无精子症及严重少精子症患者的睾丸活检病理研究

在男性不育的患者中 ,无精子症及严重少精子症占有相当的比例 ,无精子症的病因有睾丸性原因、睾丸前性原因和睾丸后性原因 ,其中睾丸性所致无精子症病因及表现又非常复杂 ,睾丸活检对确定是否睾丸性原因 ,睾丸损害类型和程度 ,以及进一步对病因的判断和治疗选择都有重要的意义。 1997年 1月～ 12月在我院泌尿外科诊疗的 4 8例无精子及严重少精子症患者进行了睾丸活检病理检查 ,现将睾丸活检病理结果报告如下。材料和方法1.病例选择　 1997年 1月～ 2 0 0 1年 12月 ,我院泌尿外科门诊 4 8例男性不育患者 ,禁欲 5～ 7天 ,手淫取精液检查 3次以…     

特发性无精子症和严重少精子症患者Y染色体基因微缺失分析

目的：研究Y染色体基因微缺失与特发性无精子症和严重少精子症的关系，并建立一个灵敏、操作简便的分子检测方法。方法：应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法对65例特发性无精子症患者、27例严重少精子症患者进行Y染色体YRRM1、DAZ、DYS1基因微缺失的检测。结果：65例特发性无精子症患者中，3例发生YRRM1基因微缺失，发生率为4．6％；5例发生DAZ基因微缺失，发生率为7．7％。27例严重少精子症患者中，1例发生YRRM1基因微缺失，发生率为3．7％；2例发生DAZ基因微缺失，发生率为7．4％。92例患者中均未发现DYS1基因微缺失。结论：YRRM1和DAZ基因位点的微缺失与特发性无精子症和严重少精子症有一定的相关性，DYS1基因缺失与男性生精障碍的相关性仍需进一步研究明确。应用荧光定量PCR法检测Y染色体微缺失具有灵敏、快速、操作简便的特点。     

无精子症和严重少精子症DYS240基因位点的分析

无精子因子的缺乏将导致无精子症和严重少精子症。本研究应用ＰＣＲ方法分析了６５例核型正常的无精子症和２５例核型正常的严重少精子症病人的ＤＹＳ２４０基因位点，结果显示，无精子症病人中６例缺乏ＤＹＳ２４０基因位点，严重少精子症病人中４例缺乏ＤＹＳ２４０基因位点，提示ＤＹＳ２４０基因是ＡＺＦ的一个重要的候选成分。     

核基质结合蛋白1在胰腺导管腺癌中的表达及意义

目的 探讨胰腺导管腺癌(PDAC)中核基质结合蛋白1(SATB1)的mRNA和蛋白表达水平及其与临床病理特征的关系,评价SATB1在PDAC预后判断中的价值.方法 应用免疫组织化学法检测49例PDAC组织及配对的癌旁组织石蜡标本SATB1蛋白表达水平,利用Western blot 和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测16对配对冷冻保存的新鲜PDAC组织、癌旁组织中SATB1蛋白和mRNA表达水平.结果 免疫组织化学结果显示,SATB1在13例PDAC中呈高表达,癌旁组织有5例高表达(26.5％比10.2％).SATB1的表达与PDAC分化程度(x2=4.131,P＜0.05)、淋巴结转移(x2 =5.000,P＜0.05)、T分期(x2=14.348,P＜0.05)和TNM分期(x2=6.69,P＜0.05)相关.阳性表达SATB1的PDAC患者术后中位生存时间为353 d,阴性表达SATB1者为508 d.RT-PCR和Western blot结果显示SATB1在PDAC患者中mRNA表达高于癌旁组织(t=2.432,P＜0.05),蛋白表达水平差异无统计学意义(t=0.324,P＞0.05).结论 SATB1在PDAC中表达呈上调状态,与PDAC临床病理因素及预后相关.     

