青蒿琥酯抑制人肝癌细胞株HepG2细胞生长及其机制的初步研究

目的：研究青蒿琥酯对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖和survivin表达的影响,探讨青蒿琥酯影响肝癌细胞增殖的可能机制.方法：常规培养人肝癌细胞株HepG2,设立空白对照组;青蒿琥酯不同浓度组（3.125μg/ml、6.25μg/ml、12.5μg/ml、50μg/ml）,作用不同时间后用MTT法检测青蒿琥酯对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的影响,应用RT-PCR检测细胞survivin在mRNA水平的表达.结果：青蒿琥酯作用人肝癌细胞株HepG2后,与对照组比较细胞生长明显受到抑制（P〈0.05）,当青蒿琥酯浓度在12.5μg/ml时,survivin的表达（相对表达量为（0.75＋0.01）显著降低（P〈0.05）.结论：青蒿琥酯可通过下调survivin的表达来抑制肝癌细胞HepG2的生长.     

青蒿琥酯纳米脂质体抗肝癌作用及其与肝脏中药物含量关系研究

目的与青蒿琥酯原料药作对比,观察青蒿琥酯纳米脂质体在肝癌裸鼠模型中抗肝癌作用及肝脏中的药物百分含量,观察其对肝癌的靶向性及对正常肝脏的影响。方法用青蒿琥酯原料药与青蒿琥酯纳米脂质体两种剂型给人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型进行腹腔注射给药,观察青蒿琥酯的抗肝癌作用,用紫外分光光度法测定不同剂型青蒿琥酯在肝癌裸鼠模型肝脏中的百分含量,并分析肝脏中药物含量与抗肿瘤作用的关系。肝脏HE染色显微镜下观察各处理组肝脏的病理变化。结果青蒿琥酯纳米脂质体对人肝癌裸鼠皮下移植瘤的抑瘤率为32.7%,原料药的抑瘤率为20.5%。青蒿琥酯纳米脂质体组药物在肝脏中的百分含量为0.53%,青蒿琥酯原料药组肝脏中药物百分含量为0.28%。且肝脏HE染色结果青蒿琥酯纳米脂质体组与原料药组和生理盐水组均对肝脏无明显损伤作用。结论青蒿琥酯纳米脂质体抗肝癌作用优于原料药组,有较明显的肝脏肿瘤靶向性,且对肝脏无明显损伤作用。     

青蒿醇提物对H22肝癌小鼠的抑瘤作用研究

目的：观察青蒿醇提物对H：：肝癌小鼠的体内抑瘤作用。方法：取H。肝癌细胞接种于小鼠右腋皮下,随机分为模型对照组、5-氟尿嘧啶组（5-Fu）及青蒿醇提物125mg／（kg·d）组、500mg／（kg·d）组,5-Fu组肌肉注射给药,其余各组灌胃给药。连续给药8d后,剖瘤称取质量,计算抑瘤率;利用高效液相色谱仪测定青蒿醇提物中青蒿素含量。结果：与模型对照组比较,青蒿醇提物各剂量组均不同程度的抑制肿瘤生长（P〈0．Ot）,青蒿醇提物125me,／（kg·d）组和青蒿醇提物500m/（kg．d）组的抑瘤率分别为54．6％、50．6％;本实验青蒿醇提物中青蒿素含量为0．02％,而在青蒿素抗H。小鼠肝癌试验中,青蒿素在剂量为10mg／（kg·d）时,对H22小鼠肝癌已没有明显的抑制作用。结论：青蒿醇提物对肝癌有明显的抑制作用;除青蒿素以外,中药青蒿中可能存在其它的抗肿瘤成分。     

青蒿琥酯抗肿瘤作用观察

目的:对抗疟药青蒿琥酯进行抗肿瘤活性实验研究.方法:采用体内抗肿瘤实验方法,观察青蒿琥酯对小鼠移植性肿瘤的抑制作用.结果:青蒿琥酯能明显的抑制小鼠移植性S180肉瘤的生长,延长艾氏腹水瘤小鼠的生存时间.结论:青蒿琥酯对小鼠移植性肿瘤具有明显的抑制作用.     

