蝎毒多肽增强5-氟尿嘧啶对H22肝癌抑制作用的机制研究

目的 探讨蝎毒多肽增强5-氟尿嘧啶（5-Fu）对肝癌H₂₂抑制作用的机制。方法 以接种H₂₂肝癌小鼠腹水方法建立小鼠荷瘤模型,在接种后第7天将荷瘤小鼠随机分为模型组、蝎毒多肽（20 mg/kg）组、5-Fu（15 mg/kg）组、低剂量蝎毒多肽（5 mg/kg）＋5-Fu组、高剂量蝎毒多肽（20 mg/kg）＋5-Fu组,每组10只,连续给药21 d。绘制肿瘤体积增长曲线并计算抑瘤率;CD34标记肿瘤微血管;免疫组织化学法检测核因子-κB（NF-κB）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达。结果 与模型组相比,联合给药组H₂₂肝癌移植瘤的生长受到明显抑制（P＜0.01）,微血管密度（MVD）及NF-κB、MMP-9、VEGF蛋白表达均明显降低（P＜0.01）;与5-Fu组相比,高剂量蝎毒多肽＋5-Fu组的MVD及NF-κB、MMP-9、VEGF蛋白表达也显著降低（P＜0.01）,而低剂量蝎毒多肽＋5-Fu组则无显著改变。结论 蝎毒多肽可增加5-Fu对肿瘤组织的抑制作用,其机制可能与抑制H₂₂肝癌组织NF-κB通路及MMP-9、VEGF的表达,从而抑制新生血管形成有关。     

六味地黄汤辅助环磷酰胺对荷H22小鼠肝癌组织VEGF及VEGFR2蛋白表达的影响

目的:观察六味地黄汤辅助环磷酰胺对荷H22肝癌小鼠肝癌组织VEGF及VEGFR2蛋白表达的影响。方法:雄性昆明小鼠40只,随机分为模型组、化疗组、六味组、六味化疗联合组,每组10只。腋下注射H22细胞建立H22荷瘤模型,六味组造模前两周开始用药[剂量为22 g/(kg·d)],化疗组[剂量为50mg/(kg·d),隔日1次]及六味化疗组造模后用药,造模14 d后处死小鼠称重,取瘤组织称重计算抑瘤率,取脾组织称重计算脾指数,免疫组化检测VEGF与VEGFR2蛋白的表达。结果:化疗组与六味化疗联合组有良好的抑瘤作用;六味组脾指数增大,与模型组比较差异具有统计学意义(P0.05),六味化疗联合组VEGF蛋白表达明显减少,与化疗组比较,差异有统计学意义(P0.05),与六味组相比较,差异有统计学意义(P0.05);六味化疗联合组VEGFR2蛋白表达减少,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);与六味组比较,有显著性差异(P0.01)。结论:六味地黄汤辅助环磷酰胺可抑制荷H22肝癌小鼠组织VEGF与VEGFR2蛋白表达,减少肝癌组织血管增殖,从而发挥辅助化疗作用。     

姜黄素对H22肝癌、S180肉瘤小鼠的抑瘤作用及机制研究

目的探讨姜黄素对H22肝癌、S180肉瘤小鼠的抑瘤作用及机制,为H22肝癌临床治疗提供实验依据。方法采用ICR小鼠接种H22瘤株、S180肉瘤株分别建立肿瘤模型,采用姜黄素进行干预,明确其抑瘤作用,分阳性对照组(CTX化疗组)、阴性对照组(生理盐水组)、姜黄素低剂量组、姜黄素中剂量组、姜黄素高剂量组,每组12只。对比分析治疗组各组用药前后体重、抑瘤率的差异;动物处死后,取肿瘤组织,采用荧光定量RT-PCR测定肿瘤组织中TGF-β1RⅡ、NF-κB、CyclinD1、VEGF表达。结果姜黄素对肝癌和肉瘤小鼠肿瘤生长抑制率为36.04%和41.27%,有明显的抑瘤作用。与模型组比较,给药组肿瘤组织NF-κB、CyclinD1、VEGF的表达水平下调,TGF-β1RⅡ的表达水平显著升高。结论姜黄素通过上调肿瘤组织TGF-β1RⅡ,下调NF-κB、CyclinD1、VEGF表达水平抑制肿瘤细胞增殖,抗血管新生,实现抑制肿瘤作用。     

