大鼠三叉神经尾侧亚核内甘氨酸受体和甘氨酸阳性神经元的分布

目的 研究大鼠三叉神经尾侧亚核内甘氨酸受体和甘氨酸阳性神经元的分布及其匹配关系,方法：免疫细胞化学染色技术,结果：甘氨酸受体免疫组化染色阳性胞体和纤维分布于三叉神经尾侧亚核各层,尤以浅层密集,甘氨酸阳性胞体在每层均有广泛分布,甘氨酸阳性纤维及终末密集分布于三叉神经脊束核尾侧亚核的浅层,深层的阳性纤维及终末呈散在线性分析,结论 上述结果表明在三叉神经尾侧亚核浅层甘氨酸阳性纤维和终末的分布与甘氨酸受体     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核及三叉神经节内PPTA,CGRP和PPE …

利用原位杂交技术和免疫组化技术，观察完全福氏佐剂致炎大鼠的三叉神经脊束核尾侧亚核和／或三叉神经节内ＳＰ、ＣＧＲＰ和Ｌ－ＥＮＫ样阳性结构及它们相应的前体ＰＰＴＡ ｍＲＮＡ、ＣＧＲＰｍＲＮＡ和ＰＰＥｍＲＮＡ分布状况的动态变化。原位杂交结果显示：ＰＰＴＡｍＲＡ在三叉神经节与三叉神经脊束核尾侧亚核浅层神经元中的表达于致炎刺激后１２ｈ明显增强，分别于１ｄ和４ｄ时达到高峰，２１ｄ后恢复正常；ＣＧＲＰｍＲＮＡ在     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内谷氨酸能,γ—氨基丁酸能和 …

三叉神经脊束核尾侧亚核浅层（Ｉ、Ⅱ层）内有较密集的谷氨酸样、γ－氨基丁酸样和甘氨酸样阳性终末。这些终末除分别来自外周初级传入或局部神经元外，还可能来自脑干的核团。为了探讨这些阳性终末的脑干起源部位，本研究用荧光金逆行追踪与免疫荧光组织化学染色相结合的双标技术对三叉尾侧亚核浅层内谷氨酸能、γ－氨基丁酸能和甘氨酸能终末在脑干的起源部位进行了追踪。结果表明：大鼠脑干向三叉尾侧亚核发出谷氨酸能、γ－氨基丁     

面口部炎性刺激条件下PPTA mRNA在大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核神经元中的表达变化及与FOS的共存

将鹿角菜胶注射到大鼠口周皮下作成炎性刺激模型，用原位杂交法结合免疫组化法观察了三叉神经尾侧亚核中PPTAmRNA的表达变化及其与FOS蛋白表达的关系。结果发现：鹿角菜胶注射后，注射侧三叉神经尾侧亚核浅层内PPTAmRNA阳性神经元的数量与对照例相比明显增多。鹿角菜胶产生的炎性刺激也诱导了FOS蛋白在三叉神经尾侧亚核中的表达，FOS蛋白阳性神经元主要位于刺激侧三叉神经尾侧亚核浅层，而对照侧仅有少量分布。在三叉神经尾侧亚核浅层约60％的PPTAmRNA阳性神经元同时表达了FOS蛋白，而双重反应阳性的神经元仅占FOS阳性神经元的30％。上述结果提示：在面口部伤害性刺激诱导的三叉神经尾侧亚核内PPTAmRNA增强表达的过程中，FOS蛋白可能起着重要的调节作用。     

大鼠三叉神经半月神经节内一氧化氮合酶阳性神经元的分布、投射及其与CGRP、SP的关系

用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学方法观察了大鼠三叉神经半月神经节内一氧化氮合酶阳性神经元的分布．结果发现约５～８％的节细胞呈一氧化氮合酶阳性，几乎均是中、小细胞，弥散地分布在神经节各处．结合荧光金逆行追踪技术观察，发现荧光金注入三叉神经脊束核尾侧亚核浅层后，约９０％的一氧化氮合酶阳性节细胞被逆行标记，提示半月神经节内的一氧化氮合酶阳性神经元主要投射于三叉神经脊束核尾侧亚核浅层．用一氧化氮合酶组织化学反应结合荧光金逆行追踪技术及ＣＧＲＰ、ＳＰ免疫荧光技术进行重合处理的结果显示，在向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的一氧化氮合酶阳性半月节神经元中，约６０％呈ＣＧＲＰ样免疫阳性，约６５％呈ＳＰ样免疫阳性．结合文献及本文结果，可以认为半月神经节向三叉神经脊束核尾侧亚核浅层投射的一氧化氮合酶与ＣＧＲＰ或ＳＰ共存的神经元可能在面口部伤害性信息的传递和调控中起重要作用．     

