探讨EDTA热修复法在IHC检测乳腺癌Her-2中的应用价值

正乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤~([1]),人类表皮生长因子受体2(Her-2)阳性的乳腺癌患者预后较差,使用Her-2靶向药物治疗效果较好~([2])。正确检测和评定乳腺癌的Her-2蛋白表达和基因扩增状态,对乳腺癌的临床治疗和预后判断至关重要~([3])。目前国内最常用免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)检测Her-2状态~([4])。FISH检测成本大,不利于基层医院的普遍开展。IHC检测中常用的柠檬酸     

荧光原位杂交与免疫组织化学技术检测乳腺癌人表皮生长因子受体2基因扩增及蛋白表达研究

目的 探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测乳腺癌人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)基因表达及扩增状态的临床意义.方法 采用FISH和IHC技术分别检测35例乳腺癌患者手术切除标本的HER2基因和蛋白表达情况及17号染色体倍体性,分析HER2基因扩增和蛋白表达状态的差异与17号染色体倍体性的相关性.结果 IHC与FISH检测的总符合率为82.8％;FISH检测HER2基因扩增情况与IHC检查HER2蛋白表达为(卅)、(++)和(-/+)者的符合率分别为93.3％,60.0％和90.0％; HER2基因绝对拷贝数阳性和阴性的患者中分别存在26.7％和10.0％的17号染色体多体扩增.结论 IHC是初步筛查HER2基因状态的首选方法;IHC检测HER2蛋白阳性的乳腺癌标本存在假阳性,FISH可准确、稳定地检测乳腺癌组织中HER2的基因状态及17号染色体倍体性.     

ALK在肺腺癌中表达情况的分析及靶向治疗

正表皮生长因子受体(EGFR)突变检测及其EGFR-TKI的使用是非小细胞肺癌(NSCLC)治疗史上里程碑式的进展~([1])。继EGFR之后,间变性淋巴瘤激酶(ALK)重排也己成为NSCLC尤其是肺腺癌中一个非常重要的分子亚型~([2])。2007年Soda等~([3])首次在1例肺腺癌组织标本中扩增出一种致瘤的变异融合基因—棘皮动物微管相关类蛋白4-间变性淋     

肺癌组织中EGFR和K-ras表达的意义

正表皮生长因子受体(EGFR)在许多肿瘤中均会发生突变和(或)过度的表达,通过信号转导可以控制肿瘤的生长,并参与肿瘤新生血管的形成、浸润以及转移等过程~([1])。K-ras定位于染色体12p11.1-p12.1,具有三磷酸鸟苷酶的活性,可以结合GTP。在多种肿瘤中,ras基因均能够表达且发生突变,也可以直接在Ras/Raf/MEK/ERK通路的激活过程中起到作用~([2,3])。本研究通过检测94例肺癌患者组织中EGFR及K-ras蛋白的表达情况,研究二者在     

乳腺浸润性癌组织人表皮生长因子受体-2基因扩增状态与蛋白表达的比较及其与临床病理特征的相关性

目的探讨乳腺癌组织中人表皮生长因子受体-2(HER2)蛋白表达和基因扩增的一致性及临床意义,并分析HER2基因扩增与临床病理特征的相关性。方法采用全自动免疫组化(IHC)及荧光原位杂交(FISH)的方法,分别检测101例乳腺浸润性癌患者的蛋白表达及基因扩增状态。分析2种不同检测方法结果的差异,并揭示其临床意义。结果 101例浸润性乳腺癌中, IHC显示HER2蛋白1例为(-), 6例为(+), 81例为(++), 13例为(+++)。FISH显示HER2基因无扩增为75例, HER2基因有不同程度的扩增为26例。HER2蛋白(-)的1例及(+)的6例HER2基因均无扩增, HER2蛋白(++)的81例中HER2基因扩增的有14例, HER2蛋白(+++)的13例中HER2基因扩增的有12例。101例中FISH检测共发现9例17号染色体多体。FISH和IHC 2种检测方法的差异有统计学意义(P0.05)。FISH结果与患者的年龄相关(P0.05),与肿瘤组织学分级、肿瘤最大径、Ki67表达及患者腋窝淋巴结转移情况均无相关性(P0.05)。结论 IHC与FISH具有较高的一致性, IHC染色强度和基因扩增状态成正相关, IHC可作为临床使用赫赛汀的初筛方法,应联合应用FISH检测来确定临床用药及判断患者预后情况。     