维生素D3对酒精性肝损伤小鼠的保护作用

目的 探讨维生素D₃对酒精性肝损伤小鼠的保护作用。方法 40只小鼠随机分为4组：正常对照组(Control组)、单纯维生素D₃组(VitD₃组)、酒精组(EtOH组)及酒精+维生素D₃组(EtOH+VitD₃组)。采用Lieber-DeCarli酒精液体饲料喂养小鼠制备酒精性肝损伤模型,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平以及肝指数,HE染色观察肝脏病理形态学改变,qRT-PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β的mRNA相对表达水平,Western blot检测肝脏NF-κB p65和NF-κB p50蛋白表达。结果 与Control组比较,EtOH组小鼠血清ALT、AST活力、肝指数及肝组织TNF-α、TGF-β、IL-6和IL-1β mRNA水平显著升高,EtOH组肝细胞索排列紊乱,肝小叶界限不清,肝细胞出现明显炎性细胞浸润和脂肪空泡,NF-κB p65和NF-κB p50...     

瑞舒伐他汀调控Sirt1/NF-κB信号通路干预阿霉素损伤小鼠肝脏的研究

目的 探讨Sirt1/NF-κB信号通路在阿霉素诱导小鼠肝脏损伤中的作用及瑞舒伐他汀对该通路的干预效果。 方法 30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组。干预组预先给予瑞舒伐他汀悬液10 mg/(kg·d) 5 d,与模型组分别给予阿霉素15 mg/kg建立肝脏损伤模型,干预组继续瑞舒伐他汀干预5 d。末次灌胃24 h后处死全部小鼠,半自动生化仪检测血清血脂、肝功能;同时检测肝组织匀浆SOD、MDA含量;HE观察各组小鼠肝脏细胞形态变化;免疫组化法检测肝脏Sirt1、NF-κB的表达。 结果 与对照组相比,模型组血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST明显升高(P＜0.05),HDL-C显著降低(P＜0.05),匀浆MDA增多,SOD降低(P＜0.05),肝细胞肿胀,血管拥挤,淋巴细胞浸润,Sirt1表达减少,NF-κB增加(P＜0.05)。干预组较模型组血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST明显降低(P＜0.05),HDL-C明显升高(P＜0.05),SOD增多,MDA降低(P＜0.05),肝细胞结构完整、炎细胞减少,Sirt1表达增加,NF-κB降低(P＜0.05)。 结论 瑞舒伐他汀通过调控Sirt1/NF-κB表达,有效保护阿霉素诱导的肝脏毒性损伤。      

顺铂联合氟西汀对肺癌伴抑郁小鼠干预的研究

【摘要】 目的 通过顺铂联合氟西汀对肺癌伴抑郁小鼠进行干预，检测相关指标，观察氟西汀能否通过抗抑郁作用对肿瘤起到抑制作用。方法 通过社交失败应激及皮下接种Lewis肺癌细胞株建立小鼠肺癌伴抑郁模型；ELISA方法检测血清皮质醇及IL-6 水平；RT-PCR方法检测海马组织中脑源性神经营养因子（brain derived neurothropic factor，BDNF）mRNA表达；免疫组织化学方法检测肿瘤组织核转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）蛋白表达。结果 双药组IL-6水平与模型组相比明显降低（P<0.05）；双药组皮质醇水平、海马BDNFmRNA表达显著降低（p<0.05）；双药组肿瘤重量、肿瘤组织中NF-κB及VEGF蛋白表达水平与单药组相比无明显差异（p>0.05）。结论 氟西汀能够降低肺癌伴抑郁小鼠血清皮质醇水平并促进海马组织BDNFmRNA表达而发挥抗抑郁作用，但并未发现其抗抑郁效果能够抑制肿瘤进展。     

