岳阳地区血小板捐献者HPA1～17,HLA-A和B基因多态性研究

目的 研究湖南省岳阳地区机采血小板捐献者人类血小板抗原（HPA） 1-17及人类白细胞抗原HLA-A和B基因分布及多态性.方法 分别采用PCR-SSP法和PCR-SSO法对200名岳阳地区机采血小板捐献者进行HPA1-17和HLA-A和B基因分型,计算基因频率、基因型频率,并与其他人群进行比较.结果 岳阳人群HPA1-17系统中,HPA7-14和HPA16-17的基因型均为aa型,不具有多态性;HPA1,2,4和5主要以aa型为主,aa基因型频率分别是0.970 0,0.900 0,0.985 0和0.980 0,未检出bb型;仅在HPA3,6和15中检出bb型,bb基因型频率分别是0.185 0,0.035 0和0.465 0;杂合度最高的是HPA15,其aa,ab和bb基因型频率分别是0.305 0,0.230 0和0.465 0,HPA3杂合度居次,其aa,ab和bb基因型频率分别是0.380 0,0.435 0和0.185 0.HLA-A位点检出12个等位基因,频率最高的3个是A＊11（0.3325）,A＊02（0.295 0）和A＊24（0.205 0）;HLA-B位点检出28个等位基因,频率最高的5个是B＊ 40（60）（0.177 5）,B＊ 46（0.142 5）,B＊ 13（0.100 0）,B＊51（0.082 5）和B＊ 15（75）（0.077 5）.结论 岳阳地区机采血小板捐献者HPA1-17和HLA-A,B基因多态性与南方汉族接近,但也呈现出自身特点,需建立该地HLA/HPA基因分型血小板供者库服务于临床.     

辽宁地区血小板志愿捐献者HPA基因资料库的建立

目的对辽宁地区血小板志愿捐献者进行HPA基因分型,建立已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。方法采用PCR-SSP方法对随机抽取的130名血小板捐献者进行HPA-1-6和HPA-15抗原系统共14个抗原的基因分型。结果辽宁地区血小板志愿捐献者HPA的基因频率分别是:HPA-1a0.9925、1b0.0075、2a0.9305、2b0.0695、3a0.5810、3b0.4190、4a1.0000、4b0.000、5a0.9810、5b0.0190、6a0.9885、6b0.0115、15a0.4615、15b0.5385。结论辽宁地区血小板志愿捐献者HPA-1—6和HPA-15抗原系统的基因频率符合Hardy-Wein-berg遗传定律,与其它地区和国家的同类资料相比显示出种族和地域性差异,由此建立起了辽宁地区已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。     

南京地区血小板捐献者HPA-1-29bw基因分型检测

目的 了解南京地区汉族血小板捐献人群血小板抗原1 ～ 29(HPA-1-29bw)等位基因频率,为患者相容性血小板输注提供依据.方法 采用一代测序法(Sanger测序法)对2019年2月～2019年9月在本中心捐献血小板的900名南京汉族固定捐献者做HPA基因分型,并采用直接计数法计算等位基因频率和基因型频率等.结果 ...     

张家口地区机采血小板捐献者HPA分型研究

目的:分析河北省张家口地区血小板捐献者血小板特异性抗原HPA1-5,15系统的基因多态性。方法:采集血小板捐献者静脉血并提取DNA,采用聚合酶链-序列特异性引物(PCR-SSP)法进行血小板特异性抗原分型,计算基因频率、基因型频率并与国内外其他地区进行比较是否存在差异及是否表现地区特异性。结果:HPA-1、HPA-2、HPA-4系统中基因表达均为纯合子aa,未出现表达纯合子bb的存在者,其中HPA-1和HPA-4系统各发现杂合子ab表达1例(1%),HPA-2系统发现杂合子ab表达14例(14%);HPA-5系统基因表达主要为纯合子aa(98%),极少数表达纯合子bb(2%);HPA-3和HPA-15系统基因表达杂合程度较高,HPA-3系统基因表达aa、ab、bb表达比例分别为46%、40%、14%,HPA-15系统基因表达aa、ab、bb表达比例分别为21%、64%、15%。结论:张家口地区血小板特异性抗原HPA1-5,15系统基因频率具有本地区特点;HPA-3和HPA-15系统基因表达杂合程度较高,引发同种免疫及血小板输注无效的可能性较大,因此应引起注意。     

安徽合肥地区单采血小板捐献者血样的HPA基因分型

目的 检测安徽合肥地区单采血小板捐献者血样的HPA基因分型,统计本地区血小板捐献者HPA基因型分布频率.方法 ①采用多重荧光PCR的方法对1181名18-55周岁的单采血小板捐献者血样进行HPA1-6,10,15,21的基因分型检测.②采用SBT直接测序的方法对22名18-55周岁的单采血小板捐献者血样进行HPA基因型...     

