基础免疫学问答

问:怎样鉴定血型? 答:可以按以下步骤进行。 1.材料准备抗A标准血清(取自B型人血清),抗B标准血清(取自A型人血清);5％待鉴定者血球悬液(取耳血一滴,加入约1～2ml生理盐水中);滴管3支,玻璃片一张。 2.试验方法取抗A、抗B两种标准血清各一滴(各用一支滴管取),分别滴在玻璃片上。     

用ELISA进行AB型体液与A和B型混和体液的鉴别

AB型人体液中,在同一血型物质分子上,同时含有A和B抗原活性。我们应用这一研究结果,用酶联免疫吸附法(ELISA)来进行AB型体液(斑)与A和B型混和体液(斑)的血型测定和鉴别。用单克隆抗A或抗B抗体进行包被,通过用人抗A、人抗B抗体和酶标抗人IgM来进行A和B血型物质的定量分析。用这种方法10,000倍稀释的体液仍能测出。AB型体液(斑),在单克隆抗A或者抗B包被板,能同时测出A和B型血型物质。然而,A和B型混和体液(斑),在相应的抗体包被板上,则只能测出相应的一种血型物质A或B。     

制剂中某些微量吩噻嗪衍生物的直接滴定法

吩噻嗪衍生物用做为抗精神病,抗胆碱能和抗组织胺的药物。有人报导过用阳极氧化和电流滴定以及极谱法测定微量吩噻嗪衍生物。本文叙述一个用N-溴琥珀酰亚胺(NBS)简便快速测定微量吩噻嗪衍生物的方法。实验 1.样品溶液:将样品25mg溶于蒸馏水中,转移至25ml容量瓶中并用水稀释到刻度。 2.0.02M N-溴琥珀酰亚胺溶液:精密称取0.3560g NBS,溶于少量的温蒸馏水中,用冷蒸馏水稀释至100ml,用碘量法标定。 3.操作步骤:取约含1-5mg药物溶液置于100ml滴定瓶中,加入2MHCl6ml和0.04％甲基红指示液2滴。用0.02M NBS滴定至指示剂退色。剩余的NBS用碘回滴。然后,取等体积的NBS在同样条件下用     

血清无机磷测定简法

取3支试管或干净青霉素小瓶,分别标明“测定”、“标准”及“空白”。分别加入0.05ml血清、磷标准液(1ml相当0.04mgP)及水于测定、标准及空白管中,各管中加入水1ml,混和后加入显色试剂(1份1％钼酸铵盐酸掖+0.1份0.2％孔雀石绿溶液+2.5份水,混和后置室温中。应用前,按上述混合液的1/5量加入1.5％吐温60,混合)2ml,混匀,置室温至少20分钟后在72型分光光度计上,用420nm波长,以空白管调节光密度为零,读取测定管及标准管的光密度。     

幽门螺旋杆菌的Wathin—Stary法的改进

我室于1992年～1994年共取临床胃镜材料2000余例,进行胃幽门螺旋杆菌的染色比较,对其化学反应过程中的试剂浓度、反应温度进行了实验探讨选择,加以改进。结果稳定,操作简便。 一、材料与方法 (1)无水醋酸钠1.64g,醋酸2.5ml,蒸馏水加至200ml。即为0.2mol/L PH3.6～3.8的醋酸盐缓冲液。以此液配制1％、2％硝酸银液、3％明胶、2％对苯二酚,分别置棕色瓶内避光备用。 (2)切片经水洗后,用1％硝酸银滴染存放60C温箱内1h。 (3)3％明胶4.5ml、2％硝酸银0.9ml、2％对苯二酚0.3ml混合后滴于切片上,室     

介绍一种鞭毛染色法

鞭毛染色法,操作简单,快速。染色成功率为100％。适用于一般医院鉴定细菌,观介绍如下：1鞭毛染色油配制液（1）：取5％石碳酸10ml,鞣酸2g,饱和硫酸铝钾液10ml。液（2）：取结晶紫16g,溶解于95％酒精100ml中,制成饱和液。将液（1）10份与液（2）1份混合即可。室温可保存2年以上。2染色方法取新载玻片,于95％酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中取出,以干纱布擦干后备用。在玻片上滴加蒸馏水一滴,一张玻片可同时染2～3个标本,用接种环取菌蔡少许,将细菌点在蒸馏水顶部,点一下,只许少量细菌进入,不可搅动,以免鞭毛脱落。静置5…     

