荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病的染色体畸变

目的 检测费城染色体（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ，Ｐｈ染色体）阴性，变异型Ｐｈ染色体及伴有其它染色体异常的慢性粒细胞白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＣＭＬ）的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因。方法 双色荧光原位杂交技术，检测伴有８种不同的骨髓细胞染色体畸变ＣＭＬ患者的ｂｃｌ／ａｂｌ融合基因。结果 ３例变异型Ｐｈ和７例有标准型Ｐｈ的ＣＭＬ患者均为ｂｃｒ／ａｂｌ融合     

重组PCR构建bcr—abl mRNA竞争RT—PCR内标物

目的竞争ＰＣＲ可用于ｍＲＮＡ的定量测定，为了得到白血病中ｂｃｒ－ａｂｌｍＲＮＡ定量ＰＣＲ的竞争内标物。方法利用重组ＰＣＲ技术，实施对ｂ３ａ２型ｂｃｒ－ａｂｌｃＤＮＡ中一２７６ｂｐ片段的缺失法定点突变。结果经ＤＮＡ序列分析证实，重组后的ｃＤＮＡ片段与重组前相比，５′和３′端大部分序列相同，仅中间５５ｂｐ的部分序列缺失，同时引入１９ｂｐ外源ＤＮＡ片段，即净缺失３６ｂｐ，得到２４０ｂｐ的重组ＰＣＲ产物。较ｂ２ａ２型ｂｃｒ－ａｂｌｃＤＮＡ相应的２０１ｂｐ扩增片段长３９ｂｐ，使之适于作为ｂ３ａ２和ｂ２ａ２型两类ｂｃｒ－ａｂｌｍＲＮＡ定量ＰＣＲ的通用内标物。结论表明重组ＰＣＲ是一种获得靶基因的竞争性内标物的简便而可靠的方法     

bcr/abl及c-myb原癌基因反义寡核苷酸对K562细胞的作用研究

目的 为反义基因治疗慢粒白血病（ＣＭＬ）奠定实验基础,并进一步提示ＣＭＬ的发病机制。方法 设计并合成针对ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因和ｃ－ｍｙｂ原癌基因的反义寡脱氧核苷酸（ａｓＯＤＮ）及其硫代衍生物,观察其对Ｋ５６２细胞的生长、ＤＮＡ合成及ｂｃｒ／ａｂｌ基因转录、表达以及细胞凋亡的影响。结果 针对ｂｃｒ／ａｂｌ基因及ｃ－ｍｙｂ癌基因的ａｃＯＤＮ可显著抑制Ｋ５６２细胞的生长、ＤＮＡ合成及ｂｃｒ／ａｂｌ基因     

双色荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病的bcr/abl融合基因

自１９８４年发现了慢性粒细胞白血病（ｃｈｒｏｎｉｃｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａ,ＣＭＬ）具有ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因［１,２］,检测ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因就成为诊断ＣＭＬ的关键。Ｔｋａｃｈｕｋ等［３］使用间接标记的荧光原位杂交（ｆｌｕｏ－ｒｅｓｃｅｎ...     

慢性粒细胞白血病特异性单、双及三单位核酶载体的构建

本文拟针对在慢性粒细胞白血病发病中起关键作用的ｂｃｒａｂｌ 融合基因, 构建特异性的系列核酶载体。为此,我们针对ｂｃｒａｂｌ 融合位点设计、合成了３ 个相邻的锤头状核酶。通过基因重组将３ 个单核酶按顺序定向克隆入改建的ｐＧＥＭ３ｚｆ 载体中,构建了ｂｃｒａｂｌ 单核酶、双核酶及三核酶体外转录载体, 并在此基础上将三单位核酶克隆入ｐ ＤｏＲｎｅｏ 载体中构建三核酶逆转录病毒载体。此外, 通过ＰＣＲ 方法, 扩增了ｂｃｒａｂｌ 融合位点附近约３７６ｂｐ 的序列,成功地构建了ｂｃｒａｂｌ 融合基因体外转录载体。本文构建的ｂｃｒａｂｌ 特异性系列载体,为今后遴选特异、高效的核酶打下了基础,并为将核酶用于自体骨髓移植的体外骨髓净化创造了条件。     

