独活香豆素对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用

目的 :探讨独活香豆素(total coumarine of Angelica pubescentis,TCA)处理对APP/PS1双转基因阿尔茨海默模型小鼠的神经保护作用。方法:将7月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、独活香豆素高(14.4 mg/kg)、中(7.2 mg/kg)、低剂量组(3.6 mg/kg),每组10只。药物处理后,采用HE染色、尼氏染色检测独活香豆素对阿尔茨海默模型小鼠脑内椎体细胞和尼氏体的影响,用免疫荧光组织化学法观察脑内神经元的变化,并采用Hoechst33258染色观察神经细胞凋亡。结果:病理学观察结果显示:独活香豆素(14.4 mg/kg)组较阿尔茨海默模型组的小鼠椎体细胞数增加(77.56±5.82个/mm2),并且尼氏体数量增加;免疫荧光组化结果显示独活香豆素(14.4 mg/kg)组小鼠脑内海马区中分子量神经丝蛋白荧光强度(83.25±10.74%)明显高于模型组(26.28±3.08%);同时,独活香豆素(14.4 mg/kg)组显著减少凋亡细胞数(14.08±3.27%)。结论:独活香豆素14.4 mg/kg能够减少阿尔茨海默模型小鼠脑内神经性损伤,是通过增强中分子量神经丝蛋白表达和减少细胞凋亡。     

阿里红多糖对APP/PS1双转基因小鼠神经损伤的保护作用

目的:探讨阿里红多糖对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠的神经保护作用。方法:将SPF级40只3月龄APP/PS1双转基因雄性小鼠随机分成5组,分别为模型组、盐酸多奈哌齐0.65 mg/kg组,阿里红多糖50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg组;8只C57小鼠作为正常对照组。连续灌胃给药90 d。采用Morris水迷宫法测定小鼠空间学习记忆能力,通过比色法测定小鼠脑组织中SOD、GSH-Px、AchE活性和MDA含量的变化;采用HE染色观察小鼠脑神经元形态和脑组织病理学变化;刚果红染色法和免疫印迹法检测各组小鼠脑组织中与神经元损伤相关的APP、Aβ_(1-40),以及TrkA的含量变化。结果:在水迷宫实验中,相比正常组小鼠,模型组小鼠的学习记忆能力均有所下降,海马组织内SOD、GSH-Px、AchE酶活性明显下降,MDA含量明显升高;与模型组相比,阿里红多糖各组小鼠活动量均增加,学习记忆能力得到不同程度的恢复,SOD、GSH-Px、AchE活性升高, MDA含量降低。在免疫组化染色和免疫印迹实验中,相比正常对照组小鼠,模型组小鼠(0.5%CMC)的脑组织中明显可见坏死的神经元,APP、Aβ_(1-40)蛋白沉积数量增多,TrkA含量下降;而阿里红多糖给药各组神经元数量不同程度增多,体积变大,坏死情况得以不同程度改善,APP、Aβ_(1-40)含量降低,TrkA含量升高。结论:天然药物阿里红多糖能明显改善阿尔茨海默病AD小鼠的学习记忆能力,促进神经元生长,对AD小鼠具有神经保护作用。     

楮实子对APP/PS1双转基因小鼠海马神经发生的影响

目的探讨楮实子对APP/PS1双转基因小鼠海马神经发生的影响。方法 40只APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、阳性药组(10 mg/kg多奈哌齐)及楮实子低、高剂量组(1.8、3.6 g/kg),C57BL/6小鼠作为对照组,每组10只,灌胃给药6周。然后,Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,TUNEL法检测小鼠海马区神经细胞凋亡,免疫荧光染色法检测小鼠海马区NeuN/BrdU阳性细胞表达,Western blot法检测GSK-3β、β-catenin蛋白表达。结果与模型组比较,楮实子高剂量组学习记忆能力显著改善(P<0.05),凋亡细胞数显著减少(P<0.01),NeuN/Brdu阳性细胞数显著增加(P<0.01),GSK-3β蛋白表达显著降低(P<0.05),β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论楮实子能促进APP/PS1双转基因小鼠海马神经发生,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。     

白藜芦醇对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的改善作用

目的探讨白藜芦醇对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的改善作用。方法 50只小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组(10 mg/kg)及白藜芦醇低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg),每组10只,10只C57BL/6小鼠作为对照组,各组灌胃给药40 d。Morris水迷宫定位航行实验和空间探索实验分别检测小鼠学习记忆能力,免疫荧光法检测小鼠海马区星形胶质细胞表达,RT-PCR法和ELISA法分别检测小鼠海马区IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达和水平。结果与模型组比较,白藜芦醇组缩短逃避潜伏期,增加穿越平台次数和目标象限停留时间,降低星形胶质细胞表达及IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达和水平,以中、高剂量组更显著(P0. 05,P0. 01)。结论白藜芦醇可改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力,其机制可能与抑制星形胶质细胞增生和炎性因子释放、减轻炎症反应有关。     

中医药治疗阿尔茨海默病APP/PS1双转基因小鼠的研究进展

中医药治疗阿尔茨海默病具有多靶点、多方式、多途径的优势。能反映AD特征的APP/PS1双转基因小鼠是一种比较理想的AD动物模型,该模型现已成功应用到中医药防治AD研究的领域。该文综述近年来中药复方及有效成分治疗阿尔茨海默病APP/PS1双转基因小鼠的实验研究。     

