血管内皮细胞miRNAs与高血压病血瘀证的相关性研究进展

高血压是多种心脑血管疾病的重要病因和危险因素,它仍是心脑血管疾病死亡的主要原因之一。原发性高血压为多基因疾病,是由多种易患基因和环境因素共同作用导致血压正常调节机制失代偿所致。微RNA(miRNA)参与高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)等心脏疾病的发生、发展,在心血管系统疾病中有重要的作用;有些特异性的miRNA还可调节血管内皮细胞功能。从miRNA方面研究高血压病血瘀证的发病机制也已受到广泛的关注。     

高血压病基本证型与血瘀的相关性研究

目的:探讨高血压病中基本证型与血瘀的相关性。方法:选取肝火亢盛型、阴虚火旺型、阴阳两虚型、痰湿壅盛型高血压病患者及健康人各20名。测定各研究对象的血压、血脂、血流变学、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)水平。结果:阴阳两虚、痰湿壅盛组年龄构成偏高,肝火亢盛组年龄构成偏低;舒张压在肝火亢盛、痰湿壅盛组高于其它患者;痰湿壅盛组的血脂、血流变学上明显高于其他各组:各实验组的NO与对照组相比都降低,但无统计学意义;而ET都明显高于健康人,尤其是肝火亢盛组ET含量显著升高。结论:高血压病各基本证型与血瘀均存在一定相关性,尤其以痰湿壅盛组与血瘀证关系最为密切。     

血管内皮细胞与血瘀证关系研究

概述了血管内皮细胞功能与血瘀证的关系研究,以及活血化瘀治法对血管内皮细胞功能的影响。参考文献18篇。     

外周血sVCAM-1、miR-126水平与冠状动脉狭窄病变程度的关系

目的 探讨外周血血浆血管细胞间粘附分子-1 (sVCAM-1)与微小RNA-126(miR-126)表达水平及其与冠状动脉狭窄病变严重程度的关系.方法 收集2017年3月-2019年4月因胸口疼痛或胸闷等症状在河南科技大学第三附属医院行冠脉造影的患者175例,根据造影结果分为无病变组87例、单支病变组32例、双支病变组...     

2型糖尿病血瘀证血管内皮细胞损伤模型的研究

目的 建立2型糖尿病血瘀证的血管内皮细胞损伤模型.方法 取对数生长期的正常人脐静脉内皮细胞(ECV-304),干预分组如下:空白对照组(无血清的DMEM)、健康组(健康人血清)、糖尿病血瘀证组(糖尿病血瘀证患者血清)和糖尿病非血瘀证组(糖尿病非血瘀证患者血清).采用MTT法观察细胞活性;在倒置相差显微镜、扫描电镜和透射电镜下观察细胞形态的变化;应用放免法测定内皮素(ET)含量;硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量;利用双抗夹心ELISA法检测各组细胞培养上清液中内皮细胞蛋白C受体(EPCR)、血管内假性血友病因子(vWF)和血栓调节蛋白(sTM)的含量;应用激光扫描共聚焦显微镜,采用Fluo-3/AM作为荧光指示剂观察细胞内游离钙浓度的变化;并采用荧光探针标记的鬼笔环肽染色法观察细胞肌动蛋白微丝分布的差异.结果 ①10%浓度的糖尿病血瘀证组的OD值较健康组明显降低(P＜0.001);②糖尿病血瘀证组的ET水平比空白对照组和糖尿病非血瘀证组升高(P＜0.001);糖尿病血瘀证组的NO水平比空白对照组降低(P＜0.001);但和糖尿病非血瘀证组相比差异没有统计学意义(P＞0.05);③内皮细胞经过患者血清损伤后,糖尿病血瘀证组分泌的EPCR含量比空白对照组升高(P＜0.001),但低于糖尿病非血瘀证组(P＜0.001);糖尿病血瘀证组分泌的vWF和sTM含量比空白对照组升高(P＜0.001),和糖尿病非血瘀证组相比差异没有统计学意义(P＞0.05);④糖尿病血瘀证组胞浆内荧光分布不均匀,荧光强度高于正常对照组和糖尿病非血瘀证组(P＜0.001);⑤空白对照组和健康组细胞骨架微丝分布多规则清晰,保持着细胞的正常外形,糖尿病血瘀证组的细胞骨架微丝断裂且排列紊乱,糖尿病非血瘀证组细胞微丝断裂但排列较为规则.结论 应用2型糖尿病血瘀证患者血清干预ECV-304可以在体外表现出血管内皮细胞损伤的种种征象,初步建立一种病证结合的血瘀证细胞损伤模型.     