“嗅三针”对帕金森病小鼠黑质高迁移率组蛋白B1及核因子-κB表达的影响

目的 观察“嗅三针”对帕金森病（Parkinsons disease,PD）小鼠黑质高迁移率组蛋白1（high mobility group box 1,HMGB1）及核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）蛋白表达水平的影响,探讨“嗅三针”改善PD的作用机制。方法 采用随机数字表法将健康雄性C57BL/6小鼠分为空白组、模型组、电针组、左旋多巴组,每组10只;除空白组外,其余每组采用脂多糖经鼻滴注制作小鼠PD模型。先采用Morris水迷宫试验对各组小鼠进行行为学检测,再采用免疫组织化学法检测小鼠黑质细胞中HMGB1的表达,蛋白免疫印迹法检测 HMGB1、NF-κB蛋白在黑质中的表达水平。结果 模型组小鼠抵达终点时间多于空白组（P<0.05）;电针组到达终点时间较模型组明显减少（P<0.05）。与空白组比较,模型组黑质中HMGB1阳性细胞数升高（P<0.05）,HMGB1、NF-κB蛋白表达水平升高（P＜0.05）;与模型组比较,电针组黑质中HMGB1阳性细胞数降低（P<0.05）,电针组黑质中HMGB1表达水平下降（P＜0.05）。结论 “嗅三针”可改善PD小鼠空间记忆能力,抑制PD小鼠神经炎症,这可能与其抑制黑质区HMGB1表达有关。     

卵巢癌中核因子-κB与血管内皮生长因子及IL-2的表达

目的通过测定卵巢癌组织核因子-κB（NF-κB）与血管内皮生长因子（VEGF）及IL-2的表达,探讨NF-κB通道的激活及其与肿瘤血管形成的关系。方法收集本院2008年~2014年卵巢癌患者47例,Ⅰ期组12例,Ⅱ期组20例,Ⅲ/Ⅳ期组15例,选择正常卵巢20例为对照组。采用免疫组织化学方法（SABC）测定NF-κB、VEGF和IL-2的表达,并用SPSS 19.0软件对数据进行统计学分析。结果 1）对照组可见少量NF-κB、VEGF和IL-2蛋白的表达;与对照组比较,Ⅰ期组、Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB、VEGF和IL-2表达均增多（P〈0.05）;与Ⅰ期组比较,Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB、VEGF表达均增多（P〈0.05）,IL-2表达均减少（P〈0.05）;与Ⅱ期组比较,Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB、VEGF表达增多（P〈0.05）,IL-2表达均减少（P〈0.05）。2）Ⅰ期组、Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB与VEGF呈正相关（P〈0.05）,与IL-2呈负相关（P〈0.05）。结论卵巢癌相关蛋白NF-κB可通过上调VEGF的表达及下调IL-2的表达共同调节肿瘤血管的生成。     

灵芝酸A对D-氨基半乳糖/脂多糖诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的?研究灵芝酸A对D-氨基半乳糖(D-GaIN)/脂多糖(LPS)诱导小鼠肝损伤的保护作用及其相关机制。方法?60只C57BL/6小鼠随机分为4组:正常组、模型组、灵芝酸A低剂量组（20?mg/kg）、灵芝酸A高剂量组（40?mg/kg）。除正常组和模型组给予等体积蒸馏水外,其余各组每天灌胃给予相应剂量药物,共7?d。末次给药4?h后,腹腔注射D-GalN(700?mg/kg)与LPS(1?mg/kg),正常组腹腔注射等体积溶媒。24?h后取血、肝脏。ELISA法检测血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性以及白介素（IL-6、IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,各组小鼠肝脏做HE染色,并采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏组织中NLRP3/NF-κB蛋白表达。结果?灵芝酸A（20、40?mg/kg）能显著降低D-GaIN/LPS诱导的肝损伤小鼠血清ALT、AST活性及IL-6、IL-1β和TNF-α含量;能显著改善小鼠肝组织的病理学改变;显著降低肝脏NLRP3/NF-κB蛋白表达。结论?灵芝酸A对D-GaIN/LPS诱导的小鼠肝损伤具有保护作用,这种效应可能与调控NLRP3/NF-κB信号通路有关。      

