智能治疗仪对兔膝骨关节炎软骨结构和关节液IL-Iβ、IL-6、INF-α、MMP-4、HA含量的影响

目的观察智能治疗仪对兔膝骨关节炎（KOA）软骨组织形态及关节液中IL-lβ、IL-6、TNF-α、MMP-3、HA的影响。方法采用改良Hulth法建立KOA模型,将64只新西兰大白兔按随机数字表法分为空白组、模型组、对照组和治疗组。对照组采用低频电子脉冲治疗仪干预,治疗组采用智能治疗仪干预,空白组和模型组未进行干预,各组分别干预8周和16周后取材。采用光镜和电镜观察软骨组织显微和超微结构,改良番红O-固绿染色观察软骨组织蛋白多糖分布情况,ELISA法测定关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3及HA含量。结果HE染色、改良番红O-固绿染色和Mankin’s评分结果显示:空白组软骨组织边缘平整光滑,4层结构清晰,蛋白多糖分布较均匀;模型组软骨组织边缘毛糙,软骨细胞成簇或减少,细胞排列紊乱,蛋白多糖含量明显减少且分布较不均匀,软骨组织Mankin’s评分与同疗程空白组相比增高（P<0.05,P<0.01）;对照组和治疗组软骨组织边缘稍不规则,软骨细胞排列紊乱,蛋白多糖含量减少,总体表现介于空白组和模型组之间,软骨组织Mankin’s评分与同疗程模型组相比降低（P<0.05,P<0.01）。超微结构结果表明:与空白组相比,模型组软骨细胞形态不规则,细胞器减少或固缩,部分细胞变形、坏死,胶原原纤维减少。与模型组相比,对照组和治疗组软骨细胞形状较稍不规则,细胞器结构较好,胶原原纤维较多。ELISA结果显示:与空白组相比,模型组中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3含量均明显升高（P<0.01）,HA明显降低（P<0.01）;与模型组相比,对照组和治疗组IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3含量均降低（P<0.01）,HA明显升高（P<0.01）;与对照组相比,治疗组IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3和HA含量无明显差异。此外,与疗程8周相比,疗程16周的模型组、对照组和治疗组IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3和HA含量变化存在统计学意义（P<0.01）。结论智能治疗仪能有效改善KOA软骨组织退变,抑制蛋白多糖降解,其作用机制可能与调节IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-4和HA表达有关。     

六味骨痹汤对兔骨关节炎滑膜组织的影响及与软骨修复的相关性研究

【目的】通过观察六味骨痹汤对骨关节炎(OA)模型兔关节液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)含量,滑膜、关节软骨形态及软骨Ⅱ型胶原蛋白表达的影响,探讨其对OA滑膜组织的修复作用及与关节软骨修复的相关性。【方法】将32只新西兰兔随机分为正常组、模型组、六味骨痹汤组和硫酸氨基葡萄糖组,每组8只。采用木瓜蛋白酶关节注射法建立兔OA模型。成功造模后,前2组每日给予10 mL生理盐水灌胃,后2组每日分别对应给予六味骨痹汤(剂量为3.8 g·kg-1·d-1)及硫酸氨基葡萄糖胶囊(剂量为77.0 mg·kg-1·d-1)灌胃。给药6周后,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测各组实验兔关节液中TNF-α、IL-1β、MMP-13含量,按照Krenn标准及改良Mankin’s法分别对滑膜炎症程度及软骨损伤程度进行评分,并评价软骨标本中Ⅱ型胶原蛋白表达情况,最后分析关节滑膜炎症程度与软骨修复的相关性。【结果】六味骨痹汤组和硫酸氨基葡萄糖组关节液中TNF-α、IL-1β、MMP-13含量,滑膜炎症Krenn评分,关节软骨Mankin’s评分均较模型组显著降低(P0.01),Ⅱ型胶原蛋白表达评分显著升高(P0.05);2给药组组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。各组滑膜炎症的缓解与软骨的修复程度成较强的正相关性。【结论】六味骨痹汤对兔OA模型滑膜炎症有缓解作用,并且这种改变与Ⅱ型胶原蛋白高表达及OA软骨的修复程度相关。本研究明确了补肝肾、强筋骨类方药治疗OA滑膜炎的疗效及与软骨修复的相关性,也为中药治疗滑膜炎及软骨损伤性疾病提供数据支持及新的思路。     

