不同来源脾结节生成细胞增殖与分化性能的比较

应用单个脾结节和性染色体作为天然的细胞遗传学标志,证明存在于纯系LACA或C_(57)胎鼠肝脏和成年小鼠骨髓中的脾结节生成细胞(简称CFU-S)大多具有重建照射小鼠髓系与淋巴系细胞的功能。因而,是一类淋巴-髓系干细胞。然而,存在于正常成年小鼠外周血中的CFU-S,虽然它们也可以在照射小鼠脾脏上生成由各系血细胞组成的脾结节,但其中至少有一部分已经失去了重建照射小鼠造血功能的能力,反映了CFU-S在功能上的不均一性。脾结节测试技术是目前测定造血干细胞的一项重要技术,但是,能够生成脾结节的细胞,不一定都具有造血干细胞的基本特性,一些由造血干细胞分化的多向性造血祖细胞也可能在照射的小鼠脾脏上生成脾结节。     

“抗微1号”对γ—射线照射小鼠多能造血干细胞的保护作用

本实验采用了集落形成单位测定法观察抗微1号(KW-1)对γ-射线照射小鼠多能造血干细胞的保护作用。在照射前后各给KW-15天,能增加照射小鼠脾脏内源性造血灶的形成,同时,使脾脏重量和骨髓有核细胞数(NNBMC)较照射对照组明显增加,从而改善小鼠的整体造血功能;KW-1可显著加快照射小鼠多能造血干细胞(CFU-S)的增殖,使其恢复加快,4Gy照射后第14天,KW-1组CFU-S已恢复到正常水平的67.8%,而照射给水组则仅恢复到正常水平的40.7%;CFU-S剂量—存活曲线的结果表明,KW-1组与照射给水组之D_o(存活曲线上使存活细胞每减少63%所需要的照射剂量)和n(射线对靶子细胞的击中次数)无显著差异,说明KW-1对小鼠CFU-S的放射敏感性无明显影响。因此,KW-1防止照后效应,促进照射后CFU-S的增殖恢复是其抗辐射作用机制之一。     

厌氧棒菌菌苗对造血干细胞增殖的影响——巨噬细胞调控造血的初步探索

本实验表明注射厌氧棒菌菌苗(简称CP菌苗)对正常小鼠多向造血干细胞(CFU-S)和粒巨噬系祖细胞(CFU-GM)的增殖均有明显的促进作用,此外CP菌苗对受750rad照射小鼠的骨髓干细胞也有明显的保护作用。实验中又观察到注射CP菌苗组腹腔巨噬细胞吞噬功能明显增高。     

小牛胸腺素F5对小鼠骨髓造血干细胞辐射损伤的防护作用

小鼠受200～100拉德γ线一次全身照射后连续7天注射胸腺素F₅50微克一天,测定多向性造血干细胞(CFU-S),实验组D₀值为300拉德,对照组为150拉德,根据D₃₇求得的剂量递减系数为2,表明胸腺素对CFU-S有保护作用。小鼠一次全身照射100～400拉德后,骨髓细胞经胸腺素1微克/平皿体外培养48小时,其粒系造血干细胞(CFU-S)存活率高于对照组,说明胸腺素对CFU-S有一定保护作用。如在照射上述剂量后,注射胸腺素140微克/天,连续7天,其CFU-S存活率比对照组明显增高,说明胸腺素对CFU-S有促进增殖、分化,即一定的治疗效果。如给小鼠注射胸腺素100微克/天连续7天后,经125拉德照射,CFU-S的活存率比对照组明显提高;但当剂量增人到375及625拉德时,未见有保护作用。     

低剂量率γ线连续照射后造血损伤与恢复的长期观察

小鼠经低剂量率(70拉德/天)γ线连续照射25天后,造血干细胞和造血祖细胞数量大幅度减少。在连续观察的一年期间,虽然骨髓有核细胞数和晚红系祖细胞(CFU-E)很快恢复到了正常水平,但造血干细胞(CFU-S)、祖细胞(BFU-E、CFU-GM)却始终处于低下状态,其水平相当于向年龄正常动物的50～70%.骨髓造血微环境也同时受到不同程度的破坏,停止照射詹半年其CFU-F只恢复至正常的70%.这些结果表明,小鼠经低剂量率γ线连续照射后,造血组织中存在着潜在的损伤,它是产生一系列辐射远后效应的重要原因。     