羟基红花黄色素A对小鼠肝癌移植瘤NF-κB信号通路的影响

目的 研究羟基红花黄色素A(HSYA)对小鼠H22肝癌移植瘤NF-κB信号通路的影响.方法 建立H22移植性肝癌小鼠模型50只,随机分为HSYA高剂量组(4.5 mg/kg)、HSYA中剂量组(2.25 mg/kg)、HSYA低剂量组(1.125 mg/kg)、阳性对照组(50 mg/kg)和生理盐水对照组,给药14 d.免疫印迹检测核转录因子-κB(NF-κB)p65、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκB-α)及NF-κB抑制蛋白(IκB-α)的水平.结果 HSYA高、中、低剂量组能够下调细胞核p65蛋白的表达,抑制活化p65核移位,抑制IκB-α的磷酸化和胞质内IκB-α的降解即降低NF-κB的转录活性,尤以中剂量组效果最显著.结论 HSYA能抑制小鼠肝癌移植瘤NF-κB的转录活性.     

重组腺病毒介导脂联素基因对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用机制

【摘要】 目的 研究腺病毒介导的脂联素（APN）过表达对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化（AS）的抑制作用和对NF-κB信号通路的影响。方法 将12周龄雄性ApoE-/-小鼠120只分为空载腺病毒对照组和脂联素干预组，每组60只。两组小鼠均给予高脂饮食诱发AS。在3个不同时间点（0天、4周、8周）处死受试小鼠，取全血和主动脉血管组织。用全自动生化仪检测血脂指标；ELISA法测定血清APN浓度；油红O和HE染色法检测小鼠主动脉血管组织的病理学变化；Masson染色法检测进展性斑块区的胶原含量和纤维帽厚度变化；免疫荧光法测定小鼠主动脉血管APN和NF-κB p65蛋白的表达；免疫印迹法检测主动脉血管APN、NF-κB p65核蛋白和炎症因子的表达。结果 APN过表达抑制了ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成。与对照组相比，脂联素干预组的动脉粥样硬化病理损伤面积明显减少（P<0.01），动脉粥样硬化损伤程度明显降低（P<0.001），总体油红O染色测定血管表面损伤百分比，4周时为27.78?.64 vs 33.02?.18 (%)；8周时为31.58?.87 vs 52.16?.79 (%)。脂联素减缓了高脂饮食导致的小鼠血清中TC（P<0.001）、TG（P<0.001）、LDL-C（P<0.001）的浓度增加，使血脂水平趋向正常化，减缓了小鼠的体重增长（P<0.05）。随着血清脂联素浓度增加，可以阻遏NF-κB通路的激活，抑制NF-κB p65核蛋白和炎症因子的表达。结论 脂联素过表达对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化具有显著的保护作用，抑制了NF-κB p65核蛋白表达，说明脂联素通过抑制NF-κB通路激活来减轻AS的炎症反应。     

