肝细胞肝癌中OY-TES-1基因mRNA表达水平的研究

目的 检测OY-TES-1基因mRNA在肝细胞肝癌(HCC)与癌旁组织中的表达水平.方法 建立实时定量PCR方法,检测37例HCC及配对癌旁组织中目的 基因OY-TES-1及管家基因HPRT的表达,OY-TES-1mRNA的表达量以OY-TES-1/HPRT表示,应用SPSS13.0统计分析软件进行数据分析.结果 ①经实时定量PCR检测,HCC中OY-TES-1mRNA阳性率为72.97%(27/37),癌旁阳性率为64.86%(24/37),有17对HCC及癌旁组织均表达阳性,OY-TES-1mRNA在HCC及癌旁组织两者的定性表达无差异(P＞0.05);②在37例HCC及配对癌旁组织中,HCC中OY-TES-1mRNA水平明显高于对应的癌旁组织(P＜0.05),但与HCC患者的年龄、性别等临床资料无相关.结论 OY-TES-1 mRNA在HCC中有较高的表达频率,其表达水平高于对应的癌旁组织,它有望作为用于HCC辅助诊断及免疫治疗的肿瘤抗原,OY-TES-1蛋白在肝癌及癌旁组织中的表达及相关意义尚值得做进一步的研究.     

p14ARF、ARF-BP1、c-myc在肝细胞癌中的表达及意义

目的:探讨肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)组织及其癌旁肝组织中p14ARF、ARF-BP1、c-myc的表达及意义.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术、免疫组化技术对45例HCC组织及其癌旁肝组织中p14ARF、ARF-BP1、c-myc的mRNA表达和p14ARF、c-myc蛋白表达情况进行检测.结果:p14ARF、ARF-BP1、c-myc的mRNA在HCC组织中阳性表达分别为80.00%、86.67%、84.44%,在癌旁肝组织中分别为11.11%、20.00%、53.33%,三者的mRNA在癌组织中呈过表达,明显高于癌旁肝组织(P＜0.01).p14ARF、c-myc蛋白在HCC组织中表达分别为78.38%、75.68%,明显高于癌旁肝组织的13.51%(P＜0.01)和51.35%(P＜0.05).结论:p14ARF、ARF-BP1、c-myc在HCC组织中高表达,这种高表达可能与HCC的发生有相关性.     

脆性位点基因WWOX mRNA在肝细胞癌中的表达及临床病理意义

目的 检测WWOX野生型mRNA及其异常转录剪接体在肝细胞癌中的表达情况,并分析其临床病理意义.方法 采用Real-time RT-PCR和RT-PCR方法检测44例肝细胞癌(HCC)、相应癌旁肝组织和5例正常肝组织中WWOX野生型mRNA及转录剪接体Variant1、Variant4及Variant6的表达,同时分析...     

C-Jun结合蛋白在肝癌细胞组织中的高表达及其意义

目的 探讨C-Jun结合蛋白(JAB1)在肝癌细胞(HCC)组织中的表达及临床病理意义.方法 收集76例HCC及癌旁组织,10例肝血管瘤旁肝组织的临床病理档案资料,采用免疫组织化学方法检测JAB1蛋白质在这些组织中的表达,并与增殖细胞核抗原(Ki67)的表达相比较.应用统计学方法对结果进行分析.结果 HCC组织中JAB1蛋白质表达的阳性率(68.85%)显著高于癌旁组织(38.72%)(P＜0.001)和血管瘤旁肝组织(34.36%)(P＜0.001).JAB1的表达与肝癌组织分化程度,血清AFP值及转移有关(P=0.000,P=0.015及P=0.000),但与患者的年龄、性别、肿瘤组织学类型、肿瘤大小等无关.HCC组织中Ki67表达的阳性率为41.45%,明显高于癌旁组织2.11%(P＜0.1301)和血管瘤旁肝组织2.01%(P＜0.001).相关性分析表明HCC组织中JAB1蛋白质表达与Ki67表达呈正相关(r=0.6192,P＜0.001).结论 JAB1在HCC组织中呈高表达,且显著高于非癌肝组织,与HCC的发生发展有关;JAB1可作为HCC细胞增生程度的潜在临床病理标记.     