薯蓣皂苷对膝骨性关节炎模型大鼠的治疗效果及其机制研究

目的 探索薯蓣皂苷对膝骨性关节炎（KOA）大鼠治疗效果,并探讨其可能机制。方法 采用切断前交叉韧带离断法建立KOA大鼠模型,40只SD大鼠随机分为假手术组、KOA组、薯蓣皂苷低剂量组（50mg/kg）、薯蓣皂苷高剂量组（100mg/kg）,各组10只大鼠,正常组、KOA组给予生理盐水灌胃, 薯蓣皂苷组给与薯蓣皂苷灌胃,每天1次,连续8周。治疗8周,进行疼痛评分、组织病理学观察,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测关节液内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）含量,Westen blot法检测关节软骨组织内信号通路Wnt3a抗体（Wnt3a）、?β-连环蛋白（β-catenin）、 人基质金属蛋白酶13（MMP-13）,糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、Ⅱ型胶原蛋白抗体（CollagenⅡ）蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,KOA组刺激缩足反射潜伏期（TWL）、机械缩足反射阈值（MWT）明显升高（P<0.05）,而薯蓣皂苷组TWL、MWT较KOA组明显降低（P<0.05）;薯蓣皂苷组大鼠膝关节大体观察及组织病理改变较KOA组明显改善;KOA组关节液内炎症因子水平、关节软骨内Wnt3a、β-catenin、MMP-13蛋白表达水平较假手术组明显升高,GSK-3β、CollagenⅡ蛋白表达水平明显降低,而薯蓣皂苷治疗后,炎症因子水平及Wnt3a、β-catenin、MMP-1蛋白表达水平较KOA组明显降低,GSK-3β、CollagenⅡ蛋白表达水平明显升高,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论 薯蓣皂苷能减轻膝骨性关节炎疼痛和软骨退行性改变,抑制关节腔内炎症反应,维持软骨代谢平衡,可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路有关。     

膝三针对膝骨关节炎模型大鼠软骨形态学及行为学改变的影响

目的 探讨膝三针对膝骨关节炎（KOA）模型大鼠软骨形态学及行为学改变的影响。方法 28只雄性SPF级SD大鼠（3～4周龄,体重180～220 g）采用随机数字表法分为空白组、模型组各8只,针刺组、西药组各6只。除空白组外均采用前交叉韧带横断术建立KOA大鼠模型。造模5周后,针刺组取左膝关节膝三针进行针刺治疗,1次/d,连续5 d休息2 d,治疗3周。西药组在患膝外搽双氯芬酸二乙胺乳胶剂。空白组和模型组不予干预。观察比较各组大鼠X线片、Lequesne MG评分、Mankin’s评分、软骨和HE染色后软骨形态学改变。结果 与空白组比较,模型组大鼠左膝关节面间隙狭窄、关节面磨损及骨赘生成明显,关节软骨表层缺损明显,细胞数量减少,分布紊乱,Lequesne MG、Mankin’s评分升高（P<0.05）;与模型组比较,针刺组治疗后Lequesne MG、Mankin’s评分降低（P<0.05）,软骨表面微糙有光泽,细胞数量增多排列分明有序;模型组、针刺组、西药组治疗后Lequesne MG评分低于治疗前（P<0.05）。结论 膝三针能改善KOA大鼠软骨形态学与行为学指标,治...     

基于以方测证的膝骨关节炎风寒湿痹证模型大鼠构建研究

目的 基于“以方测证”思维,模拟人膝骨关节炎（knee osteoarthritis, KOA）风寒湿痹证的发病机制,以期建立稳定的KOA病证结合动物模型。方法 将50只大鼠随机分为空白（A）组、单纯风寒湿刺激（B）组、单纯KOA造模（C）组、KOA造模+风寒湿刺激（D）组、乌头汤灌胃（E）组,共5组,每组10只。采用膝关节腔注射木瓜蛋白酶复合风寒湿外环境造模,基于“以方测证”思维运用乌头汤进行验证,灌胃结束后观察大鼠一般情况、膝关节软骨HE染色及Mankin评分、膝关节Micro-CT检测、血清肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-17A(interleukin-17A, IL-17A)浓度。结果Mankin评分显示,A、B组得分为0～1分,属于正常软骨;C、E组为4～7分,属KOA早中期;D组为7～11分,属于KOA中晚期。C、D、E组Mankin评分及TNF-α、IL-1β、IL-17A浓度较A组及B组均明显升高（P<0.05）,C、E组Mankin评分...     

