反相高效液相色谱法同时测定儿童血清中维生素A、E含量的研究

目的建立反相高效液相色谱法同时测定儿童血清中维生素A和维生素E的方法。方法取儿童血清50出，加入500μL无醛乙醇，振荡，加入正己烷萃取，将正己烷用氮气吹干后用流动相溶解。色谱条件：Zobax SB-c18 2．1×150mm（5μm）；流动相：甲醇：水（96：4），检测波长：维生素A325nm；维生素E294nm。结果维生素A在50～500μg/L浓度范围内呈线性，r=0．9996，维生素E在0．5～10μg/L浓度范围内呈线性关系，r=0．9997；维生素A和维生素E的平均回收率分别为98．18％（RSD=3．21％）和98．12％（RSD=3．41％）。结论本方法检测儿童血清中维生素A和E的浓度，方法快速、准确，样品处理简便，需要的血清量少。     

高效液相色谱法测定血清中的维生素A和维生素E

维生素Ａ和维生素Ｅ是一类脂溶性维生素,在人体内起着重要的生理功能,如维生素Ａ的维持暗视觉作用、维持和增强免疫功能、抑制肿瘤细胞生长的作用;维生素Ｅ的抗脂质过氧化作用,维持生殖机能作用等［１］,因此,测定血清中维生素 Ａ和维生素Ｅ的含量有其重要意义。在参阅国内有关报道［２］的基础上,我们用高效液相色谱法测定了血清中的维生素Ａ和维生素Ｅ含量,对液相色谱条件进行了探讨,并采用内标法提高了测定精度。１实验部分１．１仪器 北京分析仪器厂ＳＹ－５０６０型液相色谱仪,包括单柱塞往复泵和ＵＶ－１００紫外分光检测器…     

反相高效液相色谱法测定血清中维生素E的含量

目的:建立反相高效液相色谱(RP HPLA)测定人血清中维生素E(VE)浓度的方法。方法:移取血清,加入乙腈乙醇混合溶液及正己烷,旋涡混合、离心,分离正己烷层,氮气吹干,残渣用流动相溶解后进样。采用XTerraTMRP18色谱柱(5μm,3.9×150 mm),流动相为甲醇∶水(92∶8,v/v);流速1 m l/m in;柱温30℃;检测波长292 nm。结果:VE的保留时间为7.61 m in,浓度在2~16μg/m l范围内线性关系良好(r2=0.9999,n=5),平均回收率为95.6%,RSD<6%,最低检测量2 ng(S/N>3)。40例健康成人血清VE平均值为10.20±2.51μg/m l。结论:反相高效液相色谱检测血清VE浓度的方法灵敏度高,回收率和重现性良好,操作快速、简便,这对测定血清中其它维生素含量具有指导意义。     

强化食品中维生素A和维生素E的反相高效液相色谱同时测定法

目的建立高效液相色谱法同时测定强化食品中维生素A和维生素E的方法。方法样品经皂化后，用石油醚提取，浓缩挥干后用流动相溶解，进样测定。结果维生素A在6．54～65．40μg／L浓度范围内呈线性，r=0．99995，维生素E在0．10—5．05mg/L浓度范围内呈线性关系，r=0．99990；维生素A和维生素E的平均回收率分别为98．24％(RSD=2．92％)和95．73％(RSD=3．80％)。结论方法快速、灵敏、准确，样品处理简便易行。     

高效液相色谱法同时测定微量全血中维生素A和E

[目的]建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定微量全血样品中维生素A和E的方法。[方法]取全血50μl,用无水乙醇沉淀蛋白,再加入正己烷漩涡提取维生素A和E,取一定量正己烷层经氮气流挥干,残渣加甲醇溶解后用高效液相色谱法分析,标准曲线法定量。对血样的提取条件和色谱柱选择、流动相比例、流速、柱温等实验条件进行了优化,确定了最佳分析条件。本法色谱分离条件为:分离柱为ZorbaxC8色谱柱(4.6mm×15cm,5μm);流动相为甲醇-水(98 2);流速为0.70ml/min;柱温为50℃;紫外检测波长:维生素A为325nm,维生素E为292nm。[结果]维生素A和E标准曲线的相关系数均大于0.999;相对标准偏差(RSD)﹤5%。对于50μl全血,本法的检出限维生素A为0.02μg/ml;维生素E为0.08μg/ml。维生素A和E的加标回收率分别为93.2%～104%和80.4%～84.9%。[结论]所建立的方法快速、简便、灵敏、准确,已成功地测定了微量全血中维生素A和E。     

