人整合素αvβ3在CHO细胞表达的研究

目的 使人整合素αvβ3在CHO细胞表面有效表达，为从分子水平了解汉坦病毒(hantavirus，HV)的感染及致病机制。方法 构建含人整合素β3 ORF区基因的真核表达载体pcDNA3．1．β3；将其与含人整合素αv全长cDNA的质粒pcDNA3-αv分别及共转染至CHO细胞中进行表达；采用间接免疫荧光法、流式细胞仪、免疫沉淀及免疫印迹实验对外源基因的表达进行定性、定位及定量检测，并确证表达产物的免疫反应性。结果 人整合素αv、β3基因在共转染组细胞中有高效表达，目的蛋白主要定位于细胞膜上；β3基因在pcDNA3．1-β3单独转染组细胞中的表达明显弱于共转染组；而pcDNA3.1-β3单独转染组则未见有效的表达。结论 人整合素αvβ3在CHO细胞表面的有效表达需要2个亚基共同参与.     

骨桥蛋白及其受体异常表达在子宫内膜异位

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)及其受体整合素αvβ3在子宫内膜异位症发生、发展中的作用.方法 随机选取经手术治疗的89例子宫内膜异位症患者的异位和在位内膜作为实验组,同期非内异症患者子宫内膜作为对照组,SP免疫组化法对上述病例的骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达水平进行检测;并对两者进行相关性分析.结果 子宫内膜异位症患者的异位内膜中骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达高于其在位内膜的表达,子宫内膜异位症患者的在位内膜中骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达高于对照组子宫内膜中的表达;骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3两者在子宫内膜异位症中的表达呈正相关.结论 在子宫内膜异位症中存在着OPN、整合素αvβ3的高表达,两者可能协同在子宫内膜异位症的发生发展中起着重要作用.     

骨桥蛋白及其受体异常表达在子宫内膜异位症中的作用

目的探讨骨桥蛋白(OPN)及其受体整合素αvβ3在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法随机选取经手术治疗的89例子宫内膜异位症患者的异位和在位内膜作为实验组,同期非内异症患者子宫内膜作为对照组,SP免疫组化法对上述病例的骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达水平进行检测;并对两者进行相关性分析。结果子宫内膜异位症患者的异位内膜中骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达高于其在位内膜的表达,子宫内膜异位症患者的在位内膜中骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达高于对照组子宫内膜中的表达;骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3两者在子宫内膜异位症中的表达呈正相关。结论在子宫内膜异位症中存在着OPN、整合素αvβ3的高表达,两者可能协同在子宫内膜异位症的发生发展中起着重要作用。     

侧支血管整合素αvβ3的表达及细胞外基质对其表达的调节

目的:研究侧支血管生成过程中整合素αvβ3的表达及细胞外基质对其表达的调节。方法:结扎大鼠股动脉,应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管整合素αvβ3的表达;并在体外实验中检测不同细胞外基质成分对整合素αVβ3表达的影响。结果:侧支血管整合素αvβ3表达明显增强,为正常血管的3.47倍;种植在纤维连接蛋白(fibronectin,FN)上的血管平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMC)整合素αvβ3的表达最高,层粘连蛋白(laminin,LN)上次之,三维Matrigel基膜成分胶里最低,差异具有显著性(P<0.001)。结论:相对于正常血管,侧支血管生整合素αvβ3的表达显著上调;不同细胞外基质成分对血管平滑肌细胞中整合素αvβ3表达的影响不同。     

周期性压力对兔软骨细胞整合素α3β1的影响

观察周期性压力对兔关节软骨细胞增殖及其分泌整合素α3β1的影响。通过体外分离培养胎兔关节软骨细胞,取第3代细胞接种于6孔板,分别设置无干预对照组（A组）、周期性压力组（B组压力25PSI,频率2Hz）,持续性压力组（C组压力25PSI,持续加压）。压力干预每天2 h,连续干预3 d后,以WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测各组软骨细胞增殖情况（OD值）,并以ELISA法检测各组培养上清中整合素α3β1含量。细胞OD值A组为1.16±0.08,B组为1.52±0.12,C组为1.36±0.13,三组间两两比较OD值差异均有统计学意义（P〈0.05）。A组整合素α3β1水平为3.64±0.15 pg/ml,B组为4.03±0.19 pg/ml,C组为3.77±0.14 pg/ml,三组间两两比较整合素α3β1差异有统计学意义（P〈0.05）。周期性压力刺激兔软骨细胞,能增加软骨细胞的增殖作用和整合素的含量,其作用比持续性压力更强。     