淋巴瘤病人冷凝集反应1例

患者,女,74岁,2003年5月被确诊为淋巴瘤,在我院进行化疗后,实验室检查:WBC3.2×109/L,RBC2.28×1012/L,HGB60g/L,PLT308×1012/L,医嘱输新鲜全血200ml,我们测病人血型时病人在家属陪伴下来检验科抽静脉血2ml,用3.8%枸橼酸钠防凝,立即取出一滴用盐水稀释后加标准血清测其血型为A型,将血样室温(22℃)放置,2h后从中心血库取来血液后进行交叉配血试验。制作红细胞悬液时发现有颗粒状凝集,于是重新采样,从病房为病人抽血后立即拿到检验科(约10min),取其红细胞加入盐水中仍有颗粒状凝集,于是怀疑为冷凝集反应,将血样与盐水一起放入37℃水浴…     

半合成青霉素与头孢菌素类皮试液配制方法

<正> 半合成青霉素与头孢菌素类皮试液配制方法教科书和药典均无记载。现将我们的配制方法介绍如下。1.方法 取半合成青霉素或头孢菌素类1支(0.5或1.0)加生理盐水(2.5ml或5ml)稀释至每毫升含0.2g;取上液0.1ml加生理盐水至1ml,每毫升含0.02g;再取上液0.1ml加生理盐水至1ml,每毫升含0.002g;取上     

ABO血型测定的有关问题

血型是一种遗传性状 ,狭义上指 RBC的抗原差异 ,广义上指人体各种细胞和各种体液成份的抗原、抗体系统。1　抗原—抗体反应的影响ABO血型系统具有下列复杂成份。( 1 )血清中的凝集素　　血型　　　血清中的凝集素　　 O型抗 A、抗 B( Ig G)　　 A型抗 B( Ig M)　　 B型抗 A ( Ig M)　　 AB型——( 2 )组织液中、血浆中有血型物质　　 O型 H物质　　 A型 H、 A物质　　 B型 H、 B物质　　 AB型 H、 A、 B物质正因为有这些复杂成份、物质 ,所以在血型测定、交叉配血时 ,某些成份的改变 ,以及介质的介入 ,往往使得抗原抗体反应发…     

网状纤维醋酸氨银染色法及注意事项

近年来,汪荣法等人建立一种新的网状纤维染色法,即醋酸氨银染色法,此法使用简便,其背景清晰,我院使用四年余,现总结归纳如下:一、试剂配制醋酸氨银液的配制,取10％硝酸银10ml,加入1％醋酸钠2—3ml,摇匀,混合液呈乳白色。逐渐滴加氨水,至溶液接近变为清亮为止。再加蒸     

用短膜虫酶联免疫吸附试验(CL-ELISA)检测抗天然脱氧核糖核酸抗体(AnDA)的实验报告

鉴于检测血中AnDA对系统性红斑狼疮(SLE)等有重要临床意义,常规放免法及免疫荧光法还未能普遍应用,而ELISA方法相对简便,所以本文对用CL-ELISA检测AnDA的效果进行了研究。 CL-ELISA:短膜虫底片由生研所提供。待检血清用PBS(0.01 M pH 7.6)1/5稀释,取20μl滴在虫斑上,经孵育、PBS洗泡、甩干,滴加0.0125mg(Ab)/12.5 ml的辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人IgG抗体(E/Ab=1,生研所1984.1批,最佳工作稀释度经方阵试验选择)20μl,再孵育洗泡甩干,滴加0.1ml含0.003％H_O_2的Karnovsky液染色7～8分钟,用Tris-HCI缓冲液(0.05 M,pH 7.6)     

调经片质量标准的研究

本文应用双波长薄层扫描法对调经片中黄柏的主要有效成分——小檗碱和掌叶防己碱进行了含量测定,并对处方中当归、茯苓、川芎进行了定性鉴别。1 鉴别试验1.1 当归 称取本品(除去糖衣)约2g,研细,加水20ml稀释,用醋酸乙酯20、15、15ml萃取,合并萃取液,用5％碳酸氢钠溶液提取3次。每次15ml,合并碱液,加盐酸调pH2～3,再用苯15ml     