大鼠三叉神经节神经元向三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核的 …

为研究三叉神经节神经元向三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核的分支投射，用荧光素逆行追踪双标记方法，Ｆａｓｔ ｂｌｕｅ和Ｎｕｃｌｅａｒ ｙｅｌｌｏｗ分别注射入三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核后，荧光是微镜下可见三叉神经节内的多种逆行标记神经元，ＦＢ显示明亮的蓝色标记胞浆，而ＮＹ标记则为黄绿色的圆形胞核。     

大鼠三叉神经节及尾侧亚核内PPTA mRNA在伤害性刺激条件下的时程变化

将福尔马林注入大鼠一侧口周皮下，用原位杂交法观察三叉神经节和三叉神经脊束核尾侧亚核内PPTAmRNA表达的时程变化。证明：PPTAmRNA在三叉神经节内的表达于刺激后4h有明显增加，24h达到高峰，48h后恢复至正常；在尾侧亚核中，PPTAmRNA的表达及变化主要限于Ⅰ、Ⅱ层，其时程变化与在三叉神经节中的变化相似。PPTAmRNA表达的增加仅出现于刺激侧的三叉神经节和尾侧亚核，而对侧和对照组则无明显变化。提示伤害性刺激可直接或跨突触增强尾侧亚核PPTAmRNA的表达，意味着PPTA在西口部伤害性信息的传递和调控中起重要作用。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓向丘脑和臂旁核的谷氨酸能投射

本研究用荧光金逆行追踪与免疫荧光组比技术相结合的方法,对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓向丘脑和臂旁核的谷氨酸能投射进行了观察。磷酸激活的谷氨酸胺酶（PAG）是谷氨酸能神经元的特异性标识物。PAG样阳性胞体主要位于三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓背角的Ⅰ层,少量PAG样阳性胞体也见于它们的Ⅱ层外侧部及外侧网状核。将荧光金注入丘脑腹基底复合体后．荧光金逆标神经元主要见于对侧三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓背角的Ⅰ层及外侧网状核;将荧光金注入臂旁核后,荧光金逆标神经元也主要见于对侧三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓背角的Ⅰ层及外侧网状核。三叉神经脊束核尾侧亚核向丘脑腹基底复合体投射神经元的12．4％,向臂旁核投射神经元的13．2％呈PAG样阳性;颈髓背角浅层向丘脑瓜基底复合体投射神经元的12．7％,向臂旁核投射神经元的14．3％呈PAG样阳性。向丘脑腹基底复合体和臂旁核投射的PAG／荧光金双标神经元分别占三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内PAG样阳性神经元总数的13％和24．6％,向丘脑腹基底复合体和臂旁核投射的PAG／荧光金双标神经元分别占颈髓背角浅层内PAG样阳性神经元总数的11．6％和30．1％。外侧网状核内的部分PAG样阳性神经元也向丘脑腹基底复合体或臂旁核投射。Ⅰ层内的双?     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内代谢型谷氨酸受体的分布及谷氨酸样阳性终末的来源

本文用抗磷酸激活的谷氨酰胺酶的单克隆抗体和抗代谢型谷氨酸受体五种亚型（1，1α，2／3，5）的4种抗体，研究了三叉神经脊束核尾侧亚核和三叉神经半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样免疫反应阳性神经元和终末以及五种代谢型谷氨酸受体的分布，同时结合HRP逆标技术对三叉神经脊束核尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的来源进行了观察．发现磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性胞体和终末主要集中在三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层；半月节内仅有它的阳性胞体。半月节内HRP逆标神经元中呈磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性者占71．4％，这些双重反应阳性神经元占半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性神经元的33．2％．五种代谢型谷氨酸受体亚型中，只有5型密集地分布于三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层。以上结果说明：（1）三叉尾侧亚核内的磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末主要位于其浅层，它们主要来源于三叉神经的初级传入；（2）三叉尾侧亚核的代谢型谷氨酸受体五种亚型中，只有5型可能参与西口部伤害性刺激信息的传递；（3）三叉尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的分布与代谢型谷氨酸受体5型的分布互相匹配。     