实验性肺纤维化大鼠组织整合素α5β1和转化生长因子—β的表达

目的 研究纤维连接蛋白受体整合蛋白受体整合素α５β１在大鼠肺纤维化中的作用。方法 用免疫组化方法观察实验性大鼠肺纤维化纤维连接蛋白及其受体整合素α５β１和转化生长因子－β表达的动态变化：用Ｎｏｒｔｈｅｍ印迹杂交和免疫细胞化学方法观察ＴＧＦ－β对体外培养的大鼠肺成纤维细胞整合素α５β１ ｍＲＮＡ和 白表达的影响。结果 （１）实验组１￣３天,病灶内上皮细胞和骨皮细胞整合素α５β１表达明显增强,炎细胞及     

α3β1整合素在糖尿病大鼠肾脏的表达及其与足细胞减少的关系

目的动态观察1型糖尿病大鼠肾小球足细胞及粘附分子α3β1整合素表达的时相变化,探讨α3β1整合素与足细胞减少,蛋白尿发生的关系。方法以1型糖尿病大鼠为动物模型,于第2,4,6,8,12周以肾小球足细胞表面标志物肾母细胞瘤抑制基因(Wilm’stumor1,WT1)水平检测足细胞密度变化,同时以免疫比浊法检测大鼠24h尿微量白蛋白水平,及RT-PCR法测定各组大鼠肾皮质α3β1整合素mRNA的表达水平。结果与对照组相比,糖尿病大鼠从2周起出现明显的足细胞密度减低,24h尿量和尿微量白蛋白增加,4周开始出现血尿素氮升高,8周开始出现血清肌酐升高,并且随着病程进展,足细胞密度和24h尿微量白蛋白水平变化更加明显。α3β1整合素mRNA水平从第2周起比正常对照组明显降低,而在4周、8周和12周并没有呈现持续的减少。结论在糖尿病肾病早期,α3β1整合素水平降低可能是导致足细胞减少和蛋白尿发生的主要原因,而随着糖尿病病程进展,可能有其他机制参与,从而导致了糖尿病肾病足细胞减少、蛋白尿发生和肾小球损伤的进展。     

人整合素β3亚基真核表达载体的构建及αIIbβ3在细胞表面的表达

目的 :构建人整合素 β3亚基真核表达载体 ,并探讨如何使人整合素αIIbβ3在CHO细胞表面有效表达 ,为进一步研究整合素β3亚基作为汉坦病毒 (hantavirus,HV)受体的特异性奠定基础。方法 :构建编码人整合素 β3真核表达载体 pcDNA3.1 β3。将其与编码人整合素αIIb亚基真核表达载体 ,分别及共转染至中国仓鼠卵巢 (Chinahamsterovary ,CHO)细胞中进行表达。采用间接免疫荧光法 (IFA)检测外源基因的表达。结果 :共转染组目的蛋白呈高效的细胞膜表达。pcDNA3.1 β3单独转染组 β3亚基在细胞膜的表达较共转染组弱 ;而pBJ1 αIIb单独转染组则未见有效的细胞膜表达。结论 :人整合素αIIbβ3在CHO细胞表面的有效表达需要两个亚基共同参与。     

大肠癌ART1的表达与VEGF、整合素αVβ3表达及微血管形成的相关性

 目的 探讨大肠癌组织中单ADP核糖基转移酶ART1的表达与VEGF、整合素αVβ3表达的相关性及其对大肠癌组织微血管生成的影响。方法 免疫组化检测大肠癌组织中ART1、VEGF及整合素αVβ3的表达;免疫荧光双标检测ART1/VEGF及ART1/整合素αVβ3的共表达,用Chalkley分析法评估微血管的形成。结果 ART1、VEGF与整合素αVβ3的表达高于对照组(P相似文献   

雷公藤甲素诱导胶原导致的关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究(英)

