大鼠胰腺促性腺激素释放激素受体mRNA的原位杂交

目的 研究大鼠胰腺促性腺激素释放激素（GnRH)受体mRNA的存在及细胞定位。方法 采用原位杂交组织化学法。结果 胰脏的外分泌部腺上皮细胞、胰导管上皮细胞及内分泌部胰岛细胞内可检测到较强的GnRH受体mRNA杂交信号,杂交阳性信号物质均分布在胞质内,胞核呈阴性。结论 大鼠胰脏内、外分泌部均能合成GnRH受体。GnRH也是一种消化激素,它由胰脏自身合成,又作用于胰脏,可能参与胰脏内、外分泌功能的调节。     

肝细胞性肝癌组织中GnRH及其受体的免疫组织化学定位

肝癌可能是一种性激素依赖性肿瘤,培养的人肝癌细胞上存在促性腺激素释放激素(GnRH)结合位点,GnRH对该细胞系的生长有抑制作用[Panti D et al.En-docrinology,1995;136:75];但肝癌组织能否表达GnRH及其受体(GnRH-R),与肝癌细胞分化的关系如何,尚未见文献报道;为此我们观察不同分化级别肝癌组织中GnRH及其受体的定位和分布,以期为研究GnRH调控肝癌细胞增殖的机理提供依据.     

肝细胞生长因子及其受体基因在人肝癌和癌旁肝组织中的表达

目的：了解肝细胞生长因子（ＨＧＦ）及其受体基因在人肝癌和癌旁肝组织中的表达的变化规律，以及这种变化与肿瘤生物学行为的关系。方法：采用地高辛标记的ＨＧＦ及其受体ＤＮＡ探针，检测２６例人原发性肝癌及其癌旁肝组织中ＨＧＦ及其受体基因的表达。结果：ＨＧＦ在人肝部和癌旁肝组织中虽都有表达，但阳性率不及其受体基因表达，ＨＧＦ受体在肝癌和癌旁肝组织中均呈过度表达，且肝癌组织中杂交信号明显高于癌旁肝组织，有肝内外     

促性腺激素释放激素在胰腺癌中的表达及意义

目的：探讨促性腺激素释放激素（GnRH）在胰腺癌中的表达及其临床意义．方法：采用免疫组织化学SP法,对46例胰腺癌组织中GnRH的表达进行相关性研究,其中高分化胰腺癌20例,中分化胰腺癌16例,低分化胰腺癌10例．结果：GnRH定位于胰腺癌细胞的胞膜和胞质,在高分化癌中的阳性表达率为78．55％,明显高于中分化癌59．31％的阳性率（P〈0．01）和低分化癌50％的阳性率（P〈0．01）;显示在胰腺癌中GnRH的表达强度随着组织分化程度增高而增高．结论：GnRH的表达与胰腺癌的恶性程度有关,GnRH可能参与了胰腺恶性肿瘤的发生与发展．     

原发性肝细胞癌组织VEGF—C和CD44v6表达及意义

目的 探讨血管内皮细胞生长因子-C(VEGF-C) 和CD44v6在原发性肝细胞癌(简称肝癌)中的表达及其与肝癌部分生物学行为的关系.方法 采用常规SP免疫组织化学染色法检测33例原发性肝癌组织中VEGF-C和CD44v6的表达,并以21例肝硬化组织、16例肝外伤或肝囊肿组织作为对照,分析其表达水平与肝癌部分生物学行为的关系.结果 VEGF-C 定位于肝癌细胞的胞质,阳性表达率为78.8%,CD44v6主要定位于肝癌细胞的胞膜及胞质,阳性表达率为72.7%.二者在肝癌组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织(χ2=12.157、10.280,P<0.05);在发生转移的肝癌组织中的阳性表达率明显高于无转移的肝癌组织(χ2=4.930、8.088,P<0.05);在正常肝脏组织及肝硬化组织中几乎不表达.VEGF-C 和CD44v6的表达与肝癌组织学分级、肿瘤大小、是否并发肝硬化、AFP表达、有无HBV感染无关.VEGF-C 和CD44v6在肝癌组织中的阳性表达呈正相关(r=0.681,P<0.01).结论 VEGF-C和CD44v6的表达与肿瘤侵袭转移的发生有关,可作为估计预后的指标.     