新型血清标志物HER-2在乳腺癌诊疗中应用

正人表皮生长因子受体-2(HER-2),是定位于染色体17q12-21.32上的原癌基因—人表皮生长因子受体2基因(c-erbB-2基因)编码的相对分子质量为185000的跨膜受体样蛋白,具有酪氨酸激酶活性。该蛋白结构分为三个部分:胞外区域(ECD),跨膜区域与胞内酪氨酸激酶区域。HER-2基因在乳腺癌发生、发展中发挥重要作用~([1])。HER-2基因在20%左右乳腺肿瘤中过度表达,HER-2阳性患者可以选     

乳腺癌中GRB7的表达及临床病理意义

目的研究GRB7蛋白在乳腺癌中表达的意义。方法回顾性分析110例乳腺浸润性导管癌临床病理资料,采用免疫组化法(IHC)检测GRB7蛋白的表达情况,分析GRB7蛋白表达及临床病理意义,并同时采用荧光原位杂交(FISH)和免疫组化检测HER2基因和蛋白,研究GRB7蛋白与HER2基因相关性。结果 110例乳腺癌GRB7评分:0~1+57例(51.8%),2~3+53例(48.2%);GRB7过表达与淋巴结转移、肿块体积大、组织学分级高及Ki-67的指数高等临床病理特征有关,而与ER、PR及发病年龄无关;HER2基因扩增36例(32.7%),与GRB7的结果相关(P0.05)。结论 GRB7表达与HER2基因表达存在着一致性,可能依赖HER2的扩增与表达,是乳腺癌预后的重要生物学标记,可能成为新的药物靶点。     

数字PCR检测循环肿瘤DNA中HER2基因扩增对胃癌的预后评估

目的 探讨基于数字PCR(d PCR)检测循环肿瘤DNA(ctDNA)中人类表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增在胃癌进展监测及预后评估的临床应用价值。方法 选取2018年11月至2020年12月华中科技大学协和深圳医院收治的60例胃癌患者为病例组,以同期20名健康体检者为对照组。建立dPCR技术方法检测胃癌患者ctDNA中HER2基因扩增及阳性阈值,评价其与免疫组织化学（IHC）联合荧光原位杂交技术（FISH）病理诊断HER2表达结果一致性,分析胃癌患者术前ctDNA中HER2基因扩增与临床病理特征的关系。同时选择24例Ⅲ、Ⅳ期的进展期胃癌患者纳入随访研究,分析术后监测ctDNA中HER2基因扩增与无进展生存时间的关系。结果 HER2基因扩增比值的阳性阈值设为1.40,dPCR技术定量检测ctDNA中HER2基因扩增的敏感度、特异性分别达到0.90、0.94;胃癌患者dPCR检测HER2基因扩增、IHC与FISH联合检测HER2表达阳性率分别为20%(12/60)、16.7%(10/60),两种方法检测结果符合率一致性较好（k=0.778,P<0.01）。dPCR检测胃癌患者...     