小鼠淋巴细胞对受γ线照射的造血干细胞增殖和分化的放大作用

我们过去的工作已经证明,正常的小鼠T淋巴细胞对正常多向性造血干细胞(CFUS)的增殖有放大作用,但对受辐射损伤的干细胞是否仍有调控作用,是个值得探讨的问题,于是我们又研究了淋巴细胞对受不同剂量γ线照射的CFU-S增殖分化的调控作用。材料和方法 1.动物: LACA纯种小鼠。供体小鼠50天日龄雌性;受体小鼠60—70天日龄雌雄均用。     

亚致死剂量X射线照射的小鼠骨髓粒系祖细胞(CFU—C)的辐射敏感性及其数量的恢复

多能造血干细胞(CFU-S)是造血组织中一组未分化的细胞群,它可根据需要而产生不同的血细胞。这些未分化的增殖细胞通常对电离辐射非常敏感,并且这些细胞的枯竭可造成机体的严重辐射损伤。因此很多学者反复研究了造血干细胞在恢复射线损害造血组织方面的作用。近来一些学者广泛注意到CFU-C的自身更新能力,认为受照射动物的CFU-C是由造血组织中原有活存的但非同一细胞群的CFU-S或CFU-C再生的,活存的CFU-S的子代对X射线     

照射骨髓基质细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响

采用辐照方法将骨髓基质细胞(BMSC)预先强化,再经体外培养、富集后与骨髓细胞(BMC)一起经尾静脉输注给全身致死剂量照射的小鼠。采用股骨BMC计数,CFU-GM和CFU-S测定及股骨切片组织学观察等方法研究了这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响。结果表明输入的BMSC对辐射损伤小鼠造血重建具有促进作用。进一步研究表明,这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的促进作用不是由于其中含有造血干细胞(HSC)所致,而是通过其经血循环迁徒至造血组织后对同时输入BMC中的HSC增殖和向粒系分化发挥支持和刺激作用来实现的。     

造血干细胞的竞争性分化在照后白细胞减少中的作用

LACA小鼠经5 Gyγ线全身照射后l～4天腹腔注射经分离,洗涤和浓集的红细胞(供血鼠预先照射8.5Gyγ线)。其血红蛋白含量上升到正常对照的140.4%。照后20天骨髓CFU-E含量比照射对照组低4倍。虽然其红系造血受到明显抑制,但其骨髓CFU-S,CFU-GM及外周血粒细胞数分别比照射对照组高28、80.3和97.6‰。结果表明,小鼠受照后,存在造血干细胞的竞争性分化,向红系统分化占优势。多血通过反馈机制改变了干细胞的分化方向,使之多向粒系统分化.从而增加了外周血粒细胞数置。本文报告的结果表明照后造血干细胞的竞争性分化及向红系分化占优势是外周血白细胞数量减少的原因之一。     

造血细胞移植的进展

一般认为,骨髓移植就其本质来说与造血干细胞移植是一致的,其中主要起作用的是造血干细胞。造血细胞移植是指骨髓、胚胎肝和周围血白细胞中造血干细胞移植而言。造血干细胞可分为多向性干细胞和定向性干细胞,多向性造血干细胞(CFU-S)进一步分化为红系定向干细胞(CFU-E)和粒系定向干细胞(CFU-C)等,造血干细胞经过干细胞池、增殖池、成熟池和功能池4个阶段,发展成为各种血液有形成份。 许多因素可以影响造血干细胞的增殖和分化。各种造血器官的基质细胞所建立的特殊局部环境-造     

