龙葵碱对人结肠癌鸡胚移植模型血管生成的影响

目的：建立人结肠癌鸡胚移植模型,研究龙葵碱对其血管生成的影响。方法将鸡胚分为对照组和低剂量组、中剂量组、高剂量组（均n＝10）,将培养的人结肠癌细胞系HT‐29细胞株接种到鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）上,通过立体显微镜、Image‐proplus6．0图像分析软件及免疫组织化学苏木精‐伊红（HE）染色法,观察移植瘤在CAM上血管生成的特点,及不同龙葵碱剂量对血管生成的影响。结果HT‐29细胞接种到CAM第3～5天,大量血管向瘤体集中,长入或跨越瘤体表面,肿瘤迅速生长。给药后第5天进行拍照,图像分析,定量计算血管新生面积明显低于对照组,且呈剂量依赖性,各组间差异有统计学意义（P＜0．01）。免疫组织化学检测表明不同剂量龙葵碱的微血管密度明显低于对照组,与血管新生面积相一致;ki‐67抗原表达指数逐渐下降,实验组低于对照组,且各组间差异有统计学意义（P＜0．01）。结论龙葵碱能明显抑制人结肠癌HT‐29细胞株诱导的血管生成,从而抑制肿瘤的生长,为抗肿瘤血管生成的治疗方面提供了重要依据。     

水蛭、斑蝥对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响

目的研究中药水蛭、斑蝥对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响。方法将12只Wistar大鼠随机分为水蛭组(高低剂量组)、斑蝥组(高低剂量组)、血清组和空白组,中药水蛭、斑蝥各制成水煎液,灌胃7d,采血清备用。建立6d鸡胚绒毛尿囊膜血管模型,观察各组血清对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响。结果水蛭高剂量组有明显地抑制新生血管数量的作用,与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05);斑蝥高、低剂量组与空白组比较,亦能较强地抑制新生血管数(P0.05);水蛭、斑蝥高低剂量组有抑制血管生成面积的趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。结论虫类中药水蛭、斑蝥对CAM血管生成有一定的抑制作用。     

重组血管生成抑制因子r—K4K5的分离纯化与功能鉴定

目的 分离纯化r-K4K5,探讨r-K4K5对牛毛血管内皮（BCE）细胞、鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）新生血管生成及实验性人肺腺癌SPC-A1生长的抑制作用。方法 通过盐析、凝胶过滤提纯r-K4K5,BCE细胞在含r-K4K5的DMEM中培养24、48、72h后分别计数;孵化7d的鸡胚加r-K4K5后继续孵育72h,观察新生血管生成;已经接种入SPC-A1肺腺癌组织的荷瘤裸小鼠（Balb/c,nu/nu）,瘤旁注射r-K4K5继续饲养,观察肿瘤生长变化。结果 r-K4K5抑制BCE细胞增殖,48～72h作用明显;r-K4K5处理的CAM组中直径小于50um的小血管明显减少;高剂量r-K4K5治疗的荷瘤裸小鼠组,平均瘤重与对照组比较有统计学意义。结论 r-K4K5能够抑制BCE细胞增殖,抑制鸡胚CAM新生血管生成,抑制实验性人SPC-A1肺腺瘤生长。     

高山尖杉酯碱抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成

目的　了解高山尖杉酯碱 (H)对血管生成的影响 ,为进一步研究打基础。方法　于发育第 8天的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上植入明胶海绵载体 ,其中加入不同剂量的H ,计数长入载体的血管和载体内的微管密度 (MVD)。结果　在CAM上 ,长入载体边缘的血管数和MVD在 10 0ng以上组与对照组间的差别有统计学意义 (p <0 .0 1)。结论　在CAM中 ,10 μg/kg的低剂量能抑制CAM的血管生成 ,显示了H有较强的抗血管生成活性     

海金沙草对鸡胚血管新生的抑制作用

目的 研究从海金沙草中分离的各类成分对鸡胚血管新生的抑制作用,筛选出抑制效果最佳的有效成分.方法 系统提取海金沙草的各类组分,利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)和鸡胚卵黄囊膜(YSM)模型,观察海金沙各类组分对鸡胚血管新生的作用.结果 海金沙正丁醇组及正丁醇黄酮组处理过的CAM和YSM血管新生密度和迁移面积明显低于其他组分和对照组,差异有统计学意义.结论 海金沙正丁醇组及正丁醇黄酮组对鸡胚血管新生有明显抑制作用.     