一氧化氮合酶阳性结构在大鼠三叉神经感觉核簇内的分布及其与面部伤害性刺激诱发的FOS蛋白表达的关系

用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学技术与ＦＯＳ免疫组化（ＡＢＣ法）相结合的方法，观察了大鼠三叉神经感觉核簇内一氧化氮合酶阳性神经元和纤维的分布及其与面部伤害性刺激诱发的ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白表达的关系．证明，浓密的一氧化氮合酶阳性纤维和终末分布于三叉神经脊束核尾侧亚核的Ⅰ和Ⅱ层，阳性成分呈蓝黑色的带状分布，而在三叉神经感觉核簇的其余核区内很稀疏．一氧化氮合酶阳性神经元胞体与面部伤害性刺激诱发的ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白表达的阳性神经元在此核簇内的分布节段非常相似，都主要存在于与伤害性传入传递和调控有关的三叉神经脊束核尾侧亚核，并且二者都主要分布于与痛觉调控有关的浅层．约有１０～１５％的一氧化氮合酶阳性神经元同时呈ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白表达．在三叉脊束核尾侧亚核的Ⅲ～Ⅴ层仅出现散在的阳性细胞，除在吻侧亚核的背内缘与孤束核交界处有少量一氧化氮合酶同性神经元外，在三叉神经感觉核簇的其余核区两者均几无表达．本文及文献结果提示，一氧化氮可能对面部伤害性信息的传递和调控起重要作用．     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内向丘脑或臂旁核投射神经元与5-HT样和SP样终末间的联系:激光共聚焦显微镜研究(英文)

用免疫荧光组织化学三重染色技术观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc）浅层（Ⅰ层和Ⅱ层）内向丘脑或臂旁核投射的神经元与下行性5-HT样和初级传入的SP样终末之间的联系。将四甲基罗达明（TMR-DA）注入大鼠丘脑或臂旁核,在Vc的Ⅰ、Ⅱ层内可见TMR－DA逆标神经元,主要位于VcⅠ层。在Vc浅层内还可观察到大量的5－HT样和SP样免疫荧光组织化学染色阳性纤维和终未,5－HT样阳性纤维有较多的膨体。Vc内的这些向丘脑或臂旁核投射的TMR－DA逆标神经元与5－HT样和SP样阳性纤维和终末的分布区基本上重叠。在激光共聚焦显微镜下可以看到5－HT样和SP样阳性终末在Vc浅层内分别围绕TMR－DA逆标神经元的胞体和树突的周围并与之形成密切接触;并且观察到5－HT样和SP样阳性终末同时与TMR－DA逆标神经无形成直接的密切接触。提示Vc浅层向丘脑和臂旁核投射的神经元不仅接受外周初级传入的伤害性信息,还接受下行性5-HT能投射纤维的调控。     

SP,CGRP,ENK样阳性纤维终末在猫骶髓后连合核内的分布特征及超微结构

本实验用免疫组化电镜技术对骶髓后连合核中SP祥、CGRP样、L-ENK样阳性终末进行了观察,结果表明:SP样阳性终末主要含圆形清亮小泡,间有少量颗粒囊泡,主要与中、小树突形成不对称型轴-树突触(93%);还可见到不对称型轴-体突触(5%);也可见到少量的轴-轴突触(2%),SP样阳性终末为突触后成分。CGRP样阳性终末以含圆形清亮小泡为主,有的终末内混有颗粒囊泡。大多数终末(89%)与树突构成轴-树突触,但以远侧树突为主;也有少数(6%)的CGRP样阳性终末与胞体形成轴-体突触;还观察到由阴性终末与CGRP样阳性终末构成的轴-轴突触。L-ENK样阳性终末以含圆形清亮小泡为主,有时可见散在的颗粒囊泡,多与中、小树突形成不对型轴-树突触(92%);也观察到轴-体突触(5%)和轴-轴突触(3%)。     

面口部炎症刺激增强CGRP mRNA、PPTA mRNA及NOS在大鼠三叉神经节中的表达

为了研究ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ在伤害性刺激后大鼠ＴＧ中合成和表达的变化，将４％鹿角菜胶（ＣＡＲ）溶液注射到大鼠一侧口周皮下作为伤害性刺激模型，用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学法结合ＣＧＲＰ、ＰＰＴＡｍＲＮＡｓ原位杂交组织化学法对此进行了观察。结果显示：对照组大鼠ＴＧ中约有３２．２％、１６．２％和１０％的神经元分别呈ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性。ＣＡＲ刺激后，在刺激侧ＴＧ、ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性神经元的数量均增多，其阳性率分别达到了３８．６％、２２．８％和１４．２％。ＴＧ中约有６．８％和７．３％的神经元同时呈ＮＯＳ和ＣＧＲＰｍＲＮＡ或ＮＯＳ和ＰＰＴＡｍＲＮＡ阳性，ＣＡＲ刺激使得两种双标神经元的数量也明显增多，双标细胞占ＴＧ细胞总数的百分比分别达到了１１．０％和１０．９％，而且刺激后增加的ＮＯＳ阳性神经元主要为双标神经元。上述结果提示ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性神经元，尤其是共存神经元可能在面口部伤害性信息的传递和调节中起重要作用，伤害性刺激所诱导的ＮＯＳ合成的增加与ＣＧＲＰｍＲＮＡ和ＰＰＴＡｍＲＮＡ表达的增强可能有密切的关系。     