目的：以胶原诱导的关节炎(CIA)为动物模型，探讨雷公藤甲素能否诱导CIA大鼠滑膜细胞凋亡。 方法： 选用雄性Wistar大鼠造模，将造模成功的大鼠随机分为模型组和雷公藤甲素组。雷公藤甲素按40 μg/kg BW，肌注给药，每3 d 1次。凋亡检测：给药31 d后处死，取膝关节滑膜，作苏木素-伊红染色(HE)、电镜、缺口末端标记法(TUNEL)标记及流式细胞仪检测。 结果： 电镜下可见早期阶段的滑膜凋亡细胞。流式细胞仪检测结果显示：正常组、模型组、雷公藤甲素组的凋亡细胞分别为(0.87±0.24)%、(1.83±0.82)%和(3.98±1.16)%。正常组、模型组、雷公藤甲素组的S期细胞分别为(3.4±0.7)%、(8.0±1.4)%和(3.3±1.2)%。雷公藤甲素组与模型组比较差异均显著(P＜0.01)。TUNEL标记结果显示：正常组、模型组、雷公藤甲素组的凋亡细胞分别为(1.0±0.4)%、(2.2±1.0)%和(4.5±0.9)%，雷公藤甲素组与模型组的差异显著(P＜0.01)。 结论： 本实验首次阐明了雷公藤甲素可诱导CIA大鼠滑膜细胞的凋亡。     

αvβ3与恶性肿瘤的侵袭和转移

αvβ3 是整合素家族中的一员 ,可表达于多种不同组织来源的恶性肿瘤 ,通过诱导肿瘤血管的生成 ,调节肿瘤细胞凋亡和水解细胞外基质等作用 ,参与肿瘤的侵袭和转移过程。深入研究αvβ3 在恶性肿瘤中的表达与功能 ,有助于进一步认识恶性肿瘤侵袭转移的分子机制 ,也为恶性肿瘤的诊断和预后判断提供了新的指标     

大鼠后肢侧支动脉生成过程中整合素α5β1和纤维连接蛋白的表达

目的:探讨侧支动脉生成过程中平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMC)移动增殖的机制。方法:结扎大鼠股动脉,应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中整合素α5β1、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和层粘连蛋白(laminin,LN)的表达。并在体外实验中检测了不同的细胞外基质对SMC表达整合素α5β1的影响。结果:侧支血管整合素α5β1和FN的表达分别是对照侧的1.9倍和2倍;而LN的表达是对照侧的1／3。种植在FN上的SMC高表达整合素α5β1;种植在LN上的表达较低;而种植在三维Matrigel基膜成分胶里的SMC几乎不表达整合素α5β1。结论:在侧支血管发育过程中,整合素α5β1、FN和LN的表达变化,有助于侧支血管生长发育过程中SMC的迁移和增殖。     

缺氧诱导因子-1α在胶原诱导性关节炎大鼠滑膜中的表达和意义

目的： 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在类风湿关节炎(RA)发病中的作用。方法： 采用雄性Wistar大鼠建立Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)模型，动态观察CIA大鼠关节炎活动指标，并于造模第21、28、35 d取膝关节滑膜分别行HE染色及HIF-1α免疫组化染色，分析HIF-1α蛋白表达与CIA大鼠关节炎活动指标、滑膜病理学评分之间的关系。结果： CIA大鼠膝关节滑膜衬里层和衬里下层细胞胞浆和胞核均表达HIF-1α，且其表达随发病时间延长而逐渐增加；滑膜表达HIF-1α与CIA大鼠关节炎活动指标、滑膜病理学总评分、滑膜增生评分及血管生成评分呈显著正相关，与炎症浸润评分无明显相关。结论： HIF-1α可能通过促进滑膜增生及血管生成而参与RA发病。     

