经典名方温经汤基准样品HPLC-Q-TOF/MS分析与指纹图谱研究

目的 采用HPLC-Q-TOF/MS技术对温经汤基准样品化学成分进行表征,同时建立经典名方温经汤基准样品指纹图谱,并对其共有峰进行指认与归属。方法 采用Agilent 5 TC-C₁₈(2)柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,通过PeakView软件辅助解析,快速鉴别出温经汤基准样品中化学成分,并通过HPLC-UV及HPLC-ELSD法建立温经汤基准样品指纹图谱。结果 温经汤基准样品中共分析鉴别出122个化合物,并进行相关药味归属。建立的温经汤基准样品HPLC-UV指纹图谱有19个共有峰,通过对照品比对,指认出没食子酸、芍药苷、甘草酸、甘草苷、桂皮醛、丹皮酚、阿魏酸、藁本内酯、β-蜕皮甾酮9个色谱峰;HPLC-ELSD指纹图谱有8个共有峰,通过对照品比对,指认出人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re和人参皂苷Rb₁。建立的HPLC-UV、HPLC-ELSD两张指纹图谱能够归属全方所有药味。结论 通过UV、ELSD建立的指纹图谱方法灵敏度高,稳定性和准确性良好,全面反映了温经...     

基于HPLC-Q-TOF-MS、指纹图谱和含量测定的精气神口服液质量评价研究

目的 建立精气神口服液HPLC-ELSD指纹图谱及其活性成分的含量测定方法。方法 采用HPLC-Q-TOF-MS技术对精气神口服液化学成分进行分析,应用相似度评价对数据进行研究。采用Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,建立精气神口服液HPLC-ELSD指纹图谱并进行含量测定。结果 HPLC-Q-TOF-MS共鉴定出75个化合物;通过10批样品HPLC-ELSD指纹图谱标定了14个共有峰,通过对照品比对,共指认了斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg₃8个色谱峰。为进一步控制口服液的整体质量,选取其中斯皮诺素、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re和人参皂苷Rb₁4个活性成分,进行含量测定,各活性成分线性关系良好,建立的方法灵敏度高,稳定性和准确度良好。结论 建立的含量测定与指纹图谱同时测定的方法准确、稳定,可...     

5味山姜属中药正丁醇部位HPLC指纹图谱研究

目的:建立大高良姜、红豆蔻、高良姜、益智、草豆蔻5味山姜属中药正丁醇部位的HPLC指纹图谱,探讨同亲缘关系中药化学成分的相关性。方法:以80%乙醇作为提取溶剂,对大高良姜、红豆蔻、高良姜、益智、草豆蔻进行加热回流提取,提取液浓缩后依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,萃取液浓缩成浸膏,得到正丁醇部位,用甲醇配制成50 mg/mL供试品溶液。采用HPLC色谱法测定,国家药典委员会相似度评价软件进行分析。结果:建立了精密度、稳定性和重现性均较好的5味山姜属中药正丁醇部位HPLC指纹图谱,确定6个共有峰;其中高良姜、大高良姜含有11个共有峰,高良姜和草豆蔻含有12个共有峰,大高良姜和红豆蔻含有14个共有峰,红豆蔻、高良姜、益智和草豆蔻含有9个共有峰。大高良姜、红豆蔻、高良姜、益智、草豆蔻正丁醇部位化学成分相似度分别为0.344、0.756、0.484、0.596、0.680。结论:5味山姜属中药正丁醇部位含有共性成分较多,且含有较多极性相近的成分,红豆蔻、益智、草豆蔻正丁醇部位相似性较大,大高良姜、高良姜相似性较小。说明同亲缘关系中药化学成分有较密切的相关性。     

六神丸HPLC-UV/ELSD指纹图谱研究

目的?建立六神丸的HPLC-UV/ELSD指纹图谱分析方法,对六神丸中主要特征峰进行归属并进行指认。方法?采用HPLC法,色谱柱为Kromasil C₁₈（250?mm×4.6?mm,5?μm）;乙腈-0.05%三氟乙酸水溶液作为流动相,进行梯度洗脱;紫外检测器（UV）参数:检测波长为296?nm;蒸发光散射检测器（ELSD）参数:漂移管温度为70?℃,喷雾器为冷却模式,氮气压力为25?psi;进样量20?μL;体积流量为1?mL/min。通过《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》,建立14批六神丸指纹图谱的共有模式,计算其相似度,并对共有峰进行药材的归属以及成分进行指认。结果?分别建立了六神丸HPLC-UV及HPLC-ELSD的指纹图谱,及其共有模式,指认出HPLC-UV指纹图谱共有峰14个,14批六神丸制剂相似度为0.940～0.988,指认出HPLC-ELSD指纹图谱共有峰13个,14批六神丸制剂相似度为0.968～0.998。确认了和蟾蜍他灵、沙蟾毒精、远华蟾毒精、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸。结论?首次建立了六神丸HPLC-UV/ELSD指纹图谱分析方法,该法操作准确、简单,重复性好、精密度高,可用于分析六神丸中化学成分信息,为六神丸质量控制提供了可靠的科学依据。      