血瘀证与血管内皮细胞内游离钙浓度关系的实验研究

目的：研究血瘀证与血管内皮细胞内游离钙浓度的关系,观察不同复方（活血化瘀复方、益气活血复方、理气活血复方）对血内皮细胞内游离钙浓度的影响。方法：以大鼠为研究对象,给予高胆固醇和高脂饲料喂养建立血瘀证动物模型,分为6组,观察组分别给予硝苯地平、活血化瘀复方、益气活血复方、理气活血复方。下腔静脉取血,测血清钙、血清总胆固醇和三酰甘油,Fura-2/Am标记,荧光测定血管内皮细胞内游离钙浓度。结果：①造模组与对照比较,血清钙明显升高（P＜0．05）。②所有复方均具有钙通道阻断剂样作用,能增加细胞外钙浓度,与造模组比较差异显著（P＜0．05）。③造模组与对照组比较,胞内游离钙浓度明显升高（P＜0．05）,益气活血复方能使造模运动血管内皮细胞内游离钙浓度降低,与造模组比较差异显著（P＜0．05）。结论：①血瘀证血管内皮细胞内游离钙浓度升高,血瘀证的形成可能与血管内皮细胞的屏障功能下降有关。②益气活血复方能降低胞内游离钙浓度,具有血管内皮保护作用。     

miR-126/miR-126*在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的相关性

目的研究miR-126/miR-126*在肝细胞癌中的表达,探讨其表达与相关临床病理参数的关系。方法用RT-QPCR方法检
测74例肝细胞癌手术切除的癌组织与相应的非癌组织中miR-126/miR-126*的表达,分析其表达与相关临床病理参数的关系。
结果miR-126/miR-126*在癌组织中表达水平显著低于相对应的非癌组织;miR-126/miR-126*在肝癌中的表达呈正相关关系;
复发组癌组织中miR-126/miR-126*的表达显著低于未复发组癌组织;miR-126/miR-126*高表达组无瘤生存时间显著优于低表
达组。结论miR-126/miR-126*的的低表达可能是影响肝细胞癌转移并导致患者不良预后的一个重要因素。
     

血瘀证实质与血管内皮细胞关系的研究概况

血管内皮细胞（ＶＥＣ）是位于血管内壁的一层多功能的细胞,对血栓与止血、炎症与免疫和血管新生、物质转运等多种生理、病理过程具有重要的调节功能。由于其在维持血管的舒缩和血液的流动性方面有着不可替代的调节作用,而许多血栓性疾病和临床多科疾病的某一阶段存在着的高凝状态、血栓前倾向等表现均与血瘀证关系密切,故有学者认为血瘀证是多个病理过程的综合所致的机体凝血──纤溶系统及血小板功能等的紊乱,从而使“血行失度”、“血脉瘀阻”,其病理基础可能与ＶＥＣ损伤密切相关。１　ＶＥＣ的生理功能 ＶＥＣ虽然具有抗栓与促栓…     

miR-155抑制AngⅡ诱导的主动脉血管平滑肌细胞周期转换

目的： 观察转染miR-155后对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）诱导小鼠主动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC）细胞周期转换的影响并探讨其机制。方法：原代培养小鼠VSMC,用1×10-6 mol/L AngⅡ作用于VSMC 48 h后,采用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,q-RT-PCR）检测空白对照组及AngⅡ组miR-155表达水平。用q-RT-PCR及Western blot检测分别转染miR-155及阴性对照后各组AngⅡ 1型受体（angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R）的mRNA及蛋白表达水平;用Western blot检测转染miR-155 mimic及阴性对照后对AT1R下游细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2）、核糖体蛋白S6激酶（P70S6K1）通路的影响。分别检测转染miR-155 mimic及使用血管紧张素受体阻滞剂缬沙坦、mTOR通路抑制剂雷帕霉素、ERK1/2抑制剂U0126对细胞周期素D1（Cyclin D1）的表达影响,并使用流式细胞分析检测细胞周期变化,探讨miR-155对细胞周期的影响及其机制。结果：AngⅡ可显著降低miR-155的表达。miR-155可从mRNA及蛋白水平抑制AT1R表达,并抑制AngⅡ促AT1R表达的作用。转染miR-155 mimic后可显著抑制AngⅡ促进ERK1/2、P70S6K1通路激活的作用。转染miR-155 mimic、使用缬沙坦、雷帕霉素、U0126抑制AngⅡ促Cyclin D1表达的作用,并使细胞周期阻滞在G0/G1期。结论：miR-155可通过抑制AT1R间接抑制AngⅡ促进ERK1/2、P70S6K1通路激活及Cyclin D1表达的作用,抑制AngⅡ促进细胞周期转换的作用。     