应用肾上腺素时照后造血组织反应特点

作者曾证明,一种照前或照后应用具有抗放作用的生物一元胺——5羟色胺能减轻小鼠造血系统的辐射损伤。为了阐明其它生物一元胺类是否也有5羟色胺的这两种作用,观察了照前和照后注射肾上腺索对F_1小鼠的造血组织反应特点。F_1(CBA×C57B1)小鼠受X线1.5～7.0戈瑞照射,剂量率48伦/分。照前15分钟、照后立即或5天,每只小鼠皮下注射0.1～0.07mg(4.8～3.6mg/kg)肾上腺素。照后不同时间检查小鼠股骨骨髓有核细胞数和脾重,照后8天测定内源性或外源性脾结节数。实验结果表明(见表),照前注射肾上腺素的小鼠骨髓细胞数和脾重的恢复都比照射对照小鼠为快,照后16天这两项指标巳接近正常动物水平,CFU-S活存     

造血干细胞与免疫活性细胞的沉降特性

应用Simonsen的脾指数测定方法以及体内生成脾结节和体外琼脂培养方法,分别研究了小鼠脾脏和外周血中造血干细胞和免疫活性细胞在自然沉降条件下的沉降特性。在小鼠脾脏细胞的沉降试验中,CFU-S的沉降速度为4.50毫米/小时,CFU-C的沉降速度为6.69毫米/小时,脾指数阳性细胞的沉降速度为3.57毫米/小时。在小鼠外周血白细胞的沉降试验中,CFU-S的沉降速度为4.96毫米/小时,脾指数阳性细胞的沉降速度为5.12毫米/小时。上述沉降试验表明,造血干细胞与免疫活性细胞有不同的沉降速度和分布特性,因此,有可能通过自然沉降,在一定程度上分开这两类细胞,其中,粒系定向造血干细胞(CFU-C)的沉降速度要高于多向性造血干细胞(CFU-S),因而,在沉降分离中CFU-C与免疫活性细胞可以得到较高程度的分离。从造血细胞中分离免疫活性细胞是当前造血干细胞移植中的重要研究课题。本文对于应用速度沉降装置分离免疫活性细胞、减轻造血细胞移植中的移植物抗宿主反应(GVHR)的前景作了讨论。     

小鼠移植骨髓后供体细胞的追踪结果及其对临床的意义

LACA系和上海种小鼠于一次全身照射9～10Gy后分别移植正常异性同系、同窝或同种动物骨髓。移植骨髓后一年内不同时间分批活杀动物,借C分带染色识别Y染色体法追踪受体骨髓中供体型细胞所占比例。追踪观察结果表明,决定供体造血干细胞能否在受体造血组织中成活、增殖并长期替代造血功能的因素为照射剂量及供、受体间遗传学关系。本文结合本实验结果,讨论了当前临床上对一些血液病进行骨髓移植时有关照射剂量与方法的问题。     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对骨髓造血干细胞的辐射防护作用

用照射小鼠的骨髓造血干细胞(CFU-S)外源性脾结节形成法,评价人基因工程重组SOD(rhSOD),聚乙二醇(PEG)修饰的长半衰期重组SOD(PEG-SOD)对CFU-S的辐射防护作用.结果显示:rhSOD和PEG-SOD均能明显提高CFU-S产率,其中rh SOD在照射前1h给药效果好,而PEG-SOD在照射前2～3h给药作用更为明显,化学修饰后SOD血浆半衰期延长,将使给药时机及药物作用持续时间得到改善.     

移植长期培养的骨髓细胞对照射半同种小鼠疗效的初步观察

影响同种骨髓移植成功的主要障碍是发生免疫反应,包括宿主抗移植物反应(HVGR)和移植物抗宿主病(GVHD)。特别是骨髓植入受体后发生的GVHD,可使宿主致死。在半同种骨髓移植时,用亲代骨髓给F_1受体移植,虽然可不发生排斥反应,但仍会发生GVHD。若将骨髓移植物经过处理去除T细胞,则会明显地减轻或避免GVHD发生。例如用抗Thy-1,2抗体处理供体小鼠的骨髓清除T细胞,再移植给致死照射的同种小鼠,可大大提高动物的活存率。小鼠骨髓长期培养可长时间地维持造血干细胞(CFU-S)增殖和分化为粒系祖细胞及     