原发性肝细胞癌细胞系和组织中ARID2的表达

目的:探讨原发性肝细胞癌(HCC)细胞系和组织中ARID2 mRNA的表达与原发性HCC发生发展的关系。方法:应用实时定量荧光PCR方法检测9种HCC细胞系和组织中ARID2 mRNA的表达。结果:不同感染背景下HCC细胞中ARID2 mRNA表达水平不同。与正常肝组织相比,ARID2 mRNA在HCC癌旁组织中的表达水平下降(有HBV感染:Z=10.684,P<0.05;无HBV感染:Z=16.015,P<0.05);在无HBV感染背景的HCC组织和配对癌旁组织中ARID2 mRNA表达水平差异有统计学意义(Z=1.886,P<0.05)。不同感染背景的HCC组织中ARID2 mRNA的表达差异有统计学意义(Z=13.479,P<0.001)。结论:ARID2可能与原发性肝细胞癌的发生发展相关。     

Snail与Claudin-3蛋白的表达与原发性肝癌发生及预后的关联性研究

目的 本研究通过收集原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者的临床资料,并检测癌及癌旁组织中Claudin-3和Snail蛋白的表达,探讨Claudin-3和Snail蛋白与肝癌患者临床病理特征与预后的关联。方法 收集根治性切除的肝细胞癌病例患者资料,利用免疫组织化学的方法检测82例HCC组织及60例癌旁组织中Snail、Claudin-3蛋白的表达。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,应用Cox比例风险模型进行多因素回归分析。结果 肝癌组织中Snail蛋白阳性表达69.47%,高于癌旁组织,差异有统计学意义（P=0.001）;Claudin-3阳性表达47.61%,低于癌旁组织,差异有统计学意义（P=0.002）;两者的表达呈负相关（r=-0.430,P<0.01）;Snail蛋白在HCC中阳性表达明显高于癌旁组织,在病理分期、微血管侵犯相关方面差异有统计学意义（P<0.05）;在Cox多因素回归分析中,Snail、Claudin-3的表达是HCC患者生存的独立危险因素（P<0.05）。结论 Snail与Claudin-3蛋白与HCC的发生、侵袭有一定的关联性。进行HCC患者Snail、Claudin-3蛋白的联合检测,在临床实践中对HCC患者病理学特征与预后的判断具有重要的提示作用。     

肝细胞癌p53、bcl-2蛋白及微血管密度的检测及意义

目的 探讨肝细胞癌(HCC)组织中p53、bcl-2蛋白的表达及其与HCC血管形成及临床病理的关系.方法 应用免疫组织化学SP法,对石蜡包埋的50例HCC癌组织和10例正常肝组织(对照组)标本进行检测. 结果 (1)p53蛋白在HCC癌组织(28/50,56%)的表达显著高于癌旁肝组织和对照组(均为0,P＜0.01),其中癌旁有肝硬化组(25/3,69.4%)显著高于癌旁无肝硬化组(3/14,21.4%,P＜0.01).bcl-2在癌旁肝组织(62%)的表达高于HCC癌组织(24%,P＜0.01).微血管密度(MVD)在癌组织中高于癌旁及正常肝组织.(2)在HCC癌组织p53蛋白表达与HCC低分化及门静脉癌栓的形成呈正相关;MVD与HCC门静脉癌栓的形成呈正相关,且其值在p53阳性组或bcl-2阳性组均明显高于阴性组. 结论 p53和bcl-2对促进HCC新生血管形成有一定作用;p53和MVD对判断HCC患者预后有一定意义.     