IHC联合FISH 检测胃癌中HER2与CK8/18、p53、CEA的表达及其相关性研究

目的探讨IHC联合FISH检测胃癌中HER2及其与CK8/18、p53、CEA表达的相关性研究。方法以我院2017-01—2018-06月收治的120例胃癌手术患者为研究对象,分别采用免疫组织化学(IHC)检测胃癌组织中HER2蛋白表达情况与荧光原位杂交技术(FISH)检测胃癌组织中HER2基因扩增情况,并采用IHC方法检测胃癌组织中CK8/18、p53、CEA蛋白的表达情况,分析HER2与CK8/18、p53、CEA表达的相关性。结果120例胃癌组织中HER2表达水平,IHC检测结果显示为HER2蛋白过表达(3+)的阳性率为11.7%(14/120),FISH检测结果显示HER2基因扩增的阳性率为17.5%(21/120);HER2基因扩增与CK8/18、p53及CEA蛋白的表达越高,则胃癌发生淋巴结转移及浸润深度的概率越大(P0.05);HER2基因扩增与CK8/18、p53及CEA蛋白的表达呈正相关(P0.05)。结论胃癌HER2基因扩增与CK8/18、p53及CEA蛋白的表达与其是否发生淋巴结转移及浸润深度有关,可作为患者病情严重程度与预后的一个有效评估指标。     

乳腺癌患者HER2基因表达状态及临床病理意义探讨

人类表皮生长因子受体2（HER2）定位于17号染色体q12-21,是具有酪氨酸激酶活性的跨膜生长因子受体。乳腺癌HER2基因扩增或蛋白过表达,与疾病进展和预后相关。目前临床上选用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）法进行筛查,     

用免疫组化法检测HER-2基因的质控及意义

原癌基因HER-2是生长因子受体家庭成员之一。人的HER-2基因位于染色体17q21，编码分子量为185KD的跨膜糖蛋白，简称HER-2蛋白或受体。HER-2蛋白具有酪氨酸激酶活性，与其配体之间相互作用，通过细胞间信号传导，调解细胞生长、生存、分化和增殖。乳腺癌的人表皮生长因子受体2（HER—2）检测可以预测疗效和预后。大量研究表明HER-2受体的过表达或基因扩增与乳腺癌病程的进展及预后不良有关。     

中国人群胰腺癌与胃癌HER2/neu基因表达

  目的  探讨胰腺癌与胃癌组织中HER2/neu基因表达状态及其在治疗与评估临床结局中的作用。  方法  应用免疫组织化学和多色荧光原位杂交技术, 检测北京协和医院手术切除的81例胰腺导管癌及癌旁胰腺组织和100例胃癌及癌旁胃组织标本中HER2/neu蛋白表达及基因状态的变化, 分析HER2/neu蛋白表达与基因状态间的关系及其与胰腺癌和胃癌临床病理改变间的关系。  结果  免疫组织化学显示, 81例胰腺癌组织中9例(11.1%)HER2/neu蛋白表达阳性(2+及3+), 100例胃癌组织中13例(13%)HER2/neu蛋白表达阳性(2+及3+); 荧光原位杂交结果显示, 81例胰腺癌组织中15例(18.5%)HER2/neu基因扩增, 100例胃癌组织中11例(11%)HER2/neu基因扩增。胰腺癌HER2/neu基因扩增与淋巴结转移有显著相关性(P=0.001)。胃癌组织中6例HER2/neu蛋白3+病例均显示HER2/neu基因扩增, 且胃癌组织HER2/neu蛋白表达与其基因扩增有显著相关性(P < 0.0001)。无论是癌旁胰腺组织还是癌旁胃组织均未检测到HER2/neu蛋白表达及基因扩增。  结论  胰腺癌组织HER2/neu蛋白表达与基因扩增不一致, 而胃癌组织HER2/neu蛋白表达与基因扩增有显著相关性。HER2/neu基因异常可能在胰腺癌及胃癌的发生发展中起着重要作用, 对胰腺癌及胃癌患者进行HER2/neu基因状态检测可能对其靶向治疗具有一定的指导意义。     

