抑癌方对小鼠肠癌移植瘤微血管生成及VEGF、HIF-a表达的影晌

目的：探讨抑癌方对小鼠结肠癌移植瘤微血管生成、血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor,VEGF）及缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1α）影响。方法：用CT26结肠癌细胞建立小鼠结肠癌移植瘤模型,分阴性对照组、中药高、中、低剂量组及化疗药组5组,分别灌服生理盐水、中药及腹腔注射氟脲嘧啶（5-FU）。比较各组之间瘤重;采用免疫组化染色方法和显微图像分析技术检测不同浓度抑癌方对各组小鼠移植瘤微血管（MV）及VEGF、HIF-1a表达的影响。结果：与阴性对照组的瘤重相比较,抑癌方各组及5-FU组（阳性对照药,以下称化疗组）均有统计学差异（P〈0.05）;但中药各组瘤重均高于化疗组（P〈0.05）。免疫组化染色结果显示阴性对照组癌巢间MV、VEGF及HIF-1a表达高于中药组和化疗组（P〈0.05）。结论：抑癌方对小鼠移植瘤有一定抑制作用;能够减少肠癌移植瘤中血管形成及VEGF及HIF-1a的表达。     

抑癌方对小鼠肠癌移植瘤微血管生成及VEGF、HIF-1a表达的影响

目的:探讨抑癌方对小鼠结肠癌移植瘤微血管生成、血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1α)影响。方法:用CT26结肠癌细胞建立小鼠结肠癌移植瘤模型,分阴性对照组、中药高、中、低剂量组及化疗药组5组,分别灌服生理盐水、中药及腹腔注射氟脲嘧啶(5-FU)。比较各组之间瘤重;采用免疫组化染色方法和显微图像分析技术检测不同浓度抑癌方对各组小鼠移植瘤微血管(MV)及VEGF、HIF-1a表达的影响。结果:与阴性对照组的瘤重相比较,抑癌方各组及5-FU组(阳性对照药,以下称化疗组)均有统计学差异(P<0.05);但中药各组瘤重均高于化疗组(P<0.05)。免疫组化染色结果显示阴性对照组癌巢间MV、VEGF及HIF-1a表达高于中药组和化疗组(P<0.05)。结论:抑癌方对小鼠移植瘤有一定抑制作用;能够减少肠癌移植瘤中血管形成及VEGF及HIF-1a的表达。     

恶性胃间质瘤的血管生成拟态与恶性程度的关系

 目的 探讨恶性胃间质瘤中是否存在血管生成拟态（VM）,即肿瘤细胞变形并模仿正常血管结构形成的拟态血管。  方法 将36例恶性间质瘤分为低、中、高度3组,分别采用免疫组织化学和PAS染色双重染色测定微血管密度（MVD）、血管生成拟态密度（VMD）,并分析肿瘤的恶性程度与VMD的关系。  结果  恶性胃间质瘤中有VM形成,含有VM的恶性胃间质瘤VEGF表达及MVD均低于无VM者（P均<0.05）;随着胃间质瘤恶性程度的增高,VM肿瘤的比例逐渐增加,VMD逐渐增高,高度恶性与低或中度恶性肿瘤间差异具有统计学意义（P均<0.05）,但后二者间差异无统计学意义（P>0.05）。  结论 恶性胃间质瘤细胞具有可塑性,能通过自身变形并分泌细胞外基质,模拟正常血管结构形成可输送血液的管道系统,即血管生成拟态。     

化痰通瘀解毒方对S180小鼠移植瘤微血管密度及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨化痰通瘀解毒方抑制肿瘤微血管生成作用的机制。方法复制小鼠S180移植瘤模型,采用免疫组织化学法观察化痰通瘀解毒方对肿瘤微血管密度（micro-vessel density,MVD）及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的影响。结果与模型组比较,化痰通瘀解毒方小（20.0 g/kg）、中（40.0 g/kg）、大剂量（60.0 g/kg）组MVD和VEGF均显著降低（P〈0.05,或P〈0.01）。结论化痰通瘀解毒方能明显抑制肿瘤VEGF表达,从而抑制肿瘤微血管生成。     