青蒿琥酯肝动脉灌注对原发性肝癌患者免疫功能的影响

目的观察青蒿琥酯介入治疗原发性肝癌的抑瘤效果和对患者免疫功能的影响。方法选取原发性肝癌患者60例,随机分为治疗组30例和对照组30例。治疗组予青蒿琥酯+西药灌注化疗栓塞;对照组予单纯西药灌注化疗栓塞。具体给药方案2组均为吡柔比星(THP)50 mg、顺铂针(DDP)10 mg、丝裂霉素(MMC)10 mg和碘油20 mL;治疗组加青蒿琥酯120 mg,经肝肿瘤区靶动脉注药,1次为1个疗程。2组均给予必要的一般输液和对症治疗。1个疗程后观察2组瘤体、AFP、淋巴细胞亚群及肝功能、肾功能、白细胞的变化。结果治疗组在提高机体免疫力方面明显优于对照组(P均<0.05)。在缩小瘤体、降低AFP方面2组大致相似(P均>0.05)。在介入不良反应方面,2组未见明显差异(P>0.05)。结论青蒿琥酯联合介入治疗能提高原发性肝癌患者的机体免疫力。     

青蒿琥酯对肝纤维化小鼠肝组织中MMP-1及TIMP-1的影响

目的：为了探讨青蒿琥酯抗肝纤维化的作用机理。方法：通过四氯化碳致小鼠肝损伤模型,利用免疫组化技术研究MMP-1及TIMP-1在肝组织中的表达情况。结果：青蒿琥酯具有明显降低TIMP-1在肝组织中的表达作用（P〈0.01）。结论：青蒿琥酯能够降低TIMP-1在肝组织的表达,可能是通过抑制TIMP-1的表达而减弱了对MMP-1的抑制,从而促进了胞外基质的降解,起到抗肝纤维化的作用。     

青蒿琥酯抗肝癌作用的实验研究

目的 :研究青蒿琥酯的抗肝癌作用。方法 :运用小鼠肝癌H₂₂ 癌模型、MTT法和集落形成法 ,观察青蒿琥酯对荷瘤鼠和人肝癌SMMC-772 1细胞株的作用。结果 :口服青蒿琥酯 30 0mg·kg^-1·d^-1,肿瘤受到明显抑制 ,抑瘤率在 3次实验中分别为 49.1% ,48.7% ,46.6% ;小鼠生存时间明显延长。青蒿琥酯与 5-氟尿嘧啶有协同抗肿瘤作用。青蒿琥酯体外对人肝癌细胞有明显细胞毒作用 ,其IC₅₀为 2.07μg·ml^-1,同时抑制人肝癌SMMC-7721克隆原细胞形成集落 ,其IC₅₀为2.48μg·ml^-1。结论 :口服青蒿琥酯有抗肝肿瘤作用。     

青蒿琥醋联合奎宁马斯治疗疟疾90例临床观察

目的：观察青蒿琥酯联合奎宁马斯治疗疟疾的临床效果。方法：将180例疟疾患者根据入院顺序分为治疗组与对照组各90例,2组均给予奎宁马斯针剂静脉滴注治疗,治疗组同时给予青蒿琥酯针剂静脉滴注。结果：治疗组显效率显著高于对照组（P〈0．05）,2组总有效率差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗组平均退热时间、平均原虫转阴时间均比对照组短（P〈0．05）,24小时平均原虫下降率高于对照组（P〈0．05）;不良反应明显少于对照组（P〈0．05）。结论：青蒿琥酯联合奎宁马斯治疗疟疾疗效显著,可改善临床症状,且安全性好。     