乳腺癌组织及癌旁组织HER2基因CpG岛甲基化水平及其mRNA表达的研究

目的探讨乳腺癌组织及癌旁组织人类表皮生长因子受体2(HER2)基因CpG岛甲基化率和HER2mRNA表达的差异。方法收集经病理确诊的50份乳腺癌组织和对应的癌旁组织样本,采用焦磷酸测序法、实时聚合酶链反应(PCR)和免疫组化法分别检测HER2启动子CpG岛甲基化率、HER2 mRNA表达和HER2蛋白表达。结果 HER2阳性乳腺癌组织HER2 mRNA相对表达量高于HER2阴性癌组织(P0.05),但HER2启动子CpG岛甲基化率差异无统计学意义(P0.05)。HER2阴性乳腺癌组织HER2基因启动子CpG岛甲基化率显著高于对应的癌旁组织(P0.05),而HER2 mRNA表达则低于对应的癌旁组织(P0.05)。HER2阳性的乳腺癌组织与其对应的癌旁组织之间以及HER2阳性与阴性癌旁组织之间,HER2基因启动子CpG岛甲基化率和HER2 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(P0.05)。结论在HER2阴性的乳腺癌癌旁组织中,HER2基因启动子CpG岛的低甲基化可能是HER2 mRNA高表达的机制之一。     

乳腺癌中COX-2蛋白与HER2基因表达的相关性

目的探讨浸润性乳腺癌组织中的COX-2蛋白表达与HER2基因扩增的相关性及其临床意义。方法收集78例浸润性导管乳腺癌患者术后组织学标本,免疫组化(IHC)检测COX-2蛋白的表达,荧光原位杂交(FISH)检测HER2基因突变状态,并结合临床特征资料分析两者的相关性。结果 78例浸润性乳腺癌患者中,COX-2蛋白阳性率为55.1%(43/78);其阳性表达与肿瘤大小、病理分级、淋巴结转移存在相关性(P0.05),但与年龄、ER和PR表达无相关性(P0.05)。HER2基因扩增率为26.9%(21/78);其基因扩增与病理分级、淋巴结转移、ER和PR表达存在相关性(P0.05),但与年龄、肿瘤大小无相关性(P0.05)。COX-2蛋白与HER2基因扩增存在相关性(r=0.76,P0.05)。结论 COX-2蛋白在乳腺癌中存在高表达,且与HER2基因突变存在相关性,可作为乳腺癌预后评估指标和潜在的治疗靶点。     

乳腺癌组织中拓扑异构酶Ⅱα基因的检测及临床应用

目的 研究乳腺癌组织中拓扑异构酶Ⅱα基因(TOP2A)和蛋白的表达及与HER2基因的关系.方法 采用显色原位杂交(CISH)和免疫组化(IHC)法分别分析96例(曾检测过HER2基因状态)乳腺浸润性导管癌石蜡组织中TOP2A基因扩增及其蛋白表达水平,采用Kappa一致性检验进行统计学分析. 结果 96例组织标本中TOP2A蛋白阳性表达52例(54.17%),TOP2A基因扩增26例(27.08%).52例TOP2A蛋白表达阳性组中,17例(32.69%)出现TOP2A基因扩增;44例TOP2A蛋白表达阴性组中,9例(20.45%)出现TOP2A基因扩增.TOP2A基因扩增率与TOP2A蛋白表达阳性率及二者一致性比较,有显著差异(Kappa值为0.12,P﹤0.005).59例HER2基因扩增病例中,26例(44.07%)TOP2A基因同步扩增;37例HER2基因无扩增病例,TOP2A基因也全部无扩增.结论 TOP2A基因与其蛋白检测结果之间存在差异,因此以TOP2A基因检测指导临床选择蒽环类药物的化疗方案对乳腺癌治疗可能更为合理.TOP2A基因扩增主要存在于HER2基因扩增患者中.     

