大鼠肠道菌群对芍药苷体外代谢转化的研究

为研究肠道菌群对芍药苷在体内吸收和代谢的影响,该课题在离体培养的大鼠肠道菌群中,加入芍药苷进行厌氧孵育,分析芍药苷在48 h内的变化过程,探讨体外大鼠肠道菌群对芍药苷的代谢转化。采用UPLC监测芍药苷在不同孵育时间点的变化,色谱条件为:WelchromTMC18色谱柱(4.6 mm×100 mm,5μm),流动相0.1%甲酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速0.4m L·min-1,柱温30℃;同时运用UPLC-Q-TOF-MS/MS对转化产物进行分析鉴定(ESI离子源,正离子模式检测),结合化合物精确相对分子质量和MS裂解碎片信息,并辅以保留时间及文献数据对代谢产物进行结构解析,分析芍药苷肠道代谢规律。结果发现孵育24 h后,芍药苷已经完全被代谢转化,得到的代谢产物包括芍药内酯苷、芍药内酯苷元、脱酰基-芍药内酯苷、脱酰基-芍药内酯苷元和芍药内酯B等。通过代谢途径分析发现,离体的大鼠肠道菌群先将芍药苷转化成芍药内酯苷,然后通过脱葡萄糖、脱苯甲酰基和四元环裂解重排等多个途径被进一步代谢,将芍药苷逐步转化生成相对分子质量更小、疏水性更强的代谢产物,从而更好被肠道吸收。     

芍药苷通过调控肠道菌群改善α-异硫氰酸酯诱导胆汁淤积大鼠的作用机制研究

目的 确证芍药苷对α-异硫氰酸酯(α-isothiocyanate,ANIT)诱导胆汁淤积大鼠的药效作用,通过16SrRNA技术探究芍药苷对肠道菌群的调节作用机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组及芍药苷高、中、低剂量(200、100、50mg/kg)组和熊去氧胆酸(60mg/kg)组,每组10只。给予药物干预7d,第4天igANIT(60mg/kg)诱导胆汁淤积模型。测定胆汁体积流量;检测血清中血清中天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)活性及总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆汁酸(total bileacid,TBA)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织病理变化;收集大鼠肠内容物进行肠道菌群测序,探索芍药苷对肠道菌群的影响。结果 与模型组比较,芍药苷有效改善胆汁体积流量(P<0.05),显著下调大鼠血清中肝功能指标AST、ALT、γ-GT活性及胆汁淤积指标TBIL、DBIL、TBA水平(P<0.01),改善肝细胞损伤。肠道菌群测序结果可知,芍药苷显著上调厚壁菌门与拟杆菌门比值及异杆菌属Allobaculum、布劳特氏菌属Blautia丰度(P<0.05),降低颤螺菌属Oscillospira、瘤胃球菌属Ruminococcus丰度(P<0.05、0.01)。结论 芍药苷可能通过改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠肠道菌群失调,从而发挥对胆汁淤积肝损伤的改善作用。     

SPE-HPLC法测定冠心Ⅱ号中芍药苷的含量

冠心 号方由丹参、红花、赤芍、川芎、降香组成 ,有活血化瘀、理气止痛之功 ,用于气滞血瘀的胸痹、心痛等症 [1]。芍药苷为其主要有效成分。以芍药苷作为中成药的质控指标 ,采用 HPLC法测定已有许多报道 [2 ,3 ] ,供试品处理大都采用超声提取、离心进样的方法 ,但一般供试品的成分较复杂 ,检测基线提高 ,很难达到基线分离要求。本实验根据冠心 号水溶性的特点 ,采用固相萃取 ( SPE)技术 ,选出最佳萃取条件 ,简化了样品前处理步骤 ,节省了分析时间 ,获得了良好的测定效果。1　仪器与试药美国 Agilent1 1 0 0 Series高效液相色谱仪 :Max…     

白头翁皂苷类成分的肠道菌群降解动力学

目的: 考察白头翁皂苷类成分在肠道菌群中的降解动力学特征,为阐明白头翁发挥药效的作用机制提供参考。方法: 采用HPLC-ELSD测定白头翁皂苷B₃,B_D,B₇,B₁₀,B₁₁含量,流动相甲醇(A)-水(B)梯度洗脱(0~30 min,75%~90%A),漂移管温度75 ℃,气体流速2.0 L·min^-1。通过肠道内容物体外孵育白头翁总皂苷计算降解参数。结果: 白头翁皂苷类成分在大鼠肠道中孵育结果符合一级降解动力学特征,48 h内白头翁皂苷B₃,B_D,B₇,B₁₀,B₁₁迅速降解,降解速率常数分别为0.079 4,0.052 3,0.053 9,0.042 6,0.046 8 h^-1,半衰期依次为8.73,13.25,12.86,16.27,14.81 h。结论: 肠道菌群是白头翁皂苷原型化合物发生代谢的重要因素。     