整合素α6β1和CD44V4在卵巢上皮癌中表达及相关性分析

目的 通过检测上皮癌病理组织及正常卵巢组织中整合素α6β1和CD44V4表达情况,探讨其表达特点与临床病理特征的相关性。方法 收集2015年1月~2016年12月手术切除的20例正常卵巢组织、40例卵巢上皮良性肿瘤及65例卵巢上皮癌组织,利用免疫组织化学法检测整合素α6β1和CD44V4的表达水平,结合病理组织特征进行相关性分析。结果 卵巢上皮癌组织中整合素α6β1和CD44V4的表达水平显著高于正常卵巢及上皮良性肿瘤组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,且在不同病理分期及分化程度的卵巢上皮癌组织之间的差异有统计学意义（P＜0.05）;但在不同组织学分型病理组织中差异无统计学意义（P＞0.05）;α6β1和与CD44V4在卵巢上皮癌组织中的表达存在明显正相关（r=0.599,P＜0.05）。结论 整合素α6β1和与CD44V4在卵巢上皮癌组织中高表达且有相关性,可作为卵巢上皮癌发展的分子标志物。     

整合素αvβ6和MMP-9在胃癌中表达及其与胃癌病理生物学特征的关系

目的:探讨整合素αvβ6、MMP-9在胃癌中表达及其与胃癌病理生物学特征的关系。方法:采用EnVision免疫组化方法检测94例胃癌及癌旁胃黏膜组织中整合素αvβ6、MMP-9的表达情况,并分析两者表达与胃癌病理生物学特征的关系。结果:胃癌组织中整合素αvβ6和MMP-9阳性表达率明显高于癌旁胃黏膜组织(P<0.01)。整合素αvβ6在胃癌组织中的表达与Lauren分型、组织分化程度、是否有淋巴结转移(N分期)以及TNM分期密切相关(P<0.01),而MMP-9在胃癌组织中的表达与Lauren分型、组织分化程度、是否有淋巴结转移(N分期)、浸润深度以及TNM分期密切相关(P<0.01)。在胃癌组织中整合素αvβ6和MMP-9的表达呈正相关(r=0.672,P<0.01)。整合素αvβ6和MMP-9表达阴性患者的5年生存率明显优于整合素αvβ6和MMP-9表达阳性的患者(P<0.01)。Cox回归多因素分析表明Lauren分型、是否有淋巴结转移(N分期)、整合素αvβ6和MMP-9高表达是影响患者5年生存率的独立预后因素(P<0.05)。结论:整合素αvβ6和MMP-9的高表达与胃癌的浸润、转移密切相关;两者表达可作为判断胃癌患者预后的参考指标及治疗的靶向目标。     

胶原诱导性关节炎模型大鼠炎性细胞因子表达及白喉乌头的影响

背景：目前治疗类风湿关节炎主要的药物有慢作用抗风湿药、生物制剂及植物药物,植物药因价格便宜、不良反应小而越来越受到瞩目。 目的：观察胶原诱导性关节炎模型大鼠滑膜中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β表达及白喉乌头对其表达的影响。 方法：将45只大鼠随机分为正常对照组8只、造模组37只,造模组于大鼠足跖及尾根部多点皮内注射牛Ⅱ型胶原乳剂建立胶原诱导性关节炎大鼠模型。造模成功后,随机选取24只造模成功大鼠进行后续实验,将其随机分为模型组、雷公藤组和白喉乌头组,每组各8只,每周对3个造模后干预组和正常对照组共4组大鼠进行关节炎评分。经过灌胃给药治疗4周后,通过免疫组织化学染色检测肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β在滑膜中的表达。 结果与结论：与模型组比较,治疗后白喉乌头组、雷公藤组关节炎评分明显降低(P < 0.05)。肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β在模型组滑膜中表达明显高于正常对照组(P < 0.05),在白喉乌头组、雷公藤组中表达低于模型组(P < 0.05)。结果证实,白喉乌头治疗类风湿关节炎的机制可能与其抑制肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β表达有关。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