血凝试验检测尘螨致敏豚鼠血清中特异性抗体

将检测哮喘患者血清中尘螨特异性抗体的间接血凝试验用来检测动物血清中特异性抗体。 材料和方法 粉尘螨浸液由本教研室制备,蛋白浓度10mg/ml,实验时用生理盐水稀释至所需含量。 待测豚鼠血清共6组,每组抽血二次。其中4组用粉尘螨浸液分别加不同佐剂免疫及加强免疫,1组用无佐剂的粉尘螨浸液免疫,另1组为不含佐剂和粉尘螨浸液的对照组。 粉尘螨浸液致敏绵羊红细胞的制备:取双醛化固定经鞣化的2％绵羊红细胞悬液20ml,离心沉淀,继用0.1mol/L、pH4.8醋酸缓冲液洗涤1次后,按沉淀细胞4份(0.8ml)加粉尘螨浸液1份(0.2ml,蛋白质含量1mg/ml)立即加入0、1 mol/L、pH4.8醋酸缓冲液5ml,混匀后置37℃作用1h,离心沉淀后,再用1％兔血清磷酸缓冲液反复洗涤5次,最后用同液配制成1％致敏的红细胞液,并加防腐剂NaN_3至万分之一浓度。用生理盐水代替粉尘螨抗原处理绵羊红细胞作为对照。 用常规微量血凝法检测粉尘螨特异性抗体,在96孔V型微量血凝板上,用卡介苗(75mg/ml)0.02％和小牛血清白蛋白0.2％磷酸缓冲液灭活(56℃ 30min),待测血清由第1孔作对倍稀释成1:10～1:5120,然后在各孔中加等量(25μl)粉尘螨致敏的红细胞悬液,置微量振荡器上振荡3min,使     

快速乳胶凝集试验鉴定金黄色葡萄球菌

本文介绍一种兔血浆包被的乳胶试剂,鉴定金黄色葡萄球菌特有的凝集因子和A蛋白的方法。材料与方法乳胶试剂的制备:1)胶乳悬液(四军医大赠)用pH8.0甘氨酸缓冲液作1:8稀释。2)EDTA抗凝的兔血浆用pH8.0甘氨酸缓冲液作1:1000稀释。3)取50ml稀释好的胶乳与等量血浆稀释液混匀,放56℃水溶中30＇摇动使其充分混匀。4)取出后用盐水洗两次。5)沉淀胶粒悬浮于50ml含有0.02％叠氮钠和0.05％兔血浆的pH7.4磷酸盐缓冲盐水中备用。玻片试验方法:在一洁净玻片上加一滴生理盐水,混悬1-2个待检菌落于其中,然后加一滴乳胶试剂,充分混匀,在黑色背景下观察结果。金黄色葡萄球菌在30″-1＇内可见明显凝集。其他种葡萄球菌不出现凝集。     

介入性超声在妇科盆腔囊肿治疗中的应用

介入性超声具有实时超声监视，用非手术方法完成妇科盆腔囊肿的治疗，并获得满意的疗效。为探讨这种方法的安全性和可行性，我们对9例妇科盆腔囊肿，在B超引导和监视下进行了介入性治疗，现报告如下。1资料与方法9例患者中，已婚6例，未婚2例。年龄16～43岁，B遇及临床诊断，陈旧性卵巢出血1例，巧克力囊肿2例，单纯性卵巢囊肿6例。6例囊肿中囊液量最多为196ml，最大囊腔为9．SX74X6lcm，最小勇胜为3．2X3．0X2．5cm。1例陈旧世卵巢出血及2例巧克力囊肿，抽出咖啡色较稠液体。余6例单纯性卵巢囊肿，均抽出无色透明澄清液体。使用仪器为丹…     

超声引导下注射消痔灵治疗卵巢囊肿的临床价值

目的 研究超声引导下注射消痔灵治疗卵巢囊肿的临床价值。方法 超声引导下将18G PTC穿刺针穿刺卵巢囊肿，抽尽囊液，用甲硝唑或生理盐水反复冲洗至清亮后注入1／2囊液量消痔灵硬化5min后抽出，再注入1／8囊液量消痔灵保留。3个月复查囊肿的大小。结果 28例患者共34个囊肿均有效（100％），治愈28个囊肿（82．4％）；无1例出现严重不良反应和副作用；随访半年无1例复发。结论 超声引导下注射消痔灵是治疗卵巢囊肿安全有效的方法。     

