2型糖尿病大鼠心肌组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达与胶原代谢的关系

目的 了解2型糖尿病（T2DM）大鼠模型心肌组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及其组织抑制物1（TIMP-1）的mRNA表达变化、蛋白水平及组织定位，探讨MMPs／TIMPs在T2DM心肌病变发生发展中的作用。方法 Masson染色观察心肌胶原含量变化；RT-PCR方法观察心肌MMP-、MMP-9和TIMP-1mRNA表达；免疫组化方法测定MMP-2、MMP-9、TIMP-1的蛋白表达和组织定位。结果 T2DM大鼠心肌胶原纤维明显增多；MMP-2mRNA表达明显下调，蛋白水平下降；MMP-9、TIMP-1的mRNA表达均增加，MMP-9、TIMP-1的蛋白水平也升高，但MMP-9／TIMP-1的比值下降。结论 T2DM大鼠心肌组织胶原聚集，心肌纤维化。MMPs／TIMP-1比例失衡可能与T2DM心肌病变的发生有关。     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠肺脏组织中胶原和基质金属蛋白酶相关因子的影响

目的观察厄贝沙坦是否对抗糖尿病大鼠肺损伤,探讨大鼠肺组织胶原和基质金属蛋白酶(MMPs)通路中相关因子的变化。方法雄性SD大鼠随机分为对照组(NC)、T2DM组、厄贝沙坦+糖尿病组(Ir+T2DM)。8周后测定各组FPG、TG和TC,HE和Masson染色观察肺组织形态、纤维化改变。ELISA测定肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2含量,Western blot检测MT1-MMP蛋白的表达。结果与NC组比较,T2DM组FPG、TG和TC水平增高,肺泡结构大部分消失,胶原增生,肺组织MMP-2、MMP-9水平下降,TIMP-1、TIMP-2水平升高,MT1-MMP蛋白表达较NC组增加(P0.05或P0.01)。与T2DM组比较,Ir+T2DM组肺组织形态和纤维增生改善,MMP-2、MMP-9水平增加,TIMP-1、TIMP-2水平降低,MT1-MMP蛋白表达降低(P0.05)。结论 T2DM可诱导肺脏损伤,厄贝沙坦通过调节MMPs信号通路中的相关因子,减轻肺损伤。     

二甲双胍对2型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的 观察2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌细胞凋亡、心肌间质胶原堆积及二甲双胍(MET)的干预作用.方法 8周龄SD大鼠高热量饮食1月后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg/kg)制备模型,成模后分别于12、24 w,采用光镜、原位末端标记法、流式细胞术检测心肌细胞凋亡,采用Masson染色观察胶原堆积程度,并分别检测各组大鼠心肌组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1) mRNA表达变化及MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白水平的变化.结果 成模后12、24 w,T2DM组大鼠心肌凋亡细胞数明显增多,MET干预组大鼠的凋亡率降低.T2DM大鼠心肌间质胶原含量明显增加,MMP-2的表达明显减低,MMP-9、TIMP-1的表达均明显增加,但MMP-9/TIMP-1的比值下降.MET治疗组胶原含量明显减少,MMP-2表达明显上调,MMP-9和TIMP-1下调,但MMP-9/TIMP-1的比值增加.结论 T2DM大鼠心肌损伤表现为心肌细胞凋亡增加和间质纤维化,MMP-2、MMP-9及TIMP-1的调节失衡参与了T2DM心肌间质纤维化的发生与发展,MET可通过抑制糖尿病大鼠心肌细胞凋亡和心肌纤维化而减轻心肌损伤.     

罗格列酮对糖尿病大鼠心肌纤维化及炎症因子表达的影响

目的探讨盐酸罗格列酮（RGZ）对糖尿病（DM）大鼠心肌纤维化及炎症因子表达的影响。方法30只实验大鼠分正常对照（NC）组（n=8）、DM组（n=11）、RGZ组（n=11）,用药12周。测血糖、体重、HbA1C、心脏重量、左室心肌胶原含量、血清单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平、心肌结缔组织生长因子（CTGF）表达的变化,观察心肌细胞超微结构。结果与NC组相比,DM组大鼠左室心肌组织胶原含量明显升高（16％±2％vs10％±3％,P〈0．01）,存在心肌间质纤维化;DM组MCP-1、TNF-α水平、心肌CTGF表达明显升高（分别为34．2±3．9vs17．5±2．8,9．8±2．5vs5．0±1．4,154士19vs98±16,P均〈0．01）;RGZ治疗后,左室心肌组织胶原明显下降（12％±3％w16％±2％,P〈0．05）,MCP-1、TNF-α水平及心肌CTGF表达明显降低（分别为20．2±3．2讲34．2±3．9,P〈0．01;6．5±2．12759．8±2．5,P〈0．01;121±16vs154±19,P〈0．05）。结论RGZ能明显抑制DM大鼠心肌间质纤维化,并能降低MCP-1、TNF-α水平及心肌CTGF的蛋白表达。     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠心肌纤维化中基质金属蛋白酶通路及相关因子的影响