水蛭对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响

目的:评价水蛭对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响.方法:制备大鼠含药血清,制备鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型,比较大鼠水蛭含药血清和空白对照血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响.结果:水蛭含药血清存在促CAM血管新生作用.结论:水蛭对活体血管的生成具有促进作用,可能为水蛭在治疗缺血性心血管疾病和其他缺血性疾病中的应用提供新的观点.     

菲牛蛭素对血管新生作用的研究

目的：通过菲牛蛭素刺激人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）血管,研究其对血管新生的影响.方法：体外培养HUVEC,以血管内皮生长因子（VEGF）作阳性对照药,采用四甲基噻唑蓝（MTT）比色法测定菲牛蛭素对HU-VEC细胞活力的影响,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测菲牛蛭素对HUVEC培养液中VEGF释放含量的影响;制备CAM模型,生理盐水作对照,观察不同浓度菲牛蛭素对血管生成的影响.结果：菲牛蛭素终浓度0.25 U/mL时细胞活力最强,与空白对照组比较增殖率为28.4％,且在此浓度培养液中VEGF含量最高,比空白对照组高出80.7％;与生理盐水对照组比较,CAM血管总数明显增加,大、中血管数增加显著（P＜0.01）,小血管数变化不明显（P＞0.05）,其中以22 U/mL剂量组增生作用最明显.结论：菲牛蛭素对血管新生具有促进作用,这可能为缺血性疾病治疗提供依据.     

鸡胚尿囊膜法筛选具有抑制血管生成作用的中药

目的筛选具有抑制新生血管生成作用的药物,为肿瘤治疗提供新的药物。方法种蛋随机分为16组,孵育8 d后,将熬制的15种单味中药及0.14 mol.L-1NaCl溶液分别加于鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)表面的载体上。作用4 d后,观察统计CAM上血管生长状况。结果在筛选的15味中药中,牡丹皮和香附子对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成具有明显的抑制作用,与NaCl组相比有显著差异(P<0.05)。结论牡丹皮和香附子能有效抑制新生血管生成。     

川芎嗪对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成影响的实验研究

目的:观察川芎嗪对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。方法:将90只8 d龄鸡胚随机分成6组(生理盐水组、贝复济组、盐酸川芎嗪A组、B组、C组、D组),建立CAM模型,将NS、bFGF、4种浓度的川芎嗪分别加在CAM表面的载体上,继续孵育3 d后制备CAM标本,观察血管生成表现,并进行新生血管计数。结果:川芎嗪各浓度组新生血管数增加,与生理盐水组和贝复济组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:川芎嗪具有促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成作用,川芎嗪促血管生成作用与其浓度有一定依赖关系。     

益气养阴方抗血管生成作用的实验研究

目的：探讨益气养阴方抗鸡胚绒毛尿囊膜（Chick chorioa—llantoic membrane,CAM）血管及肿瘤细胞诱导CAM血管生成的效应。方法：制备CAM模型及接种肿瘤细胞的CAM模型,采用血清药理学方法制备含药血清。观察含药血清对CAM血管和肿瘤细胞诱导CAM血管生成的影响,并与生理盐水血清组对照。结果：益气养阴方含药血清可抑制CAM血管及肿瘤细胞诱导的CAM血管生成,各剂量含药血清组血管数目（高剂量组：9．662±0．599,中剂量组：9．682±0．818,低剂量组：10．242±0．640）与血管面积（高剂量组：8878．500±1870．115,中刺量组：9369．750±3206．427,低剂量组：11226．875±2665．071,mm^2）均较对照血清纽（10．511±0．990,12759．375±4379．058,mm^2）明显减少,与生理盐水对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：益气养阴方对血管生成有明显抑制作用。     