高效液相色谱法同时测定强化食品中的维生素A、D、E

用反相高饮液相色谱法同时测定强化食品中维生素Ａ、维生素Ｄ和维生素Ｅ的含量。对不同成分的样品采用不同的提取步骤。测定回收率分别为９２．１８％～９８．７２％、９１．６１％～９７．７８％和９２．００％～９７．２５％。变异系数（ＣＶ）分别为１．０３％～５．２３％、２．３７％～５．３３％和２．６７％～３．７２％。     

高效液相色谱法测定血清中维生素A的含量

目的探讨高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定血清中维生素A含量。方法取血清200μL,用无水乙醇沉淀蛋白,再加入正己烷震荡提取维生素A,取一定量烷层经氮吹挥干,残渣加无水乙醇溶解后采用HPLC法分析,保留时间定性,标准曲线法定量。分析柱为C18柱(250 mm×46 mm,5μm),流动相:甲醇+水(98+2),检测波长325 nm。结果维生素A在0.25～125.50μg/mL之间线性良好(r>0.999 6),平均回收率为98.20%,RSD为0.85%。结论 HPLC法测定血清中维生素A的含量简便、快速,灵敏度高,准确性好。     

高效液相色谱-多波长荧光检测法同时测定血清中维生素A和维生素E的含量

目的建立高效液相色谱-多波长荧光法同时快速检测人血清中维生素A和不同构型维生素E含量的方法。方法血清样品加入内标维生素A醋酸酯后,加入乙腈沉淀蛋白,经正己烷萃取,一定量的正己烷层经氮气挥干,用甲醇定容后进样,采用WATERS Symmetry C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,甲醇等度洗脱,控制柱温30℃,使用荧光检测器在线变换波长的方式进行定量检测。结果维生素A、α-维生素E、β-维生素E和δ-维生素E分别在质量浓度为0.050～2.0、0.50～50、0.050～5.0和0.050～5.0μg/mL的范围内呈良好的线性关系(r≥0.996);维生素A和各构型维生素E的方法检出限均为0.020μg/mL;各组分的日内、日间相对标准偏差在高、中、低浓度下均小于3%;样品在3个浓度点的回收率为91.2%～107.5%,相对标准偏差均小于10%。结论方法简单准确,相比高效液相-紫外检测法灵敏度更高,可实现血清中维生素A和不同构型维生素E含量的同时测定,适合大量血清样本的快速检测。     

二维高效液相色谱法同时测定菜肴中维生素A、D和E

目的 建立二维高效液相色谱法同时测定菜肴中维生素A、D、E的方法。方法 试样在抗氧化剂保护下,经过皂化,乙酸乙酯-正己烷混合液(3∶2,V/V)提取,二维高效液相色谱仪测定。以华谱Alphasil五氟苯基柱(150 mm×4.6 mm, 5μm)为一维色谱柱,用水和甲醇为流动相进行梯度洗脱,实现视黄醇、α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚的基线分离,荧光检测器检测;以华谱Alphasil VC-C₁₈柱(4.6 mm×150 mm, 3.5μm)为二维色谱柱,用含2%甲醇的乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,实现维生素D₂、D₃与其他杂质的分离,紫外检测器检测。结果 本研究实现视黄醇、维生素D₂和维生素D₃、5种生育酚的基线分离检测,在预设的浓度范围内各目标化合物呈线性相关,相关系数>0.999;样品中三水平加标回收率为85.4%～106.4%,相对标准偏差<8%。对干炸带鱼、油焖香菇、酱油蒸蛋、红烧肉、糖醋排骨等常见成品菜肴进行6次重复测定,相...     