Gli2在原发性肝细胞癌中的表达及与Cyclin D1、p21的关系

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中 Gli2、Cyclin D1 和 p21 的表达及其意义.方法 采用组织芯片和免疫组织化学方法以及 RT-PCR 检测了 44 对 HCC 和相应癌旁肝组织中 Gli2 蛋白和 mRNA 的表达情况,应用 Western blot检测了 Cyclin D1、p21 蛋白在两种组织中的表达差异.结果 免疫组化染色与 RT-PCR 示 Gli2 在 HCC 组织中的阳性表达率为 68.2%,而癌旁肝组织为38.6%,两者差异具有极显著性意义(P<0.01),且 Gli2 与 HCC 的组织分化和门静脉转移相关.Cyclin D1 蛋白在 HCC 中的表达显著高于癌旁肝组织(P<0.05).且与 Gli2 的表达呈正相关;而 p21 蛋白在癌旁肝组织中的表达显著高于 HCC,但与 Gli2 无明显相关性.结论 Gli2 过度激活可能通过上调 Cyelin D1 的表达而使肝癌细胞异常增殖,参与 HCC 的发生和发展.     

Survivin与p21waf-1在大鼠肝细胞癌变过程中的动态表达及其相关性的研究

目的:动态观察黄曲霉毒素B1(AFB1)在诱发大鼠肝细胞癌(HCC)过程中survivin 及p21waf-1表达的变化及它们在HCC发生发展中的关系.方法:用免疫组化及RT-PCR检测24只用AFB1诱发出的大鼠肝癌及癌旁肝组织、6只未诱发出肝癌的大鼠及11只对照大鼠不同时期肝活检组织中的survivin与p21waf-1基因和蛋白表达.结果:①HCC组织中survivin阳性率41.67%、癌旁肝组织54.17%;未发生肝癌及对照组大鼠活检肝组织,均未检出survivin蛋白(P<0.01);②HCC及癌旁肝组织中survivin mRNA的表达水平显著上调(P<0.01);③HCC及癌旁肝组织p21waf-1蛋白阳性率明显低于58周未出癌及对照组大鼠肝组织(P<0.01);④出癌大鼠p21waf-1 mRNA表达水平在HCC形成过程逐渐下调(P<0.01);⑤在HCC形成中,survivin与p21waf-1表达呈负相关.结论:在HCC形成的早期p21waf-1mRNA表达的下调逐渐失去抑制细胞增殖、促进细胞分化功能,使细胞增殖,而survivin mRNA表达上调,抑制细胞凋亡,两者在HCC形成过程中可能发挥协同作用.     

肝细胞癌候选相关基因IDD01的克隆与鉴定

目的鉴定表达序列标签(EST)在肝细胞癌(HCC)和癌旁非癌组织表达,扩增其全长.方法采用半定量RT-PCR方法,对21例HCC患者的癌组织和癌旁非癌组织EST mRNA的表达情况进行检测,通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术扩增、测序获得全长,Blast检索GenBank.结果此EST在HCC癌组织中高表达,癌旁非癌组织中低表达(P＜0.05);序列全长为1 333 bp,含有完整开放阅读框(ORF)和Poly(A)尾;Blast检索为一功能未知基因.结论获得一个和HCC相关候选新基因,为进一步研究其功能打下基础.     

MACC1基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨MACC1基因在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其临床意义.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法 检测42例肝癌组织、对应癌旁肝组织以及17例正常肝组织中MACC1 mRNA的表达情况,并分析MACC1基因的表达与相关临床参数的关系.结果 MACC1基因在肝癌组织的表达水平显著高于癌旁肝组织(P＜0.01),在癌旁肝组织的表达水平显著高于正常肝组织(P＜0.05),且MACC1基因的表达水平与肝癌的TNM分期、肝内或淋巴结转移、门静脉癌栓等均明显相关(均P＜0.05),而与肿瘤个数、血清甲胎蛋白(AFP)水平、有无肝硬化等无明显关系(均P＞0.05).结论 MACC1基因可能在肝细胞癌的侵袭转移中发挥着重要作用,有可能成为肝癌治疗的新靶点之一.     

