PRK中不同去角膜上皮方法的比较

目的　比较光屈光性角膜切削术 (PRK)中机械去上皮法与激光去上皮法的优劣。　方法　将行PRK的患者分为机械去上皮组和激光去上皮组 (简称机械组和激光组 ) ,术后随访 1年 ,对两组的术后角膜上皮愈合时间、Haze发生程度、最佳矫正视力 (BCVA)恢复时间进行比较。　结果　①角膜上皮愈合时间 :激光组平均 2 .8± 0 .6d ,机械组平均 3.7± 0 .5d(t=5 .15 3,P <0 .0 1) ,两组有显著性差异。②角膜上皮下雾状混浊 (Haze)发生程度 :术后 6个月激光组 0级 2 4例 ,1级 16例 ;机械组 0级 12例 ,1级 2 6例 ,2级 2例(χ2 =7.2 7,P <0 .0 5 ) ;术后 1年激光组 0级 34例 ,1级 6例 ;机械组 0级 2 2例 ,1级 18例 (χ2 =7.2 7,P <0 .0 5 )两组差异有显著性意义。③BCVA恢复时间 :激光组平均 2 2 .8± 15 .3d ,机械组平均 35 .3± 2 1.8d(t=0 .4 2 0 ,P >0 .0 5 ) ,两组差异无统计学意义。　结论　在PRK手术中采用激光去上皮法 ,可缩短角膜上皮愈合时间 ,有效地减少Haze发生及其程度。     

刮除与保留角膜上皮对兔角膜碱烧伤疗效的影响

目的比较兔角膜碱烧伤早期,刮除与保留角膜上皮对兔角膜碱烧伤疗效的影响。方法成年家兔16只,建立右眼(16眼)角膜碱烧伤模型,随机分为刮除角膜上皮组与保留角膜上皮组,分别于碱烧伤后0、1、3、5、7 d 1%荧光素钠染色,计算角膜上皮修复率;不同时点制作病理切片,光镜、电镜观察。结果角膜碱烧伤后1、3、5、7 d,刮除角膜上皮组与保留角膜上皮组角膜上皮修复率相比较,差异均有统计学意义(P<0.05),刮除上皮组疗效较保留上皮组好。病理学结果显示:刮除上皮组角膜上皮愈合好,胶原纤维排列整齐,炎细胞浸润少。结论角膜碱烧伤后,先刮除角膜上皮再进行药物治疗疗效较好。     

重组人角膜上皮素对人角膜上皮细胞黏附的影响

目的 研究比较改良前后重组人角膜上皮素对人角膜上皮细胞黏附的影响.方法 培养人角膜上皮细胞,将野生型角膜上皮素蛋白和诱变型重组角膜上皮素蛋白浓度调整为10,20,30,100μg/mL,分别预孵化96孔酶标板,每种浓度6个孔.包被18 h,孵育2 h.加入人角膜上皮细胞的细胞悬液调整浓度为每孔3×105,每组都设2%BSA预孵化的细胞板对照组.全自动定量绘图酶标仪检测吸光度.结果 诱变型重组人角膜上皮素比野生型角膜上皮素拥有更高的促角膜上皮细胞黏附作用,以剂量依赖式方式促进人角膜上皮细胞的黏附.在诱变型重组人角膜上皮素浓度达到10μg/mL时,开始促进人角膜上皮细胞黏附,随着浓度的增高,作用增强;浓度达到30μg/mL时,促进作用达到高峰.结论 诱变型人角膜上皮素比野生型角膜上皮素拥有更高的促角膜上皮细胞黏附作用,为进一步临床应用提供了理论基础.     