献血者血小板1-16抗原基因遗传多态性分析及已知HPA型供者数据库的建立

本研究的目的是分析人类血小板抗原（human platelet antigen,HPA）基因多态性,根据分布频率来判断HPA抗原不配合比率以及抗体产生的机会,确定有临床意义的血小板抗原系统,并建立邯郸地区血小板基因频率数据库和供者库.采用SSP-PCR方法对邯郸地区148名随机献血者进行HPA1-16抗原32个等位基因的检测分析,并与不同人群的分布频率进行比较.结果表明：每个样本均检测到HPA-1a、2a、4a-14a、16a基因;HPA-4a、7a-14a、16a呈现单态性,未检测出相应的等位基因HPA-b;对于HPA-1、-2、-5、-6主要以a/a纯合子为多,a/a基因型频率分别是0.9595、0.8108、0.9865、0.9797,没有b/b纯合子出现.在HPA1-16中,具有最高杂合度的是HPA-15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.2230、0.5270、0.2500;HPA-3在其次,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.3851、0.5135、0.1014.经x2检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.邯郸地区随机献血者HPA1-5系统基因频率与石家庄地区相似（P＞0.05）;与我国台湾人群进行HPA1-13、HPA-15的比较,HPA-1、-2、-6具有明显的不同（P＜0.05）,其它相似（P＞0.05）;与韩国人群进行HPA1-8的比较,除HPA-3具有明显不同外（P＜0.05）,其余均相似（P＞0.05）;与美国黑人进行HPA1-5的比较,HPA-1、-2、-5具有明显的差异（P＜0.05）;与英国人进行HPA1-11的比较,HPA-1、-5具有明显的不同（P＜0.05）.结论：北方地区中国人群HPA-2、-3、5、-15系统具有多态性,且HPA抗原分布不配合比率较高,这必然造成免疫暴露的机会增加,提示在临床上可能具有重要的免疫学意义.同时,在此次研究数据的基础上建立了邯郸地区血小板基因频率数据库和血小板已知型供者库.     

血小板捐献者HLA资料库的建立

目的建立血小板捐献者HLA基因分型资料库,探讨HLA-A、B基因频率及单体型频率,为临床患者提供HLA匹配的血小板。方法应用聚合酶链反应-序列特异性引物方法和Luminex-SSO方法对730名沈阳地区血小板捐献者进行中低分辨率HLA-A、B基因分型,根据HLA表型群体资料,使用最大数学预期值算法(Expectation-Maximization,EM)计算HLA-A、B座位单体型频率。结果 HLA-A位点共检出15种等位基因,HLA-B位点共检出36种等位基因,单体型数222种。结论为向临床提供HLA匹配的血小板,各地区有必要建立血小板捐献者HLA基因分型资料库。     

石家庄汉族血小板捐献者HPA1-17基因多态性分析

目的建立石家庄地区已知HPA基因型别单采血小板捐献者基因资料数据库,分析石家庄地区3591名汉族血小板捐献者HPA基因多态性分布特点。方法 HPA基因分型采用聚合酶链反应—序列特异引物(PCR-SSP)方法,计算等位基因频率、基因型频率及HPA-1～17组合型频率。结果 3 591名无血缘关系的血小板捐献者HPA基因HPA-7～14、HPA-16、HPA-17系统均为aa纯合子,未检出b等位基因。HPA-1～6、15中杂合度最高的为HPA-3系统,不配合率为37.44%;其次为HPA-15系统,不配合率为37.40%;HPA-4系统的杂合度最低,不配合率仅为0.38%;与国内部分地区人群数据比较分析,发现石家庄地区汉族血小板捐献者HPA-5系统分布与国内其他地区人群存在显著差异。结论建立了石家庄地区血小板捐献者HPA-1～17基因分型数据库,可为患者提供HPA相合的血小板,对减少临床血小板输注无效的发生具有重要意义。     