Claudin-1基因在大肠癌中表达检测的意义

目的探讨Claudin-1基因mRNA在大肠癌发病过程的表达及意义。方法收集62例液氮保存的新鲜大肠癌组织及其对应的正常大肠组织,常规方法提取组织总RNA。将这些总RNA逆转录成cDNA后,利用实时荧光定量PCR方法检测Claudin-1基因在这些组织中的表达情况,最后统计分析Claudin-1表达变化与大肠癌进展相关的临床病理参数之间的关系。结果与正常大肠组织相比,Claudin-1基因在大肠癌组织中表达明显增强,此外,DukesⅢ、Ⅳ期大肠癌患者Claudin-1基因表达比Ⅰ、Ⅱ期患者明显增强。结论 Claudin-1基因在大肠癌中高表达,提示其可能与大肠癌发生和进展过程有关。     

CDC25C蛋白和CLDN6蛋白在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究肝细胞癌(hepatic cell carcinoma,HCC)组织中细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(cell division cyclin 25 homolog C,CDC25C)与紧密连接蛋白Claudin-6(CLDN6)的表达情况,探讨其与HCC的发生、发展、预后的关系。方法:应用免疫组织化学SABC法检测58例HCC、24例癌旁组织和18例正常肝脏组织中CDC25C和CLDN6的表达情况,并分析两者与临床病理特征和术后无瘤生存期的关系。结果:CDC25C在HCC组织、癌旁组织、正常肝脏组织表达阳性率分别为86.2%、45.8%、11.1%,表达差异均有统计学意义(P<0.05)。CDC25C在HCC组织中的表达与乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、肿瘤直径大小和肿瘤分化程度有关(P<0.05)。CLDN6在HCC组织、癌旁组织、正常肝脏组织表达阳性率分别为77.6%、41.7%、16.7%,表达差异均有统计学意义(P<0.05)。CLDN6在HCC组织中的表达与肿瘤直径大小有关(P<0.05)。HCC中CDC25C阳性组及CDC25C阴性组的中位无瘤生存时间分别为12个月和15个月,差异有统计学意义(P<0.05)。CLDN6阳性组及CLDN6阴性组中位无瘤生存时间分别为12个月和14个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CDC25C和CLDN6可能在肝细胞癌的发生、发展及复发过程中起重要作用,有望成为肝癌诊断及预测预后的重要指标。     

SOAT1在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：观察甾醇O-酰基转移酶1（SOAT1）在肝细胞癌（HCC）组织及癌旁组织中的表达,探索其与患者预后及临床病理特征之间的相关性。方法：从癌症基因组图谱（TCGA）数据库收集HCC数据集,下载SOAT1 mRNA表达谱及预后资料,比较SOAT1 mRNA在50例正常肝组织与374例HCC组织中的表达,分析表达量与患者预后相关性。收集53例HCC患者石蜡组织标本,采用免疫组织化学方法检测癌和癌旁组织中SOAT1的蛋白表达水平,并分析其与临床病理特征之间的相关性。结果：TCGA数据库数据分析显示,与癌旁正常组织比较,SOAT1在HCC中表达显著升高（P＜0.01）。预后生存分析发现SOAT1高表达患者的5年生存率较低（P＜ 0.05）。免疫组织化学结果显示,与癌旁组织相比,HCC组织中SOAT1蛋白表达量显著升高（P＜0.05）。癌组织中SOAT1蛋白表达量与肿瘤临床分期及微血管癌栓形成相关（P＜0.05）。结论：SOAT1在HCC组织中表达增高,并与HCC癌患者的临床病理特征密切相关,其表达与肿瘤恶性程度高度相关。     