慢性粒细胞白血病的分子生物学特征与临床研究进展

Ｐｈ染色体是慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的细胞遗传学标记，而ｂｃｒ／ａｂｌ基因重排则为ＣＭＬ的分子基础。ＢＣＲ、ｃ－ａｂｌ基因重排及ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的结构，转录和表达是ＣＭＬ寻病的关键环节。随着分子生物学技术的迅速发展，对ｂｃｒ／ａｂｌ重组基因的研究日益深入有可能最终阐明ＣＭＬ的发病机制，并在临床上对ＣＭＬ诊断、分型、鉴别、预后判断及治疗等均有极其重要的指导意义。目前已在尝试利用分子生物学技术     

Bcr/abl嵌合基因表达与慢粒白血病细胞积累

目的和方法 :ｂｃｒ/ａｂｌ嵌合基因是定位于人 9号染色体 9ｑ34上的ｃ -ａｂｌ基因和 2 2号染色体 2 2ｑ1 1上的ｂｃｒ基因因ｔ( 9:2 2 )易位 ,使相应断裂的基因发生融合所形成。它是ｐｈ染色体的分子基础 ,在慢粒白血病 (ＣＭＬ)发病中起重要作用。Ｂｃｒ/ａｂｌ嵌合基因编码具酪氨酸激酶活性的蛋白 (Ｐ2 1 0 )。这种蛋白与细胞信号传导蛋白相互作用 ,扰乱细胞信息传递过程 ,使ＣＭＬ细胞增殖和分化失控。为了探讨ｂｃｒ/ａｂｌ嵌合基因表达致慢粒白血病细胞积累的发病机制 ,设计并合成针对ｂｃｒ/ａｂｌ嵌合基因的反义寡脱氧核苷酸 (ａ …     

慢性粒细胞白血病的分子生物学特征与临床研究进展

Ｐｈ染色体是慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的细胞遗传学标记，而ｂｃｒ／ａｂｌ基因重排则为ＣＭＬ的分子基础。ＢＣＲ、ｃ－ａｂｌ基因重排及ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的结构，转录和表达是ＣＭＬ发病的关键环节．随着分子生物学技术的迅猛发展，对ｂｃｒ／ａｂｌ重组基因的研究日益深入有可能最终阐明ＣＭＬ的发病机制，并在临床上对ＣＭＬ诊断、分型、鉴别、预后判断及治疗等均有极其重要的指导意义．目前已在尝试利用分子生物学技术在基因水平根治ＣＭＬ，这项技术为治疗ＣＭＬ开辟了一条新途径。     

bcr-ahl融合基因反义寡核苷酸对K562细胞生长的影响

目的：研究 ｂｃｒ－ａｂｌ融合基因硫代磷酸反义寡核苷酸（Ａｓｐｏ）对 Ｋ５６２细胞生长特性的影响,探讨其在慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）基因治疗中的意义。方法：倒置显微镜下细胞活体观察;Ａｓｐｏ与细胞共同培养２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ及 １２０ｈ,用０．４％台盼蓝染色计各处理组死活细胞数,甲基纤维素半固体培养法观察其克隆形成率的变化,流式细胞仪测定各处理组细胞Ｐ２１０蛋白表达变化。结果：Ａｓｐｏ处理后细胞仍呈克隆状生长,当 Ａｓｐｏ浓度达５μｍｏｌ／Ｌ时,即可产生增殖抑制作用,呈一定的量效关系,其最大抑制效应时间为作用１２０ｈ,当Ａｓｐｏ达１０μｍｏｌ／Ｌ时,在一定细胞浓度范围内（１×１０４／ｍＬ－ ５× １０５／ｍＬ）,均有显著抑制作用,当Ａｓｐｏ浓度达５μｍｏｌ／Ｌ以上时,Ｋ５６２细胞 Ｐ２１０蛋白表达明显下降甚至不表达。 ｂ２ａ２型 Ａｓｐｏ对表达 ｂ３ａ２型 ｍＲＮＡ的 Ｋ５６２细胞也表现出交叉抑制作用。结论：ｂｃｒ－ａｂｌ融合基因反义寡核苷酸对Ｋ５６２细胞具有特异性增殖抑制作用,在慢性粒细胞白血病基因治疗中值得深人研究。     