人肠道菌群对芒果苷体外代谢转化的研究

目的:研究离体人肠道菌群在体外对芒果苷代谢转化的情况.方法:芒果苷与人肠道菌群在厌氧条件下孵育,通过大孔树脂、制备液相等方法对代谢产物进行分离和纯化,并通过质谱、核磁等手段进行结构鉴定.结果:在与人肠道菌群共同孵育12 h后,芒果苷代谢物生成的量趋于平衡.代谢物经MS,1H和13C鉴定为芒果苷的苷元.结论:在离体条件下,芒果苷可被人肠道菌群代谢,主要代谢物为芒果苷的苷元(1,3,6,7-tetrahydroxyxanthen).     

血必净注射液中芍药苷的降解动力学研究

目的研究芍药苷(Paeoniflorin)在血必净注射液及水溶液中,不同pH、温度下降解的动力学规律。方法采用高效液相色谱法(HPLC)考察不同pH和温度对芍药苷稳定性的影响,利用化学反应动力学模型及Arrhenius公式分析芍药苷在不同条件下的降解规律并计算降解反应动力学参数。结果芍药苷在碱性和加热时降解较快,符合一级动力学规律,碱性条件下随pH升高,降解速度明显增加。计算得芍药苷在水溶液和血必净注射液中降解活化能分别为114.70 kJ/mol和122.80 kJ/mol。结论芍药苷在碱性和强酸性条件下不稳定。相同条件下,芍药苷在血必净注射液中的稳定性都要高于其水溶液。     

刺五加苷B、苷E在大鼠体内肠道菌群中的代谢

目的：观察刺五加苷B、刺五加苷E等刺五加有效部位在大鼠体内肠道菌群中的代谢情况。方法：以10倍剂量给大鼠灌胃刺五加的有效部位,收集1、2、4、6、8、12h的大鼠肠道内容物和12h的大鼠粪便,加水使粪便与水的比例为1g：4ml,13000r/min离心,取上清液采用HPLC法检测刺五加苷B刺五加苷E的道谢情况。结果：在给大鼠灌胃刺五加有效部位后,12h内的大鼠粪便里检测不到刺五加的有效成分和代谢产物,经过对大鼠肠道内容物的研究得出,4h后刺五加的有效部位被完全代谢,但检测不到刺五加苷B、刺五加苷E的代谢产物。结论：绿原酸和异秦皮啶在大鼠肠道菌群中不发生代谢。体内研究显示,刺五加的有效部位在4h后被完全代谢吸收,但是检测不到刺五加苷B、刺五加苷E的代谢产物,推测其代谢产物可能直接被大鼠吸收。     

连翘酯苷A、连翘苷的体外肠道菌群代谢研究

目的 研究连翘酯苷A、连翘苷经肠道菌群转化后的代谢产物及其代谢途径.方法 将连翘酯苷A、连翘苷分别与大鼠肠道菌群培养液体外厌氧温孵培养后,进行UPLC-TOF/MS鉴定分析.结果 在温孵液中检测到原药、连翘酯苷A代谢产物连翘脂苷E、连翘苷代谢产物1,3,4,6-tetrahydro-1-(3,4-dimethoxyph...     

肉苁蓉苯乙醇苷对ALD小鼠肠道黏膜屏障和肠道菌群的影响

目的 探讨肉苁蓉苯乙醇苷（CHPhGs）对酒精性肝病（ALD）小鼠肠道黏膜屏障和肠道菌群影响。方法 将36只C57BL/6N雌性小鼠,随机分为正常组、正常给药组、模型组和CHPhGs低、中、高剂量组（175、350、700 mg·kg^-1）,每组6只。采用利伯-德卡利（Lieber-Decarli）乙醇液体饲料建立ALD小鼠模型。正常给药组和CHPhGs低、中、高剂量组按相应剂量每天灌胃给予CHPhGs。生化仪检测血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）水平;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、脂多糖（LPS）、脂多糖结合蛋白（LBP）、D-乳酸（D-LA）和二胺氧化酶（DAO）水平,肝脏LBP水平;比色法检测肝脏中TG和TC水平;肝脏行油红O和苏木素-伊红（HE）染色;电镜观察空肠上皮细胞微观结构;空肠和结肠道行HE和阿利新蓝-过碘酸-雪夫（AB-PAS）染色,及黏蛋白2（Muc2）免疫组化。收集正常组、正常给药组、模型组和CHPhGs高剂量组肠道内容物,进行测序。结果 ALD模型建立成功,与正常组比较,模型组血清中ALT、AST和TG水平,以及肝脏TG和TC水平均明显升高（P<0.05）;病理结果提示,与正常组比较,模型组肝脏细胞出现了明显的脂肪变性。与模型组比较,CHPhGs低、中、高剂量组的血清中TG和肝脏TG和TC水平均明显降低（P<0.05）;CHPhGs高剂量组血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1β、LPS和LBP明显降低（P<0.05）;CHPhGs高剂量组脂肪变性肝细胞数量明显减少,空肠上皮细胞微绒毛结构基本完整,结肠Muc2表达减少,肠道菌群出现了明显改变（P<0.05）。与正常组比较,异杆菌（Allobaculum）在模型组出现了显著上调（P<0.01）;与模型组比较,嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia）在CHPhGs高剂量组中明显上调（P<0.05）。Akkermansia与Allobaculum的丰度呈负相关（r=-0.701,P<0.01）。结论 CHPhGs对ALD的肠道屏障损伤有改善作用,可能是通过调节肠道有益菌Akkermansia和潜在有害菌Allobaculum的丰度和结构,影响肠道黏液稳态来发挥作用。     