黄花倒水莲中Reinioside C含量测定及指纹图谱分析

目的:建立黄花倒水莲中Reinioside C的含量测定方法,并对其总皂苷部位的指纹图谱进行初步研究.方法:采用RP-HPLC-ELSD法,用C18色谱柱,以乙腈-0.1%冰乙酸水溶液梯度洗脱 .结果:两点校正,自然对数换算可弥补ELSD线性应答差的不足,方法学验证此法可获得准确测定结果.结论:HPLC-ELSD法测定Reinioside C的含量及药材总皂苷部位的指纹图谱可用于黄花倒水莲的质量控制.     

麦冬类药材皂苷元含量与其抑制中性粒细胞呼吸爆发的相关性

目的:分析麦冬类药材总皂苷元含量与抑制中性粒细胞呼吸爆发作用的相关性,考察通过总皂苷元含量预测药材的药效活性。方法:采用HPLC-ELSD法测定麦冬类药材鲁斯可皂苷元及薯蓣皂苷元含量;采用化学发光法测定对中性粒细胞呼吸爆发的作用活性。结果:不同种麦冬类药材在皂苷元组成及含量上均有区别,其总苷元含量从高到低依次为:短葶山麦冬、川麦冬和湖北麦冬、杭麦冬;在活性作用方面:麦冬类药材对中性粒细胞呼吸爆发呈抑制作用,其中短葶山麦冬对中性粒细胞的呼吸爆发具有较强的抑制作用。经分析不同种麦冬类药材的总皂苷元含量与其对中性粒细胞呼吸爆发的抑制作用,总皂苷元含量与抑制中性粒细胞呼吸爆发作用呈相关性。结论:麦冬类药材可根据总皂苷元含量预测对中性粒细胞呼吸爆发的抑制活性,总皂苷元含量是反映药材抗炎活性的一个很好的综合指标,该研究为麦冬类药材的品质评价提供了科学依据。     

河北道地药材远志HPLC-UV指纹图谱研究

目的 建立河北道地药材远志的HPLC-UV指纹图谱,获得对照图谱,并与不同产地远志药材指纹图谱相比较,为有效控制远志质量提供方法.方法 采用HPLC-UV法得到了19批远志样品指纹图谱.色谱条件:Waters 1525高效液相色谱仪,C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.2%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长316 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温35℃.结果 建立了河北省远志药材HPLC-UV指纹图谱共有模式,并对不同产地药材进行了相似度比较.结论 本方法操作简便、快速、准确,为远志药材的鉴别和质量的全面控制提供了依据.     

麦冬有效部位对HUVEC凝血与纤溶活性物质的影响

目的 探讨麦冬正丁醇提取部位、薯蓣皂苷元及豆甾醇对培养HUVEC抗凝、纤溶及抗自由基损伤等作用.方法 经H2O2和麦冬正丁醇提取部位、薯蓣皂苷元及豆甾醇作用于HUVEC后,取上清培养液测定tPA、PAI-1、TM的含量.结果 麦冬正丁醇提取部位、薯蓣皂苷元及豆甾醇可缓解H2O2所致tPA、PAI-1的水平降低.结论 麦冬有效部位可减轻自由基对HUVEC的损伤,在一定程度上通过对tPA、PAI-1含量的调节,维持内皮细胞正常生理功能,从而能有效防治血瘀证.     