青蒿琥酯及其与硼替佐米在HBV-Tg小鼠中抗病毒作用研究

目的:观察青蒿琥酯与硼替佐米的抗HBV作用。方法:以HBV-Tg小鼠原代肝细胞为细胞模型,给予含青蒿琥酯分别为0、0.4、2、10、50、250μmol/L及其联合1μmol/L硼替佐米,培养24h,MTT法检测对细胞生长影响。ELISA检测培养细胞上清中HBsA g的变化,比较不同浓度药物对HBsA g抑制率。体内实验采用HBV-Tg小鼠分4组,对照组:0.5ml 5%葡萄糖/d;青蒿琥酯组:青蒿琥酯30mg/(kg·d);硼替佐米组:硼替佐米0.5mg/kg,每周2次;硼替佐米青蒿琥酯联合组:青蒿琥酯30mg/(kg·d),并硼替佐米0.5mg/kg,每周2次。每15天采血1次,测HBsA g。30天后处死小鼠,取肝脏组织固定,HE染色和HBcA g免疫组化检测,计数HBcA g阳性细胞数。结果:50μmol/L以下青蒿琥酯及其联合1μmol/L硼替佐米对原代肝细胞均无毒性。10和50μmol/L的青蒿琥酯对HBsA g有显著抑制作用,联合硼替佐米后对HBsA g的抑制作用显著增强。在体内实验中,30mg/kg青蒿琥酯连续给药30天后可以明显抑制HBV-Tg小鼠的HBsA g和HBcA g表达,0.5mg/kg硼替佐米连续给药对HBV-Tg小鼠的HBsA g却有刺激作用。结论:体内外实验证明,青蒿琥酯能显著抑制HBV抗原的表达。     

青蒿琥酯诱导人胃癌细胞凋亡的分子机制研究

目的探讨青蒿琥酯对人胃癌HGC27细胞凋亡的影响及可能的分子机制。方法将HGC27细胞分为正常对照组、20 mg·L-1青蒿琥酯组、80 mg·L-1青蒿琥酯组、160 mg·L-1青蒿琥酯组,采用CCK8分别检测青蒿琥酯作用24、48和72 h后对HGC27细胞增殖的影响,流式细胞术检测青蒿琥酯对HGC27细胞凋亡的影响,Western blot检测青蒿琥酯对HGC27细胞中β-catenin、GSK-3β、c-Myc以及Caspase-3表达的影响。结果青蒿琥酯能抑制HGC27细胞增殖,与对照组相比,青蒿琥酯各浓度组的增殖抑制率显著升高(P0.05),且具有浓度-时间依赖性。青蒿琥酯能诱导HGC27细胞凋亡,与对照组相比,青蒿琥酯各浓度组的细胞凋亡率显著升高(P0.05),且具有浓度依赖性。Western blot检测发现青蒿琥酯能显著上调GSK-3β和Caspase-3的蛋白表达(P0.05),抑制β-catenin和c-Myc的蛋白表达(P0.05)。结论青蒿琥酯能明显抑制HGC27细胞的增殖,诱导细胞凋亡,这可能与其抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。     

Inhibition of hepatoma 22 tumor by Liquiritigenin

The purpose of this study was to evaluate the in vivo antitumor effects of liquiritigenin (LQ) on H₂₂ Hepatocarcinoma. After mice were administrated liquiritigenin (10, 20 and 40 mg/kg) intragastrically for 15 days, tumor volume, indices of thymus and spleen, MDA level in serum, optical microscopy, electron microscopy were determined. We have found that LQ had inhibitory effects on transplanted tumors and that the middle dose of LQ was more effective than the others. All LQ groups could increase thymus weight but it had no obvious effect on the spleen. MDA content decreased with LQ treatment but there wasn't a significant difference. In the group treated with LQ, we observed that the nuclei changed markedly and had ultrastructural morphological changes to apoptosis. The study supports that LQ significantly inhibits the growth of H₂₂ in vivo, and might be a promising antihepatoma agent. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

雷公藤对荷肝癌(H22)小鼠的抑瘤作用的实验研究

目的:探讨中药雷公藤治疗实验性肝癌的疗效.方法:建立荷实体型肝癌(H22)小鼠模型,观察经雷公藤治疗对其肿瘤生长的影响.结果:雷公藤能显著抑制肿瘤的生长,其抑瘤率达35.46%.结论:雷公藤有明显的抗肿瘤作用.     