Claudin-3在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的 通过检测Claudin-3 mRNA和蛋白在膀胱移行细胞癌(TCCB)组织中的表达,探讨其在膀胱移行细胞癌发生、发展中所起的作用.方法 对56例TCCB患者肿瘤组织、17例非肿瘤膀胱移行上皮组织分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Claudin-3 mRNA的表达,SP免疫组织化学法检测Claudin-3蛋白的表达.并分析Claudin-3 mRNA 和蛋白的表达与TCCB的病理分级、临床分期的关系等.结果 (1)TCCB组中Claudin-3 mRNA阳性率明显低于非肿瘤膀胱组织(P<0.05),且在不同临床分期、病理分级的TCCB组之间阳性率差异有统计学意义(P<0.05).(2)TCCB组中Claudin-3蛋白表达水平明显低于非肿瘤膀胱组织,不同临床分期和病理分级肿瘤组织中Claudin-3蛋白表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05).而在不同性别、年龄、单灶与多灶组间Claudin-3蛋白表达的阳性率差异无统计学意义(P>0.05).在初发与复发组间Claudin-3蛋白表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05).结论 (1)TCCB组Claudin-3 mRNA和蛋白表达水平均明显低于非肿瘤组,提示Claudin-3与TCCB的发生密切相关,Claudin-3在膀胱肿瘤的发生中起抑制作用.(2)Claudin-3的转录表达与膀胱肿瘤的病理分级、临床分期、以及肿瘤复发均有显著相关.Claudin-3表达下调或缺失可能促使膀胱移行细胞癌恶性程度和复发率增高.     

肝细胞癌中ZHX2 mRNA的表达及其临床意义的研究

[目的探讨转录抑制因子ZHX2（zinc-fingers and homeoboxes2,ZHX2）在肝细胞癌（hepatoceUu1ar carcinoma,HCC）中的表达及其与转移的关系。方法通过RT-PCR方法,检测35例HCC癌组织及相应癌旁组织和8例正常肝组织中ZHX2 mRNA的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果HCC癌组织中ZHX2 mRNA的表达率明显低于癌旁组织与正常肝组织（P〈0．05）。术中发现伴随转移的HCC癌组织中ZHX2 mRNA的阳性表达率明显低于无转移的HCC（P〈0．05）。ZHX2 mRNA的表达与血清甲胎蛋白（alphafetoprotein,AFP）水平呈负相关（P〈0．05）,而与年龄、性别、HBsAg感染、肿瘤直径、分化程度、是否伴随肝硬化无明显关系。结论ZHX2低表达与HCC转移密切相关,并与AFP的高表达有关。     

原发性肝癌组织中陷井受体3基因表达与扩增的临床意义

目的　观察原发性肝癌组织中陷井受体 3(DcR3)基因的表达和扩增 ,探讨该基因在肝癌组织中过度表达的原因 ,分析临床病理学因素在肝癌DcR3基因表达和扩增中的作用。方法　对4 8例病理学证实的原发性肝癌患者的组织 ,利用RT -PCR检测癌组织及癌旁组织DcR3基因mRNA表达 ,荧光定量PCR检测该基因的扩增倍数 ,统计分析肝癌组织中DcR3基因表达与扩增的相关性 ,比较不同临床病理学类型肝癌中该基因表达及扩增的差异。结果　 4 8例肝癌组织中DcR3基因mRNA阳性表达 2 9例 ,阳性率为 6 0 4 % ;癌旁组织无阳性表达。mRNA表达与肿瘤大小、临床分期及肿瘤的浸润和转移有关 (P <0 0 5 )。mRNA阳性表达组的基因扩增倍数为 1 5 3± 0 82 ,阴性组为 0 75± 0 33,其差异有显著意义 (P <0 0 1)。 4 8例患者的DcR3基因扩增倍数为 0 18～ 3 86 ,平均值为 1 2 2± 0 77,扩增倍数超过 2的患者共 7例 ,占 14 6 %。不同扩增倍数肝癌患者该基因mRNA的表达差异有显著意义 (P <0 0 1) ;不同临床病理学特征肝癌间DcR3基因的扩增倍数差异无显著意义 (P >0 0 5 )。序列分析发现其mRNA序列与源序列有 3个碱基改变。结论　 (1)原发性肝癌组织中存在DcR3基因的高表达 ,对应的癌旁组织中未见表达 ;(2 )原发性肝癌组织中存在DcR3基