高血压病、2型糖尿病血瘀证与非血瘀证患者白细胞HSP70基因表达研究

目的 :研究高血压病和 2型糖尿病血瘀证与非血瘀证患者白细胞中HSP70基因表达的变化及意义。方法 :应用流式细胞技术 ,观察了 10 0例血瘀证 (高血压病 4 9例 ,2型糖尿病 5 1例 )与 6 0例非血瘀证 (高血压病 31例 ,2型糖尿病 2 9例 )患者和 15例健康人 (正常对照组 )白细胞中HSP70基因表达的变化情况 ,并进行了血瘀证各分型之间的比较。结果 :高血压病与 2型糖尿病患者HSP70基因表达高于对照组 (P <0 .0 1) ;血瘀证组高于非血瘀证组 (P <0 .0 1) ;血瘀证各型中气滞血瘀型高于其他型 (P <0 .0 1)。结论 :①高血压病与 2型糖尿病患者HSP70基因异常表达 ;②提示血瘀证形成过程中存在HSP70基因的高水平表达 ;③气滞血瘀型明显高于其他各型 ,有关机制有待进一步探讨。     

妊娠期高血压患者血清miR-218、miR-155和ET-1水平变化及其与病情严重程度之间的关系

目的:探索妊娠期高血压患者血清miR-218、miR-155和ET-1水平变化及其与病情严重程度之间的关系.方法:选择2018年6月-2020年6月本院收治的148例HDCP患者,根据病情严重程度分为单纯性妊娠期高血压(GHP,n=63)、轻度子痫前期(MPE,n=51)和重度子痫前期(SPE,n=34),另选择同期于本院体检的100例健康孕妇为对照组.检测各组收缩压(SBP)和舒张压(DBP),荧光定量PCR检测血清miR-218、miR-155水平,ELISA检测血清ET-1水平;Pearson相关性分析血清miR-218、miR-155和ET-1与HDCP患者疾病严重程度之间的相关性.结果:HDCP组患者的SBP、DBP、血清miR-155和ET-1水平高于对照组(P<0.05),血清miR-218水平低于对照组(P<0.05);GHP组患者血清miR-218水平高于MPE组和SPE组(P<0.05),血清miR-155和ET-1水平低于MPE组和SPE组(P<0.05);MPE组血清miR-218水平高于SPE组(P<0.05),血清miR-155和ET-1水平低于SPE组(P<0.05);血清miR-218与HDCP患者病情严重程度呈显著负相关(P<0.05),miR-155和ET-1与患者病情严重程度呈正相关(P<0.05);血清miR-218与miR-155、ET-1呈负相关关系(P<0.05),血清miR-155与ET-1呈正相关关系(P<0.05).结论:血清miR-218、miR-155和ET-1水平水平变化与HDCP患者病情严重程度具有显著的相关性.     

血浆miR-127-3p及miR-129-5p分子与狼疮性肾炎微观血瘀证的相关性探讨

[目的]探讨狼疮性肾炎(LN)患者miR-127-3p、miR-129-5p分子的表达情况及与微观血瘀证和相关临床指标的相关性.[方法]收集符合微观血瘀证及微观非血瘀证的LN患者各30例,同时选取15例健康志愿者作为健康对照组.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测所有受试者血浆miR-127-3p、miR-129...     

miR-21、miR-155在乳腺癌患者血液与肿瘤组织中表达水平的相关性研究

目的 对健康女性血清及乳腺癌患者血清中miR-21和miR-155表达水平进行实时定量PCR检测,同肿瘤患者癌组织与对应癌旁组织的miR-21和miR-155表达水平的变化趋势相比较,以评价血清中miR-21和miR-155在乳腺癌早期诊断中的潜在价值.方法 收集健康女性血液和患者血液与患者癌组织和癌旁组织,利用实时荧光定量PCR对提取的RNA miR-21和miR-155进行相对定量检测,得到miR-21和miR-155在血清中变化趋势与在组织中变化趋势的相关性.结果 miR-21和miR-155在肿瘤组织的表达水平明显高于其在癌旁组织的表达水平,miR-21和miR-155在乳腺癌患者血清中的表达水平也要高于其在健康体检者血清中的表达水平.血清中miR-21和miR-155表达水平变化趋势与组织中miR-21和miR-155表达水平变化趋势一致.结论 血清中miR-21和miR-155能反映乳腺癌的发生,miR-21和miR-155有可能作为乳腺癌早期诊断的肿瘤标志物.     