人肝癌裸鼠皮下移植瘤早期血液供应模式的定量研究

目的 定量评估不同时间点人肝癌裸鼠皮下移植瘤内血液供应模式的变化。方法 将1×10⁷/mL的MHCC97-H细胞悬液同一时间接种于40只裸鼠（0.2 mL/鼠）的左侧腹股沟皮下,分别于种瘤后第2、3、4、5周取瘤行HE染色和免疫组化染色（CD34和CD34/PAS双染色）,定量分析血管参数,包括微血管面积（microvascular area,MVA）、微血管密度（microvessel density,MVD）、血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）,评估肿瘤内血管供应模式的变化。结果 随着肿瘤生长时间的延长,MVA先减小后增大,第3周肿瘤MVA小于第2周[（13 720.8±2 375.6）μm² vs.（28 795.5±3 412.7）μm²,P=0.013],第4周肿瘤MVA大于第3周[（29 221.3±3 958.5）μm² vs.（13 720.8±2 375.6）μm²,P=0.025];VM百分比呈明显升高趋势,第4周肿瘤VM百分比高于第2周（84.2%±15.4% vs.50.1%±14.6%,P=0.015）。结论 在人肝癌裸鼠皮下移植瘤新生血管形成的早期阶段,随着肿瘤生长时间的延长,VM逐渐成为肿瘤的主要血液供应模式。     

Tum-5基因对肝细胞癌生长的抑制作用和对血管生成的影响

目的：探讨肿瘤抑素5（Tum-5）基因对肝细胞癌的抑制作用及对血管生成的影响,阐明其参与抗肿瘤生成的作用机制。方法：体外实验选择人肝癌HepG-2细胞,采用不同感染复数（MOI）（0、1、5、10、25和50）的pLXSN和pLXSN-Tum-5病毒颗粒感染72h,MTT法检测各组细胞增殖率。体内构建肝癌H22荷瘤小鼠模型,分为saline组、pLXSN组和pLXSN-Tum-5组,每组5只。saline组小鼠瘤内注射生理盐水,pLXSN组和pLXSN-Tum-5组小鼠瘤内分别注射相应的病毒颗粒（MOI=5）,隔日注射,共注射5次。测定各组小鼠移植瘤体积、质量和小鼠体质量,免疫组织化学法检测CD31蛋白在各组小鼠移植瘤组织中的表达,计算微血管密度（MVD）。结果：与pLXSN组比较,不同MOI pLXSN-Tum-5组的细胞增殖率差异无统计学意义（P> 0.05）;荷瘤鼠瘤内注射结束后,pLXSN-Tum-5组小鼠移植瘤体积和质量均明显小于pLXSN组和saline组（P< 0.05或P< 0.01）;免疫组织化学检测,各组小鼠移植瘤内均有形态不规则的新生血管生成,与saline组和pLXSN组比较,pLXSN-Tum-5组小鼠移植瘤组织MVD平均值明显降低（P< 0.05）。结论：Tum-5可通过抑制肝癌组织内新生血管的生成发挥抑瘤作用。     

SFBR联合贝伐珠单抗对结肠癌脉管系统的影响

目的 探讨单次近距离放疗（SFBR）联合贝伐珠单抗对结肠癌脉管系统的影响。方法 复制小鼠结肠癌移植瘤模型，随机分为空白对照组、SFBR组、贝伐珠单抗组、SFBR联合贝伐珠单抗组（以下简称联合组）。治疗结束后第14天计算移植瘤的终体积和肿瘤生长抑制率。运用¹⁸F-FDG micro PET/CT测量肿瘤最大标准摄取值（SUV_max），评估肿瘤代谢活性。采用免疫组织化学法检测肿瘤组织的微血管密度（MVD）、淋巴管密度（LVD）、血管生成拟态密度（VMD）及肿瘤细胞Ki-67阳性表达率。利用流式细胞学技术检测肿瘤细胞凋亡率，评估肿瘤凋亡情况。结果 联合组肿瘤组织中MVD、LVD、VMD低于SFBR组和贝伐珠单抗组（P <0.05），SUV_max、Ki-67表达水平低于SFBR组和贝伐珠单抗组（P <0.05）；而联合组肿瘤抑制率、肿瘤细胞凋亡率高于SFBR组和贝伐珠单抗组（P <0.05）。结论 SFBR联合贝伐珠单抗能降低结肠癌组织中MVD、LVD、VMD，从而有效抑制结肠癌的生长。     

Ki-67与血管生成拟态在原发性肝细胞癌中的表达及意义

目的：探讨 Ki-67与血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）在原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达情况。方法：取87例 HCC 石蜡标本,运用免疫组织化学染色法检测Ki-67的表达,并运用过碘酸雪夫（periodic acid-schiff stain,PAS）和 CD34双染色法进一步标记VM。结果：Ki-67高表达组VM阳性率高于Ki-67低表达组,差别具有统计学意义（P〈0.05）。结论：肝细胞癌组织内存在VM表达,且与癌细胞的Ki-67表达密切相关,Ki-67可能参与 VM的形成,是 VM形成的机制之一。     