单次注射聚乙二醇化重组人巨核细胞生长发育因子促进骨髓抑制小鼠多系造血功能恢复

目的:观察一次静脉注射聚乙二醇化重组人巨核细胞生长发育因子(PEG-rHuMGDF)对亚致死剂量全身照射小鼠造血恢复的影响。方法:8周龄雄性BALB/c小鼠,用3.5GyX射线照射后1小时静脉分别一次注射PEG-rHuMGDF1、8、80和640μg/kg,基因重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)10、50、250和1000μg/kg或赋形剂,观察其外周血象和照后5天内造血干/祖细胞及照射后12天脾集落生成单位(CFU-S)的变化。结果:照射后第8天,赋形剂组小鼠外周血小板数达最低值,此后开始上升,但第18天仍未恢复到正常值水平。PEG-rHuMGDF8μg/kg治疗小鼠的血小板最低…     

DHEA对放、化疗损伤造血功能保护作用的实验研究

目的：研究17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯（DHEA）对137Csγ射线和环磷酰胺（CTX）所致小鼠造血及免疫功能损伤的保护作用。方法分别用8．0 Gy 137Csγ射线和CTX建立C57BL/6小鼠动物模型,观察DHEA低、中、高3个剂量对两个模型小鼠的造血干细胞脾结节形成细胞（CFU-S）数、外周血WBC、骨髓有核细胞数、脾脏指数的影响。结果 DHEA各组对小鼠137Csγ射线照射所致的外周血WBC、CFU-S数、骨髓有核细胞数的降低具有保护作用,并增大了脾脏指数。DHEA各组对环磷酰胺引起的小鼠WBC、CFU-S数、骨髓有核细胞数降低有抑制作用。结论 DHEA能减轻辐射和环磷酰胺对小鼠造血系统的损伤。     

造血干细胞辐射敏感性的比较

本文研究了在体内外照射条件下小鼠骨髓多向性造血干细胞(CFU-S)和粒系定向干细胞(CFU-C)的辐射敏感性。它们的D(?)值分别为103.4拉德和173.7拉德,反映了CFU-S和CFU-C是两类在性质上不全相同的干细胞群。在目前尚未建立起除啮齿类动物以外的多向性造血干细胞测定技术的情况下,我们应用体外琼脂培养技术,比较了在体外照射条件下狗与小鼠骨髓CFU-C的辐射敏感性,它们的D_0值分别为58.6拉德和190.2拉德,反映了两者在辐射敏感性上存在着明显的差异,为阐明不同种属动物的不同辐射耐受性提供了一个根据。联系到AET具有降低造血干细胞辐射敏感性以及提高动物的辐射耐受性的事实,进一步论证了在造血型放射病的发生和发展中,造血干细胞的损伤和修复是起着重要作用的。     

银耳制剂对小鼠骨髓造血干细胞及其放射敏感性的影响

水文研究了银耳制剂对小鼠骨髓及造血干细胞的影响。腹腔注射后早期,骨髓有核细胞数明显下降,而外用血白细胞数未见增多,药物使骨髓CFU-S和GM-CFC生成率显著提高,但对其放射敏感性的影响较小。该制剂对照射动物造血功能的恢复有明显的促进作用,揣测与其改善造血微环境有关。     

超氧化物歧化酶的辐射防护作用

本研究甩照射小鼠的活存率和外源性脾结节法评价了牛红细胞SOD的辐射防护作用.小鼠受875拉德γ射线照射前1小时静脉注射200mg/kgSOD可提高活存率50%,照后给药无效.小鼠受350拉德照射前或照射后静脉注射200或35mg/kg SOD,都能明显提高骨髓CFU-S的形成能力与总量,照后给药效果较低.照前与照后各注射一次35mg/kg SOD,可加强SOD对CFU-S的防护效果.照前腹腔注射或皮下注射SOD对骨髓造血干细胞也有良好的辐射防护作用.对SOD的辐射防护效果及其作用机制进行了讨论.