特异性核基质结合区结合蛋白1、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因在前列腺癌中的表达及临床意义

目的探讨前列腺癌(PCa)中特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的蛋白表达水平及临床意义。方法收集徐州医科大学附属医院泌尿科2022年3月至8月间诊治的79例PCa患者的相关资料, 采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)染色法检测79例PCa中SATB1、PTEN蛋白表达水平, 并分析其相关性。结果 79例PCa患者年龄≤65岁者13例, >65岁者66例, 中位年龄77岁。术前前列腺特异抗原(PSA)值0～10 ng/ml者13例, 10～20 ng/ml者12例, >20 ng/ml者51例, 另有3例PSA值不详。病理Gleason评分<7分者6例, 评分=7分者11例, 评分>7分者62例。免疫组织化学染色SATB1高表达者占57%, 低表达者占43%;PTEN蛋白阳性者占73%, 阴性者占27%。SATB1缺失与PTEN缺失、年龄呈正相关(r=-0.292、-0.235, P<0.05), 与术前PSA值、Gleason评分无明显相关。结论分析PCa中SATB1、...     

gr/gr和b2/b3缺失中不同DAZ拷贝缺失与精子发生障碍的相关性研究

目的:研究AZFc区gr/gr和b2/b3缺失中DAZ基因拷贝缺失对中国男性精子发生障碍的影响。方法:试验组纳入121例不同程度生精障碍的不育男性,对照组选择了95例健康男性且均符合《WHO人类精液检查与处理实验室手册》第5版标准,通过常规PCR和PCR-RFLP以及Y染色体特异性序列标签位点(STS),分析AZFc区不同类型gr/gr和b2/b3缺失中DAZ基因拷贝缺失与男性精子发生障碍的关系。结果:对照组中共观察到13例(13.68%)gr/gr缺失和1例(1.05%)b2/b3缺失,试验组中发现15例(12.40%)gr/gr缺失及6例(4.96%)b2/b3缺失。DAZ特异性单核苷酸变异位点(SNV)分析显示对照组中有3例(3.16%)gr/gr-DAZ1/DAZ2缺失和10例(10.53%)gr/gr-DAZ3/DAZ4缺失以及1例(1.05%)b2/b3-DAZ3/DAZ4缺失,试验组中有11例(9.09%)gr/gr-DAZ1/DAZ2缺失和4例(3.31%)gr/gr-DAZ3/DAZ4缺失以及6例(4.96%)b2/b3-DAZ1/DAZ2缺失。结论:中国男性Y染色体AZFc部分缺失(gr/gr、b2/b3缺失)在正常生精者和不同程度的生精障碍患者中均存在,且差异无统计学意义,不能作为精子发生障碍的危险因素。但gr/gr和b2/b3缺失中不同类型的DAZ拷贝子缺失对男性精子发生的影响不同,DAZ1/DAZ2缺失与男性生精功能障碍相关,可能是导致男性不育的危险因素,而DAZ3/DAZ4缺失似乎对生精的影响很小或不起作用。     

精子发生障碍患者Y染色体AZF区微缺失的筛查及意义

目的　探讨精子发生障碍患者Y染色体AZF区微缺失情况及意义。　方法　选取 6个Y染色体特异性序列标签位点 (STS) ,用PCR技术检测 2 7例精子发生障碍患者AZF区微缺失情况。　结果　 2 7例中AZF区微缺失 2例 ,表现为无精症。缺失均在AZFc区 ,1例为DAZ(sY2 5 4、sY2 5 5 )缺失 ,另 1例为DAZ加sY15 7缺失。　结论　与其他人种一样 ,Y染色体AZF区微缺失也可能是中国人精子发生障碍的原因之一 ,因而精子发生障碍患者在行辅助生育技术前进行AZF区微缺失的筛查是必要的。     

沉默长链非编码RNA特异性核基质结合区结合蛋白1-AS1对前列腺癌细胞增殖和迁移侵袭能力的影响

目的观察沉默长链非编码RNA(lncRNA)特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)-AS1对前列腺癌细胞增殖和迁移侵袭能力的影响, 探究其机制。方法采用小干扰RNA(siRNA)沉默前列腺癌细胞株(22RV1、LNCAP)内SATB1-AS1表达。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞的体外增殖能力;平板克隆实验检测单细胞克隆形成能力;TransWell实验检测细胞体外迁移侵袭能力;通过蛋白质印迹法(Western blot), 检测细胞经不同处理后上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白表达情况。两组间比较采用独立样本t检验, 多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)检验。结果成功沉默22RV1与LNCAP细胞内SATB1-AS1的表达。CCK-8结果显示, 敲低组细胞增殖能力低于相应对照组(0.875±0.021、1.288±0.009和1.237±0.036、1.496±0.041, F=18.657, P<0.05)。平板克隆结果显示, 敲低组细胞的单个细胞克隆形成能力低于相应对照组细胞(45.00±5.21、50.00±3.67和87.00±5.78、108.00...     