消化道双向分化肿瘤的血管生成拟态研究

目的 探讨在消化道双向分化恶性肿瘤中是否存在血管生成拟态（VM）。方法采用免疫组化和PAS染色技术研究消化道双向分化恶性肿瘤的血管生成模式,收集消化道双向分化恶性肿瘤111例,包括恶性胃肠间质瘤80例;恶性黑色素瘤18例;癌肉瘤13例。分别进行血管内皮生长因子（VEGF）、CD31及PAS染色,通过体视学网格计数法计算VEGF的表达量、显微图像分析仪下分别计算CD31和PAS阳性图案围成的管道面积即微血管密度（MVD）与VM密度（VMD）,根据三者的表达量研究VM并比较分析三者之间的关系以及与肿瘤恶性程度的关系。结果消化道双向分化恶性肿瘤有VM形成,其内存在红细胞,含有VM的肿瘤其VEGF表达（89±20）及MVD（47±12）均低于无VM者（126±18,78±13,均P〈0．05）;随着肿瘤恶性程度的增高,VM肿瘤的比例逐渐增高,VM肿瘤VEGF的表达、MVD、VMD均逐渐增高,上述指标在各肿瘤的低度恶性（45±19,15±8,38±25）与高度恶性（128±42,81±17,122±39）之间差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论 消化道双向分化恶性肿瘤细胞具有可塑性,存在VM。肿瘤细胞通过VM可进一步获得血液供应和血道转移。     

PD-L1、VM及MVD在子宫内膜癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨程序性死亡配体-1(programmed death ligand 1,PD-L1)、血管生成拟态(vasculogenic mimicry, VM)及微血管密度(microvessel density, MVD)在子宫内膜癌(endometrial cancer, EC)中的表达，及其与患者预后的关系。方法 选取2016年5月至2022年4月，江苏省连云港市妇幼保健院手术切除并经病理证实的子宫内膜癌标本共62例，采用免疫组织化学法检测子宫内膜癌组织中的PD-L1蛋白表达；用CD34和PAS双重染色法检测VM表达；用CD34标记微血管上皮细胞进行微血管密度计数；分析PD-L1、VM、MVD的表达水平与患者临床病理参数的关系；并采用Kaplan-Meier单因素分析三者对患者预后的影响。结果 PD-L1蛋白在临床Ⅱ～Ⅲ期组、组织学中-低分化组和肌层浸润≥1/2组中呈高表达(73.7%、66.7%、87.5%),差异有统计学意义(均P<0.05);VM在淋巴结有转移组中呈高表达(77.8%),差异有统计学意义(P<0.05);MVD值在临床Ⅱ～Ⅲ期组、组织学中-低分化...     

金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MK-45细胞凋亡的影响

目的:评价金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞的抑制作用。方法:50只裸鼠建立原位移植人胃癌MKN-45细胞模型,随机分为模型组,金龙蛇颗粒高、中、低剂量组和5-FU干预组。各组裸鼠予以相应药物实施干预。观察各组荷瘤裸鼠一般情况,肿瘤生长情况及抑瘤率。流式细胞仪检测肿瘤细胞周期分布及细胞凋亡情况。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-fluoresceinisothiocyanate/propidium iodide,Annexin V-FITC/PI)双标记染色法鉴别早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞。电镜下观察肿瘤细胞的超微结构变化。结果:金龙蛇颗粒高、中、低剂量组的抑瘤率分别为68.13%、55.94%和50.31%,呈剂量依赖效应,与5-FU干预组抑瘤率比较,差异无统计学意义。金龙蛇颗粒各剂量组肿瘤细胞凋亡率为22.81%~38.54%,亦呈剂量依赖效应,且肿瘤细胞主要被阻滞于G0/G1期。AnnexinV-FITC/PI双标记染色结果显示,金龙蛇颗粒各剂量组以早期凋亡细胞居多,5-FU干预组则以晚期凋亡细胞和坏死细胞居多。结论:金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞具有较好的抑制作用,促进MKN-45细胞凋亡可能是其抗肿瘤治疗的主要作用机制之一。     