“发物”对H22肝癌小鼠瘤体质量、免疫功能及病理影响的实验研究

目的比较母鸡、草鸭、黄鱼、羊肉4种“发物”对H22肝癌小鼠瘤体质量、免疫功能及肿瘤病理的影响。方法选择BALB／c小鼠30只,5只作为正常组,其余接种H22细胞株复制肝癌模型。模型小鼠随机分为生理盐水组、1号组（母鸡）、2号组（草鸭）、3号组（黄鱼）和4号组（羊肉）,共5组,每组5只;生理盐水组给予0．9％NaCl溶液,其余各组分别给予相应食物的水煎液。观察各组瘤体质量、免疫功能及肿瘤病理变化情况。结果①与生理盐水组比较,1号组（母鸡）和4号组（羊肉）小鼠瘤体质量差异有统计学意义（P〈0．05）,抑瘤率分别达39．9％和35．2％。②与生理盐水组比较,各“发物”干预组荷瘤小鼠CD3＋、CD4＋、CD8＋差异均无统计学意义（P〉0．05）。③与生理盐水组比较,1号组（母鸡）和4号组（羊肉）IFN-γ水平显著升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,4号组（羊肉）IL-4水平显著升高（P〈0．01）。④4号组（羊肉）荷瘤小鼠肿瘤细胞多出现较明显坏死,组织中血管少;1号组（母鸡）荷瘤小鼠肿瘤细胞浸润较多,可见病理性核分裂相,细胞排列紧密;2号组（草鸭）、3号组（黄鱼）荷瘤小鼠肿瘤细胞浸润明显,组织中间见较多淋巴细胞浸润,后者较前者肿瘤血管更丰富。结论羊肉适合于肿瘤患者食用,母鸡次之,草鸭再次之,黄鱼则不宜食用。     

蝎毒多肽提取物抑制肝癌H22细胞化疗期间再增殖实验研究

目的:观察蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)对H22肝癌荷瘤小鼠化疗期间再增殖的抑制作用并探讨可能的机制。方法:96只Balb/c小鼠皮下接种小鼠肝癌H22细胞,随机分为模型组、PESV高、低剂量组和荷瘤对照组。以5-Fu对荷瘤小鼠进行化疗建立再增殖模型。按不同的用药方法对4组小鼠进行干预,每周测量肿瘤体积2次。各组每7 d处死6只小鼠,实验共进行35 d。以免疫组织化学方法检测各组肿瘤组织CD105,PCNA,VEGF,PDGF蛋白水平表达。以CD105标记微血管,计算微血管密度(MVD)。结果:荷瘤对照组肿瘤体积在13~24 d增加迅速,荷瘤对照组小鼠在第27天全部死亡,模型组肿瘤体积在17 d前增长较快,在第17~22天增加较慢,之后体积增加又较快,在第31天全部死亡。PESV高、低剂量组肿瘤体积全程缓慢增加,体积在17 d以后显著低于模型组,PESV高低剂量组之间仅在第17天存在差异(P0.05)。免疫组织化学检测显示,模型组肿瘤组织第31天PCNA表达水平高于第21,28天(P0.01),PESV高、低剂量组表达水平显著低于模型组(P0.01),PESV高、低剂量组仅在第17天存在显著差异(P0.05)。免疫组织化学检测显示,与PESV高、低剂量组相比,模型组CD105-MVD在第21,28天(P0.05),第35天(P0.01)存在显著差异,PESV高低剂量组之间无差别。模型组VEGF表达第35天高于第21,28天(P0.05),PESV高、低剂量VEGF表达在第21,28,35天表达水平均显著低于模型组(P0.01),PESV高低剂量组无差别。模型组肿瘤PDGF表达水平逐渐下降,PESV高,低组在第21天表达水平最低,之后逐渐增高,PESV高低剂量组之间在第35天存在显著差异(P0.01)。相关性分析显示,肿瘤组织VEGF表达水平与肿瘤组织CD105-MVD呈正相关(r=0.669)。结论:PESV可抑制H22肿瘤在化疗期间再增殖作用,其机制可能是抑制血管生成和使肿瘤血管正常化。     