男性FASL-844基因多态性与特发性无精子症及严重少精子症发病风险的研究

目的:研究FASL-844位点基因多态性在中国南方汉族男性人群中的分布,探讨其与特发性无精子症及严重少精子症发病风险的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,分析184例特发性无精子症及严重少精子症患者与236例正常生育男性FASL-844位点的基因型及等位基因频率,分析该基因多态性与特发性无精子症及严重少精子症之间的关系。结果:不育组与正常生育组FASL-844CT和TT基因型分布差异有显著性(P=0.024;P=0.008)。携带FASL-844TT基因型个体罹患特发性无精子症或严重少精子症的风险是CC基因型个体的2.76倍(95%CI:1.20~6.35);将携带CC和CT基因型的个体合并,携带TT基因型的个体罹患特发性无精子症或严重少精子症的风险是(CC+CT)基因型个体的2.90倍(95%CI:1.28~6.58)。结论:FASL-844基因多态性可能是中国南方汉族男性特发性无精子症及严重少精子症的遗传易感因素之一。     

The study of inhibiting systematic inflammatory response syndrome by applying xenogenic (porcine) acellular dermal matrix on second-degree burns

OBJECTIVE: To investigate the influence of xenogenic (porcine) acellular dermal matrix on the systematic inflammatory reaction syndrome (SIRS), and the reaction of burn patients to tissue damage upon application to second-degree burn wounds. METHOD: Seventy-two cases of patients with acute second-degree burns were enrolled in the study. According to the total burn surface area (TBSA) and the treatment methods, we randomly divided the patients into four groups. Group A (treatment group): patients with less than 30% TBSA covered with xenogenic acellular dermal matrix. Group B (control group): patients with less than 30% TBSA covered with betadine ointment gauzes. Group C (treatment group): patients with more than 30% TBSA covered with porcine acellular dermal matrix. Group D (control group): patients with more than 30% TBSA covered with betadine ointment gauzes. Serum level of C-reactive protein (CRP) was measured by single radial immunodiffusion method on 1, 4, 7 and 14 days postburn. RESULTS: The serum level of CRP in group A was significantly less than that of in group B (P<0.05) on days 4, 7 and 14. The serum level of CRP in group C increased slowly, descended quickly and was significantly less than that of in group D on days 4, 7 and 14. CONCLUSION: The application of xenogenic (porcine) acellular dermal matrix on second-degree burn wound can decrease serum level of CRP of the patients, which may play an important role in reducing SIRS and sepsis incidence.     

釉基质蛋白对人角质形成细胞粘附、增殖及迁移影响的体外研究

目的：观察釉基质蛋白对体外培养的人角质形成细胞粘附、增殖及迁移等生物功能的影响。方法：消化法培养人正常角质形成细胞，采用MTT比色法及体外划痕法，观察人正常角质形成细胞在不同浓度釉基质蛋白（50、100、150及200μg／ml等浓度的 EbtPs）包被的培养孔表面粘附、增殖及迁移情况，试验各组依次命名为EP1、EP2、EP3、EP4组。结果：①细胞粘附性实验中，EP2、EP3及EP4组在接种细胞4．5h后结果均高于空白对照组（P〈0．05）；②细胞增殖实验中，在各时间点各组之间无统计学差异（P〉00．05）；③细胞迁移实验中，各实验组和空白对照组间并无统计学差异（P〉0．05）。结论：EbtP对人正常角质形成细胞粘附有促进作用，而对其增殖和迁移则没有影响。     