刺五加多糖对自身免疫性肝炎小鼠肝损伤的改善作用及机制研究

[目的]研究刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)对自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠肝损伤的改善作用,并探讨相关分子机制。[方法]从120只C57BL/6小鼠中选取60只用于免疫剂的制备,其余50只腹腔注射免疫剂,建立AIH模型。将42只建模成功的小鼠随机分为AIH组(10只)、ASPS低剂量组(10只)、ASPS高剂量组(11只)和泼尼松龙组(11只),其余10只小鼠不进行处理,设为健康组。ASPS低、高剂量组分别采用50、100mg·kg-1的ASPS灌胃,泼尼松龙组采用9mg·kg-1泼尼松龙灌胃,健康组与AIH组均以等量0.9%氯化钠溶液灌胃。检测各组小鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、白介素-22(interleukin-22,IL-22)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;以多参数流式细胞术检测外周血辅助性T细胞22(Thelper cell 22,Th22)的比例;以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肝组织病理变化;Western blot检测肝组织Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88 (myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB)、磷酸化核因子-κB(phosphorylation-nuclear factor-κB,p-NF-κB)蛋白相对表达量。[结果]与健康组比较,AIH组血清AST、ALT、IL-22、TNF-α、IL-6水平,外周血CD4+T淋巴细胞中Th22细胞比例均升高(P0.05);与AIH组比较,ASPS低、高剂量组和泼尼松龙组血清AST、ALT、IL-22、TNF-α、IL-6水平,外周血CD4+T淋巴细胞中Th22细胞比例均降低(P0.05);与ASPS低剂量组比较,ASPS高剂量组和泼尼松龙组血清AST、ALT、IL-22、TNF-α、IL-6水平,外周血CD4+T淋巴细胞中Th22细胞比例均降低(P0.05)。HE染色结果显示,AIH组肝细胞明显水肿,肝小叶结构被破坏,可观察到大面积小灶样坏死,且存在大量炎性细胞浸润;ASPS低、高剂量组和泼尼松龙组干预后,肝细胞小灶样坏死面积缩小,肝小叶结构较为完整,炎性细胞浸润减少。与健康组比较,AIH组肝组织TLR4、MyD88蛋白相对表达量,p-NF-κB p65/NF-κB p65均升高(P0.05);与AIH组比较,ASPS低、高剂量组和泼尼松龙组肝组织TLR4、MyD88蛋白相对表达量,p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P0.05);与ASPS低剂量组比较,ASPS高剂量组、泼尼松龙组肝组织TLR4、MyD88蛋白相对表达量,p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P0.05)。[结论]ASPS可保护AIH小鼠肝功能,调节Th22细胞比例,减轻炎症反应,缓解肝组织病理变化,且呈剂量依赖性,其分子机制可能与抑制TLR4/MyD88信号通路有关。     

人参二苓汤对小鼠移植瘤腹水的治疗作用研究

目的：研究人参二苓汤对H22荷瘤小鼠恶性腹水的抑制作用及相关机制.方法：建立H22荷瘤小鼠恶性腹水模型,随机分为模型对照组,阳性对照组,人参二苓汤有效部位低、中、高剂量组,观察各组小鼠毛色、食欲、活动状况和精神状态等一般的生活状况;测定小鼠体重和腹围的变化;观察腹腔内情况,计数腹膜瘤结节数量,称重计算抑瘤率;利用Elisa法检测腹水中VEGF、MMP-2、MMP-9的表达量.结果：人参二苓汤有效部位能够延缓H22荷瘤小鼠体重和腹围的增长,对H22荷瘤小鼠腹水的生长有一定的抑制作用,且存在剂量依耐性.与模型组比较,人参二苓汤有效部位高剂量组小鼠腹水中VEGF的含量显著降低（P ＜0.01）,MMP-2和MMP-9的含量有差异（P＜0.05）;中剂量组小鼠腹水中VEGF的含量有差异（P＜0.05）,MMP-2和MMP-9的含量无差异（P＞0.05）;低剂量组小鼠腹水中VEGF、MMP-2和MMP-9的含量均无差异（P＞0.05）.人参二苓汤有效部位各剂量组与模型对照组比较均无差异.结论：人参二苓汤能够提高H22腹水型小鼠的生活质量,抑制恶性腹水的生长,抑制腹水中VEGF、MMP-2和MMP-9的表达,而对H22荷瘤小鼠恶性腹水的发展起抑制作用.     