陕西地区血小板HLA/HPA基因供者库的建库评估及应用策略

目的 探讨陕西地区血小板HLA/HPA基因供者库合适的库容水平及匹配概率,为本地区血小板供者库的建设、维护及应用提供数据支持。方法 以11 755名中华骨髓库陕西分库造血干细胞志愿捐献者、401名和249名陕西地区无血缘关系多次单采血小板捐献者为对象,分别进行HLA基因多态性分析、HPA基因分型和CD36抗原检测,应用Arlequin 3.5.2.2软件计算HLA、HPA基因频率及单体型频率,并根据表型频率计算找到HLA、HPA全匹配供者概率,评估库容水平。结果 获得了陕西地区HLA-A、-B及HPA1-6、10、15、21表型群体多态性资料,在249例健康捐献者中检测到CD36抗原Ⅰ型和Ⅱ型缺失频率均为0.40%(1/249);计算推导得到当血小板供者库库容为194人时,患者有95%的把握能在该库中找到至少1名HPA1-6、10、15、21全匹配供者;1个1 500人的血小板供者库有95%的概率可以找到1名HLA-A-B表型频率>0.002或单体型频率>0.001的相同供者,而找到任何1个交叉反应组(CREG)匹配的供者概率应在44.95%～97.57%之间;当供者数为8...     

陕西地区血小板供者基因数据库拓展性应用的研究

目的 通过分析本地区无偿献血与造血干细胞捐献群体之间的共性和特性,挖掘包括血小板基因供者库在内的无偿献血者与造血干细胞捐献者资料库间的融合潜力,提高招募成功率和已知结果库存率。方法 应用数据库建模和比对方法对本市近10年无偿献血者与中华骨髓库陕西分库造血干细胞捐献者之间的匹配度和融合度进行筛选分层,采用Arlequin 3.5.2.2软件计算HLA、HPA基因频率及单体型频率,并根据表型频率计算不同血小板供者后备库中找到HLA、HPA全匹配供者概率。结果 在本地区已入库造血干细胞志愿捐献者中,依据其献血行为挖掘出的活跃献血者分别划分为血小板供者库后备一、二、三、四梯队,分别为696名、2 752名、9 092名和12 028名捐献者。第一梯队具有10～50次血小板捐献经历和10～20次全血捐献经历的占比最高,分别为13.65%和26.01%;第二梯队具有10～20次全血捐献经历和10～50次血小板捐献经历者占比分别为15.04%和1.38%,与其他梯队献血特征有差异(P<0.05)。在现有血小板库+一二梯队的核心库容中(n=4 955),患者找到至少1名HLA-A,B表型相同的供...     

血小板捐献者血型资料数据库的建设与应用展望

供受者血小板配合输注可有效解决免疫性血小板输注无效问题。由于受HLA和HPA基因系统多态性、人群中CD36抗原缺乏个体比例及临床应用需求时限性等因素的影响,需要提前建立有一定规模的血小板捐献者血型资料库,才可能在临床需要时及时提供配合性血小板。血小板捐献者血型资料库涉及HLA-A,-B基因型资料库、HPA基因型资料库和CD36抗原阴性资料库;国内部分血站已建立200—4 000(人)份捐献者血小板血型资料库。建库中献血者选择、HLA-C位点覆盖问题、HPA系统最适检测范围和检测方法选择仍有待标准化。血小板捐献者血型资料库具有良好的应用前景,但仍需要通过扩大血小板捐献者基因型资料库规模、缩短配合血小板制备发放流程所需时间和加强临床沟通等措施,来提升基因型配合血小板的临床应用。     

长沙地区汉族人血小板抗原（HPA1-17）基因多态性调查

目的研究长沙地区汉族人群人类血小板特异性抗原HPA1-17基因多态性。方法采用PCR-SSP方法对长沙市血液中心618名汉族无偿献血者进行HPA1-17系统基因分型。结果长沙地区618名汉族无偿献血者HPA1a基因频率为99.3%,HPA2a基因频率为96.8%,HPA3a基因频率为58.7%,HPA4a基因频率为99.4%,HPA5a基因频率为98.9%,HPA6a基因频率为98.9%,HPA15a基因频率为53.6%。结论长沙地区汉族人群HPA1-17的基因检测填补了地方空白,为建立血小板库奠定了基础,也为临床提供同型血小板输注提供可能。     