小半夏汤低极性部位高效液相指纹图谱研究

目的:建立小半夏汤乙醚提取部位的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并研究全方与其组成药味的相关性。方法:采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-水梯度洗脱,柱温30℃,流速为1 m L·min-1,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004)对获得的指纹图谱进行相似度分析。结果:建立了10批小半夏汤乙醚提取部位的HPLC指纹图谱,标定了9个共有峰,并通过对照品比对指认了其中的1个色谱峰。考察了全方与各组成药味指纹图谱的相关性,结果表明低极性部位的色谱峰主要来自生姜药材。结论:首次建立了小半夏汤乙醚提取部位的HPLC特征指纹图谱,该方法比较稳定、简便、可靠,可作为小半夏汤质量控制的参考依据。     

知母HPLC-UVD-ELSD指纹图谱的建立与多特征成分含量测定的质控方法研究

目的?建立知母指纹图谱结合多特征成分含量测定的HPLC-UVD-ELSD分析方法,并应用于多批次市售药材的质量控制。方法?采用UltimateTMXB-C₁₈色谱柱（4.6?mm×250?mm,4.5?μm）,检测波长258?nm,ELSD漂移管温度65?℃,载气流速1.0?L/min,建立知母指纹图谱与主含黄酮及皂苷类成分含量测定的HPLC-UVD-ELSD分析方法,运用相似度软件结合化学计量学分析对多批次药材进行质量评价并同时完成多特征成分的含量测定。结果?建立了高效、快捷的知母HPLC-UVD-ELSD指纹图谱与多特征成分含量测定的方法;18批市售药材的指纹图谱相似度在0.786~0.999,并指认了10个色谱峰。化学计量学结果表明造成18批药材差异较大的成分为新芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ;进而建立了同时测定新芒果苷、芒果苷、知母皂苷N、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ 5个成分含量的方法,结果表明知母中主含知母皂苷BⅡ。结论?建立的指纹图谱结合多特征成分含量测定的HPLC-UVD-ELSD分析方法,更全面而准确地描述了知母药材化学成分整体轮廓与各类特征成分含量贡献,为提升市售知母药材的质量控制方法奠定了基础。      

复智散HPLC-UV/ELSD指纹图谱的研究

目的 建立中药复智散提取物HPLC-UV/ELSD指纹图谱.方法 采用HPLC-UV/ELSD串联检测技术,应用AlltechC18(5 μm,4.6mm×250 mm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.1%乙酸水溶液(B),线性梯度时间洗脱程序(A)为:0,12%;25,20%;30,20%;75,30%;105,40%;120,80%;130,12%;流速:1.0ml/min;柱温:30℃;检测波长:335 nm;飘移管温度80℃;氮气压力25 psi.运用指纹图谱相似度评价软件,对12批复智散提取物指纹图谱进行相似度计算.结果 建立中药复智散提取物指纹图谱并鉴定其5种主要成分;对UV与ELSD图谱互补性进行分析;12批复智散提取物指纹图谱相似度良好.结论 该指纹图谱能同时反映复智散复方中主要化学组分特征,一次进样,可全面、稳定、有效地进行复方中药复智散的质量监督与评价.     

Development of the fingerprints for the quality evaluation of Viscum coloratum by high Performance liquid chromatography

A high-Performance liquid chromatography coupled ultraviolet (HPLC-UV) method was developed for a chemical fingerprint analysis of Viscum coloratum. Eighteen peaks were selected as the common peaks and Homoeriodictyol-7-0-β-D-apiosiyl-(1→2)-β-D-glucoside was used as a reference. The relative areas of common peaks were used for hierarchical clustering analysis and similarity calculation. Thirty-seven samples collected from different sources were classified into five groups. The similarities of 21 batches Viscum coloratum samples were beyond 0.90. The results obtained suggest that the Chromatographie fingerprint can efficiently identify Viscum coloratum. Additionally, the fingerprints can then be used to evaluate the correlation between Viscum coloratum and hosts.     

基于衰老大鼠模型的银杏叶提取物血清指纹图谱研究

目的 研究银杏叶提取物用于衰老大鼠模型的血清指纹图谱,探讨其体内药效成分。方法 建立D-半乳糖致衰老大鼠模型,同时ig给予银杏叶提取物,制备衰老大鼠的含药血清,采用HPLC-UV和HPLC-ESI-MS法,分别针对黄酮类成分和内酯类成分建立指纹图谱,分析入血成分。结果 HPLC-UV指纹图谱显示了10个入血成分,大多为代谢成分;HPLC-MS指纹图谱标定了9个共有峰,其中7个为原型成分。结论 首次进行了银杏叶提取物的血清药物成分图谱研究,可反映银杏叶提取物口服给药吸收入血药物成分的变化,为其体内药效物质研究奠定基础。     