安柳汞足癣液的研制

安柳汞足癣液为医院自制制剂,经过多年来的临床应用,证明对各种顽固性足癣有疗效,现将有关资料报道如下：1处方水杨酸60g;苯甲酸40g;薄荷脑10g;液化酚10ml;升汞2．5g;甘油100ml;乙醇（95％）适量至1000ml。2制法取水杨酸、苯甲酸、薄荷脑、升汞溶于适量乙醇,搅拌,溶解后用纱布过滤,另取液化酚和甘油混匀,加入上述乙醇液中,添加乙醇至足量,搅匀,即可。3质量检查3．1性状本品为红棕色含醇液体,具有薄荷脑,酚特臭。3．2鉴别苯甲酸、水杨酸取本品1ml,滴加氢氧化钠试液至对石蕊试纸呈碱性,再滴加盐酸液（lmoir）,使恰成酸后…     

不同消化方式对脐带华通胶间充质干细胞提取的影响

目的探讨使用不同酶浓度、消化不同时间及不同浓度胎牛血清的培养基稀释对消化脐带华通胶后提取培养间充质干细胞的影响。方法无菌条件下取出正常剖腹产胎儿脐带,剔除动脉、静脉及外膜,取其之间的胶状物,剪成1 mm3及更小的块状,分别加入0.1%和0.2%的Ⅱ型胶原酶,分为A、B两组,37℃水浴消化。每一组消化时间分别为4、81、2、16、202、4、28、323、6、40 h共10个消化时间点,每一个消化时间点又分为两组,分别为A1、A2组和B1、B2组。消化后的黏稠细胞悬液用完全DMEM稀释,并加入特级胎牛血清至浓度为10%（A1、B1）和20%（A2、B2）,充分混匀。悬液移至75 cm2培养瓶,15 ml/瓶,37℃、5%CO2、饱和湿度培养,3 d换液。通过细胞计数观察原代细胞贴壁生长的最早时间和80%细胞铺满瓶底的时间和生长活力。结果 0.2%的Ⅱ型胶原酶消化脐带华通胶在消化时间为20h,且稀释血清浓度为20%时,获得的细胞悬液在培养36 h即有细胞贴壁,培养6 d细胞贴壁达到80%,其余各组细胞生长情况各不相等,均弱于此组。其中消化时间在8 h以内和32 h以上时不论使用多少的酶浓度和稀释时使用多少的血清浓度,细胞均不生长。结论在使用胶原酶消化脐带华通胶提取间充质干细胞的过程中,使用0.2%Ⅱ型胶原酶、消化16～24 h、稀释培养时加入至20%的血清对干细胞的提取效果最佳。     

CT引导下介入治疗卵巢囊肿15例护理体会

目的　探讨CT引导下卵巢囊肿介入治疗的护理体会。方法　 15例患者 ,均在CT扫描定位 ,局麻下 ,用 2 1号细长针穿刺囊腔 ,抽尽囊液 ,注入约 10～ 2 0ml无水酒精 ,保留15min ,再抽吸 ,反复 3次 ,最后注入 10ml无水酒精 ,术毕。结果　卵巢囊肿介入治疗后 ,囊肿缩小 ,囊壁不清 ,症状消失 ,未见并发症。结论　CT引导下介入治疗卵巢囊肿应作好术前、术中、术后的系统护理配合。     

自制体液代用样品在实验室诊断教学中的应用

在实验室诊断实习教学中经常遇到这样的问题:一是能否取得阳性样品;二是怎样避免传染。为解决上述两个问题,我们经过多次试验制作了一些代用样品,用于教学得到了较理想的效果。方法 1.尿蛋白定性试验用样品:取1ml鸡蛋清加于250ml生理盐水中,再滴入20％铬酸钾液3滴。试验结果为蛋白阳性( ),相当于尿蛋白0.1～0.5g/L。 2.尿糖及尿酮体定性试验用混合样品:取3g葡萄糖加入到300ml生理盐水中,待溶解后再加入30ml丙酮溶液,最后滴加20％