丝氨酸羟甲基转移酶对小鼠肝脏缺血再灌注的影响

目的 探索丝氨酸羟甲基转移酶2（SHMT2）在小鼠肝脏缺血再灌注损伤的表达及作用。方法 SPF级C57BL/6小鼠60只，分为正常组（sham）、生理盐水对照组（NS）、空载腺相关病毒组（AVV-GFP）、及腺相关病毒沉默组（AAV-SHMT2），每组15只。建模前2周尾静脉给予注射腺相关病毒及生理盐水，建立小鼠肝脏70%缺血再灌注模型。收集缺血再灌注模型小鼠的血清及肝组织。采用qPCR、Western blot、免疫荧光和免疫组化检测各组AST/ALT的浓度、SHMT2、JNK、NF-κB、Caspase-3及下游炎症因子表达水平的变化。并利用HE染色观察各组肝组织病理损伤，TUNEL法检测细胞凋亡。结果 肝脏缺血再灌注后SHMT2表达随时间升高，在24 h达最高（相对表达量为1.5，P<0.05）。肝脏缺血再灌注24 h后，AAV-SHMT2组AST/ALT水平含量（588/416 U/L）均明显高于对照组（416/345 U/L），空载组（387/321 U/L）（P<0.05）。AAV-SHMT2组与对照组和空载组相比，SHMT2水平明显降低（相对表达量为0.24，P<0.05），p-JNK，p-p65水平明显升高（相对表达量为0.80，0.97，P<0.05），炎症因子水平TNF-α、IL-1β与其保持一致升高（相对表达量为1.6，1.2，P<0.05）。空载组和对照组比较无统计性差异（P>0.05）。结论 SHMT2在肝脏缺血再灌注中有可能通过抑制JNK通路激活来缓减肝细胞的凋亡以及抑制NF-κB通路过度激活来减轻肝脏缺 血再灌注的损伤。     

抑制NF-κB活性可减轻CCl4诱导的小鼠急性肝损伤

目的研究核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)活性抑制剂对CCl4诱导急性肝损伤小鼠肝组织中细胞间黏附分子-1(intercellular ashesion molecule-1,ICAM-1)表达及肝功能的影响.方法30只雄性昆明小鼠(28±2.2)g随机分为3组,即正常对照组、急性肝损伤模型组和NF-κB活性抑制剂组.正常对照组腹腔注射生理盐水0.1 mL/10 g,实验组腹腔注射0.1?l4 0.1 mL/10 g,NF-κB活性抑制剂组于腹腔注射0.1?l4 0.1mL/10 g前15 min腹腔注射脯氨酸二硫代氨基甲酸酯(prothiocarbamates DTC,ProDTC 150μg/10 g)1次,其后1次/d,共5次.结果模型组ALT、AST及MDA较正常组显著升高(P ＜0.01),SOD降低明显(P＜0.01).在正常组中肝脏无NF-κB、ICAM-1表达,肝损伤模型组中NF-κB有较强表达,ICAM 1在肝细胞坏死区强表达.NF-κB抑制剂组ALT、AST及MDA较模型组显著降低,NF-κB、ICAM 1表达均较肝损伤组减弱,肝组织坏死程度较轻.结论 NF-κB在CCl4诱导小鼠急性肝损伤中表达明显增强,NF-κB抑制剂可减少NF-κB及ICAM-1表达并减轻肝损伤程度.     

人表皮生长因子受体2、核因子-κB及血管内皮生长因子在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨胃癌组织中人表皮生长因子受体2（HER-2）、核因子-κB（NF-κB）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法（ S-P法）检测126例胃癌组织、54例正常胃黏膜组织中HER-2、NF-κB及VEGF蛋白表达情况,分析三者的相关性及其表达与胃癌临床病理特征间的关系。结果（1）胃癌组织中HER-2高表达率为21．4％（27／126）,NF-κB及VEGF蛋白的阳性表达率分别为53．9％（68／126）、58．7％（74／126）,均明显高于正常胃黏膜组织（P＜0．05）;（2）低分化胃癌组、淋巴结转移组、TNMⅢ＋Ⅳ期组患者的胃癌标本中HER-2蛋白高表达率较高（P＜0．05）;低分化胃癌组、浆膜或浆膜外浸润组、TNMⅢ＋Ⅳ期组患者的胃癌标本中NF-κB蛋白阳性率较高（P＜0．05）;浆膜或浆膜外浸润组、淋巴结转移组、TNMⅢ＋Ⅳ期组患者的胃癌标本中 VEGF蛋白阳性率较高（P＜0．05）。（3）胃癌组织中HER-2与NF-κB、HER-2与VEGF、NF-κB与VEGF表达均呈正相关性（P＜0．05）。结论胃癌组织中HER-2、NF-κB及VEGF的阳性表达增高。 HER-2可激活NF-κB以影响胃癌的发展和预后,激活VEGF可促进肿瘤的生长与转移,三者的协同作用对于研究胃癌的信号传导网络及分子靶向药物治疗有重要意义。     