人肝细胞癌组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原与预后的关系

研究肝癌组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原与患者预后的关系。应用免疫组化方法对60例肝细胞癌组织作Ⅰ、Ⅲ型胶原定位和半定量分析。结果：患者5年生存率在癌内Ⅰ、Ⅲ型胶原染色强阳性组中明显高于中等阳性和弱阳性组（P＜0．05）；在出现癌栓的病例中，Ⅰ、Ⅲ型胶原强阳性和中等阳性组的例数明显少于无癌栓组（P＜0.05）；并观察到肝癌细胞胞质内Ⅰ、Ⅲ型胶原染色阳性。结论：Ⅰ、Ⅲ型胶原可作为肝癌预后判断的一个指征；癌内胶原主要来自间质细胞，但肝癌细胞有合成胶原的可能。     

丙型肝炎病毒核心抗原的转位表达与肝（癌）细胞凋亡的关系

目的　探讨丙型肝炎病毒核心抗原的转位表达与肝(癌 )细胞凋亡的关系及其意义 .方法　采用免疫组织化学方法检测 HCV核心区抗原和 NS3区抗原在肝硬变 (L C)和肝细胞肝癌 (HCC)组织中的分布 ,同时对连续切片进行原位凋亡检测并计算凋亡指数 .结果　 HCV核心区抗原定位于肝细胞或肝癌细胞的胞质或胞核中 ,在 L C组织中 ,核心抗原呈弥漫或灶状分布于肝细胞胞质 ,偶见胞核阳性的肝细胞 ,阳性率为 6 0 .7% ;核心抗原在癌组织中以核阳性分布为主 ,阳性率为 37.6 % ,癌旁肝组织以胞质阳性为多见 .HCC中 HCV核心抗原的核阳性率 (75 .0 % ,15例 / 2 0例 )明显高于其在 L C(17.7% ,6例 / 34例 )及癌旁肝组织 (11.8% ,2例 / 17例 )中的阳性率 (P<0 .0 5 ) ;在 HCC中 ,HCV核心抗原核转位表达的癌组织的 AI值 (0 .174± 0 .0 93)显著低于胞质阳性的癌组织 (0 .5 12± 0 .113,P<0 .0 1) . HCV NS3区抗原定位于肝细胞或肝癌细胞的胞质中 ,在 L C和 HCC组织中的阳性率分别为 5 3.6 %和 39.6 % .未发现 HCV NS3区抗原的表达与肝(癌 )细胞凋亡的相关性 .结论　 HCV感染与我国 L C,HCC的发生关系密切 ,HCV核心抗原在肝癌组织中常发生核转位表达 ,这种核转位表达抑制了肿瘤细胞发生凋亡 ,从而促进肿瘤组织的进一步恶化     

促性腺激素释放素及其受体在人肝癌组织中的分布及意义

目的观察促性腺激素释放素（ＧｎＲＨ）及其受体在不同分化程度肝癌组织中的定位与分布,为研究ＧｎＲＨ与肝癌细胞增殖调控的关系提供依据。方法用常规组织学ＨＥ染色和免疫组织化学链霉亲合素生物素化过氧化物酶复合物（ＳＡＢＣ）技术检测了３３例人肝细胞性肝癌及其癌旁肝组织中ＧｎＲＨ及其受体的表达和分布情况。结果ＧｎＲＨ与ＧｎＲＨ受体在肝癌细胞和癌旁肝细胞的定位及分布范围基本一致,阳性物质主要位于癌细胞的胞膜和胞浆,核周区染色增强,胞核未见阳性产物。分化Ⅰ、Ⅱ级肝癌组织ＧｎＲＨ的阳性率为９４％（１６／１７）,高于ＩＩ级肝癌［５０％（５／１０,Ｐ＜００５）和Ⅳ级肝癌［１７％（１／６）Ｐ＜０００１］。Ⅰ～Ⅱ级肝癌组织ＧｎＲＨ受体阳性率为８８％（１５／１７）,高于Ⅳ级肝癌［１７％（１／６）Ｐ＜００１］。此外,尽管各分化级别肝癌组织中ＧｎＲＨ及其受体的阳性率均低于其相应癌旁肝硬化组织,但差异无显著意义（Ｐ＞００５）。结论肝癌组织中ＧｎＲＨ及其受体的表达与其分化程度有关。     