徐州地区汉族人群血小板HPA1～17等位基因的研究

目的调查徐州地区汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性及特点,为人类遗传学提供资料,为本地区临床血小板免疫性减少症患者提供血小板输注配型参考。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对徐州地区100名无血缘关系的汉族成年人进行HPA1～17等位基因分型。在包含引物混合液的96孔反应板中,按照相同的循环条件扩增PCR产物。结果在徐州地区汉族人群的HPA1～17系统中,呈多态性分布的等位基因是HPA1a、HPA2a、HPA3a、HPA4a、HPA5a、HPA6a、HPA15a,其频率分别为0.995 0、0.935 0、0.590 0、0.9950、0.980 0、0.975 0、0.575 0,HPA7～14、16～17呈单线性分布。结论徐州地区汉族人群HPA的基因有地区特点,人类血小板抗原HPA的基因具有民族多态性。     

四川造血干细胞捐献者资料库HLA-A,B,DRB1基因和单倍型研究

目的了解中国造血干细胞捐献者资料库四川分库(以下简称“四川分库”)HLA基因及单倍型分布特征。方法采用PCR-SSP及PCR-SSO对四川分库内11134名四川籍捐献者HLA-A、B、DRB1基因低分辨分型,用Excel软件计算HLA基因频率、Hardy-Weinberg平衡吻合度、单倍型频率及其连锁不平衡参数。结果在四川分库内,HLA-A、B、DRB1基因(含血清学特异性)分别有18、41、13种,累积频率>50%的显著高频率基因是:A*11、A*02,B*46、B*40(60)、B*13、B*58、B*15(75),DRB1*09、DRB1*12、DRB1*15、DRB1*04。频率大于5%的单倍型有A*02-B*46、A*11-B*40(60)、A*33-B*58、B*46-DRB1*09、A*02-DRB1*09、A*11-DRB1*12、A*11-DRB1*15、A*02-B*46-DRB1*09。紧密相关的单倍型是A*33-B*58、A*30-DRB1*07、B*37-DRB1*10、A*02-B*37-DRB1*10。结论此资料有助于为临床移植寻找合适匹配的供受对,并为四川地区健康人群HLA基因多态性以及HLA相关疾病的研究提供有意义的参照数据。     

中山地区血小板供者HLA基因分型资料库的建立

目的 建立血小板供者HLA基因分型资料库,探讨HLA-A、B基因频率及单体型频率,为临床患者提供HLA匹配的血小板,解决血小板输注无效(PTR)患者的血小板输注.方法 采用聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸探针杂交技术 (PCR-SSOP)对568名中山地区单采血小板捐献者进行HLA-I类(A、B位点)基因分型并形成数据库,根据HLA表型群体资料,使用最大数学预期值算法(EM)计算HLA-A、B单体型频率.结果 HLA-A位点共检出17种等位基因,HLA-B位点共检出29种等位基因,单体型数153种.结论 血小板供者HLA分型资料库的建立可以为PTR患者迅速寻找到HLA相合血小板,提高血小板输注效果.     

四川德阳地区血小板捐献者HPA-1～6w、HPA-15及HPA-32bw～35bw多态性研究

目的 了解四川德阳地区血小板捐献者HPA-1～6w、15及32bw～ 35bw的多态性,并评估32bw～35bw位点是否纳入血小板库常规检测.方法 采用PCR-测序分型(SBT)方法,对205名德阳地区血小板捐献者的HPA-1～6w、15及32～ 35bw位点测序后,采用直接计数法计算等位基因频率,与中国南北方人群及澳...     