TLR4、MyD88、NF-κB在乙型肝炎病毒肝硬化患者中的表达及其临床意义

目的 探讨Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、核转录因子-κ（NF-κB）信号通路在乙型肝炎病毒所致肝硬化中的表达及临床意义。方法 选取2017年1月—2019年1月华北石油管理局总医院收治的130例乙型肝炎肝硬化患者为研究对照（肝硬化组），选择同期130例乙型肝炎患者为乙型肝炎组，选择130例健康人群为对照组。其中肝硬化组进一步根据ChildPugh分为A级（49例），B级（47例），C级（34例）；根据肝硬化程度分为：代偿期肝硬化（49例），失代偿期肝硬化（48例），原发性肝癌（33例）。比较3组丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）的差异，比较3组单核细胞表面TLR4阳性率及血清MyD88、NF-κB水平，以及不同程度肝硬化患者TLR4、MyD88、NF-κB表达水平。采用Spearman或Pearson分析法分析TLR4、MyD88、NF-κB与ChildPugh分级、AST、ALT及TBIL的相关性，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析ALT、AST、TBIL、TLR4、MyD88及NF-κB对肝硬化致原发性肝癌的诊断价值。结果 肝硬化组、乙型肝炎组、对照组AST、ALT、TBIL水平比较，差异有统计学意义（P <0.05）；TLR4、MyD88、NF-κB水平比较，差异有统计学意义（P <0.05）；ChildPughA级、B级、C级患者TLR4、MyD88、NF-κB水平比较，差异有统计学意义（P <0.05）；不同程度肝硬化患者TLR4、MyD88、NF-κB比较，差异有统计学意义（P <0.05）。TLR4、MyD88及NF-κB与ChildPugh分级、AST、ALT及TBIL均呈正相关（P <0.05）。ROC曲线结果显示，ALT截断值为101.44 u/L时，AUC为0.738；AST截断值为136.74 u/L时，AUC为0.706；TBIL截断值为51.86 μmol/L 时，AUC为0.746；TLR4截断值为32.342%时，AUC为0.896；MyD88截断值为931.402 pg/ml时，AUC为0.897；NF-κB截断值为1 243.620 pg/ml时，AUC为0.875。结论 TLR4、MyD88、NF-κB信号通路与乙型肝炎病毒所致肝炎及肝硬化病理进程密切相关，且TLR4、MyD88、NF-κB的检测在诊断肝硬化致原发性肝癌中具有一定临床价值。     

石见穿多糖对肝腹水H22荷瘤小鼠的作用及可能机制

目的 探讨石见穿多糖（PSSC）对肝腹水H22荷瘤小鼠的作用效果及可能机制。方法 选取BALB/c小鼠80只,建立H22荷瘤小鼠模型,随机分为5组：对照组、环磷酰胺组（CTX,20 mg/kg）、PSSC组（20、40和120 mg/kg）,每组16只。观察各组小鼠腹部周长、体重、生存率及生存时间;采用脾淋巴细胞转化试验检测T、B淋巴细胞增殖情况;E-玫瑰花结实验观察T细胞的免疫功能状态;ELISA法检测血清和腹水中白介素2（IL-2）、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血管内皮生长因子（VEGF）含量;TUNEL法检测H22细胞凋亡;Caspase比色法测定Caspase-3和Caspase-8酶活性;Western blot法检测Janus激酶1（Jak1）、信号传导和转录激活因子-3(Stat3)、Bcl2-相关X蛋白（Bax）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白表达。结果 与对照组相比,PSSC组的腹部周长和体重显著下降,而存活率和存活时间呈剂量依赖性增加;与CTX组相比,PSSC 40、120 mg/kg组腹部周长和体重下降,而存活率和存活时间升高（均P＜0.05）。与对照组相比,PSSC组小鼠SI及EtRFC随PSSC治疗剂量的增加而增加;与CTX组相比,PSSC 120 mg/kg组SI及EtRFC百分比升高（均P＜0.05）。ELISA检测结果,与对照组相比,PSSC组H22肿瘤小鼠血清和腹水中的IL-2、IFN-γ和TNF-α水平呈剂量依赖性增加,而VEGF表达降低;与CTX组相比,PSSC 120 mg/kg组小鼠血清和腹水中的IL-2、IFN-γ和TNF-α表达升高,而VEGF表达下降（均P＜0.05）。TUNEL实验显示,与对照组相比,PSSC呈剂量依赖性增加H22细胞凋亡数量;与对照组相比,随着PSSC浓度的增加,Caspase-3和Caspase-8表达上升（P＜0.05）;Western blot检测结果,PSSC组Jak1、Stat3和Bcl-2蛋白表达较对照组降低,而Bax/Bcl-2比值上升。结论 石见穿多糖对H22 荷瘤小鼠具有一定的抗肿瘤作用,其机制可能与免疫调节与抗凋亡作用有关。     