高效液相色谱法测定人血清中维生素A的方法研究

目的 建立高效液相色谱法测定人血清中维生素A的方法。方法 血清加入维生素A醋酸酯内标,以乙醇沉淀蛋白质,用正己烷提取维生素A,氮吹浓缩后采用HPLC紫外检测器测定。结果 维生素A的线性范围为0.05~2.0μg/ml,标准曲线的相关系数大于0.9995,方法回收率在92%~111%之间,日内日间相对标准偏差(RSD)小于6%。结论 该法灵敏、准确、快速,适用于人血清中维生素A浓度的测定。     

反相离子对高效液相色谱法测定维生素C

维生素Ｃ是现代食品中应用最为普遍的营养强化剂，可用于果汁饮料、奶粉中，使用量为５００～１０００ｍｇ／ｋｇ。国内常见的分析方法有荧光分光光度法、高效液相色谱（氰柱）法，我们采用反相离子对高效液相色谱法，用ＯＤＳ柱，以甲醇／１－辛烷磺酸钠为流动相，根据色谱保留时间定性，外标法峰高定量。本法成功地将维生素Ｃ与溶剂峰及其他干扰峰分离开来，并解决了维生素Ｃ在ＯＤＳ柱上保留时间短的缺点。 材料与方法 １．仪器：美国贝克曼３４４Ｍ高效液相色谱仪（１６６紫外检测器）；Ｍ－５０型过滤器及注射式滤器；滤膜（ＨＡ０．４…     

反相高效液相色谱法测定保健食品中维生素C

维生素C是人体维持生长保证健康所必需的营养物质，许多保健食品中都含有。目前国内测定维生素C的方法有2，4-二硝基苯肼法、荧光光度法及液相色谱法。前两种方法试样前处理比较复杂，后一种方法由于各种样品基体不同，干扰因素不同及检测条件不完善，通常应用不多。但检测条件是分离效果的关键，我们通过摸索条件，建立了反相高     

儿童血清中维生素A、D的高效液相色谱测定

维生素Ａ、Ｄ是人体生长发育过程中不可缺少的营养物质之一 ,对儿童尤为重要。如果缺乏 ,轻者可导致发育不良 ,严重则可引起干眼病、夜盲症、佝楼病等。为了解和监测儿童生长发育过程机体维生素Ａ、Ｄ的含量 ,我们在南宁市某幼儿园随机选取５１名健康儿童 ,取血５．０ｍｌ,作化学方法提取维生素Ａ、Ｄ ,高效液相色谱测定其血清中的含量。结果 :５１份样品全部检出维生素Ａ ,平均含量为１．２８９８μｍｏｌ／Ｌ ;维生素Ｄ３ 只有９份样品检出 ,检出率为１７．６５ % ,平均含量为０．２２０７μｍｏｌ／Ｌ。１材料与方法１．１样品的制备所有…     

反相高效液相色谱法同时测定膳食补充剂中维生素C、叶酸和泛酸的方法研究

采用反相高效液相色谱法 ,对膳食补充剂中的维生素C、叶酸、泛酸的同时测定进行了方法学研究。色谱参考条件为SupelcosilC18柱 ;柱温 :4 0℃ ;检测波长 :2 10nm ;流动相 :0 .0 5mol/LKH2 PO4∶CH3 OH∶0 .1mol/LKOH =85 +8+7(pH6 .3) ;流速 :1.5ml/min。用外标法定量 ,线性范围为维生素C :0～ 1.0mg/ml;叶酸 :0～ 0 .1mg/ml;泛酸 :0～ 0 .2 5mg/ml。线性相关系数为 0 .999到 0 .9997,平均回收率为 90 .5 %～ 10 5 .6 % ,相对标准偏差为 1.6 %～ 8.0 %。方法简便 ,快速、准确 ,用于实际样品测定 ,结果令人较为满意。     

高效液相色谱法快速测定血浆中维生素A方法研究

目的:建立血浆中维生素A的高效液相色谱快速测定方法。方法:在避光条件下,血浆加入内标后振荡混匀,经正己烷萃取后离心,取上清液氮气吹干,加入无水乙醇溶解,HPLC测定。结果:在0.034μg/ml～0.68μg/ml的浓度范围内线性关系良好,r=0.9998,方法回收率88.2%～111.8%,最低检出限0.6 ng。结论:该方法操作简便、快速、准确,能够满足日常大批量快速分析要求。     