异种脱细胞真皮基质的制作和临床应用观察

目的　降低异种 (猪 )真皮组织的抗原性 ,探讨在临床复合移植的可行性。　方法　健康小猪中厚皮 ,半数经戊二醛交联后采用胰蛋白酶和TritonX 10 0等脱细胞处理 ,制成未交联(sADM0 )和交联型 (sADM1)网状脱细胞真皮基质 ,通过动物实验和临床应用 ,观察 2种sADM组织学变化和移植效果。　结果　 (1)兔皮下埋植sADM0 宿主细胞侵入迅速 ,炎症反应和组织降解明显 ,而sADM1炎症反应轻 ,皮片降解和收缩不明显 ;(2 ) 10例烧伤患者Ⅲ度创面和 1例胸部瘢痕切除后 ,以自体薄中厚皮 (ATS)和自体刃厚皮或超薄皮 (UTS)为对照 ,进行sADM UTS复合移植 ,19块复合皮平均成活率为 78.9% ,与ATS组无显著差异。其中sADM0 UTS组早期炎症反应和创面收缩明显 ,外观效果与UTS组相当 ;在sADM1 UTS组 ,早期炎症反应和创面收缩较轻 ,外观平整 ,触软 ,与ATS组移植效果相当 ,但有 3例患者的 6块创面在术后平均 (12 .8± 6 .9)周时 ,出现表皮破溃、sADM1外露和组织学严重的异物巨噬细胞反应。　结论　临床用交联型sADM作复合皮的真皮替代物 ,能减缓早期免疫反应 ,提高UTS移植效果 ,但仍不可避免迟发性异种排异反应。     

Myeloid-derived suppressor cell (MDSC) key genes analysis in rat anti-CD28-induced immune tolerance kidney transplantation

BackgroundIn the field of transplantation, inducing immune tolerance in recipients is of great importance. Blocking co-stimulatory molecule using anti-CD28 antibody could induce tolerance in a rat kidney transplantation model. Myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) reveals strong immune suppressive abilities in kidney transplantation. Here we analyzed key genes of MDSCs leading to transplant tolerance in this model.MethodsMicroarray data of rat gene expression profiles under accession number {"type":"entrez-geo","attrs":{"text":"GSE28545","term_id":"28545"}}GSE28545 in the Gene Expression Omnibus (GEO) database were analyzed. Running the LIMMA package in R language, the differentially expressed genes (DEGs) were found. Enrichment analysis of the DEGs was conducted in the Database for Annotation, Visualization and Integrated Discovery (DAVID) database to explore gene ontology (GO) annotation and their Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) pathways. Their protein-protein interactions (PPIs) were provided by STRING database and was visualized in Cytoscape. Hub genes were carried out by CytoHubba.ResultsThree hundred and thirty-eight DEGs were exported, including 27 upregulated and 311 downregulated genes. The functions and KEGG pathways of the DEGs were assessed and the PPI network was constructed based on the string interactions of the DEGs. The network was visualized in Cytoscape; the entire PPI network consisted of 192 nodes and 469 edges. Zap70, Cdc42, Stat1, Stat4, Ccl5 and Cxcr3 were among the hub genes.ConclusionsThese key genes, corresponding proteins and their functions may provide valuable background for both basic and clinical research and could be the direction of future studies in immune tolerance, especially those examining immunocyte-induced tolerance.     

Changes of serum advanced glycation end products (AGEs), matrix metalloprotein-2 (MMP-2), and urinary microalbuminuria (mALB) in diabetic nephropathy and their predictive value for heart failure

BackgroundDiabetic nephropathy is a common complication in diabetic patients, with a high rate of disability and mortality. This study aims to explore the changes in serum advanced glycation end products (AGEs), matrix metalloprotein-2 (MMP-2), and urinary microalbuminuria (mALB) in diabetic nephropathy and their predictive value for heart failure.MethodsThe 134 patients with diabetic nephropathy treated in our hospital from January 2014 to December 2017 were enrolled and divided into two groups resulting in 64 cases in an observation group with heart failure, and 70 cases without heart failure in a control group. In addition, 80 patients with simple diabetes who were treated during the same period were selected as the simple diabetes group. Levels of AGEs, MMP-2, and mALB between the groups were compared, risk factors affecting diabetic nephropathy patients with heart failure were analyzed, and an ROC curve was drawn to evaluate the predictive value of AGEs, MMP-2, and mALB for heart failureResultsThe levels of AGEs and mALB in the diabetic nephropathy group were significantly higher than those in the simple diabetes group, and the levels of MMP-2 were significantly lower than those in the simple diabetes group (P<0.05). The levels of AGEs and mALB in the observation group were significantly higher than those in the control group, and the levels of MMP-2 were significantly lower than that in the control group (P<0.05). Smoking history hypertension history, blood creatinine (abnormal increase), blood uric acid (abnormal increase), AGEs (abnormal increase), MMP-2 (abnormal decrease), and mALB (abnormal increase) were independent risk factors affecting diabetic nephropathy patients with heart failure. The area under the ROC curve of AGEs, MMP-2, mALB, and their combined detection were: 0.821, 0.909, 0.897, and 0.991, respectively, showing the area under the curve of combined detection to be the largest.ConclusionsAGEs, MMP-2, and mALB have high predictive value for heart failure in patients with diabetic nephropathy. Their sensitivity and specificity are high, indicating they may hold considerable clinical value.     