小柴胡汤不同提取方法抗小鼠H22肝肿瘤的对比研究

目的 观察小柴胡汤采用不同的提取方法 获取的提取物对小鼠H22肝癌实体瘤及免疫器官的影响,优选小柴胡汤抗肝肿瘤的最佳提取方法 .方法 建立小鼠H22肝癌模型,分别灌服不同提取方法 获取的小柴胡汤提取物(13.5 g生药/kg),腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-FU)(20 mg/kg)做阳性对照;给药10天后检测各组的瘤重、体重、脾脏指数和胸腺指数,优选出最佳小柴胡汤提取方法 .结果 小柴胡汤水提组、梯度乙醇组及醇水组对H22小鼠肝癌实体瘤均有明显抑制作用,抑瘤率分别为32.35%、43.97%和25.77%,最佳提取方法 为梯度乙醇组.与正常组比较,H22荷瘤小鼠脾脏指数升高(P<0.01),胸腺指数和体重变化不大(P>0.05),小柴胡汤各提取工艺组脾脏指数均明显升高(P<0.01),5-FU组胸腺指数极显著降低(P<0.001).小柴胡汤各组小鼠体重均无明显影响,而5-FU组小鼠体重下降明显(P<0.001).结论 小柴胡汤采用水煎法、梯度乙醇提取法及醇水法获得的提取物对小鼠H22肝癌实体瘤生长有明显抑制作用,优选出的最佳提取方法 为梯度乙醇提取法.     

蟾酥总蟾蜍甾烯对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及组织中代谢物的初步分析

目的:评价蟾酥总蟾蜍甾烯(total bufadienolides from toad venom,TBFs)对H22荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用,同步对体内组织中的代谢物进行初步分析.方法:采用HPLC和LC-MS对制备的受试药TBFs的化学组成进行表征;采用灌胃和腹腔注射2种方式给予H22荷瘤小鼠高、中、低3个剂量的受试药,给药后第13天处死,剥取瘤组织,称重,计算抑瘤率;同时取心、肝、脾、肺、肾各脏器组织,采用HPLC和LC-MS对其中的药物进行初步分析.结果:在对照品对照,在线紫外吸收光谱和质谱数据的基础上,明确了受试药TBFs的化学组成,以日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾毒它灵、酯蟾毒精、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基为主.与空白对照组比,灌胃给予TBFs对H22荷瘤小鼠的体重无影响,低(5 mg· kg-1),中(10 mg·kg-1),高剂量组(20 mg·kg-1)的抑瘤率分别为14.76％,16.38％,10.32％;腹腔注射给予TBFs,与空白对照组比,中、高剂量组在给药第5天时体重增加较慢,第13天时恢复正常;低(1.5mg· kg-1),中(3 mg·kg-1),高剂量组(6 mg·kg-1)的抑瘤率分别为17.30％,19.80％,40.95％,呈一定的剂量依赖性.小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器组织HPLC分析表明,肝组织中存在蟾蜍甾烯类成分,LC-DAD-MS初步推测其中的11个化合物.结论:灌胃给予TBFs对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有一定的抑制趋势,但作用不明显;腹腔注射则展示了显著性抑瘤作用,同时给药初期也表现了一定的毒性反应;肝组织中推测的蟾蜍甾烯类化合物为进一步研究其体内代谢途径奠定基础.     