黄芪抗胃溃疡作用的谱效关系研究

目的 研究黄芪95%乙醇提取物的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱与抗胃溃疡药效的相关性,初步揭示黄芪药效物质基础。方法 ig给予胃溃疡模型小鼠黄芪乙醇提取物,用灰色关联法和偏最小二乘法将HPLC指纹图谱各共有峰的峰面积与抗胃溃疡药效数据相关联,研究谱效相关性,确定黄芪抗胃溃疡作用的物质基础。结果 黄芪95%乙醇回流提取物（总提取物）对无水乙醇所致小鼠胃溃疡有一定的抑制作用,这与黄芪的敛疮生肌之功效相一致。用灰色关联的分析方法,根据关联度大小确定黄芪乙醇提取物中各成分对抗胃溃疡作用的贡献度,并应用偏最小二乘法拟合了药效和化合物峰面积的数理方程,筛选出贡献值较大的化合物。两种统计学方法综合分析表明,在HPLC-DAD指纹图谱中,成分P9和P12（毛蕊异黄酮）贡献较大;在HPLC-ELSD指纹图谱中,成分P8和P9作用较强。结论 黄芪95%乙醇提取物较其不同极性提取部位具有较强的抗胃溃疡作用,通过HPLC指纹图谱与药效相关性分析可知黄芪抗胃溃疡作用与其所含的多种成分有关。     

枇杷叶药材高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的：建立中药枇杷叶的高效毛细管电泳（HPCE）指纹图谱。方法：采用正丁醇超声提取法制备品种、批次不同的枇杷叶供试液,以熊果酸对照品为内参考物,运用高效毛细管区带电泳法测定指纹图谱,并用相似度评价软件分析其相似度。结果：所测定的13个品种枇杷叶样品,其指纹图谱相似度0.9以上有11个,0.9～0.8之间1个,0.8～0.7之间1个,指纹图谱整体面貌基本一致的。结论：所建立的枇杷叶高效毛细管电泳指纹图谱稳定、可靠,可作为枇杷叶的特征指纹图谱,为枇杷叶的定性鉴别及药材内在质量评价提供了新的参考依据。     

瓜蒌滴丸的化学指纹特征及4种成分的定量分析

目的研究瓜蒌滴丸的化学指纹特征及4种成分的定量分析方法。方法采用HPLC-PDAD法建立10批瓜蒌滴丸的化学指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算瓜蒌滴丸的相似度;采用标准曲线法对瓜蒌滴丸中尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟苷、腺苷进行定量分析。结果10批瓜蒌滴丸的相似度为0.99（Mark峰匹配）和0.97（全谱峰匹配）。瓜蒌滴丸中尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟苷、腺苷的含量分别为0.06%、0.03%、0.11%、0.17%,该方法的精密度、稳定性、重复性和加样回收率的RSD最高值分别为2.24%、3.55%、4.23%和4.44%,可满足分析要求。结论建立了瓜蒌滴丸的化学指纹特征及4种成分的定量分析方法,可用于瓜蒌滴丸的质量控制。     

基于指纹图谱及多指标成分定量的丹参提取工艺对比研究

目的 对已上市制剂中丹参不同提取工艺的提取效果进行对比分析.方法 按照冠心丹参胶囊、复方丹参片、复方丹参滴丸、丹参片4种代表制剂的提取工艺制备丹参提取液,研究建立同时测定提取液指纹图谱及多指标含量的HPLC方法,测定不同丹参提取液的丹参素钠、丹酚酸B和丹参酮ⅡA含量及指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件计算指纹图谱的相似度.结果 4种丹参提取液中丹参酮ⅡA、丹参素钠、丹酚酸B含量分别为0.27~1.25、1.44~4.46、33.77~93.92 mg·g-1;冠心丹参胶囊与丹参片、复方丹参滴丸、复方丹参片的指纹图谱相似度分别为0.781、0.853、0.758,复方丹参滴丸与复方丹参片的指纹图谱相似度为0.879.结论 4种代表制剂丹参提取工艺的丹参酮ⅡA、丹参素钠、丹酚酸B含量及指纹图谱均存在明显差异,针对相同的临床适应症,需深入研究以实现丹参工艺的标准化、规范化.     

痰热清氯化钠注射液指纹图谱的研究

目的建立痰热清氯化钠注射液的指纹图谱。方法采用HPLC-ELSD法检测痰热清注射液中非挥发性成分,以黄芩苷对照品为参照,标定共有峰,计算相对保留时间和相对峰面积比值,确定10批样品之间的相似度。结果在全面方法学研究的基础上,对10批痰热清氯化钠注射液进行检测分析,HPLC指纹图谱有16个共有峰,其相对保留时间及相对峰面积比值均符合要求。结论建立的指纹图谱可作为痰热清氯化钠注射液质量评价的重要依据之一。