大鼠肠道菌群对短小蛇根草苷体外代谢转化研究

为分析短小蛇根草苷经体外大鼠肠道菌群代谢转化的产物,在离体培养的大鼠肠道菌群中,加入短小蛇根草苷,采用HPLC检测代谢进程,采用UPLC-Q-TOF-MS鉴定肠菌代谢转化产物。结果显示,短小蛇根草苷容易被大鼠离体肠道菌群代谢,随着代谢时间的延长,短小蛇根草苷被代谢转化成多个代谢产物,该实验初步鉴定了3个代谢产物。研究结果表明短小蛇根草苷能够在大鼠离体肠道菌群中发生广泛的代谢。     

HPLC测定抗敏Ⅱ号中连翘苷、芍药苷的含量

目的 :研究以RP HPLC法同时测定抗敏Ⅱ号中连翘苷、芍药苷的含量。方法 :采用反相高效液相法。色谱条件 :InertsilODS 3色谱柱 ;流动相 :甲醇 水 (37∶63) ,双波长检测 ,测定波长λ1 =2 70nm ,λ2 =2 30nm ,流速 :1 .0mL·min- 1 。结果 :连翘苷、芍药苷在上述色谱条件下 ,分离效果理想 ,连翘苷在 0 .1 2 5～ 1 .0 μg范围内 ;芍药苷在 0 .2 5～ 2 .0 μg范围内 ,线性关系良好。结论 :方法简便、准确 ,重现性好 ,可作为抗敏Ⅱ号的含量测定方法     

肠道菌群对中药苷类成分的代谢研究进展

肠道菌群对中药苷类成分的代谢研究已经被国内外许多学者所关注,对其研究已得到创新性进展。本文综述了肠道菌群对中药苷类成分的代谢作用(包括药理作用和毒性作用),对研究较深入的一些中药成分的代谢情况进行了总结,并展望了用固定化酶技术对中药苷类成分进行代谢研究的前景。     

芍药苷的水解动力学研究

目的 考察芍药苷在不同pH条件下的水解情况. 方法Diamonsil-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%的甲酸水溶液(15∶85);检测波长为230 nm;进样量为10 μl;柱温为室温,流速为1.0 ml·min~(-1).结果 芍药苷对照品在0.021 5～0.215 μg范围内,进样量与峰面积间呈良好的线性关系,r=0.999 9,并得到不同pH条件下的水解动力方程.结论 芍药苷的水解符合一级动力学模型.在不同pH条件下,芍药苷的水解速度不同.     

离体大鼠肠道菌群对淫羊藿苷的代谢研究

目的：考察大鼠肠道菌群对淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的代谢情况，为研究淫羊藿苷的口服吸收机理打下基础。方法：将待测药物与新配制的大鼠肠内容物混悬液在37℃孵化，采用高效液相色谱法同时测定孵化前后溶液中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的浓度。结果：淫羊藿苷被肠道菌群迅速代谢成淫羊藿次苷Ⅱ，而淫羊藿次苷Ⅱ不被代谢。结论：研究淫羊藿次苷Ⅱ的吸收和代谢机理对于研究淫羊藿苷的口服吸收机理非常有必要。     