LASIK术后3级角膜瓣下上皮植入1例

准分子激光原位角膜磨镶术（LASIK）后角膜上皮内生发生率约2％,但重度角膜上皮内生发生率较低。现将本院眼科收治的一例LASIK术后角膜上皮内生的病例报道如下。     

人血浆纤维连结蛋白对角膜上皮缺损愈合的作用

对角膜损伤的家兔应用纤维连结蛋白（ＦＮ）与生理盐水进行对照试验，结果显示ＦＮ治疗兔角膜损伤愈合速度较快。对３８３眼顽固性角膜上皮缺损病进行临床研究，结果显示ＦＮ疗效优于对照组（Ｐ〈０．０１）。     

儿童LASIK手术后角膜上皮植入1例

准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomeleusis, LASIK)后上皮植入是较为严重的并发症,处理不当可能导致角膜透明度下降甚至溶解.我科有1例行LASIK矫治并在术后1年出现角膜上皮植入的儿童严重屈光参差患者,报告如下.     

以兔去上皮浅层角膜为载体体外培养角膜缘上皮细胞的实验研究

目的 建立以兔去上皮浅层角膜为载体体外培养兔角膜缘上皮细胞的培养方法 ,观察细胞生物学特性。方法 用含5%胎牛血清的DMEM/F12（1∶1）培养液对兔角膜缘上皮细胞进行体外组织块法原代培养,待细胞形成单层后,传代种植于去上皮浅层角膜载体上。每天用倒置显微镜观察培养细胞的形态及生长情况,电镜观察培育细胞的超微结构并采用HE染色和抗增殖细胞核抗原（anti-proliferating cell nuclear antigen,PCNA）单克隆抗体免疫细胞化学染色对生长于去上皮浅层角膜载体上的细胞进行检测。结果 原代培养时,48小时后可见组织块边缘有细胞生长游出,10天左右,细胞汇合成单层。传代种植于载体上,细胞24小时贴壁伸展,第5天可见部分区域细胞逐渐融合成片,11天左右细胞形成良好单层。细胞呈卵圆形或多边形,类似角膜上皮细胞;电镜下,可见细胞表面有许多微绒毛,细胞间有桥粒连接;免疫细胞化学染色显示部分细胞PCNA单克隆抗体呈阳性反应。结论 含5%胎牛血清的DMEM/F12培养液适合角膜缘干细胞的体外培养,并能成功地在去上皮角膜浅层载体上培养出类似生理状态下的角膜上皮细胞。     

兔泪腺摘除后的泪液分泌及其角膜上皮的形态学改变

目的观察摘除泪腺后,兔泪液S1T值、角膜荧光素染色和虎红染色的变化及其角膜上皮超微结构的变化,评估兔干眼症模型的建立。方法摘除兔泪腺和Harder氏腺,比较泪腺摘除前后S1T、角膜荧光素染色和虎红染色分值的变化,并在透射电镜下观察角膜上皮形态学的变化。结果泪腺摘除后平均S1T值(15.88±6.29mm/5min)低于摘除前的平均S1T值(20.25±5.52mm/5min),差别有统计学意义(P=0.0062)。平均角膜荧光素染色和虎红评分(分别为8.22±1.99和7.67±0.87)明显高于摘除前(分别为0.22±0.44和0.67±0.5),差别有统计学意义(两组均P<0.0001)。以上3个检查指标的变化说明摘除泪腺后出现水液性泪液分泌缺乏,导致角膜上皮点状剥脱,干燥及坏死。在形态学上泪腺摘除前后的角膜上皮也发生了明显的改变,透射电镜检查发现液化的表层上皮细胞,表层细胞膜破裂。以上的改变均符合干眼症的特征。结论摘除兔泪腺和Harder氏腺后兔泪液分泌减少,角膜上皮坏死,能有效形成泪液缺乏型干眼模型。     

碱性成纤维细胞生长因子对角膜穿通伤术后角膜上皮愈合影响的研究

目的:评价碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)滴眼液对角膜穿通伤术后角膜上皮愈合的临床疗效。方法:观察单纯角膜穿通伤住院就治的患者共64例64只眼,随机分为2组。治疗组32例32只眼,其中男21例21眼,女11例11眼,平均年龄37.5岁,给予bFGF滴眼液并配合抗生素滴眼液治疗。对照组32例32只眼,其中男19例19只眼,女13例13只眼,平均年龄32.5岁,单独给予同样抗生素滴眼液治疗。用药2周,观察术后3天、6天、9天、12天、15天角膜荧光素染色,比较两组角膜创面修复情况。结果:治疗组6天时治愈数为30例,占总数的93.7%,对照组6天时的治愈数为9例,占总数的28.12%,经x~2检验两组相比差异有显著性(P<0.01),治疗组修复速度明显快于对照组。结论:本组结果表明碱性成纤维细胞生长因子滴眼液早期能促进角膜穿通伤术后上皮愈合。     