人肝细胞癌组织内Ⅰ,Ⅲ型胶原与预后的关系

研究肝癌组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原与患者顾后的关系。应用免疫组化方法对６０例肝细胞癌组织作Ⅰ、Ⅲ型胶原定位和半定量分析。结果：患者５年生存率在癌Ⅰ、Ⅲ型胶原染色强阳性组中明显高于中等阳性和弱阳性组（Ｐ〈０．０５）；在出现癌栓的病例中，Ⅰ、Ⅲ型胶原型原强阳性和中等阳性组的例数明显少于无癌栓组（Ｐ〈０．０５）；并观察到肝癌细胞胞质内Ⅰ、Ⅲ型胶原染色阳性。结论：Ⅰ、Ⅲ型胶原可作为肝癌顾判断的一个指征；癌内胶原主     

肝细胞肝癌组织中FN和PTEN基因表达水平及意义*

目的：研究FN和PTEN基因在肝细胞肝癌中的表达情况,探讨其在肝细胞肝癌发生发展中的作用及意义。方法：应用荧光实时定量PCR方法,检测84例肝细胞肝癌及癌旁组织中FN蛋白、PTEN蛋白、mRNA表达情况。分析FN和PTEN基因表达及肝细胞肝癌的关系。结果：FN蛋白主要定位于肝癌细胞外基质中。FN mRNA在肝细胞肝癌中的阳性率为79.76%,高于癌旁肝组织的阳性率9.52%,差异具有统计学意义（P<0.05）。PTEN蛋白明确定位于肝细胞胞质内。PTEN mRNA在肝细胞肝癌中的阳性率为38.09%,明显低于癌旁肝组织的阳性率100%,差异具有统计学意义（P<0.05）。FN在合并癌栓,淋巴结转移,AFP阳性,肿瘤数目多发的肝癌组织中的表达高,而在不同分化程度及不同肿瘤直径的肝癌组织中表达差异无统计学意义;PTEN在低分化肝癌细胞,合并癌栓,AFP阳性,淋巴结转移,肿瘤直径≥2cm的肝癌组织中表达较低,而在不同肿瘤数目的肝癌组织中表达无统计学意义,PTEN蛋白表达与HBsAg无关,与组织学分级及转移有关。结论：肝癌组织中FN mRNA的表达量高于癌旁组织,而肝癌组织中PTEN mRNA的表达量低于癌旁组织,FN和PTEN基因可能与肝细胞肝癌的发生发展有关,其可能在肝癌的发生发展、侵袭转移中起一定的促进或抑制作用。     

阿拉瑞林对GnRH受体阳性肝癌细胞Fas/FasL基因表达的影响

目的　探讨Fas Fasl系统在LHRH类似物抑制肝癌细胞增殖过程中的作用。方法　用免疫组织化学方法检测SMMC772 1肝癌细胞中GnRH受体的表达 ;用半定量RT PCR方法 (QRT PCR)观察LHRH类似物对SMMC772 1肝癌细胞中Fas FasL系统mRNA表达的变化。结果　SMMC772 1肝癌细胞呈GnRH及其受体免疫反应阳性。PCR反应产物均与预期长度相符合。Fas FasL mRNA水平随LHRH类似物浓度增加而增大 ,经方差分析各组间有显著性差异 (Fas ,F =16.5 18FasL ,F =111.5 83 ,P <0 .0 1)。结论　SMMC772 1肝癌细胞具有自分泌GnRH的功能 ;Fas FasL系统可能参与了LHRH类似物对肝癌细胞增殖的抑制作用     