艾拉莫德对兔膝骨性关节炎炎性反应与氧化损伤的影响

目的 观察艾拉莫德对膝骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)模型兔氧化应激相关因子以及炎性因子表达的影响，进一步探讨艾拉莫德治疗KOA的机制。方法 将20只新西兰大白兔随机分为空白组、手术组、双醋瑞因组和艾拉莫德组，每组5只。采用手术诱导法制备兔KOA模型，手术组、双醋瑞因组和艾拉莫德组于造模成功后分别给予蒸馏水、双醋瑞因、艾拉莫德灌胃，连续12周，给药首日进行Lequesne MG评分，此后每月1次，持续3个月。治疗结束后，拍摄膝关节X线片观察关节变化情况，苏木素-伊红染色观察软骨组织变化，通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)测定各组兔血清中炎症因子水平[白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)、IL-1β、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)]、氧化应激参数水平[丙二醛(malondialdehyde, MDA)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸...     

温针灸、谢氏点穴及其联合治疗对高脂饮食诱导的膝骨关节炎大鼠的作用机制研究

目的 探讨温针灸、谢氏点穴及其联合治疗对肥胖大鼠膝骨关节炎的治疗效果与作用机制。〖JP1〗方法 采用高脂饮食诱导肥胖大鼠膝骨关节炎,检测温针灸、谢氏点穴以及温针灸+谢氏点穴治疗后肥胖大鼠体质量,血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（total triglyceride,TG）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein,HDL）与低密度脂蛋白（low-density lipoprotein,LDL）,膝关节病变,关节滑液中白细胞介素1β（interleukin 1β, IL-1β）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）、单核细胞趋化蛋白1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的含量以及膝关节软骨层中基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinases-1,MMP-1）和MMP-13表达的水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠体质量,血清TC、TG、LDL水平,膝关节Mankin得分,关节滑液中IL-1β、TNF-α、MCP-1、VEGF水平及膝关节软骨层中MMP-1与MMP-13的表达水平均显著升高（P<0.05）,血清HDL水平显著降低（P＜0.05）。与模型组比较,各治疗组大鼠血清TC、TG水平,膝关节Mankin得分,关节滑液中MCP-1、VEGF水平及膝关节软骨层中MMP-13表达水平均显著下降（P<0.05）。谢氏点穴疗法、温针灸+谢氏点穴疗法显著升高大鼠血清HDL水平,降低关节滑液中TNF-α含量和膝关节软骨层中MMP-1表达水平（P<0.05）;温针灸+谢氏点穴疗法显著降低大鼠血清LDL水平、关节滑液中IL-1β含量（P<0.05）;温针灸+谢氏点穴疗法降低大鼠血清TC、TG、LDL水平,膝关节Mankin得分及膝关节软骨层中MMP-1、MMP-13表达水平显著优于温针灸治疗组和谢氏点穴治疗组（P<0.05）。结论 温针灸联合谢氏点穴能够调节脂质代谢,减少关节滑液中VEGF与MCP-1的分泌,从而缓解高脂饮食诱导的膝骨关节炎。     