肝癌bcl—2／JH融合基因及bcl—2蛋白的表达

目的：探讨ｂｃｌ－２基因与肝癌发生的关系。方法：采用半套式原位聚合酶链反应和免疫组化技术原位检测５４例肝癌中ｂｃｌ－２／ＪＨ融合基因和ｂｃｌ－２蛋白表达。结果：４０例肝细胞癌中６例ｂｃｌ－２蛋白阳性，阳性率为１５％，发生ｂｃｌ－２基因重排１０例，阳性率为２５％，ｍｂｒ和ｍｃｒ阳性各５例；１４例肝胆管癌中ｂｃｌ－２蛋白阳性１０例，阳性率７１．４％，未发现ｂｃｌ－２／ＪＨ融合基因。结论：ｂｃｌ－２／Ｊ     

慢性粒细胞性白血病急变的相关分子研究进展

慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ）是由ｔ（９，２２）（ｑ３４，ｑ１１）易位引起的一种血液系统恶性疾病。该易位重排形成的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因及其所编码的Ｐ２１０蛋白在ＣＭＬ发生中的作用已被确认。近年研究表明ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因、抑瘤基因（如ｐ５３，Ｒｂ，ｐ１６等）及其它分子（如ＥＶＩ１，ｃｍｙｃ等）均与ＣＭＬ急变有关。分析这些相关分子对ＣＭＬ急变的直接或间接影响，对ＣＭＬ的分子病理学及其治疗研究均具指导意义。     

慢性髓系白血病bcr—abl融合基因的克隆及其在COS …

目的 克隆慢性髓系白血病（ＣＭＬ）融合基因ｂｃｒ－ａｂｌ的ｃＤＮＡ序列,并在真核细胞中表达。方法 以设计的两条引物扩增ｂｃｒ－ａｂｌ融合位点两侧的ｃＤＮＡ,测序后克隆至真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１,转染ＣＯＳ－７细胞。取常规培养的细胞进行ＲＴ－ＰＣＲ鉴定。结果 ①ＰＣＲ扩增出４９０ｂｐ大小的ｃＤＮＡ,其序列测定除第４５２位的碱基Ｃ突变为Ｔ外,其余序列均正确。②ＲＴ－ＰＣＲ法检测到转染细胞系中,有ｂ     

α—2b干扰素联合低剂量阿糖胞苷治疗慢性粒细胞白血病

α－２ｂ干扰素（ＩＦＮα－２ｂ）与低剂量阿糖胞苷（ＬＤ Ａｒａ－Ｃ）联合应用具有相加作用,可以减少或消除Ｐｈ染色体阳性细胞和ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因,显提高慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患的血液学和细胞遗传学缓解率,延长ＣＭＬ患的生存期,被认为是目前治疗ＣＭＬ最有前途的方案之一。     

线探针核酸杂交分析贵州地区HCV感染株基因型

目的　分析贵州地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染株的基因型。方法　用第二代线探针核酸杂交方法,对９８ 例ＨＣＶ感染者血清进行基因分型。结果　１２ 例献血员血清,均为ＨＣＶ１ｂ 型;１５ 例血液病患者中,１４ 例（９３－３％ ）为ＨＣＶ１ｂ ,１ 例（６－７％ ）为ＨＣＶ１ｂ ＋ ２ 型。慢性丙肝患者３７ 例中,ＨＣＶ１ｂ 型３４例（９１－９％ ） ,混合感染基因型３ 例（ＨＣＶ１ａ ＋ １ｂ 、ＨＣＶ１ｂ ＋ ２ 、ＨＣＶ１ａ ．１ｂ ＋ ２ａ２ｃ 各１ 例）。静脉药瘾者３４ 例,其中ＨＣＶ１ｂ 感染１３ 例（３８－２％ ） ,ＨＣＶ６ａ１０ 例（２９－４％ ） ,ＨＣＶ３ｂ４ 例（１１－８％ ） ,ＨＣＶ３ａ１ 例（２－９ ％） ,混合感染６ 例（１７－６ ％） ,大多为ＨＣＶ２ 复合其他基因型。结论　贵州地区ＨＣＶ感染者中,以ＨＣＶ１ｂ 基因型为主,其次为ＨＣＶ６ａ ,尚存在ＨＣＶ３ａ 和ＨＣＶ３ｂ 。其中ＨＣＶ３ａ、３ｂ 、６ａ ,在本地区系首次报告,但主要存在于静脉药瘾者中。虽然有混合感染基因型的存在,但其基因基础需测序分析     