原发性肝癌内HBV DNA及HBAg的分布与意义

采用原位分子杂交和免疫组化及双标记技术,对44例原发性肝细胞肝癌及痛旁肝组织进行了乙型肝炎病毒DNA及其表达产物x抗原、核心抗原检测。癌组织中HBV DNA、HBxAg、HBcAg检出率分别为70.5％、65.9％及20.5％;癌旁肝组织依次为76.5％、76.5％及29.4％。HBV DNA及HBxAg主要位于肝细胞浆中,在HBcAg阳性组中的检出率高于HBcAg阴性组(P<0.05)。9例枯否氏细胞浆有HBxAg检出。HBVDNA在癌及癌旁组织中的检出有“伴随现象”。HBcAg多位于核内,部分为核浆型,且总是伴随HBV DNA和(或)HBxAe检出,无一例单独检出HBcAg者。此外,HBxAg可由肝内游离型HBV DNA所表达;肝内核型或浆型HBcAg均可反映HBV的复制。因此,肝内HBxAg的检测可作为HBV感染的灵敏指标之一,进一步证实HBV感染与HCC的发生有密切关系。     

肝细胞癌患者癌和癌旁组织中Fas抗原和bcl-2表达的研究

目的：探讨人体肝细胞癌患者癌及癌旁组织中Ｆａｓ抗原的原位表达、分布，并与抗凋亡基因产物ｂｃｌ－２蛋白比较，探讨Ｆａｓ抗原在肝细胞癌形成过程中的生物学意义。方法：用免疫组织化学方法检测２０例患者的肝细胞癌及癌旁组织中Ｆａｓ抗原和ｂｃｌ－２蛋白的原位表达。结果：１８例癌组织中有Ｆａｓ表达，大多数表现为胞质阳性，所有癌旁组织均见Ｆａｓ表达，阳性可见于胞质及胞膜，炎细胞浸润明显之汇管区及纤维间隔附近的肝细胞阳性表达有所增强。ｂｃｌ－２在１９例ＨＣＣ和所有癌旁组织均有表达；胞质着色，癌组织较癌旁表达为弱。结论：人体肝癌组织有Ｆａｓ表达，以胞质阳性为主，癌旁组织胞质及胞膜均有表达，与淋巴细胞浸润关系密切，ｂｃｌ－２的表达并不减弱细胞Ｆａｓ的表达，二者在ＨＣＣ的发生过程中可能有着独立的作用机制并起了一定的作用。     

肝细胞癌组织Bcl-2和Bax蛋白的表达（英文）

目的　探讨原发性肝细胞癌 (简称肝癌 )细胞凋亡相关蛋白 Bcl- 2和 Bax的表达及其意义 .方法　采用免疫组化ABC法检测 Bcl- 2和 Bax蛋白在 66例人肝癌组织和 2 4例人正常肝组织 ,以及 3株人肝癌细胞系 HCC- 92 0 4 ,SMMC-772 1 ,HHCC和 1株永生化的人正常肝细胞系 QZG的表达情况 ,并分析肝癌组织的 Bcl- 2和 Bax阳性率与其病理分级之间的关系 .结果　 Bcl- 2在正常肝组织的阳性率只有 4.2 % ,而在肝癌组织为 2 5.8%差异显著 (P<0 .0 5) .Bax在正常肝组织的阳性率为 70 .8% ,在肝癌组织为 43.9% ,差异显著 (P<0 .0 5) .肝癌组织的 Bcl- 2和 Bax阳性率与其病理分级之间均未见明显的相关性 (P>0 .0 5) .在正常肝和肝癌组织中 ,Bcl- 2阳性率均明显低于 Bax(P<0 .0 1 ,P<0 .0 5) .在QZG细胞中未见明显的 Bcl- 2阳性信号 ,Bax阳性细胞计数率为 61 % .SMMC- 772 1细胞和 HHCC细胞的 Bcl- 2阳性细胞计数率分别为 1 4 .3%和 1 1 .8% ,Bax阳性细胞计数率分别为 58.3%和 47.1 % .HCC- 92 0 4细胞中未见明显的 Bcl- 2阳性信号 ,Bax阳性细胞计数率为 43.2 % .结论　与正常肝组织相比 ,肝癌组织的 Bcl- 2蛋白低度升高 ,Bax蛋白下降 .正常肝和肝癌组织的 Bcl- 2水平均低于 Bax.肝癌和正常肝细胞系的 Bcl- 2蛋白水平均很     