目的观察厄贝沙坦是否对抗糖尿病大鼠心肌纤维化,探讨其对基质金属蛋白酶(MMPs)通路相关因子的影响。方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照(Con)组、糖尿病(DM)组、厄贝沙坦+糖尿病组(Ir+DM),每组10只。高糖髙脂饮食12周后,Masson染色观察心肌组织纤维化改变。ELISA测定心肌组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、组织抑制因子2(TIMP-2)含量及基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、MMP-14蛋白表达。结果与Con组比较,DM组FBG增加,心体比增大,心肌胶原纤维粗大,部分胶原沉积,ColⅠ、ColⅢ、TIMP-1、TIMP-2含量升高[(133.80±6.24)vs(262.07±9.84),(33.80±2.34)vs(71.42±2.59),(10.64±1.04)vs(38.05±1.29),(7.79±0.48)vs(23.15±0.82)ng/mg,P0.01],MMP-2、MMP-9蛋白表达降低[(1.60±0.10)vs(0.80±0.05),(0.51±0.03)vs(0.26±0.01)ng/mg,P0.01],MMP-14蛋白表达增加[(1.01±0.06)vs(1.49±0.05),P0.01]。与DM组比较,厄贝沙坦干预改善心肌组织纤维化,ColⅠ、ColⅢ含量减少,TIMP-1、TIMP-2水平降低[(262.07±9.84)vs(167.12±7.88),(71.42±2.59)vs(43.23±2.30),(38.05±1.29)vs(15.66±1.42),(23.15±0.82)vs(11.01±0.90)ng/mg,P0.01],MMP-2、MMP-9蛋白表达增加[(0.80±0.05)vs(1.30±0.05),(0.26±0.01)vs(0.43±0.02),P0.01],MMP-14蛋白表达降低[(1.49±0.05)vs(1.07±0.05),P0.01]。结论糖尿病可诱导心肌纤维化,厄贝沙坦通过调节MMPs信号通路及相关因子减轻纤维化程度。     

中药通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨中药通心络超微粉对糖尿病(DM)大鼠心肌纤维化的影响。方法制备大鼠DM模型并给予通心络灌胃,12 w后光镜观察病理变化检测心肌胶原容积分数(CVF),免疫组化、W estern印迹技术检测转化生长因子(TGF)-β1、基质金属蛋白酶(MMP)-9及组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1蛋白表达及含量。结果与正常对照(NC)组相比,DM组CVF值明显增大,TGF-β1、MMP-9、TIMP-1蛋白表达及含量均明显升高,MMP-9/TIMP-1比值降低,TXL组上述异常均明显减轻。结论 TGF-β1、MMP-9及TIMP-1三者平衡失调可能是使DM心肌纤维化发生的机制之一,中药通心络可通过调节三者之间的平衡,有效改善DM心肌纤维化。     

白细胞介素-10对肝纤维化大鼠细胞外基质及其代谢酶表达的影响

目的探讨白细胞介素（IL）-10对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-1和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响及其抗纤维化作用的可能机制.方法47只SD大鼠随机分为正常组（N组）和CCl4组（C组）.C组通过CCl4腹腔注射造模.至造模第9周,C组随机分为模型组（M组）、IL-10治疗组（T组）和自然恢复组（R组）.S-P免疫组化法检测肝脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1及Ⅰ、Ⅲ型胶原含量,H-E染色判断肝纤维化程度.结果成功建立肝纤维化模型,肝病理组织学显示,与M组比较,T组肝纤维化程度有明显改善（P=0.001）,而R组未见明显好转.与N组比较,MMP-2、MMP-9、TIMP-1及Ⅰ、Ⅲ型胶原在M组表达明显升高（P＜0.01）,T组显著降低（P＜0.01）,R组表达较M组有所降低（P＜0.05）,但仍明显高于T组（P＜0.01）.结论IL-10可抑制纤维化大鼠肝组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,减弱细胞外基质合成,加速其降解进而发挥抗纤维化作用.     