双色银染原位杂交技术检测胃癌HER2基因扩增及临床意义

目的 探讨双色银染原位杂交技术（dual-color silver-enhanced in-situ hybridization,DSISH）检测胃癌人类表皮生长因子受体2（human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2）基因扩增的可行性及其与临床病理学特征的关系.方法 应用DSISH技术检测230例患者胃癌切除组织中HER2基因扩增状态,并进行相关统计学分析.结果 DSISH检测230份胃癌标本中43例存在HER2基因扩增,HER2基因扩增率为18.7％.HER2基因扩增与胃癌的分化程度、淋巴结转移有关（P均＜0.05）,与患者年龄、性别、肿瘤发生部位、浸润深度、神经以及脉管侵犯无关（P均＞ 0.05）.结论 DSISH技术检测胃癌HER2基因扩增状态具有可行性;HER2基因扩增可以反应胃癌生物学行为.     

全自动与手工免疫组化法在检测5种恶性肿瘤Her-2表达中的应用

正HER-2是表皮生长因子受体家族成员,具有酪氨酸激酶活性,在很多恶性肿瘤中呈现过度增殖,其靶向药——曲妥珠单抗(赫赛汀)对于Her-2阳性乳腺癌患者的预后生存有明显改善~([1])。免疫组化(IHC)技术在对Her-2蛋白的检测应用中发挥了重要作用,包括手工与全自动IHC两种方法。本文对Her-2蛋白的手工与全自动IHC结果进行对比分析,     

人类表皮生长因子受体2在乳腺癌表达与临床的相关病理特征分析

目的 评估人类表皮生长因子受体2(HER2)预测价值,并分析其与常见的组织病理学参数的相关性。方法 收集陕西省人民医院2011年～2014年之间160例接受手术治疗的乳腺癌患者组织标本,通过免疫组织化学方法(IHC)和荧光原位杂交(FISH)检测 HER2水平,通过χ²检验用来评估HER2基因扩增状况及不同临床病理特性的相关性,临床参数包括:肿瘤大小、组织学分级、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达,年龄、绝经情况和Ki-67指数。结果 HER-2表达与组织学分级、淋巴结转移、ER水平、PR,Ki-67指数差异存在统计学意义(均P<0.05)。相对于HER-2⁺组患者,HER-2^-病变多表现为雌激素ER阴性、孕激素阴性、ER阴性、淋巴结阴性、ki-67≥20%。结论 HER-2表达与多种临床病理因素存在相关性。     

不同体积的4%中性缓冲甲醛固定液对全自动免疫组化法检测乳腺原发性浸润癌Her2蛋白的影响

正乳腺癌是女性最常见的癌症,其发病率居女性恶性肿瘤首位~([1])。《乳腺癌HER2检测指南》(2014版)明确指出,推荐采用免疫组化法检测Her2蛋白的表达水平。手术标本的充分、及时和规范的固定是保障乳腺癌Her2检测质量的基础,固定不当可引起细胞、组织抗原的活性降低和定位不准确,进而影响Her2蛋白的检测与判读。甲醛固定液渗透能力约为1 mm/h,其固定液所需量可能因为检测抗原的不同而有差异。王银萍等~([2])认为,在病理标本的制作中,固定液的体积至少仍应5倍于所浸泡组织     

乳腺癌患者PTPRO、HER2和PIASy表达情况

目的分析乳腺癌患者受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPRO)、表皮生长因子受体2(HER2)、激活的STAT蛋白抑制因子(PIASy)表达情况及其临床意义。方法选取2016年5月至2018年4月我院收治的乳腺癌患者56例为研究对象,采用免疫组织化学EnVision法检测其PTPRO、HER2和PIASy表达水平,并分析其与临床病理参数的关系。结果乳腺癌患者癌组织PTPRO阳性率低于癌旁组织,而HER2、PIASy阳性率高于癌旁组织(P<0.05);无淋巴结转移、孕激素(PR)阴性表达者PTPRO阳性率高于淋巴结转移、PR阳性表达者,临床分期Ⅲ~Ⅳ期、PR阳性表达者的HER2阳性率高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、PR阴性表达者,临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移者PIASy阳性率高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移者(P<0.05)。结论乳腺癌患者中PTPRO低表达,而HER2、PIASy呈高表达,且PTPRO、HER2、PIASy均与患者临床病理参数有一定关系,有潜在的临床诊断意义。