贝复舒与爱丽滴眼液治疗准分子激光手术后角膜上皮缺损的疗效对比

①目的评价贝复舒与爱丽治疗准分子激光屈光手术后角膜上皮缺损的疗效比较与安全性。②方法观察准分子激光对屈光不正行PRK手术后患100例，随机分成3组。贝复舒组30例，爱丽组30例，普通抗生素组40例。定期观察角膜上皮修复情况，以角膜染色作为观察指标，时间为1个月。③结果贝复舒与爱丽对屈光不正手术后角膜上皮修复均有显的促进作用(P＜0．01)。贝复舒治疗组的有效率高于爱丽组(P＜0.05)。贝复舒治疗组3天角膜上皮完全修复率为93％，爱丽组为89％，普通抗生素组为85％，但差异比较无统计学意义(P＞0．05)。④结论贝复舒与爱丽滴眼液治疗准分子激光矫正屈光不正手术后角膜上皮缺损安全有效，疗效确切。     

板层角膜及角膜缘上皮移植术治疗翼状胬肉

目的　探讨板层角膜联合角膜缘上皮移植术治疗翼状胬肉的临床疗效。方法　对 1 1眼翼状胬肉实施板层角膜联合角膜缘上皮移植术。结果　手术均获成功 ,术后平均随访 1年 ,移植未发生排斥反应 ,无复发。结论　板层角膜联合角膜缘上皮移植术治疗翼状胬肉具有较好的疗效     

以纤维蛋白为基质网架的组织工程角膜上皮的构建

目的：应用组织工程技术以纤维蛋白为基质网架、角膜缘干细胞为种子细胞构建组织工程角膜上皮，为角膜上皮移植提供新的移植材料。方法：将20 g•L^-1的纤维蛋白原溶液和含有10 U•mL^-1凝血酶的催化剂溶液混合构成纤维蛋白基质网架，检测支架材料的一般结构和超微结构；取2 mm×2 mm角膜缘组织，胰蛋白酶消化后移至纤维蛋白胶上培养，观察角膜上皮干细胞的生长情况，2周后进行形态学、超微结构和免疫组织化学观察。结果：纤维蛋白基质网架柔软有伸拉性，孔径70～108 μm，平均三维空孔率为70.4%；扫描电镜下呈多层次网络状；接种36 h后，细胞从组织块边缘迁移，7 d后细胞几乎铺满整个培养板孔底，14 d左右细胞与纤维蛋白胶体形成复合植片。透射电镜下观察仍维持上皮细胞特有的超微结构特征。抗细胞角蛋白K3单克隆抗体AE5和抗p63的单克隆抗体4A4免疫组织化学染色均为阳性。 结论：纤维蛋白可作为角膜上皮干细胞移植的良好支架材料，可为组织工程角膜上皮提供新的移植材料。     

大气颗粒物PM10对小鼠泪膜功能和角膜上皮组织结构的影响

目的研究大气颗粒物PM10对小鼠泪膜功能和角膜上皮组织结构的影响。方法24 只雄性6～8周龄BALB/c 小鼠,随机分为A、B组,每组12 只。空白对照组6 只不作处理。B组采用5 mg/ml PM10点眼,A组采用无菌PBS 点眼,3 次/d。分别在干预前及干预第1、4 和7天进行实验小鼠泪膜功能相关检查,包括采用酚红棉线法检查泪液分泌量、泪膜破裂时间（BUT）、荧光素染色及荧光素染色评分（FL）。根据分组于相应时间点收集其角膜组织,行苏木精- 伊红染色及透射电子显微镜下观察角膜上皮组织结构变化。结果干预4 和7 d后,A组泪液分泌量、BUT、FL 较干预前无明显变化（P >0.05）,而B 组泪液分泌量减少、BUT、FL 较干预前恶化（P <0.05）。点眼7 d后,A 组上皮细胞为（5±1）层,B 组为（7±1）层,差异有统计学意义（P <0.05）。电镜观察可见A 组角膜上皮微绒毛呈指状突起,微绒毛数量多,排列整齐;而B 组角膜上皮微绒毛减少、变短、排列紊乱。结论PM10会影响小鼠泪膜功能,小鼠泪液量分泌减少,泪膜稳定性下降;小鼠角膜上皮组织结构损坏。     