杠柳苷对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制研究

目的研究香加皮中杠柳苷体内抗肿瘤作用,探讨其可能作用机制。方法将小鼠肝癌H22细胞经体外培养并于BALB/c小鼠腹腔内传代后,无菌接种于小鼠皮下,建立荷瘤小鼠模型。采取不同剂量杠柳苷(0.25、0.50、1.00 mg/kg)ip给药,每天1次,连续15 d,观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况,测定抑瘤率,应用流式细胞术检测杠柳苷对肿瘤细胞周期与凋亡的影响;采用透射电镜观察荷瘤小鼠肿瘤细胞超微结构的变化。结果杠柳苷对小鼠H22皮下移植瘤具有显著的抑制作用,小鼠成瘤时间明显晚于模型组,肿瘤生长缓慢,低、中、高3个剂量组抑瘤率分别为60.28%、68.09%、74.74%。流式细胞术分析结果显示,不同剂量杠柳苷处理小鼠移植瘤细胞后,处于G0/G1期细胞明显增多,S期和G2/M期细胞显著减少,与模型组相比差异显著(P0.05),其中1.00 mg/kg杠柳苷组G0/G1期细胞由对照组的(46.90±5.80)%升高至(83.80±2.52)%,S期和G2/M期细胞分别由对照组的(38.30±5.11)%、(14.80±0.70)%下降至(5.33±2.73)%、(10.87±0.25)%;而且杠柳苷各组小鼠肿瘤细胞的凋亡率均明显增加,其中1.00 mg/kg组凋亡率高达(32.35±1.75)%,并可见典型的凋亡峰。透射电镜观察可见,杠柳苷各组小鼠肿瘤组织中出现大量典型的凋亡细胞,而对照组瘤组织内多为富含线粒体与内质网的代谢旺盛的肿瘤细胞。结论杠柳苷具有很强的体内抗肿瘤作用,其作用机制可能与阻滞细胞周期和诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

灵芝孢子油软胶囊对H22肝癌小鼠抑瘤作用及免疫功能的影响

目的:研究灵芝孢子油软胶囊抗肝癌作用及对肝癌小鼠免疫功能的影响。方法:将接种H22肝癌细胞的小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、灵芝孢子油高、中、低剂量组。给药7d后剥离瘤块,计算肿瘤抑制率;给药11d后检测各组小鼠网状内皮细胞的吞噬功能、体液免疫功能、特异性细胞免疫功能、TNF-α、IFN-γ生物调节因子水平。结果:高剂量灵芝孢子油对H22实体瘤的生长具有显著性的抑制作用。高、中、低剂量灵芝孢子油均可显著提高荷瘤小鼠网状内皮细胞吞噬功能及特异性细胞免疫功能(P<0.05,P<0.01);高、中剂量灵芝孢子油可显著提高荷瘤小鼠的血清溶血素水平(P<0.05,P<0.01);高剂量灵芝孢子油能显著提高荷瘤小鼠血清生物调节因子IFN-γ和TNF-α水平(P<0.05)。结论:灵芝孢子油能有效抑制H22肝癌小鼠实体瘤的生长,调节荷瘤小鼠的免疫功能可能是其发挥作用的途径之一。     

白附子混悬液对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用的免疫调节机制研究

[目的]研究白附子混悬液对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用,探讨其抗肿瘤作用的免疫学机制。[方法]采用H22荷瘤小鼠模型为研究对象,用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测小鼠血清中白介素-2(IL-2)和白介素-4(IL-4)水平;用流式细胞术(FACS)法分析对CD4+,CD8+T细胞的调节作用。[结果]白附子混悬液能够上调荷瘤小鼠血清IL-2细胞因子的表达,降低IL-4水平,可以使CD4+T细胞表达升高,CD8+T细胞表达降低。[结论]白附子混悬液能够通过调节荷瘤机体异常免疫功能状态而发挥抗肿瘤作用。     

大蒜素注射液对S180肉瘤和H22肝癌移植瘤小鼠的肿瘤抑制作用

目的:研究大蒜素注射液以及口服液对S180和H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫器官的影响.方法:建立S180肉瘤、肝癌H22荷瘤小鼠动物模型,注射液连续腹腔注射给药8d后脱颈椎处死剥离肿瘤、胸腺、脾脏,称质量,计算抑瘤率及胸腺、脾脏、肝脏指数.结果:大蒜素注射液7.5 μg/kg、15 μg/kg、30μg/kg、60μg/kg、120μg/kg对H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别为23.5％、31.5％、39.4％、40.4％、52.4％,其中120μg/kg剂量组相对于模型组有显著性差异(P＜0.05);对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为11.9％、15.9％、18.3％、33.7％、38.4％,其中120μg/kg剂量组相对于模型组有显著性差异(P＜0.05).结论:大蒜素注射液对H22、S180荷瘤小鼠具有良好的抑制作用,且基本不影响免疫器官.