甘氨酸对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤保护作用机制的研究

目的探讨甘氨酸对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用机制。方法将SD大鼠36只随机分成假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、甘氨酸组(SAP+Gly组)。SAP模型通过胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导,造模前SAP+Gly组分别于12 h、24 h从尾静脉内注入甘氨酸(3 mmol/L,0.1 ml/100 g)。假手术或造模后分别于12 h、24 h处死动物,检测其血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血淀粉酶(AMS)含量;用ELISA法检测TNF-α和IL-1β蛋白含量,用免疫组化染色法检测肝组织中NF-κB的表达,并同时观察肝组织的病理变化。结果 SAP组大鼠AST、ALT、AMS含量均较SO组明显升高(P<0.01);而SAP+Gly组AST、ALT、AMS含量与SAP组比较,明显降低(P<0.05)。在SAP组肝组织中各时间点NF-κB表达明显高于SO组(P<0.01),血清中TNF-α和IL-1β蛋白含量与SO组比较也明显升高(P<0.01),但在SAP+Gly组大鼠上述指标均较SAP组显著降低。病理观察显示:SAP组大鼠肝组织可见肝细胞明显肿胀、肝窦充血,肝细胞界限不清,肝索扭曲,至12 h可见局灶性坏死,并有大量中性粒细胞及淋巴细胞浸润,以小叶区明显;甘氨酸预处理组肝窦扩张充血明显减轻,汇管区中性粒细胞及淋巴细胞浸润明显减少。结论甘氨酸可以抑制重症急性胰腺炎肝脏NF-κB的表达,减少外周血中炎症因子TNF-α、IL-1β的释放,从而对重症急性胰腺炎肝损伤起保护作用。     

蒙药古日古木-13含药血清对过氧化氢诱导的人Huh-7细胞损伤的保护作用

目的：探讨蒙药古日古木-13含药血清对H2O2诱导Huh-7细胞氧化应激损伤的保护作用及其可能机制。方法：40只大鼠随机分5组,分为古日古木-13高、中、低剂量组、阳性对照组及PBS空白组,灌胃7 d,于最后一次给药1 h后取血,制备含药血清培养基;CCK8法筛选H2O2损伤Huh-7细胞最适浓度及古日古木-13含药血清最适剂量浓度和作用时间;HPLC法检测古13含药血清中有效成分;流式细胞仪测细胞凋亡变化;qPCR法检测细胞NF-κB的表达变化;蛋白印迹法检测细胞NF-κB蛋白表达变化。结果：Huh-7细胞半数抑制率为930 mmol/ml;选择中剂量浓度古13含药血清,作为后续作用条件(P<0.05);H2O2＋10%古13血清组作用Huh-7肝细胞的最适时间为18 h;古13含药血清的有效成分是没食子酸及鞣花酸;H2O2＋10%古13血清组能降低H2O2损伤的Huh-7细胞凋亡率,差异有统计学意义(P<0.05);H2O2＋10%古13血清组细胞NF-κB较H2O2＋10%空白血清组细胞表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05);H2O2＋10%古13血清组细胞的NF-κB蛋白表达量明显低于H2O2＋10%空白血清组蛋白表达量,差异有统计学意义,P<0.05。结论：蒙药古日古木-13含药血清对 H2O2 损伤的 Huh-7 细胞具有保护作用,其机制可能与NF-κB通路有关。