二极管阵列反相高效液相色谱法测定人血清中维生素E含量

目的:建立二极管阵列反相高效液相色谱法(PDA-HPLC)测定人血清中维生素E(α)含量的方法。方法:吸取血清,加入甲醇乙腈混合溶液及正己烷,旋涡混合、离心,分离正己烷层,氮气吹干,残渣用甲醇溶解后进样。采用XDB-C8色谱柱(5μm,4.6×150 mm),流动相为甲醇,流速1.0 ml/min,二极管阵列检测器检测。结果:α-VE浓度在2.1~21.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999,n=5),样品加标平均回收率为98.3%,相对标准偏差(RSD)<5%,最低检测量5 ng。结论:二极管阵列反相高效液相色谱法(PDA-HPLC)测定人血清中维生素E(α)含量的方法,定性准确,灵敏度高,回收率和重现性良好,操作快速、简便,结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定血清中的双酚A

双酚A(bisphonelA)是重要的化工原料 ,主要用于生产聚碳酸酯 (PC)、环氧树脂 (EP)和其他高分子材料 ,在这些材料中仍残留不少双酚A。PC用于制造耐热的茶具、咖啡杯等 ,EP用于食品包装材料 ,如罐装饮料与肉类罐头的内层涂料。由于这些物品都是人们经常接触的生活用品 ,造成双酚A也随之进入体内。双酚A是环境内分泌干扰物 ,在人体内能起到干扰体内正常激素分泌的作用 ,从而影响生殖功能 ,导致恶性肿瘤的产生。测定人血浆中的双酚A含量可对人类机体的影响提供评价依据。测定双酚A的方法有气相 质谱联用法[1,2 ] 、液相 质谱联用法[3 ] ,…     

反相高效液相色谱法测定肉碱

肉碱(Carnitine,CN)化学名为L-β-羟-r-三甲氨丁酸,其主要功能是促进脂肪酸的氧化以提供能量.若CN缺乏,会导致肌无力、肥胖、脂肪肝以及一系列心血管疾病的发生.CN已被广泛应用于药品及保健品领域.面对市场上名目繁多的CN类制品,急需一种简便、快捷、准确的方法进行检测和监督.本文提出了用高效液相色谱(HPLC)紫外检测法测定CN的技术.目前大多数县、区级以上的卫生防疫部门和食品管理监测部门都装备了HPLC仪,故本方法具有较广泛的应用价值.现报告如下.     

反相高效液相色谱法测定维生素B1片的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定维生素B1片含量的方法.方法 :采用DLamonsLlTM(钻石)色谱柱C18(250×4.6mm,5um);流动相为0.05mol/L辛烷磺酸钠的1%冰醋酸溶液-甲醇-乙腈(50:30:20);流速:1.0ml·min-1;检测波长:254nm.结果 :维生素B1在50～350ug·ml-1范围内线性关系良好,平均回收率为99.6%,RSD=0.9%(n=7).结论 :该方法简便可行、结果准确可靠,可作为维生素B1片的质量控制.     

DLPME-HPLC同时测定微量人血清中的维生素A和E

[目的]建立人血清中维生素A和E的分散液相微萃取(dispersive liquid phase microextraction,DLPME)-高效液相色谱分析方法。[方法]取血清20μl,加入50μl甲醇,漩涡震荡10 s后加50μl三氯甲烷超声萃取,高速离心后吸取下层三氯甲烷层供高效液相色谱分析,标准曲线法定量。色谱分析条件为:色谱柱为Eclipse XDB-C8(150mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(96+4);流速为0.80 ml/min;柱温为25℃;紫外检测波长:维生素A为325nm,维生素E为292 nm。[结果]维生素A和E标准曲线的相关系数均大于0.999;相对标准偏差均小于5%。对于20μl血清,本法的检出限维生素A为0.035μg∕ml;维生素E为0.09μg∕ml。维生素A和E的加标回收率分别为90.4%～103.2%和81.0%～92.1%。[结论]本法灵敏、准确、快速、简便,节约有机溶剂,适合于血清中维生素A和E的快速测定,是环境友好型的绿色分析方法。