山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌生长和细胞周期的影响

目的探讨山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制作用。方法建立裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞模型。105只裸鼠随机分为山柰挥发油乳剂高、中、低剂量组,乳剂溶媒对照组,生理盐水组,环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组和空白对照组,每组15只。各组裸鼠予以相应药物实施干预。观察各组荷瘤裸鼠一般情况、肿瘤生长情况及抑瘤率。流式细胞仪检测肿瘤细胞周期分布及细胞凋亡情况。电镜下观察肿瘤细胞超微结构的变化。结果山柰挥发油乳剂高、中、低剂量组的抑瘤率分别为57.2%、28.0%和5.0%,肿瘤细胞主要被阻滞于G0/G1期,与空白对照组比较差异有统计学意义,且呈剂量依赖效应。电镜下观察山柰挥发油乳剂高剂量组和CTX组可见较多凋亡细胞,而山柰挥发油乳剂中、低剂量组凋亡细胞较少。结论山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞具有较好的抑制增殖作用,且呈剂量依赖效应,其机制可能与调节胃癌细胞周期、促进G1期阻滞及诱导细胞凋亡相关。     

藤梨根提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其作用机制。方法建立肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,观察藤梨根乙酸乙酯提取物的作用,设置对照组、治疗组(低剂量组、高剂量组)。通过测量移植瘤体积变化绘制生长曲线,根据终末瘤质量比较计算抑制率,采用TUNEL法检测移植瘤凋亡指数,采用免疫组化法检测移植瘤Survivin蛋白表达、增殖指数,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测移植瘤Survivin mRNA变化。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组,高、低剂量组的瘤质量抑制率分别为69.00%和45.09%。各治疗组移植瘤组织凋亡指数则明显高于对照组,而Survivin mRNA及蛋白表达较对照组明显减少,高剂量组尤其明显,各组间上述指标比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论藤梨根乙酸乙酯提取物在体内对肺癌A549细胞生长有抑制作用,可以诱导移植瘤细胞发生凋亡,促进癌细胞凋亡并下调瘤细胞Survivin蛋白和mRNA表达。     

枸杞多糖对小鼠移植性肝癌抑制作用的实验研究

目的 探讨枸杞多糖对小鼠移植性肝癌的抑制作用。方法 采用皮下接种法制备小鼠移植性肝癌（H₂₂肝癌细胞株）模型,随机将96只小鼠分成对照组、模型组、枸杞多糖高、中、低剂量（20、10、5 mg/kg）组、环磷酰胺（20 mg/kg）组。观察枸杞多糖对荷瘤小鼠死亡率、肿瘤体积、肿瘤质量及肿瘤细胞密度、核分裂像、肿瘤坏死程度及间质淋巴细胞浸润、纤维组织增生情况的影响。结果 20、10、5 mg/kg的枸杞多糖能明显降低移植性肝癌小鼠的死亡率（P＜0.05）,减小肿瘤细胞的体积和质量（P＜0.05）,抑瘤率分别为42.23%、25.10%和9.16%;同时20、10 mg/kg的枸杞多糖能不同程度地降低肿瘤细胞密度（P＜0.05）,减少肿瘤细胞的核分裂像计数（P＜0.05）,增加肿瘤细胞坏死程度、间质淋巴细胞浸润和纤维组织增生（P＜0.05）。结论 枸杞多糖对小鼠移植性肝癌有一定的抑制作用。     

艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用研究

目的：观察艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用。方法：将人胃癌细胞BGC-823接种于裸鼠右腋皮下,建立荷瘤裸鼠模型;将荷瘤裸鼠随机分为5组：模型组、环磷酰胺组和艾迪注射液高、中、低剂量组,各组动物按相应药物和剂量给药,连续14d;末次给药后处死动物,剥取瘤块,称重计算抑瘤率并作组织学观察。结果：艾迪注射液高剂量组的抑瘤率为61.84%,光镜下可见大片状的坏死区。结论：艾迪注射液对裸鼠人胃癌细胞BGC-823具有抑制作用。     

阔叶山麦冬总皂苷对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆及代谢产物的影响

目的:探讨阔叶山麦冬总皂苷(Liriope platyphylla total saponin,LPTS)对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆和神经介质相关酶及代谢产物的影响。方法:90只昆明种小鼠随机分为9组:生理盐水(normal saline,NS)组,模型组,LPTS高(100 mg/kg)、中(50 mg/kg)、低(10mg/kg)剂量组,舒血宁组,绞股蓝总苷组,西比灵组,维生素E组,除NS组外,其余各组每天腹腔注射80 mg/kg D-半乳糖生理盐水溶液,然后小鼠再给予相应的药物干预,连续给药造模42d后,分别检测相关衰老指标。结果:LPTS对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆障碍有一定的改善作用,并且可以显著促进衰老小鼠体质量增长,提高其胸腺系数和脾系数,降低血清丙二醛的含量,降低脑组织单胺氧化酶活性和脂褐质水平,提高血清超氧化物歧化酶活性,升高肝谷胱甘肽含量。结论:LPTS可改善学习记忆障碍,并且具有抗衰老的作用。     