体外循环对血管内皮细胞和内皮素-1影响的研究

目的　本实验通过对血栓调节蛋白、血管性假血友病因子的观察 ,旨在了解体外循环 (CPB)对全身血管内皮的急性损伤 /活化 ,以及内皮素在该过程中的变化。方法　 12例先天性心脏病心内畸形矫治术患者 ,房缺修补术 6例 ,室缺修补术 6例。采用异丙酚、咪唑安定、维库溴胺和芬太尼诱导 ,麻醉维持以吸入异氟醚和分次静脉注射维库溴胺、芬太尼、安定及氯胺酮等。CPB中非搏动灌注 ,灌注流量为 2 .0～ 2 .6L/ (min·m2 ) ,鼻咽温 3 2～ 3 3℃。于麻醉后CPB前、CPB3 0min、停CPB、停CPB后 1h、2 4h、72h、6个时点采集静脉血 ,动态观察患者血浆中血栓调节蛋白 (Thrombomodulin ,TM)、血管性假血友病因子 (vonWillebrandFactor,vWF)和内皮素 - 1在该过程中的变化。结果　TM、vWF在CPB3 0min时己显著升高 ,至停CPB时升至最高点 ( 6.3± 2 .1)ng/ml和 ( 2 42 .9± 84.0 ) % (p<0 .0 1) ,而后有下降趋势 ,但至停CPB后 72h仍未恢复到CPB前水平 ( p<0 .0 5或 p<0 .0 1)。ET - 1在整个过程中先下降后上升 ,停CPB后 1h( 72 .6± 16.9)ng/L与 72h( 99.8± 44 .5 )ng/L比较有显著性差异 ( p<0 .0 5 )。结论　CPB可导致血管内皮细胞的广泛损伤 /活化     

血栓前状态分子与冠心病血瘀证的相关性研究

目的探讨血栓前状态(PTS)分子与冠心病血瘀证之间的相关性。方法研究分为家系冠心病血瘀证组、家系冠心病非血瘀证组、家系非冠心病血瘀证组、家系健康人组、非家系冠心病血瘀证组、非家系健康人组6组,运用ELISA试剂盒检测外周静脉血血浆(或血清)中血栓调节蛋白(TM)、血小板P-选择素(P-Selectin)、凝血酶原片段1、2(F1+2)、可溶性纤维蛋白单体(SFMC)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、凝血酶-抗凝血酶III复合物(TAT)等分子水平。结果家系人群研究中冠心病血瘀证患者与健康人比较TM、t-PA、P-Selectin、F1+2、TAT水平增加,SFMC、PAI-1水平无差异;冠心病血瘀证患者与冠心病非血瘀证患者比较TM、t-PA、P-Selectin、TAT、SFMC水平增加。非家系冠心病血瘀证与非家系健康人比较各PTS分子均无差异。结论家系人群中PTS分子与冠心病血瘀证存在一定相关性,但抗凝血、促凝血等相互拮抗的分子水平变化趋势一致值得进一步探讨;非家系冠心病血瘀证与健康人比较PTS分子均无差异;且PTS分子水平在家系和非家系人群中有明显区别,这种差异是否与遗传因素有关也值得后续研究进一步探索。     

URSA患者绒毛组织中细胞凋亡及血管新生异常与miR-155表达的关系

目的:探究URSA患者绒毛组织中细胞凋亡及血管新生异常与miR-155表达的关系.方法:选择2014年1月~2015年1月来我院妇产科行清宫术后的孕妇的标本64例,其中URSA患者38例,剩余26例,将64例患者按照是否为URSA患者分为两组,即URSA组、对照组.对miR-155的表达量与细胞凋亡分子Bcl-2、Bcl-xl及血管新生分子VEGF、HIF-1α、sFlt-1的表达量记录,并与miR-155的表达量进行对比.结果:miR-155的表达量与细胞凋亡分子Bcl-2、Bcl-xl的表达量呈正相关,与血管新生分子VEGF、HIF-1α的表达量呈正相关,与sFlt-1的表达量呈负相关,且两组患者的miR-155、Bcl-2、Bcl-xl的表达量不同,URSA组显著低于对照组,且URSA组miR-155、VEGF、HIF-1α的表达量显著低于对照组,sFlt-1的表达量则显著高于对照组.结论:URSA绒毛组织中细胞的凋亡及血管新生与miR-155存在关系,且miR-155的表达量下降则会导致绒毛组织中的细胞过度凋亡.     

气虚血瘀证与冠心病血浆一氧化氮、内皮素和血管紧张素Ⅱ含量的相关性研究

目的:通过检测冠心病(Coronary heart disease,CHD)患者的血浆一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)等血管活性物质的含量,探讨血管内皮细胞功能在冠心病气虚血瘀证中的作用.方法:对CHD气虚血瘀证组112例、CHD非气虚血瘀证组108例、非CHD气虚血瘀证组110例和健康人对照组100名检测分析血管内皮细胞产生的NO、ET、AngⅡ等血管活性物质.结果:ET、Ang Ⅱ的异常程度均呈CHD气虚血瘀证组＞CHD非气虚血瘀证＞健康人对照组的趋势(P＜0.05或P＜0.01);而CHD气虚血瘀证组和非冠心病气虚血瘀证组之间差异无显著性(P＞0.05).结论:血管内皮细胞分泌的NO、ET、AngⅡ等血管活性物质与CHD形成及病情变化密切相关,是CHD“气虚血瘀”病理重要标志物.