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂在COPD合并肺间质纤维化大鼠中的作用

目的 观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织型蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在慢阻肺继发肺间质纤维化(PIFCOPD)大鼠肺组织中的变化,评价其与PIF-COPD的病理变化及发病机制的相关性.方法 雄性大鼠24只,随机分为正常对照组(1组),21天(2组)和42天(3组)模型组.以烟熏联合气管内滴注脂多糖建立PIF-COPD模型.免疫组化法检测肺组织中MMP-9及TIMP-1水平.结果 MMP-9和TIMP-1在1组有少量表达;在2和3组MMP-9为0.1970±0.0017和0.2414 ±0.0017;TIMP-1为0.1265 ±0.0018和0.2171 ±0.0023(与l组相比P＜0.05)水平逐渐增高且与肺间质纤维化的严重程度成正相关.结论 MMP-9及TIMP-1的水平与PIF-COPD的发病机制及病程有关.     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠肾皮质MMP-2、MMP-9表达的影响

目的探讨厄贝沙坦对糖尿病（DM）大鼠肾皮质基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、DM组及厄贝沙坦治疗组,用免疫组化法检测三组肾皮质MMP-2、MMP-9表达;并用光镜、透射电镜观察其肾皮质病理改变。结果DM组肾皮质MMP-2、MMP-9表达明显低于对照组（P〈0．01）,出现典型的糖尿病肾病（DN）病理改变。治疗组MMP-2、MMP-9表达明显高于DM组（P〈0．01）,其DN病理改变好转。结论厄贝沙坦可能通过上调MMP-2、MMP-9表达,减少细胞外基质积聚,从而对DM大鼠起到肾脏保护作用。     

前列地尔对慢性心衰大鼠心肌基质金属蛋白酶表达及纤维化的影响

目的探讨前列地尔对慢性心衰大鼠心肌组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达及心肌纤维化的影响。方法 70只雄性SD大鼠随机分成假手术组和模型组。模型制备采用腹主动脉缩窄法,4周后模型组大鼠死亡7只。根据前列地尔给药浓度,将存活的51只模型大鼠随机分为未治疗组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,给药2周。Masson染色于光镜下观察心肌间质胶原纤维沉积情况,测定胶原容积分数(CVF)、羟脯氨酸(HYP)水平及胶原总含量。实时荧光定量PCR检测各组心肌组织MMP-2、MMP-9 mRNA表达,明胶酶谱法检测其活性变化。结果低、中、高剂量组大鼠心肌CVF、HYP水平及胶原总含量明显低于未治疗组(P0.05或P0.01)。与未治疗组比较,低、中、高剂量组大鼠心肌MMP-2、MMP-9 mRNA表达和活性水平均下调(P0.05或P0.01),低、中剂量组间MMP-2、MMP-9 mRNA表达无统计学差异(P0.05),高剂量组MMP-2、MMP-9 mRNA表达明显低于低、中剂量组,差异有统计学意义(P0.05);随前列地尔剂量增加,低、中、高剂量组间MMP-2、MMP-9活性水平逐渐下降,三组间差异有统计学意义(P0.05)。前列地尔剂量与大鼠心肌CVF、HYP水平、胶原总含量、MMP-2和MMP-9 mRNA表达及活性水平均存在负相关(P0.05或P0.01)。结论前列地尔可能通过抑制基质金属蛋白酶的表达及活性而减轻心肌纤维化,限制慢性心衰大鼠心室重塑和心衰进展,改善慢性心衰的预后。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ及其配体调节大鼠肺纤维化的作用机制

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）及其配体在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化中的作用及参与机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为4组,即生理盐水对照组、罗格列酮对照组、博莱霉素组、罗格列酮干预组,经气管内注射博莱霉素建立肺纤维化模型。采用Masson染色观察肺组织形态学变化;碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸含量;免疫组化及荧光定量RT-PCR检测PPARγ、MMP-9和TGF-β1的表达。结果气管内注入博莱霉素后,肺组织中羟脯氨酸含量、胶原沉积、MMP-9、TGF-β1及PPARγ表达较生理盐水对照组增加（P均〈0.05）;给予罗格列酮干预后,除PPARγ表达进一步增加,上述指标均下降（P均〈0.05）。相关性分析显示,博莱霉素组PPARγ蛋白水平与MMP-9和TGF-β1mRNA表达分别呈负相关（P均〈0.05）。结论 PPARγ参与了肺纤维化的发生;PPARγ及其配体罗格列酮可能通过抑制TGF-β1、MMP-9转录,从而减少胶原沉积,延缓博莱霉素诱导的肺纤维化进程。     