TRAF3在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)在肝细胞癌(简称肝癌)发生、发展中的意义。方法采用免疫组化方法检测50例原发性肝癌组织、12例癌旁肝组织及10例正常肝组织中TRAF3蛋白的表达,分析其与肝癌的临床病理参数的关系。Western blot法检测TRAF3在肝癌高分化细胞系HepG2、低分化细胞系SMMC7721和人正常肝细胞系L-02中的表达差异。结果 TRAF3主要定位于细胞质,其阳性率在正常肝组织(100%)及癌旁组织(91%)明显高于肝细胞癌组织(52%)。TRAF3在肝癌的表达与临床分期相关,与患者性别、年龄、癌灶数目、肿瘤大小、瘤栓有无、乙肝表面抗原(HBsAg)阴阳性、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤包膜是否完整均无关。TRAF3总蛋白在正常肝细胞系中的表达量明显高于肝癌细胞系,且在肝癌高分化的细胞系中表达量高于低分化细胞系。结论 TRAF3在肝癌中的表达明显下调,且在肝癌中的表达水平与肝癌的侵袭程度相关,提示TRAF3可能抑制肝癌的浸润和转移。     

原发性肝细胞癌组织中丙型肝炎病毒的检出及其相关意义的研究

目的 探讨丙型肝炎病毒（HCV）感染导致肝细胞癌变的可能机理。方法 应用抗－HCVNS3单克隆抗体和地高辛标记的HCV全基因组cDNA探针,对19例伴单一HCV感染的肝细胞癌石蜡组织切片进行了HCAg的免疫组化和原位杂交检测。结果 两种方法的阳性检出率分别为89．5％（17／19）和57．9％（11／19）。HCAg主要分布于癌细胞和癌旁肝细胞的胞浆和胞核内,呈局灶或弥漫型分布,癌旁组织表达较癌巢显著,核型分布在癌旁组织中常见;HCV RNA仅见于癌或癌旁肝细胞的胞浆中,呈散在及局灶分布,弥漫型分布少见。结论 本研究结果支持HCV感染可能导致原发性肝细胞癌的观点。HCAg在癌旁肝细胞和癌细胞核中的存在提示其可能对肝细胞核产生基因调节作用,这是否是HCV感染导致肝细胞癌变的可能机理之一,值得进一步研究阐明。     

肝细胞癌发生中丙型肝炎病毒NS3蛋白对诱导型一氧化氮合酶表达的影响

OBJECTIVE: To investigate hepatocarcinogenesis by detecting the effect of HCV NS3 protein on expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA in hepatocellular carcinoma (HCC) and pericarcinomatous liver tissues(PCLT). METHODS: The expression of HCV NS3 protein and iNOSmRNA was detected by immunohistochemical technique (SP method) and in situ hybridization in specimens of HCC and PCLT from 52 patients with HBV(-). The relationship between the positive rate and the signal strength was tested statistically. RESULTS: The positive rate of HCV NS3 protein in HCC was lower (46.2% vs. 67.3%), and signal strength was weaker than those in PCLT. The signal strength of HCV NS3 protein was correlated with the degree of carcinomatous cells differentiation in HCC (P < 0.01). The positive rates (80.8% and 90.4%) of iNOSmRNA in HCC and PCLT had no statistical difference. Signal intensity of iNOSmRNA in HCC was weaker than that in PCLT. The higher HCVNS3 protein expression level was, the stronger iNOSmRNA signals in PCLT (P < 0.01). In particular, the localization and patterns of HCV NS3 protein were much similar to those of iNOSmRNA in the PCLT of some patients. CONCLUSIONS: HCV NS3 protein may exert its hepatocarcinogenic effect in the early stage on host cells by increasing product of nitric oxide, which may bring about transformation of hepatocytes.