益气生骨冲剂对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的探讨益气生骨冲剂对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）血管生成的影响。方法取9日鸡胚24枚建立CAM模型，随机分为实验组和空白组，每组12枚。实验组加药益气生骨冲剂于无血管区的载体上，空白组加生理盐水。每日上下午各加药1次。3d后检测CAM载体周围1．5cm的血管数目。结果实验组小血管数目和血管总数均多于空白组，两组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论益气生骨冲剂可以促进血管内皮生长因子及其受体表达，促进血管内皮细胞的增殖可能是促进血管生成的原因之一。     

当归、黄芪注射液对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的探讨当归、黄芪注射液对鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)血管生成的影响。方法种蛋在37.8℃孵育7d后制备CAM模型,当归、黄芪注射液及其不同配比滴加于CAM表面的载体上,继续孵育3d,观察鸡胚存活状况,然后制备鸡胚CAM标本,解剖显微镜下计数新生毛细血管数目。结果当归、黄芪注射液及其不同配比均具有促进鸡胚CAM血管生成作用,与生理盐水对照组相比有显著性差异(P<0.05),除当归与黄芪1∶5,其他各组药效低于表皮生长因子(EGF)(P<0.05)。结论当归注射液、黄芪注射液及其不同配比具有显著促进鸡胚CAM血管生成作用,其可能的机制是血管内皮细胞的增殖与迁移。     

纤维母细胞生长因子10对鸡胚尿囊膜血管形成的作用

目的探讨纤维母细胞生长因子10(FGF10)对鸡胚尿囊膜血管生长作用。方法应用胶原蛋白共培养方法,分别于培养液中加入100ng·mL-1的FGF10(FGF10组)、100ng·mL-1 FGF10和20μmol·L-1 SU5402(SU5402组)作用于鸡胚尿囊膜血管内皮细胞组织块,同时设立空白对照组,观察3组新生血管的形成状况。结果与空白对照组比较:FGF10组新生血管形成面积显著增加(P<0.001);SU5402组中SU5402可抑制FGF10的作用,其新生血管形成面积显著下降(P<0.001)。结论 FGF10能促进鸡胚尿囊膜新生血管的形成。     

蝎毒多肽对鸡胚血管生长的抑制作用

目的:探讨从东亚钳蝎蝎毒中分离的蝎毒多肽(STP)对血管形成的抑制作用。方法:采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)的新生微血管模拟肿瘤的新生血管,用玻璃纤维滤纸吸附生理盐水和0.8μg、0.5μg的STP作为移植片,分别置入各组鸡胚的CAM上,孵化48h后,观察STP对CAM新生血管形成的影响。结果:0.5μgSTP实验组微血管密度及母血管的扩张均明显低于生理盐水组(P<0.01),表明STP能明显抑制CAM的新生血管的生长。结论:提示小剂量蝎毒多肽是一种有效的天然新生血管形成阻断剂。     

几种收涩中药对鸡胚尿囊膜血管生成影响的实验研究

目的研究收涩中药乌梅、椿皮、金樱子、五味子、五倍子、赤石脂、禹余粮对鸡胚尿囊膜生成的影响。方法采用血清药理学方法,制备收涩药物的大鼠血清;建立鸡胚绒毛尿囊膜模型,并应用鸡胚绒毛尿囊膜模型进行活性筛选。于鸡胚发育的第5天,将加药物血清后的明胶海绵载体加于鸡胚绒毛尿囊膜上,孵育48h后,固定鸡胚绒毛尿囊膜,取出,采用医用图像采集系统分析结果。结果收涩药物金樱子、五味子、五倍子、乌梅、赤石脂、椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管数目有一定抑制作用（P〈0．05）;乌梅组、椿皮组对抑制新血管生成有一定的趋势,与空白对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论收涩中药对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用。     

DMPP对于鸡胚血管形成的抑制作用

目的研究1,1-二甲基-4-苯基哌嗪(1,1-dimethyl-4-phenyl piperazinium,DMPP)对于鸡胚发育期血管新生的作用。方法采用质量浓度为50μg/mL的DMPP溶液局部处理鸡胚绒毛尿囊膜(chickenchorioallantoic membrane,CAM)和鸡胚卵黄囊膜(yolk sac membrane,YSM)表面,分别用肉眼和显微镜观察与被测物作用后CAM膜上血管生成情况和YSM膜血管密度和生长率的变化。结果 DMPP能明显抑制CAM模型血管的生成和YSM模型的血管面积和密度的增长。结论 DMPP可抑制鸡胚血管的形成。     