Dynamic changes in the expression of matrix metalloproteinases and their inhibitors, TIMPs, during hepatic fibrosis induced by alcohol in rats

AIM: To determine the dynamic changes in the expression of matrix metalloproteinases (MMPs) and the endogenous tissue inhibitors of MMPs inhibitors (TIMPs) during hepatic fibrosis induced by alcohol.METHODS: Male Sprague-Dawley rats were randomly divided into normal, 4 d, 2 wk, 4 wk, 9 wk and 11 wk groups, and the model rats were fed with a mixture of alcohol by gastric infusion at the designed time, respectively, then decollated and their livers were harvested for the examination of MMP-2, MMP-3, MMP-9, MMP-13, TIMP-1 and TIMP-2 by immunohistochemistry, zymograghy and Western blotting, respectively.RESULTS: Normal rats had moderate expression of MMP-2,which was decreased in the model rats except in the 11 wk group, where MMP-2 expression slightly increased. MMP-3 had the similar changing pattern to MMP-2 despite weaker expression. MMP-9 expression decreased in the 4 d and 2 wk groups, rose in the 4 wk group, decreased again in the 9 wk group and returned to normal levels in the 11 wk group.MMP-13 expression decreased in the 4 d and 2 wk groups,and returned to normal levels in the 4 wk, 9 wk and 11 wk groups. TIMP-1 expression decreased in the 4 d and 2 wk groups, but sharply increased in the 4 wk group and sustained at a high level even after modeling was stopped for 2 wk. In normal rats TIMP-2 expression was strong. However, it decreased as soon as modeling began, and then gradually rose, but remained to a level lower than that in normal rats even after modeling was stopped for 2 wk.CONCLUSION: MMP-2 may not always expresses at a high level during hepatic fibrosis. MMP-13 and MMP-3 are acutely affected by TIMP-1. In this model TIMP-1 is the most powerful factor imposed on capillarization and peri-sinusoidal fibrosis. TIMP-2 is the most effective regulator on the metabolism of type Ⅳ collagen located in the basement of sinus.     

MMP-2／TIMP-2比值与2型糖尿病大鼠心肌胶原代谢的关系及瑞舒伐他汀对其的干预

目的探讨基质金属蛋白酶-2（matrixmetalloproteinases-2,MMP-2）／基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinases-2,TIMP-2）与2型糖尿病大鼠心肌间质中胶原代谢的关系,及瑞舒伐他汀防治心肌间质纤维化的可能机制。方法30只雄性SD大鼠按随机数字表法抽取8只作为正常对照组,其余22只喂高脂,高糖饲料,并予低剂量链脲佐菌素单次腹腔注射。16只成模的糖尿病组大鼠按随机数字表法分成糖尿病组（n=8）与瑞舒伐他汀治疗组（n=8）。待血糖稳定后,治疗组开始给予瑞舒伐他汀干预处理,干预两个月后,处死大鼠,测定动物体质量,心脏质量,以计算心脏质量指数：心脏质量（g）／动物体质量（g）。酶联免疫吸附试验（ELISA）法分别测定3组大鼠血浆MMP-2、TIMP-2浓度,采用免疫组化方法检测心肌MMP-2、TIMP-2蛋白表达的水平和组织定位,采用Masson染色方法观察心肌间质胶原蛋白含量变化及分布。结果糖尿病组及治疗组血糖高于正常组,差异有统计学意义（P〈0．05）。糖尿病组心脏质量指数高于治疗组和正常组,差异有统计学意义（P〈0．05）。糖尿病组血浆MMP-2及TIMP-2浓度均比正常组高,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组血浆MMP-2及TIMP-2浓度比糖尿病组降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。然而,免疫组化检测到MMP．2在糖尿病组心肌间质中表达比正常组明显减少,在治疗组的表达比在糖尿病组增多,差异有统计学意义（P〈0．05）：TIMP-2在糖尿病组心肌间质中表达比正常组明显增多,在治疗组的表达比在糖尿病组减少,差异有统计学意义（P〈O．05）。糖尿病组与正常组比较,MMP-2／TIMP-2比值下降;治疗组与糖尿病组比较,MMP-2／TIMP-2比值上升。心肌Masson染色：亮绿色纤维在糖尿病组心肌间质中明显比正常组增多。而治疗组比糖尿病组有所减少。结论糖尿病大鼠中MMP-2／TIMP-2比值下降可能是导致心肌间质纤维化的原因之一。瑞舒伐他汀可减轻糖尿病大鼠心肌间质的胶原沉积,其可能是通过升高MMP-2／TIMP-2比值,使糖尿病心肌问质纤维化有所减轻。     