电针法对兔膝关节炎模型治疗效果及机制研究

目的 观察电针法对兔膝骨关节炎(KOA)模型治疗效果，探讨电针法治疗兔KOA的机制。方法 将18只健康新西兰兔随机分为空白对照组、模型对照组、电针法组，每组6只。空白对照组正常饲养，模型对照组、电针法组采用改良韦德曼左后肢伸直位固定制动法固定6周制作KOA模型，造模完成1周后给予电针法组电针治疗4周，每周5次，每次20 min。用奎森(Lequesne)功能指数评价兔左膝关节功能评分；酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清及关节液白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平；亚硝酸盐比色(Griess)法检测血清及关节液一氧化氮(NO)水平；苏木精-伊红(HE)染色法观察膝关节软骨组织形态学改变，曼金(Mankin)评分法评价软骨退变程度；免疫荧光技术观察膝关节软骨组织p-P38MAPK阳性细胞表达。结果 与空白对照组比较，模型对照组Lequesne评分增高(P<0.05);血清及关节液中IL-1β、IL-6、NO水平升高(P<0.05);软骨面欠光滑，Mankin评分升高(P<0.05);免疫荧光染色阳性细胞增多(P<0.05)。与模型对照组比较，电针法组Lequ...     

参麦注射液关节腔注射对兔膝骨关节炎IL-1β、IL-6、TNF-α表达的影响

目的 研究参麦注射液对兔膝骨关节炎模型的干预作用,并探讨其作用机理.方法 行前交叉韧带切除法(ACLT)复制兔膝骨关节炎模型,予膝关节腔注射参麦注射液、透明质酸钠4周后,取膝关节液及关节软骨组织,用ELISA法检测关节液白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,RT-qPCR检测关节软骨组织IL-1β、IL-6、TNF-α基因表达.结果 与正常对照组比较,模型组关节液IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均明显升高(P＜0.01),软骨组织IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达均明显升高(P＜0.01);与模型组比较,参麦注射液组和透明质酸钠组关节液IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著降低(P＜0.01),软骨组织IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA均显著降低(P＜0.05).参麦注射液组与透明质酸钠组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 参麦注射液对兔膝关节软骨有一定的保护作用,其作用机制与下调关节液IL-1β、IL-6、TNF-α水平,降低软骨组织IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达有关.     

改良后Hulth法和Ⅱ型胶原酶注射法建立兔膝骨关节炎模型的比较研究

目的 对比分析兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)模型两种常用造模方法的差异,为不同类型膝骨关节炎动物模型的选择提供参考。方法 将9只健康新西兰大白兔随机分为3组：空白组、改良后Hulth组、胶原酶组。改良后Hulth组和胶原酶组分别给予改良后Hulth法、关节腔内注射胶原酶干预,1周后每日促使其活动,6周后进行Lequesne MG评分、X-ray、Micro-CT、Pelletier评分、Mankin评分、ELISA检测,观察膝关节大体及病理改变。结果 与空白组相比,两种造模方法的兔膝关节软骨表面均出现缺损;病理结果显示软骨层出现裂隙,番红O染色减退,潮线扭曲并伴有血管通过;ELISA结果显示空白组、改良后Hulth组和胶原酶组血清内TNF-α含量分别为(624.99±17.82),(1140.56±129.81)和(1480.69±492.08)pg/mL,血清内IL-1β含量分别为(30.23±0.25),(46.67±0.71)和(46.82±1.04)pg/mL,改良后Hulth组和胶原酶组与空白组相比,差异均具有统计学意义(均P<0.05...     

栀子对兔膝骨关节炎模型关节软骨病理改变及IL-1 β表达的影响

目的:观察栀子浸膏对兔膝骨关节炎模型中关节软骨病理改变及关节液、血清中IL-1β表达的影响。方法:24只大白兔随机分为给药组、模型组和对照组（n=8）。给药组、模型组行Hulth法复制骨关节炎模型,术后第5周,给药组以栀子浸膏600 mg/kg灌胃,模型组与对照组给予等量生理盐水灌胃,给药3周后处死动物,分别对软骨肉眼下行Pelletier评分及光镜下行Mankin评分,取股骨内侧髁关节软骨组织块行电镜、H-E染色观察软骨细胞形态及检测关节液与血清中IL-1β的含量。结果:栀子浸膏能延缓骨关节炎关节软骨病理损伤,给药组关节液与血清中IL-1β的含量明显低于模型组（P<0.05或P<0.01）。结论:栀子浸膏可能通过降低骨关节炎模型关节液与血清炎症因子IL-1β的表达发挥保护关节软骨的作用,从而延缓骨关节炎病程的进展。     