大鼠肠道菌群对紫丁香苷体外代谢转化研究

目的观察大鼠肠道菌群对紫丁香苷的体外代谢转化作用。方法将紫丁香苷与离体大鼠肠道菌群的孵育液分别培养O、4、8、12、24、48 h后取样,经正丁醇萃取后采用HPLC和LC-MS法对代谢产物进行定性和定量分析;扩大培养24h的孵育液经正丁醇萃取后,采用ODS柱色谱和重结晶方法分离制备代谢产物NMR法鉴定其结构。结果大鼠肠道菌群对紫丁香苷具有显著的代谢转化作用。在0~48 h代谢组的孵育液中共检测到2个代谢产物芥子醇(M_1)和右旋丁香树脂酚(M_2)。12h时有81%的紫丁香苷被代谢转化,24 h时紫丁香苷已经完全被代谢转化;并且检测到12h之前的主要代谢产物为M_1,24h后的主要代谢产物为M2,且24h后未能检测到M_1。结论在离体条件下,大鼠肠道菌群可以在24h内将紫丁香苷完全代谢转化为M_1,然后再将M_1代谢转化为M_2,且8~12h内转化紫丁香苷的速率最快。     

当归芍药散中阿魏酸和芍药苷的药代动力学研究

目的:探讨当归芍药散君药中的2个主要活性成分-阿魏酸和芍药苷的药代动力学。方法:昆明种小鼠一次性灌胃后,采用高效液相色谱法测定不同时间小鼠体内阿魏酸和芍药苷的血药浓度。用3P87药动力程序对血药浓度-时间数据进行拟合。结果:从灌胃小鼠血清中检测到阿魏酸和芍药苷两种成分,它们的主要药动学参数为:阿魏酸Ke(0.330±0.085)1/h,Ka(0.555±0.133)1/h,t_(1/2(ka))(1.249±0.365)h,t_(1/2(ke))(2.101±0.665)h,T_(peak)(2.606±0.586)h,C_(max)(6.372±1.510)mg·L~(-1),AUC(41.399±11.763)mg·h~(-1)·L~(-1);芍药苷:Ke(0.511±0.117)1/h,Ka(0.656±0.121)1/h,t_(1/2(Ka))(1.056±0.263)h,t_(1/2(Ke))(1.356±0.281)h,T_(peak)(2.062±0.396)h,C_(max)(3.401±0.879)mg·L~(-1),AUC(16.047±3.767)mg·h·L~(-1)。本研究为临床提供了有价值的实验数据。     

离体大鼠肠道菌群对淫羊藿苷的代谢研究

目的：考察大鼠肠道茵群对淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的代谢情况。为研究淫羊藿苷的口服吸收机理打下基础。方法：将待测药物与新配制的大鼠肠内容物混悬液在37℃孵化,采用高效液相色谱法同时测定孵化前后溶液中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的浓度。结果：淫羊藿苷被肠道菌群迅速代谢成淫羊藿次苷Ⅱ,而淫羊藿次苷Ⅱ不被代谢。结论：研究淫羊藿次苷Ⅱ的吸收和代谢机理对于研究淫羊藿苷的口服吸收机理非常有必要。     

高效液相色谱法测定冠心五号合剂中芍药苷的含量

目的：测定冠心五号合剂中芍药苷的含量。方法：高效液相色谱(HPLC)法测定。结果：平均回收率97．2％，RSD 1．94％。结论：该方法简便、准确、重复性好。     

离体大鼠肠道菌群对类叶升麻苷代谢的研究

在离体培养的大鼠肠道菌群中加入类叶升麻苷进行厌氧孵育。采用HPLC监测类叶升麻苷在不同孵育时间点的变化,同时运用HPLC-Q-TOF-MS鉴定类叶升麻苷的代谢产物。结果表明离体的大鼠肠道菌群可以对类叶升麻苷进行代谢,代谢产物分别是3,4-二羟基苯乙醇、咖啡酸和3-(3'-羟苯基)丙酸。     

芍药汤对湿热泄泻大鼠的炎性细胞因子与肠道菌群的影响

目的:明确芍药汤对湿热泄泻大鼠的止泻抗炎作用和肠道菌群调节作用,探讨芍药汤中"通因通用"法的作用机制。方法:采用高温+高湿+高糖高脂饮食+致病因子方式造模,分别设置正常组(不造模)、模型组(给予生理盐水),芍药汤全方组(生药5.62 g·kg^-1),芍药汤全方去大黄组(生药5.15 g·kg^-1),单味大黄组(生药0.01 g·kg^-1),给药5日,每天早晚2次。每天晚上给药3 h后用腹泻指数评估各给药组止泻效果,最后1次给药3 h后用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α),大鼠白细胞介素-6(IL-6),大鼠白细胞介素-1β(IL-1β)和大鼠白细胞介素-2(IL-2)含量,用16sDNA对大鼠粪便中菌群结构进行表征。结果:与模型组比较,芍药汤全方、芍药汤去大黄和单味大黄水煎液均可显著降低大鼠腹泻指数(P<0.01),其起效速度为芍药汤全方>芍药汤去大黄>单味大黄。与模型组比较,3种给药方案均可显著降低大鼠体内炎症因子水平(P<0.01),其中芍药汤全方组效果最佳,而...