反义基质金属蛋白酶抑制剂-1基因转染对氧化应激反应介导的肺纤维化大鼠的影响

目的:探讨反义基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1cDNA)基因转染对氧化应激反应介导的肺纤维化大鼠的影响。方法:取40只大鼠,其中30只建立肺纤维化模型,随机分为模型组、反义组和空载组,其余10只为对照组。术后第1天,反义组和空载组向气管分别注入反义TIMP-1cDNA逆转录病毒载体和空载体,模型组和对照组注入生理盐水溶液。观察4组大鼠一般体征和肺组织病理学变化,对比肺系数、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平及谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值;对比肺组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA和蛋白相对表达量及MMP-9/TIMP-1比值。结果:对照组大鼠一般状态良好,但模型组和空载组状态逐渐变差,反义组有所改善;对照组肺组织正常,模型组和空载组肺纤维化及组织结构损伤严重,反义组较模型组减轻,但仍有炎症细胞。肺系数、肺组织MDA水平、TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA和蛋白相对表达量对照组最低,反义组其次,模型组和空载组最高;肺组织SOD水平、GSH/GSSG对照组最高,反义组其次,模型组和空载组最低;肺组织MMP-9/TIMP-1 mRNA相对表达量及MMP-9/TIMP-1比值组间比较,反义组最高,模型组和空载组其次,对照组最低。上述指标模型组和空载组均相近(P0.05),其余每2组间比较差异均显著(均P0.05)。结论:反义TIMP-1基因转染可减轻氧化应激反应介导的肺纤维化,可能与下调TIMP-1、上调MMP-9 mRNA和蛋白表达有关。     

Sodium hydrosulfide alleviates pulmonary artery collagen remodeling in rats with high pulmonary blood flow

This study aimed to explore the effect of sodium hydrosulfide (NaHS) on pulmonary artery collagen remodeling in rats with high pulmonary blood flow. Thirty-two Sprague-Dawley rats were randomly divided into a sham group, shunt group, sham + NaHS (an H₂S donor) group, and shunt + NaHS group. After 11 weeks of shunting, mean pulmonary artery pressure (MPAP), relative median area (RMA) of pulmonary arteries, H₂S concentration in lung tissues, plasma endothelin-1 (ET-1) levels, and ET-1 mRNA in lung tissues were investigated. Collagen I and collagen III were evaluated by immunohistochemistry. Hydroxyproline assay and Sirius-red staining were performed. Matrix metalloproteinase-13 (MMP-13), tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1), and connective tissue growth factor (CTGF) were evaluated by immunohistochemistry. After 11 weeks of shunting, rats showed a significant pulmonary hypertension and pulmonary artery collagen remodeling in association with a decrease in lung tissue H₂S content. After NaHS treatment for 11 weeks, lung tissue H₂S content was increased, whereas MPAP was attenuated and RMA was reduced. Meanwhile, pulmonary artery collagen I and collagen III protein expressions of intra-acinar pulmonary arteries were inhibited, but MMP-13/TIMP-1 ratio was augmented with a decreased plasma ET-1 content and lung tissue ET-1mRNA and CTGF expressions. The downregulation of H₂S is involved in the development of pulmonary artery collagen remodeling induced by high pulmonary blood flow.     