组织工程人角膜上皮体外重建的研究进展

从种子细胞的来源和载体支架的筛选两个方面对组织工程人角膜上皮的体外重建及其研究中所存在的问题与解决途径进行综述。     

糖尿病性白内障术后角膜内皮细胞的变化

目的:观察糖尿病性白内障患者超声乳化术后角膜内皮细胞形态学的变化,探索糖尿病患者术后角膜内皮细胞的变化规律及影响因素。方法:随机选取28例(32眼)非胰岛素依赖型糖尿病合并老年性白内障患者行经透明角膜切口的白内障超声乳化吸除术联合折叠式人工晶体植入术。所有患者于术前、术后3月分别行角膜中央区和手术切口区内皮细胞观察,检测其细胞密度、六角形细胞比例和变异系数。结果:白内障超声乳化术后角膜内皮细胞密度和六角形细胞比例均呈现逐渐下降趋势,变异系数渐增加。术后切口区内皮细胞密度低于中央区,有显著性差异。六角形细胞比例低于中央区,变异系数高于中央区。结论:白内障超声乳化术中,糖尿病患者角膜内皮受到超声因素和机械因素的双重损伤。手术切口区内皮细胞丢失明显大于中央区,所以对于白内障患者尤其合并糖尿病者,在超声因素(能量、时间)损伤的基础上,应注意机械因素的作用;并且这种创伤对角膜内皮的影响可能更大。     

Toll样受体在人眼角膜上皮和永生化人角膜上皮细胞系的表达及功能研究

目的探讨Toll样受体（TLR）1—9在人眼角膜上皮和上皮细胞系的表达及其功能性。方法以健康人外周血单个核细胞（PBMC）为阳性对照,收集20例健康青年人角膜上皮标本和培养永生化人角膜上皮细胞系（THCE）细胞,用半定量反转录聚合酶链反应检测TLR1～9mRNA表达;Western印迹检测TLR2、4的蛋白质表达;TLR3和TLR4的配体对THCE刺激后酶联免疫检测分泌IL-8的变化,结合抗体封闭实验,研究角膜上皮TLR的功能性。结果与PBMC比较,人角膜上皮强表达TLR1、2、3、5、6、9,弱表达TLR8,微弱表达TLR4;20例角膜上皮标本中发现1例TLR3、4、6、8阴性表达,1例TLR5微弱表达;人角膜上皮在蛋白质水平表达TLR2、4;THCE细胞与人角膜上皮有相似的TLR表达谱;LPS和PolyI：C刺激THCE1、4、8h后IL-8分泌增加,8h时分别达到对照组的10倍和7倍（均P〈0．05）,抗体封闭TLR4可以阻断LPS诱导的IL-8分泌。结论人角膜上皮表达TLR1—9,但不同TLRs表达水平有差异。THCE是研究人角膜上皮TLR表达和功能的良好细胞系。     

激光角膜屈光手术特殊适应证的研究进展

 常规激光角膜屈光手术的长期安全性和稳定性已经得到了广泛的认可,而在特殊适应证诸如儿童复杂性屈光不正、角膜移植后、高眼压或疑似青光眼患者中的作用如何,技术方法有何特点、并发症如何,面临的争议又有哪些等,仍需要进一步研究。本文旨在阐述激光角膜屈光手术在上述特殊患者中应用的有效性、安全性,并对其发展前景进行展望。     