酒石酸锑钾对人结肠癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:观察酒石酸锑钾(PAT)对人结肠癌裸鼠移植瘤的抑瘤及凋亡诱导作用。方法:60只裸鼠皮下注射结肠癌SW480细胞建立移植瘤模型,随机分为4组,每组15只,分别腹腔内注射生理盐水、5-Fu及不同剂量的PAT,给药15 d,末次给药24 h后处死裸鼠,计算抑瘤率并观察肿瘤细胞的凋亡。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞凋亡。结果:PAT对人结肠癌裸鼠移植瘤生长有显著性抑制作用,肿瘤细胞凋亡增加;高剂量PAT组、低剂量PAT组和5-Fu组的凋亡指数高于生理盐水组,差异有显著性(P<0.05),高剂量PAT组的凋亡指数高于5-Fu组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:酒石酸锑钾可通过诱导结肠癌SW480细胞凋亡抑制结肠癌裸鼠移植瘤生长。     

异甘草酸镁对奥沙利铂在人胃癌裸鼠模型中抗肿瘤作用的影响研究

目的:探讨异甘草酸镁对奥沙利铂在人胃癌裸鼠模型中抗肿瘤作用的影响。方法:建立人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型,并随机分为高、中、低剂量异甘草酸镁(Mg IG)联合奥沙利铂(L-OHP)组,单纯L-OHP组,单纯Mg IG组和葡萄糖对照组6组,连续尾静脉注射给药14 d,停药24 h后处死裸鼠,称取移植瘤质量,测量移植瘤体积,分别计算质量抑瘤率、体积抑瘤率,用TENEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡率,并检测裸鼠肝功等指标。结果:高、中、低剂量Mg IG联合L-OHP组以及单纯L-OHP组的体积抑瘤率和质量抑瘤率均高于葡萄糖对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各剂量Mg IG联合L-OHP组的抑瘤率高于单纯L-OHP组,且呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);与单纯L-OHP组相比,不同剂量Mg IG联合L-OHP组ALT和AST水平均较低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:异甘草酸镁对奥沙利铂的抗肿瘤作用具有协同作用,并能够潜在改善药物性肝损伤。     

叶下珠水提物对裸鼠人肝癌移植瘤HBx和VEGFR3表达的影响

目的探讨乙型肝炎病毒x基因(hepatitis B virux x gene,HBx)和血管内皮生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor 3,VEGFR3)基因与乙型肝炎相关肝癌的相关性,以及叶下株水提物(aqueous extract of phyllanthus urinaria L,AEP)对HBx和VEGFR3蛋白表达的干预作用。方法将60只Balb/c-nu裸鼠随机分为10组。分别复制转染HBx、氯霉素乙酞转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)和VEGFR3基因的HepG2肝癌细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,用AEP进行干预,以生理盐水、环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)作为对照,共治疗6周。观察模型复制后不同时间各组裸鼠的移植瘤生长状况,采用酶联免疫吸附试验检测各组裸鼠血清甲胎蛋白(alpha fetal protein,AFP)水平,采用Western blot方法检测移植瘤组织中HBx和VEGFR3蛋白表达水平。结果肝癌移植瘤模型复制成功。各组裸鼠体质量均随着时间显著增长。实验结束时,接种HepG2-HBx细胞的各组中,AEP处理组肿瘤质量显著低于CTX处理组(P0.05),其AFP水平显著高于NS处理组(P0.05),其移植瘤组织中HBx表达水平显著低于NS组(P0.05)。接种相同肝癌细胞的各组中,AEP处理组VEGFR3表达水平最低,但与CTX组VEGFR3表达水平比较,差异无统计学意义(P0.05);AEP组和CTX组VEGFR3表达水平显著低于NS组(P0.05)。对于相同的处理因素,接种HepG-HBx细胞和HepG-CAT细胞的裸鼠移植瘤组织中VEGFR3表达水平均显著低于接种HepG-VEGFR3细胞的裸鼠(P0.01)。结论 AEP通过直接抑制HBx蛋白和VEGFR3蛋白表达,及通过抑制HBx蛋白表达而间接抑制VEGFR3蛋白表达,达到对肝癌移植瘤生长的抑制作用。