金骨莲胶囊对兔膝骨关节炎软骨保护作用的研究

目的 研究中药金骨莲胶囊对兔膝骨关节炎(OA)关节软骨中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响,探讨其可能作用机制.方法 40只家兔分为4组:空白对照组(10只)、模型对照组(10只)、金骨莲胶囊组(10只,74.4 mg·kg-1·d-1)、氨基葡萄糖组(10只,150mg·kg-1·d-1).除空白对照组外其余均按改良Hulth法复制OA模型,术后当天开始药物灌胃,对照组仅灌服等量生理盐水,1次/天,连用8周.8周后处死家兔取右膝股骨髁及胫骨平台大体观察.采用Mankin评分评价关节软骨退变情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测股骨内侧髁负重区关节软骨IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA相对表达量.结果 空白对照组、金骨莲胶囊组、氨基葡萄糖组和模型对照组Mankin评分分别为(1.380±0.183)、(2.580±0.464)、(5.250±0.143)、(10.380±0.183)分,Mankin评分依次升高,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).金骨莲胶囊组和氨基葡萄糖组3种炎性因子mRNA表达量均明显低于模型对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);中药金骨莲胶囊在下调IL-1βmRNA方面与氨基葡萄糖作用相当,差异无统计学意义(P=0.271).金骨莲胶囊在降低IL-6和TNF-α mRNA方面优于氨基葡萄糖作用,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 中药金骨莲胶囊可不同程度下调关节软骨中IL-1β、IL-6和TNF-α炎症因子的表达,使软骨退变的部分因素得到控制,从而起到保护关节软骨的作用.     

兔骨关节炎模型血清炎症指标的动态观察

目的:通过观察兔骨性关节炎(osteoarthritis,OA)模型血清中相关炎症指标的连续动态改变,探讨其在反映OA病程进展中的价值。方法:70只雄性新西兰大白兔随机分成OA组和对照组,每组35只。OA组实验兔左膝关节腔注射2%浓度的木瓜蛋白酶0.5 ml,建立OA模型;对照组左膝关节腔注射等量无菌生理盐水。在建模后第1、2、4、6、8、10、12周分别取实验兔动脉血检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,取兔膝关节标本行病理观察并进行Mankin’s评分。结果:OA组出现关节软骨变薄、基质分解破坏、滑膜增生等炎症及退行性改变,并随观察时间的延长而进一步发展;血清IL-1β、TNF-α和IL-6水平明显升高,与对照组相比有显著性差异,结果同Mankin’s评分一致。结论:血清IL-1β、TNF-α和IL-6水平与OA病变程度平行,可用来提示OA临床病情发展。     

独活寄生汤对兔膝骨性关节炎关节液中白介素-1β、肿瘤坏死因子-α和Ⅱ型胶原的影响

目的观察独活寄生汤对兔膝骨性关节炎关节液中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)表达水平的影响,探讨其治疗骨性关节炎的机制。方法将40只实验用新西兰大白兔分五组,即空白对照组、模型组、独活寄生汤低剂量组、高剂量组和玻璃酸钠组,每组各8只,采用改良伸直位石膏固定兔膝关节造模,造模后立即干预,独活寄生汤组浓缩液给药,每日1次;对照组关节内注射玻璃酸钠注射液,0.5m L/关节,1周1次,造模8周,采用双抗体夹心酶免疫吸附法(ELISA)和免疫组化法,分别测定兔膝关节液中的IL-1β、TNF-α表达水平以及Collagen II的表达水平。结果兔膝骨性关节炎造模后,兔的Mankin评分明显升高(P0.01),独活寄生汤和玻璃酸钠可降低Mankin评分(P0.01),且两者的比较差异无显著意义(P0.05)。结论独活寄生汤可以通过降低关节液中IL-1β、TNF-α的水平以及保护Collagen II以对兔膝骨性关节炎起到防治作用;     