蒸馏水及泪然在UBM检查中对角膜上皮影响的对比研究

目的 探讨两种不同超声介质在超声生物显微镜（ultrasound biomicroscopy,UBM） 检查中对角膜上皮的影响。方法 采用前瞻性研究方法将2012 年1-4 月在我院行超声生物显微镜的患者随机分为2 组,蒸馏水组（30 例46 眼,采用蒸馏水作为超声介质） 和泪然组（33 例37 眼,采用泪然作为超声介质）,两组均于检查后10 min 及24 h 行角膜荧光素染色（corneal fluorescein staining,CSF） 评分,评估角膜上皮缺损情况。结果 检查后10 min 泪然组角膜荧光素染色评分明显低于蒸馏水组（P ＜0.05）,差异有统计学意义;24 h 后两组角膜上皮荧光素染色均较前明显好转,差异无统计学意义（P ＞0.05）。结论 UBM 检查有损伤角膜上皮的风险,采用泪然作为超声介质能有效保护角膜上皮,缓解检查后不适症状。     

空军飞行人员角膜屈光矫治现状分析

摘要：目的掌握现役飞行人员实施角膜屈光矫治术的现状,为后续其全面视觉质量及飞行适应性评估做准备。方法以空军所属航空医学鉴定训练中心人住的现役飞行人员为筛查对象,行裂隙灯检查,部分结合角膜曲率及直接检眼镜彻照检查。对于裂隙灯检查具备角膜屈光矫治后特征、角膜K值低于40或角膜存在异常影动者,选择性实施角膜地形图和角膜厚度检查,结合相关病史采集,确定并记录筛查阳性或可疑阳性者资料。结果筛查现役飞行人员2386例,发现行各类角膜屈光矫治术者59例116眼（2人为单眼）,筛查阳性率为2．47％;阳性者年龄23～43岁,平均28．53岁;其中飞行员5例占8．47％,机械师27例占45．76％,领航员1例占1．69％,通射员12例占20．34％,战勤人员14例占24．07％。矫治术式：准分子激光原位角膜磨镶术（1aserinsitukeratomileusis,LASIK）24例47眼占40．52％,准分子激光角膜切削术fphotorefractivekeratectomy,PRK）9例18眼占15．52％,可疑PRK（检查结果支持,本人否认）23例46眼占39．66％,准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术（1asersubepithelialkeratomileusis,LASEK）I例2眼占1．72％,放射状角膜切开术（radialkeratotomy,RK）2例3眼占2．59％,以PRK术式居多（占55．18％）。矫治时间3个月～16年,平均7．59年。目前远视力（C字表）0．5～1．5,其中≥1．0有97眼（占83．62％）,〈1．0有19眼（占16．38％）;接受检查者平均眼压13．50mmHgf1mmHg=0．133kPa）;平均K值右眼39．69、左眼39．83,平均角膜厚度右眼498．16μm、左眼506．20μm。术后并发症：13．56％存在不同程度干眼及间断视疲劳现象。结论自行角膜屈光矫治术者中83．62％远视力良好,13．56％存在不同程度干眼、视疲劳现象;其视觉质量及飞行适应性评估有待进一步全面检查后确定。     

左旋肉碱在人角膜缘上皮细胞的转运特性

目的检测左旋肉碱(L-carnitine,LC)在人角膜缘上皮(human corneal limbal epithelia,HCLE)细胞的转运特性,为进一步阐明HCLE细胞对LC的转运机制提供实验依据。方法采用放射摄入实验检测HCLE细胞对[~3H]-L-carnitine的转运功能,并利用米氏方程(Michaelis-Menten equation)分析计算其动力学参数。结果HCLE细胞对LC的转运过程具有饱和性和时间依赖性,并且反应体系中需要Na~+的存在。Eadie-Hofstee作图提示HCLE细胞存在高亲和力和低亲合力2个肉碱转运系统。非标记LC和乙酰化左旋肉碱可竞争性抑制[~3H]-Lcarnitine的转运过程。结论 HCLE细胞可通过主动转运过程将泪液中的左旋肉碱摄入细胞内,发挥其生物学功能。