Image-Pro Plus图像分析软件定量鸡胚尿囊膜血管新生面积的方法

目的应用Image-Pro Plus 5.0图像处理和分析软件,研究鸡胚尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)血管新生面积定量的新方法。方法20只发育良好的7日龄鸡胚,分为龙葵给药组和对照组,每组10只。将中药龙葵水提液及等量蒸馏水吸附于5 mm直径的定性滤纸,置于CAM上。利用Image-Pro Plus 5.0软件,定量血管新生面积、蛋壳开窗处对应的CAM面积,计算出血管新生面积与CAM面积的比值。结果用Image-Pro Plus 5.0可方便、自动、准确地进行给药前后的数据收集和面积计算。统计分析表明,受试物龙葵可明显抑制CAM血管新生,与对照组比较有极显著差异(P<0.001)。结论Image-Pro Plus 5.0图像处理和分析软件是一种高效、准确的统计血管新生面积的工具,用该软件定量蛋壳开窗部位下的血管新生面积占开窗部位所对应的CAM总面积,不仅操作简便,而且数据计算自动生成,可较准确地反映鸡胚血管新生情况。     

藏茵陈水提物对斑马鱼新生血管的抑制效果及调控机制

【摘要】 目的 探讨藏茵陈水提物对斑马鱼新生血管的抑制效果及调控机制。 方法 选取TG 品系的 fli1a EGFP 转基因斑马鱼为实验动物,收集90个22hpf发育正常的斑马鱼胚胎,分为空白对照组、阳性对照组、藏茵陈水提物组,每组各30例。空白对照组予以0.1%二甲基亚砜（DMSO）、阳性对照组予以瓦他拉尼（工作浓度为 5μg/ml）、藏茵陈水提物组予以藏茵陈水提取物（工作浓度为 200μg/ml）。在体式荧光显微镜下观察藏茵陈提取物处理的鱼胚血管表型并拍照,分析各样品对斑马鱼体节间血管（ISVs）生成的影响。利用实时荧光定量 PCR 技术检测处理后鱼胚的ptp rb、nr2f1a、VE cadherin、S1P1、CD146、pik3r2、netrin1a、fgfr1a、fgfr2、fgfr3、fgfr4基因的表达情况。 结果 与空白对照组及阳性对照组相比较,藏茵陈水提取物组鱼胚ISVs变薄,背主动脉出芽减少,显示出抑制斑马鱼血管生成的作用（P＜0.05）。藏茵陈水提物组的nr2f1a基因出现下调,但与空白对照组及阳性对照组相比较差异无统计学意义（P＞005）,ptp rb基因出现下调,差异有统计学意义（P＜0.0001）,VE cadherin、S1P1、CD146、pik3r2、netrin1a、fgfr1a、fgfr2、fgfr3、fgfr4基因出现上调,但与空白对照组及阳性对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 藏茵陈水提取物有抑制斑马鱼新生血管的作用,其机制与下调ptp rb的基因表达有关。     

氟尿嘧啶抗血管生成作用的实验研究

目的：探讨氟尿嘧啶(5-FU)的抗血管生成作用。方法：以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)原代培养模型，MTT法测定5-FU对HUVEC增殖的影响；采用鸡胚尿囊膜血管形成模型(CAM模型)，观察5-FU对鸡胚尿囊膜新生血管的抑制作用。结果：5-FU在非细胞毒浓度下可在体外抑制HUVEC的增殖，在体内抑制鸡胚尿囊膜新生血管形成。结论：5-FU在非细胞毒浓度下具有抗血管生成作用。     

益气活血化瘀通腑方对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的:观察益气活血化瘀通腑方对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响。方法:分别选取桂枝茯苓丸及鱼精蛋白做阳性对照,生理盐水做阴性对照,观察不同剂量益气活血化瘀通腑方对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。结果与结论:该方具有抑制CAM血管生成的作用,且作用大小呈剂量依赖关系。