滤泡型淋巴瘤的t（14：18）染色体易位与bcl－2蛋白的表达

利用ＰＣＲ技术和免疫组化方法，对２８例滤泡型淋巴瘤和１８例反应性滤泡增生进行了ｂｃｌ－２／ＩｇＨ融合基因和ｂｃｌ－２蛋白表达的检测。结果发现不仅５７％的滤泡型淋巴瘤中ｔ（１４：１８）易位，而且在３３％的滤泡反应性增生也存在这种易位。二者经Ｘ￣２检验无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。在本实验中仅采用ｍｂｒ引物对的条件下，ｂｃｌ－２蛋白异常表达与ｂｃｌ－２／ＩｇＨ融合基因的形成之间并无相互对应的关系。在肿瘤性滤泡与反应性滤泡中ｂｃｌ－２蛋白表达的不同分布，有助于对两者的鉴别诊断。     

慢性粒细胞白血病急性变p53基因改变的初步探讨

慢性粒细胞白血病急性变ｐ５３基因改变的初步探讨陈敬春，刘树茂，费洪宝，龚维龙Ｐｈ染色体易位所致的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因的形成及活化是慢性粒细胞白血病（简称慢位，ＣＭＬ））发病的关键。ＣＭＬ在临床上要经过慢性期（ＣＰ）、加速期（ＡＰ）及急变期（ＢＣ），...     

凋亡相关基因产物Fas抗原及bcl—2蛋白在甲状腺肿瘤组织中？…

目的：了解Ｆａｓ抗原及ｂｃｌ－２蛋白在甲状腺肿瘤组织中表达的意义。方法：用流式细胞技术对１４例乳头状甲状腺癌,１６例甲状腺瘤及３２例结节性甲腺肿组织中Ｆａｓ抗原和ｂｃｌ－２蛋白的表达进行检测。结果：上述３组织中均测到Ｆａｓ抗原和ｂｃｌ－２蛋白表达没有统计学差异（Ｆ＝２．７８,Ｐ〉０．０５;Ｆ＝２．５６,Ｐ〉０．０５）。乳头状甲状腺癌组织Ｆａｓ抗原表达与ｂｃｌ－２蛋白表达有明显相关性（ｒ＝０．６４６     

凋亡相关基因产物Fas抗原及bcl-2蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达

目的：了解Ｆａｓ 抗原及ｂｃｌ２ 蛋白在甲状腺肿瘤组织中表达的意义。方法：用流式细胞技术对１４ 例乳头状甲状腺癌,１６例甲状腺腺瘤及３２ 例结节性甲状腺肿组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达进行检测。结果：上述３ 组织中均测到Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白。３ 种组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白表达没有统计学差异（Ｆ＝２．７８,Ｐ＞０．０５;Ｆ＝２．５６,Ｐ＞０．０５）。乳头状甲状腺癌组织Ｆａｓ 抗原表达与ｂｃｌ２ 蛋白表达有明显相关性（ｒ＝０．６４６,Ｐ＜０．０５）,其他两种组织中Ｆａｓ 抗原与ｂｃｌ２ 表达均无相关性（ Ｐ＞０－０５）。结论：上述３ 种组织中均有Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达,均参与了甲状腺肿瘤组织中细胞凋亡的调节。细胞凋亡异常与乳头状甲状腺癌的发生有密切关系。     

bcr基因重排与白血病

Ｐｈ染色体为性粒细胞白血病的特异标记染色体，存在于９５％的ＣＭＬ患者中，近年来随着分子生物学的进展。已阐明Ｐｈ染色体所导致的ｂｃｒ／ａｂｌ基因重排是某些白血病发病的关键因素，本文复习了国内外有关文献，对该领域目前研究的进展做一简要综述。     

肾综合征出血热病毒结构蛋白在患者尿中融合细胞上的表达及其意义

为了探讨汉坦病毒（ＨＶ）结构蛋白与患者尿融合细胞的关系，采用抗ＨＶ包膜结构蛋白Ｇ２的单克隆抗体ＭｃＡｂ－ＬＶ４８Ａ，抗ＨＶ血凝素的ＭｃＡｂ－３Ｄ８，抗ＨＶ核衣壳蛋白的ＭｃＡｂ－Ａ３５等，分别对３０例肾综合征出血热患者尿液中的融合细胞进行免疫酶染色。结果ＭｃＡｂ－ＬＶ４８Ａ阳性率为７０％（２１／３０）；ＭｃＡｂ－３Ｄ８阳性率为７３％（２２／３０）；ＭｃＡｂ－Ａ３５阳性率为７％（２／３０）。该结果提示，患者尿液中的融合细胞的形成与ＨＶ膜结构蛋白在泌尿系统上皮细胞上的表达有密切关系。