大鼠三叉神经节细胞向三叉神经脊束核各亚核的分枝投射

本文应用荧光素双标记与免疫荧光结合方法研究了单个含ＳＰ或ＣＧＲＰ的三叉神经节细胞向三叉神经脊束核的尾侧亚核、极间亚核和吻侧亚核的分枝投射。将ＤｉａｍｉｄｉｎｏＹｅｌｌｏｗ（ＤＹ）注入尾侧亚核，ＦａｓｔＢｌｕｅ（ＦＢ）分别注入吻侧亚核或极间亚核，发现ＤＹ／ＦＢ双标细胞占同侧三叉神经节内标记细胞总数的１３．２％（ＦＢ注入吻侧亚核例）和２．３％（ＦＢ注入极间亚核例）；双标细胞中含ＳＰ者分别为７４．４％和６９．６％；含ＣＧＲＰ者分别为７２．１％和６４．３％。将ＤＹ注入极间亚核，ＦＢ注入吻侧亚核时，ＤＹ／ＦＢ双标细胞占同侧三叉神经节标记细胞总数的１．６％，双标细胞中有６７．９％为ＳＰ阳性，７３．９％为ＣＧＲＰ阳性。多数的双标且呈ＳＰ或ＣＧＲＰ阳性的三叉神经节细胞直径约为２５～５０μｍ，为中、小型节神经元，而直径大于５０μｍ的大型细胞较少见。以上结果提示，三叉神经初级传入纤维进入脑干后的下降支分枝投射向三叉神经脊束核的各亚核，它们可能与面口部的痛信息传递有关。ＳＰ和ＣＧＲＰ是这些分支投射神经元的重要神经活性物质。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内SP受体阳性神经元、FOS阳性神经元及初级传入C纤维和终末分布的研究

用免疫组织化学和组织化学方法对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）内ＳＰ受体阳性神经元、ＦＯＳ阳性神经元及初级传入Ｃ纤维和终末的分布及相互之间的关系进行了观察。ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突主要分布在此核的Ⅰ、Ⅱ层，Ⅰ层多于Ⅱ层；１０％福尔马林刺激大鼠口周区后诱导的ＦＯＳ阳性神经元分布于此核的Ⅰ～Ⅳ层及其内侧的网状结构，但主要集中在Ⅰ、Ⅱ层，Ⅱ层多于Ⅰ层；ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤维及其终末也密集地分布于此核的Ⅰ、Ⅱ层，且Ⅱ层多于Ⅰ层。多重反应的结果显示：在Ｖｃ的Ⅱ层和Ⅰ层内，ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突和ＦＯＳ阳性神经元胞体的周围可见许多ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维及终末；部分ＳＰ受体阳性神经元也呈ＦＯＳ阳性，少数ＳＰ受体和ＦＯＳ的双重阳性神经元周围也有ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维和终末。以上结果说明：（１）传递面口部痛信号的Ｃ纤维主要终止在尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层，与ＳＰ受体阳性神经元的分布区重叠，提示这些Ｃ纤维可能含ＳＰ；（２）参与西口部痛信息传递的ＦＯＳ阳性神经元主要分布于Ｖｃ的Ⅱ层，它们与初级传入Ｃ纤维终末的分布区重叠，其中的部分ＰＯＳ阳性神经元也呈ＳＰ受体阳性，从而进一步地证明了ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤?     

大鼠三叉神经尾侧亚核mGluR7、PAG和Glu-ir神经元的定位

本文应用免疫组织化学技术研究了大鼠三叉神经尾侧亚核(Vc)内代谢型谷氨酸受体7亚型(mGluR7)、磷酸激活的谷氨酰胺酶(PAG)和谷氨酸(Glu)免疫阳性神经元的定位.结果显示mGluR7阳性胞体和纤维主要分布于Vc浅层(Ⅰ,Ⅱ层),在深层只有散在分布.Glu和PAG阳性胞体分布于Vc各层,尤以浅层密集,Glu和PAG阳性纤维及终末主要分布于Vc浅层.以上结果表明Glu阳性纤维及终末和mGluR7亚型阳性胞体及纤维在Vc内的分布是相互匹配的,本文还对Vc内Glu和mGluR7在伤害性信息传递和调控中的机能意义进行了讨论.