前交叉韧带重建术中胫骨侧止点无撞击区的定位研究

目的探讨前交叉韧带(ACL)重建术中胫骨隧道无撞击重建区的定位。方法选用10具正常新鲜冷冻尸体膝关节标本,膝关节完全伸直时,标记髁间窝顶延长线和ACL胫骨附着处的交点。膝关节屈曲90°时,测量ACL胫骨附着处上标记点与ACL前缘间的距离及标记点与胫骨棘间区后缘间的距离。然后,再测量标记点前部分的前后径、后部分的前后径和内外径,并计算后部分的面积。结果由ACL胫骨附着处前缘到胫骨棘间区后缘的前后径平均为(21.40±1.17)mm。ACL胫骨附着处标记点前部分的前后径平均为(8.90±0.74)mm(占总前后径的41.59%)。胫骨附着处标记点后部分的前后径平均为(12.50±0.85)mm(占总前后径的58.41%),内外径平均为(10.65±0.97)mm,面积平均为(133.80±21.01)mm2。结论ACL胫骨附着处上标记点的后部分是胫骨隧道无撞击区,位于胫骨棘间区的后缘中点与该点前12.50mm之间,在该区域行ACL重建可以避免移植物与髁间窝顶部的撞击。绝对撞击区位于ACL胫骨附着部前缘与其后8.90mm之间,应尽量避免在此区域内定位胫骨隧道。     

从皮肤的细胞外基质(NECM)中制取可注射胶原

常规制取注射性胶原的方法是用酶降解法，经反复酸提、盐析、离心、交联等步骤，进行纯化，该法将胶原降解，酸提取分子片断，用交联剂组成可注射胶原。本法是从ＮＥＣＭ开始制取，ＮＥＣＭ已为胶原框架，因此步骤简化很多，仅需解裂胶原网状结构，酶解末端蛋白以消除特异性，最后降解成３００ｎｍ左右胶原。本法不用交联剂和稳定剂。生物原材料来源广泛，有利临床推广应用。经半年动物实验证明，本法制取的可注射胶原无排斥反应和炎性反应，也无包裹现象，半年时仍残留有部分胶原     

血管细胞外基质和尿道细胞外基质修复兔尿道缺损的比较研究

目的　寻求较理想的尿道修复材料。　方法　切取 10只家兔的腹主动脉和尿道各 3cm ,制备成血管细胞外基质 (VECM)和尿道细胞外基质 (UECM)。另 2 0只分别切除尿道 2 .5cm并随机分为VECM修复组和UECM修复组。两组均于修复术后 10d、3周、6周及 2 4周行组织再生情况研究 ;另于术后 10周、2 4周各取 2只行膀胱尿道造影 ;2 4周两组各取 2只行尿动力学检测和尿道镜检查。　结果　制备的VECM和UECM均为白色透明状 ,但VECM较UECM弹性和机械强度好。缺损修复术后10d ,基质中见单层上皮细胞且有血管长入ECM ,基质和受体尿道连接处有炎性细胞浸润 ;3周时基质管腔已完全被上皮细胞覆盖 ;6周时可见平滑肌细胞再生 ,炎性细胞消失 ;2 4周后其组织结构与正常尿道组织结构一致。VECM修复组和UECM修复组相比其组织再生过程无差异。尿动力学检测VECM修复组和UECM修复组的膀胱容量分别为 (30 .2± 1.6 )ml和 (32 .1± 1.4 )ml、尿道最高压分别为(15 .2 7± 1.36 )mmHg和 (14 .6 8± 1.6 5 )mmHg、尿道最低压分别为 (12 .4 9± 1.2 3)mmHg和 (11.96±0 .98)mmHg ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。膀胱尿道造影可见尿道壁完整光滑通畅 ,不能分辨移植区与正常组织 ,无尿液外渗 ,无梗阻及结石形成 ;尿道镜检查证实VECM修复组和U