大鼠肝纤维化形成中基质金属蛋白酶2、9活性变化的病理意义

目的探讨大鼠肝纤维化形成中基质金属蛋白酶2、9(MMP 2、MMP 9)活性变化及其病理意义.方法采用二甲基亚硝胺4周1 2次腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,分别于造模后1、2、3 d、1、2、4、6、8周作为动态观察时相点;MMP-2和MM P-9活性测定采用酶谱法,透射电镜观察肝组织超微结构,免疫组织化学观察肝窦壁Ⅳ型胶原(CⅣ)、层黏连蛋白(LN)和Ⅰ型胶原(C I)表达,weste rn blot方法测定肝组织金属组织蛋白酶抑制剂2(TIMP 2)含量.结果造模后第2、3天,MMP 2、MMP 9活性(灰度值)显著增加(2 dMMP-2正常对照组为54.72±4.56,模型组为70.76±7.63,F=16.27,P＜0.05;MMP-9分别为25.72±4.29和51.76±15.33,F=13.38,P＜0.05).肝窦壁CⅣ(阳性面积比%)在造模第2、3天直至1周显著减少(2 d正常对照组为6.06±1.35,模型组为2.86±0.63,F=69.12,P＜0.05),4周末则显著增加(正常对照组为6.06±1.35,模型组为8.04±1.50,F=14.42,P＜0.05).MMP-9活性与肝窦壁CⅣ表达量呈显著负相关(r=-0.729,P＜0.05);肝窦壁LN沉积4周末达峰值;正常肝窦壁无C I表达,造模4周后肝窦壁C I呈阳性染色; 4周模型大鼠可见完整的基底膜形成;肝纤维化后期TIM P 2表达异常增加.结论早期MMP 9(主要的)、MMP 2活性升高,降解肝窦内皮细胞下正常分布的CⅣ,是肝窦毛细血管化形成的重要因素;后期T I M P-2表达增加,可能是该模型肝纤维化不易自行消退的原因之一.     

Lung remodeling in a porcine model of cyanotic congenital heart defect with decreased pulmonary blood flow

ABSTRACT Background: Hypoperfusion of the pulmonary vascular bed under the condition of congenital cardiac malformations may lead to progressive pulmonary vascular disease. To improve the mechanistic understanding of this disease, we examined the biochemical and morphological changes of the lung in a relevant animal model and provided valuable insights into the underlying mechanisms of the pathogenesis of pulmonary hypotension. Materials and Methods: A model of congenital heart defect with decreased pulmonary blood flow was implemented into 8 piglets (the cyanosis group). Another 8 piglets underwent a sham operation (the control group). Two months postoperatively, lung biopsy specimens were harvested for the measurement of the expression levels of MMP-2, MMP-9, TIMP-1, VEGF, and type I and type III collagens. Moreover, the light-microscopic morphology, morphometry, and ultrastructure of lobes were examined. Results: Compared to the controls, the histopathological changes of the pulmonary vasculature in the cyanosis group showed evident hypoplasia and degeneration. The expression levels of MMP-2, MMP-9, TIMP-1, VEGF, and type I collagen, as well as the microvessel density, in the cyanosis group were significantly lower than those in the control group, whereas the level of type III collagen in the cyanosis group was significantly higher than that in the control group. Conclusions: The observed morphological changes may represent an adaptive reaction to the prolonged decrease of pulmonary blood flow. The underlying mechanism of lung remodeling may be attributed to the changes in the expression of structural proteins and cytokines in the pulmonary extracellular matrix induced by modulating factors.     

二氧化硫通过调控MMP-3/TIMP-1表达改善急性心肌梗死大鼠心肌纤维化

目的探讨气体信号分子二氧化硫(SO2)对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化的作用及其对基质金属蛋白酶(MMP)-3/MMPs抑制剂(TIMP)-1蛋白表达的影响。方法将40只健康雄性成年SD大鼠随机分为正常对照(Control)组、模型[异丙肾上腺素(Iso)]组、SO2干预(Iso+SO2)组、SO2对照(SO2)组。首先构建急性心肌梗死大鼠模型组,Iso组和Iso+SO2组予以持续2 d腹腔注射Iso 50 mg/(kg·d),Control组及SO2组大鼠则腹腔注射等量生理盐水,行心电图及肌钙蛋白检测,确定造模成功后,Iso+SO2组和SO2组大鼠腹腔注射亚硫酸钠(Na 2SO 3)/亚硫酸氢钠(NaHSO 3)溶液(0.54±0.18)mmol/(kg·d),Control组及Iso组则腹腔注射等量生理盐水;持续4 w后,将大鼠处死,通过Masson染色检测心肌胶原沉积情况,用Western印迹对大鼠心肌组织MMP-3和TIMP-1蛋白表达水平变化进行检测。结果与Control组相比,Iso组心肌组织间可见明显胶原纤维沉积,MMP-3蛋白表达显著上升(P<0.05),TIMP-1蛋白表达显著下降(P<0.05)。Iso+SO2组与Iso组相比,大鼠心肌组织可见胶原纤维沉积减少,MMP-3蛋白表达水平下降(P<0.05),TIMP-1表达水平明显上升(P<0.05)。结论SO2可能通过调控MMP-3/TIMP-1改善Iso诱导的急性心肌梗死大鼠的心肌纤维化。