流式细胞仪结合序列特异性寡核苷酸探针基因分型方法在血小板供者资料库建立中的应用

目的 探讨高通量流式细胞仪结合序列特异性寡核苷酸探针(FLOW-SSO)技术在人类血小板抗原( HPA)基因分型中的应用.方法 采用FLOW-SSO技术对1378例汉族血小板捐献者HPA1～6,15系统的基因型进行检测;并以10份国际输血协会(ISBT)第12届血小板免疫学术研讨会提供的质控样品对FLOW-SSO技术的可靠性进行考核.以3家供应商提供的不同聚合酶链反应-序列特异引物法(PCR-SSP)试剂,对50份血小板样品的基因分型结果进行比对试验.分型结果采用x2检验考察HPA系统的基因型频率分布是否符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.结果 通过FLOW-SSO方法获得的1379例血小板供者HPA等位基因频率如下,HPA-1a为0.9927,HPA-1b为0.0073,HPA-2a为0.9536,HPA-2b为0.0464,HPA-3a为0.5700,HPA-3b为0.4300,HPA-4a为0.9982,HPA -4b为0.0018,HPA-5a为0.9804,HPA-5b为0.0196,HPA-6a为0.9822,HPA-6b为0.0178,HPA- 15a为0.5337及HPA-15b为0.4663.基因频率检测结果经x2检验,其分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.ISBT提供的10份样品考核结果相符率为100％.50份血小板样本采用3种不同的PCR-SSP试剂测定的HPA1～6,15基因分型结果,与FLOW-SSO技术测定结果完全一致.结论 FLOW-SSO基因分型技术有便捷、重复性好及高通量等特点,适用于血小板供者资料库的血小板基因分型.     

南京地区血小板固定捐献者HLA和HPA基因资料库的建立及库容评估分析

目的 探讨南京地区血小板固定捐献者HLA-A、-B和HPA-1～6w、10w、15、21w基因多态性分布特点并进行血小板固定捐献者基因资料库库容评估分析。方法 采用荧光定量PCR法对南京地区1059例血小板固定捐献者血液样本进行HLA-A、-B位点和HPA-1～6w、10w、15、21w基因分型,计算等位基因频率、HLA单体型频率、HPA组合型频率,并以此为数据基础,评估库容水平。结果 1059例血小板固定捐献者中共检出HLA-A位点等位基因15个,频率较高的有A^*02、A^*11、A^*24、A^*33、A^*30;检出HLA-B位点等位基因29个,频率较高的有B^*15、B^*40、B^*13、B^*46、B^*51、B^*58;观察到HLA-A-B单体型共269种,频率>0.01的有22种,其中频率最高的为A^*02-B^*     

盐城地区汉族人血小板抗原HPA-1～17，Caba基因多态性分析

目的：研究盐城地区汉族人群血小板特异性抗原人类血小板同种抗原1～17（HPA1～17）,Caba的基因分布,建立本地区固定机采血小板供者 HPA数据库。方法应用序列特异性引物聚合酶链式反应（PCR‐SSP）技术,对盐城市中心血站200名汉族固定血小板献血者的血液进行HPA1～17,Caba基因分型。用χ2检验统计分析各 HPA血型系统基因分布的期望值与观察值,验证其是否符合 Hardy‐Weinberg平衡定律,并与国内外人群相比较。结果盐城地区200名汉族血小板献血者的HPA‐1a、2a、3a、4a、5a、6a、15a的基因频率分别为0．9950、0．9375、0．5725、0．9925、0．9850、0．9875、0．5425,呈多态性分布,HPA7～14、16～17及Caba呈单线性分布;不配合率大于10％的HPA系统有HPA‐2～3、15。结论本研究已确认盐城地区200名固定血小板供者 HPA基因分布特征,与国内其他地区、其他国家相比有本地区人群特点;在此基础上建立本地区已知 H PA基因型固定机采血小板供者数据库,为临床血小板HPA血型配合性输注提供可能。     

徐州地区汉族人群血小板HPA基因多态性的研究

目的 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)检测徐州地区汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性.方法 2010年期间对徐州地区100名无血缘关系的汉族成年人进行HPA1～17基因及新等位基因Caba+分型研究.根据HPA基因分型试剂盒的要求,调整DNA模板浓度;根据人类生长激素基因(HGH)的保守片段设计内参引物进行PCR-SSP,在包含引物混合液的96孔反应板中,按照相同的循环条件扩增PCR产物;用x2检验比较基因分布期望值与观察值,以验证是否符合Hardy-Weinberg遗传平衡.结果 在徐州地区汉族人群的HPA1～17系统中,呈多态性分布的等位基因是HPA1a,HPA2a,HPA3a,HPA4a,HPA5a,HPA6a和HPA15a,其频率分别为0.995 0,0.935 0,0.590 0,0.9950,0.980 0,0.975 0和0.575 0,HPA7～14,16～17及新等位基因Caba+呈单线性分布.结论 徐州地区汉族人群HPA的基因有地区特点,人类血小板抗原HPA的基因具有民族多态性.