透骨消痛胶囊对KOA大鼠关节软骨uPA系统相关调节因子的影响

目的观察透骨消痛胶囊对膝骨性关节炎(KOA)大鼠软骨中尿激酶型纤溶酶原激活剂(u PA)系统相关调节因子基质金属蛋白酶3(MMP-3)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨透骨消痛胶囊治疗骨性关节炎的作用机制。方法清洁级SD大鼠144只,分为空白组(24只)与造模组(120只)。造模组采用关节腔注射4%木瓜蛋白酶复制KOA模型,造模成功后随机分为模型组、壮骨关节丸组和透骨消痛胶囊低、中、高剂量组,空白组与模型组分别给予相应剂量的生理盐水灌胃,壮骨关节丸组和透骨消痛胶囊低、中、高剂量组分别给予相应药物灌胃。免疫组化反应观察MMP-3、IL-1β和TNF-α阳性表达;Western blot检测MMP-3、IL-1β和TNF-α蛋白表达情况。结果免疫组化反应显示,透骨消痛胶囊组和壮骨关节丸组MMP-3、IL-1β和TNF-α阳性率均明显降低,透骨消痛胶囊中剂量组和壮骨关节丸组两组间比较无显著性差异;Western blot检测结果与免疫组化具有相同的趋势。结论透骨消痛胶囊治疗KOA的部分作用机制是有效抑制u PA系统相关调节因子MMP-3、IL-1β和TNF-α的表达。     

肾气丸对膝骨性关节炎模型大鼠炎症因子和软骨基质的影响

【目的】探讨肾气丸对膝骨性关节炎的治疗作用和机制。【方法】采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶方法建立膝骨性关节炎大鼠模型,将造模成功的27只大鼠随机分为模型组、中药组和西药组,每组各9只,另取正常大鼠10只为正常组。中药组给予肾气丸水煎剂11.55 g·kg-1·d-1灌胃,西药组给予氨基葡萄糖生理盐水溶液157.5 g·kg-1·d-1灌胃,正常组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃,灌胃8周。8周后测量大鼠的膝关节宽度、膝关节被动活动度、滑膜厚度、压痛阈值、热痛阈值,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测关节液中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素9(IL-9)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Ⅱ型胶原、雌二醇(E2)含量。【结果】与正常组比较,模型组大鼠的膝关节宽度和滑膜厚度增加,膝关节被动活动度、压痛阈值、热痛阈值减小,关节液中的TNF-α、IL-1β、IL-9、MMP-3、MMP-9含量升高,Ⅱ型胶原、E2含量降低(均P 0.05);与模型组比较,中药组、西药组大鼠的膝关节宽度和滑膜厚度减小(P 0.05),膝关节被动活动度、压痛阈值、热痛阈值增加,关节液中的TNF-α、IL-1β、IL-9、MMP-3、MMP-9含量降低,Ⅱ型胶原、E2含量升高(均P 0.05),且2个治疗组比较,差异无统计学意义(P 0.05)。【结论】肾气丸可以抑制膝骨性关节炎大鼠关节内炎症反应,抑制关节软骨降解,修复软骨损伤,改善膝关节功能。     

苍黄散外敷治疗兔早期膝骨关节炎的实验研究

目的观察平乐郭氏正骨苍黄散外敷治疗兔早期膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)滑膜组织的病理改变,以及软骨组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor, TNF-α)、金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase,MMP-13)的水平变化,探讨经验方苍黄散治疗早期KOA的作用机制。方法将30只新西兰大白兔随机分为3组:平乐正骨苍黄散组(简称经验方组)、扶他林组、模型组,采用木瓜蛋白酶和半胱氨酸混合液兔关节腔内注射完成动物早期KOA造模,经验方组和扶他林组兔分别采用对应药物外敷治疗,治疗时间为20 d。治疗结束后记录每组兔膝关节局部皮肤温度,HE染色法观察关节滑膜组织,用ELISA和Westernblot方法检测软骨组织中IL-1β、TNF-α、MMP13含量及蛋白的表达量。结果治疗结束后,经验方组和扶他林组皮温改善程度优于模型组,差异具有统计学意义(P0.05);病理学观察发现:模型组膝关节滑膜大量增生,并且可见血管增生明显,其他两组中膝关节滑膜组织中血管增生较少,少量炎性细胞浸润;模型组滑膜组织及软骨组织中IL-1β、TNF-α、MMP-13含量及蛋白表达量明显高于另外两组,差异明显(P0.05),经验方组与扶他林组之间IL-1β、TNF-α、MMP-13含量及蛋白表达量,差异无统计学意义(P0.05)。结论平乐郭氏正骨经验方苍黄散外敷能缓解兔早期膝骨关节模型皮温高的症状,同时能降低软骨组织中IL-1β、TNF-α、MMP-13含量,此结果为临床运用提供了实验依据。     

