免疫亲和-荧光光度法快速测定乳脂及其制品中的黄曲霉毒素M1

本文研究应用荧光光度法测定高乳脂乳和乳制品中的黄曲霉毒素M1,方法 检测限为0．1μg／kg,相对标准偏差低于5％,回收率88％～93％。方法 简便快速、灵敏准确,能够满足进出口乳及乳制品中黄曲霉毒素M1的测定。     

抗黄曲霉毒素M1抗体制备及检测方法建立

目的制备针对黄曲霉毒素M1的单克隆抗体并建立针对黄曲霉毒素M1的间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。方法利用B细胞杂交瘤技术。建立能分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，制备抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体，建立间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。结果研制出1株能特异性分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为2F2。该单克隆抗体的Ig亚类为IgG1，亲和常数为2．8×10^-11mol／L。该抗体与黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2和黄曲霉毒素M2等结构类似物有微弱的交叉反应，具有较高的特异性。在此基础上建立了间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。该方法的最低检出浓度为0．07ng／ml。校正曲线的线性范围为0．02～2ng／ml，线性方程y=-0．4364x＋0．2693（R^2=0．9949）。方法的加标回收率为72．5％～131．3％。结论制备了具有高特异性和亲和力的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体，并建立了快速、灵敏的针对黄曲霉毒素M1的酶联免疫吸附试验检测方法。     

免疫荧光层析试纸条法检测食用油中的黄曲霉毒素B_1

目的建立快速检测食用油中黄曲霉毒素B1的免疫荧光层析试纸条法,用于鉴别正规的食用油和地沟油。方法应用自行研制的免疫荧光层析试纸条,对20份检验合格的食用油样本和10份地沟油样本进行免疫荧光试纸条法检测,同时采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法作比较;采用含黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素M1、黄曲霉毒素M2、黄曲霉毒醇、黄曲霉毒素Q1的模拟样本进行特异性检测。结果本免疫荧光层析试纸条法的检测下限为5μg/L;20份检验合格的食用油样本均未检出黄曲霉毒素B1,10份地沟油中有8份检出含有黄曲霉毒素B1,荧光免疫层析试纸条法和LC-MS/MS法具有高度的相关性,r0.950 0;对于其他的黄曲霉毒素具有高度特异性。结论用免疫荧光层析试纸条法检测地沟油中黄曲霉毒素B1是可行的。     

黄曲霉毒素B1的检测方法

黄曲霉毒素具有毒性大,致癌力强,样品中含量低等特点,而黄曲霉毒素B1是全部黄曲霉毒素中毒性最强的,这要求检测方法灵敏度高,特异性强,集分离与检测为一体。目前黄曲霉毒素B1测定的方法有薄层层析法、高效液相色谱法、酶联免疫吸附法等。所有这些方法主要是根据黄曲霉毒素B1的化学结构和生物特性结合仪器来对黄曲霉毒素B1进行定性、定量的分析,使之更加完善。笔者就目前使用较多,受人们关注的几个代表性方法作如下讨论。     

采用噬菌体展示技术筛选黄曲霉毒素B_1模拟抗原表位

目的从随机肽库中筛选黄曲霉毒素B1模拟抗原表位,以建立无需黄曲霉毒素B1偶联抗原的免疫学检测方法。方法利用噬菌体展示技术,以抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体为靶分子,从随机七肽库中进行生物亲和淘选,ELISA鉴定阳性克隆,通过DNA测序对每个阳性克隆进行定性分析。结果通过4轮结合/扩增循环,获得了能与抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体结合的肽,采用间接竞争ELISA,筛选到了4株能抑制黄曲霉毒素B1的阳性克隆子,经DNA测序得到HXXDPXH共有序列,其中X为任意氨基酸。以其中P10噬菌体阳性克隆建立竞争ELISA方法,线性范围为500~2000pg/ml,检测下限为50pg/ml。结论利用噬菌体展示技术筛选到了黄曲霉毒素B1模拟抗原表位,并以其代替黄曲霉毒素B1偶联抗原建立了免疫学检测方法。     

柱前衍生-高效液相色谱荧光法测定粮谷类食物中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2

目的分析粮谷类食物中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量,为建立食品中黄曲霉毒素的限量标准提供依据。方法建立免疫亲和层析柱净化、柱前衍生、高效液相色谱荧光检测器测定的方法,并分析食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量。结果在0.15 ng/ml~50 ng/ml时,所得回归方程的相关系数均0.99。黄曲霉毒素B1、G1方法检出限为0.10 ng/g,黄曲霉毒素B2、G2方法检出限为0.03 ng/g。该方法的精密度为0.13%~9.5%,加标回收率为70%~106%。花生酱、米粉样品中检出黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,大米、玉米渣未检出黄曲霉毒素。结论该方法灵敏度和准确度较高,适用于粮谷类食品中黄曲霉毒素的检测。本研究中有样品检出黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,但其含量均没有超过国家限量标准。     

光化学衍生-高效液相色谱法检测食品中的黄曲霉毒素

目的 建立食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的光化学衍生高效液相色谱荧光检测方法。 方法 用乙腈-水提取样品中的黄曲霉毒素,经多功能柱净化,以38/62的甲醇-水为流动相等度洗脱,高效液相色谱分离,光化学衍生器衍生,荧光检测器检测。 结果 4种黄曲霉毒素在24 min内得到良好的基线分离,黄曲霉毒素B1、G1的检出限为0.2 μg/kg,黄曲霉毒素B2、G2的检出限为0.1 μg/kg。在1.0～5.0 μg/kg添加范围内,加标回收率为84.0%～94.6%,相对标准偏差为3.4%～6.5%。 结论 该方法灵敏度高,操作简便,准确可靠,重现性好,适于对食品中黄曲霉毒素的日常检测。     

高效液相柱后衍生法测定食品中的黄曲霉毒素B1

目的：研究用高效液相色谱及柱后衍生法测定黄曲霉毒素B1。方法：样品经甲醇＋水（55＋45）提取，提取液经过滤、浓缩后，用高效液相色谱及柱后衍生法测定黄曲霉毒素B1。结果：黄曲霉毒素B1的最低检出量0．01ng，检出限0.12μg／kg，加标回收率在80．8％-97．1％，RSD在2．86％-4．89％之间。结论：方法简单、快速、准确，检出限低，回收率高。     

新一代黄曲霉毒素B1定性（半定量）检测盒的研制报告

新开发研制的黄曲霉毒素B1(AFB1)定性(半定量)检测盒(AB1-ELISA-l)能够准确、便捷检测食品中黄曲霉毒素B1，其敏感性、特异性和可重复性均十分理想，适合各级食品检验人员掌握和使用，是当前检测食品中黄曲霉毒素B1的较为理想的试剂盒。     

南平市售花生酱黄曲霉毒素B_1含量检测

目的了解南平市市售花生酱中黄曲霉毒素B1污染水平,对其潜在危害进行分析。方法采集南平市市内各小吃店使用的花生酱,用高效液相色谱测定黄曲霉毒素B1含量。检测结果以大于方法的检出限为阳性(黄曲霉毒素B1检出限0.5μg/kg),超标判断依据GB/T 2761-2011规定。结果在测定的40份花生酱样品中,黄曲霉毒素B1阳性率为65%,超标率为25%。结论南平市市售花生酱中黄曲霉毒素B1污染普遍,须加大监测力度。