甘草次酸对胶原诱导性关节炎滑膜成纤维样细胞炎症细胞因子表达和分泌的影响

目的:观察甘草次酸(GA)对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜成纤维样细胞(CIA-FLS)TNF-α、IL-1β表达分泌的影响,并观测与传统治疗药物MTX联合应用后的效果。方法:组织块培养法体外分离纯化CIA大鼠膝关节滑膜组织中CIA-FLS细胞。实验分为空白组、MTX组、GA组和GA+MTX组4组,分别对CIA-FLS细胞进行体外药物干预实验。每组分别干预1、3、5 d。Real time qPCR法检测各组CIA-FLS细胞TNF-α、IL-1β mRNA表达水平,ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β水平。结果:药物干预1 d,CIA-FLS TNF-α、IL-1β表达均降低,但与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。药物干预3 d,CIA-FLS TNF-α、IL-1β表达均降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),3组组间差异无统计学意义(P>0.05)。药物干预5 d,CIA-FLS MTX、GA、GA+MTX均可明显抑制TNF-α、IL-1β表达(P<0.05),处理组间差异有统计学意义,按照强弱依次是GA+MTX>MTX>GA(P<0.05)。MTX、GA、GA+MTX抑制TNF-α、IL-1β表达均呈时效依赖性,作用时间延长,抑制作用越明显(P<0.05)。结论:GA、MTX、GA+MTX对CIA-FLS炎症因子TNF-α、IL-1β表达和分泌的抑制作用依次递增,并呈时间依赖性。     

问荆合剂对胶原诱导关节炎大鼠滑膜细胞分泌TNF-α、IL-β水平的影响

采用Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,以雷公藤多甙作对照,通过对大鼠的关节肿胀指数观察及检测问荆合剂含药血清对滑膜细胞细胞因子TNF-α、IL-β水平的影响,探讨问荆合剂治疗类风湿关节炎的部分作用机制。结果发现问荆合剂能显著减轻大志关节肿胀指数,不同程度地抑制大志关节滑膜炎性细胞因子TNF-α、IL-β的水平。提示问荆合剂对Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎具有一定抑制作用,可通过抑制关节滑膜分泌的炎性细胞原子TNF-α、IL-β的水平,从而减轻关节滑膜的炎症,可能是其治疗类风湿关节炎的作用机制之一。     

大鼠胶原诱导性关节炎关节滑膜Treg/Th17 平衡及TNF-α拮抗剂的影响

目的: 探讨胶原诱导性关节炎(CIA)关节滑膜Treg/Th17平衡状态以及TNF-α拮抗剂TNFR-Fc对Treg/Th17的影响。方法: 建立CIA模型,观察踝关节组织病理变化,ELISA检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α),免疫荧光双标法检测关节滑膜Treg/Th17的表达。结果: CIA组TNF-α较正常对照组及TNFR-Fc治疗组显著升高(P<0.01),TNFR-Fc治疗组与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05);CIA组滑膜组织的CD4⁺Foxp3⁺Treg/CD4⁺细胞比例与正常对照组比较无明显差异(23.12%±4.93% vs 24.66%±5.82%,P>0.05),而TNFR-Fc治疗组则升高明显(33.07%±5.14%);CIA组CD4⁺RORγt⁺Th17/CD4⁺细胞比例显著增高(9.74%±2.23% vs 正常对照组1.00%±0.59%,TNFR-Fc治疗组5.63%±1.76%,P<0.01)。结论: CIA大鼠关节滑膜存在Treg/Th17分化失衡;TNFR-Fc可能通过抑制关节滑膜Th17细胞分化,诱导Treg细胞生成/聚集,使得病变关节的Treg/Th17平衡得以恢复。     

整合素连接激酶和β1整合素在大鼠烫伤创面愈合过程中表达的实验研究

目的探讨大鼠烫伤创面愈合过程中整合素连接激酶（ILK）和β1整合素的表达以及在创面愈合中的作用。方法健康雌性SD大鼠18只,随机选取其中15只作为实验组,建立深Ⅱ度烫伤模型,另外3只为对照组,不做处理。实验组分别于烫伤模型建立后第1、5、10、15、20天随机选取3只大鼠,切取背部两侧全层创面,运用免疫组织化学的方法检测创面中ILK、β1整合素的表达。对照组取背部正常皮肤作为对照。结果实验组烫伤后第5、10、15天大鼠烫伤创面中ILK的表达明显高于对照组和实验组烫伤后第20天（P〈0.05）;创面中β1整合素的表达在烫伤后第5天明显高于对照组（P〈0.05）,实验组烫伤后第10、15天则明显高于对照组和实验组烫伤后第20天（P〈0.05）。结论ILK、β1整合素在大鼠创面愈合过程中表达明显增加,ILK可能通过参与整合素信号通路,在调节创面细胞的增生以及细胞与ECM相互作用中扮演着重要的角色。