膝关节骨关节炎软骨中YKL-40、IL-1β的表达及相关性探讨

目的 研究膝关节骨关节炎(KOA)病患软骨中甲壳质酶(YKL 40)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平,并分析两者相关性.方法 选择该院骨科住院就诊的符合KOA诊断的病患38例,记为观察组.再选择同期因膝关节外伤行膝关节镜检治疗或膝关节骨折内固定手术患者关节软骨30例,记为对照组.根据KOA放射线及关节镜下分级标准,将观察组分为轻度组16例、中度组11例及重度组10例.对比所有病患的YKL 40、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,同时进行Mankin评分、细胞死亡率的对比.结果 观察组YKL-40、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平及Mankin评分、细胞死亡率均显著高于对照组,并且观察组中轻度、中度、重度的YKL-40等指标水平呈上升水平(均P＜0.05).并且YKL-40表达水平与IL-1β水平存在显著的正相关(r=0.738,P=0.000).此外,YKL-40表达水平还与IL-6(r=0.819,P=0.000)、TNF-α(r=0.871,P=0.000)表达水平及Mankin评分(r=0.832,P=0.000)、细胞死亡率存(r=0.832,P=0.000)在显著的正相关.结论 KOA病患中YKL-40、IL-1β呈高表达状态,并且两者呈现显著的正相关.     

依托咪酯调节MAPK/ERK信号通路对骨关节炎大鼠软骨损伤的影响

目的:探究依托咪酯(ET)对骨关节炎(OA)大鼠软骨损伤的影响以及对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的调节作用。方法:将SPF级SD雄性大鼠72只,随机分6组：假手术组、模型组、阳性组(15mg/kg的双氯芬酸钠)以及ET低(1.5mg/kg)、中(3mg/kg)、高剂量(6mg/kg)组。评估各组大鼠关节水肿和承重不对称情况;检测各组大鼠压痛阈值和热痛阈值;HE观察各组大鼠软骨病理损伤情况并进行Mankin评分;酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)以及软骨寡聚基质蛋白(COMP)的水平;Western blot检验软骨组织中基质蛋白酶-13(MMP-13)及通路蛋白ERK及其磷酸化p-ERK蛋白的表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠右后肢膝关节水肿和关节承重不对称性增大,软骨组织缺损且软骨层变薄,软骨细胞数量变少,血清中TNF-α、IL-1β、COMP水平升高,软骨MMP-13、p-ERK1/2蛋白表达及p-ERK1/2/ERK1/2比例升高(P<0.05)。与模型组相比,阳性...     

膝骨性关节发病过程中细胞因子的变化及降钙素的影响

目的探讨膝骨性关节发病过程中细胞因子的变化及降钙素(CT)的影响。方法将36只健康大耳白兔随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)、CT治疗组(C组),B、C两组采用改良Hulth法复制膝骨性关节炎模型,A组除切开皮肤和关节腔外,不做其他处理,从术后第6周开始C组每天皮下注射CT 5 U/kg,A、B组给予等量生理盐水皮下注射,连续注射20 d后处死动物。分别观察3组动物膝关节液中白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及关节软骨组织病理形态和转化生长因子-β(TGF-β)、TNF-α表达的变化以及CT对上述指标的影响。结果与A组比较,B组股骨髁软骨退变评分和Mankin’s评分明显升高,IL-1、IL-6、TNF-α表达明显增高,而TGF-β表达明显减少(P<0.05);与B组比较,C组股骨髁软骨退变评分和Man-kin’s评分明显降低,软骨损伤明显减轻,IL-1、IL-6、TNF-α表达也明显降低,而TGF-β表达则明显增高。结论 CT可以明显改善兔膝骨性关节炎的软骨损伤,此作用可能与细胞因子的改变有关。