开心散对APP/PS1转基因小鼠在体LTP和PSD-95表达的影响

目的考察开心散(远志、人参、茯苓、石菖蒲)对APP/PS1转基因小鼠海马在体长时程增强(LTP)、海马CA1区和大脑皮层突触后致密蛋白-95(PSD-95)的表达的影响。方法 32只APP/PS1雄性小鼠(3月龄)随机均分为模型组、多奈哌齐[0.75 mg/(kg·d)]组、开心散[1.5、3 g/(kg·d)]组,另设C57/BL6小鼠为对照组,连续给药3个月。记录海马区穿通纤维通路(perforant pathway,PP)至齿状回(dentate gyrus,DG)的在体LTP,免疫组化法观察小鼠海马CA1区、大脑皮层PSD-95的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠场兴奋性突触后电位(fEPSP)斜率明显下降,海马CA1区、大脑皮层中PSD-95阳性细胞的平均光密度明显减少;而多奈哌齐、开心散可明显提高模型组小鼠f EPSP斜率。多奈哌齐能增加海马CA1区PSD-95阳性细胞的平均光密度,开心散[1.5 g/(kg·d)]可以增加海马CA1区、大脑皮层PSD-95阳性细胞的平均光密度,开心散[3 g/(kg·d)]能增加大脑皮层PSD-95阳性细胞的平均光密度。结论开心散能促进APP/PS1转基因小鼠LTP形成,增强突触可塑性,可能与调节PSD-95蛋白表达有关。     

高良姜素通过调节Akt/MEF2D/Beclin-1信号通路改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆障碍的作用北大核心CSCD

研究高良姜素对APP/PS1小鼠学习记忆障碍及Akt/MEF2D/Beclin-1通路的影响。实验分为正常组、模型组、高良姜素低剂量组(25 mg·kg^(-1))、高良姜素中剂量组(50 mg·kg^(-1))、高良姜素高剂量组(100 mg·kg^(-1))、多奈哌齐组(3 mg·kg^(-1))、Akt抑制剂组(25 mg·kg^(-1))和自噬抑制剂组(30 mg·kg^(-1)),每组10只,持续给药30 d,待给药第24天进行水迷宫和避暗实验测试;ELISA检测海马中p-tau、β-淀粉样多肽1-42(Aβ_(42))、乙酰胆碱酯酶(AChE)、淀粉样前体蛋白β位点裂解酶1(BACE1)和淀粉样前体蛋白(APP)水平,RT-PCR检测海马中Beclin-1 mRNA表达,免疫组化检测海马中Aβ_(42)和胶质纤维状酸性蛋白(GFAP)的表达,免疫荧光检测海马中肌细胞增强因子2D(MEF2D)的表达,HE染色观察海马病理学情况以及Western blot检测海马中Akt、MEF2D和Beclin-1表达。结果表明,与正常组比较,模型组游泳时间、错误次数、被电次数、p-tau、Aβ_(42)、APP、AChE、BACE1、GFAP和Beclin-1增加,避暗潜伏期、p-Akt和MEF2D减少,海马损伤明显。与模型组比较,多奈哌齐组和高良姜素组游泳时间、错误次数、被电次数、p-tau、Aβ_(42)、APP、AChE、BACE1、GFAP和Beclin-1减少,避暗潜伏期、p-Akt和MEF2D增加,海马组织病理情况改善。与自噬抑制剂组比较,高良姜素组游泳时间、错误次数、被电次数、p-tau、Aβ_(42)、APP、AChE、BACE1、GFAP和Beclin-1显著增加,避暗潜伏期、p-Akt和MEF2D显著减少。综上所述,高良姜素改善APP/PS1小鼠的学习记忆障碍和海马神经元损伤,其机制可能与调节Akt/MEF2D/Beclin-1通路有关。     

参芪益智颗粒对APP/PS1转基因小鼠LRP1和RAGE蛋白表达的影响

目的:探究参芪益智颗粒对APP/PS1转基因小鼠学习认知功能及脑组织LRP1和RAGE表达的影响。方法:分别以APP/PS1双转基因小鼠和Aβ_(25-35)刺激的BV-2细胞为研究对象,检测小鼠学习记忆能力、海马组织病理形态学、细胞存活率、LRP1和RAGE的基因和蛋白表达,测定胞内Aβ_(1-42)含量。结果:动物实验显示,与空白组相比,模型组动物在Morris水迷宫实验中进入平台区域时间及次数明显减少,海马CA1区神经细胞数量减少且排列紊乱,脑组织LRP1基因和蛋白表达下调,RAGE基因和蛋白表达上调。与模型组相比,参芪益智颗粒3.2 g/kg、6.3 g/kg、12.6 g/kg组可明显增加动物进入平台区域时间及次数,明显改善海马CA1区神经细胞数量减少和排列紊乱等病变,上调或下调脑组织LRP1和RAGE的基因和蛋白表达水平。细胞实验显示,Aβ_(25-35)刺激BV-2细胞后该细胞存活率明显降低,细胞内LRP1基因表达水平下调,RAGE基因表达水平上调,胞内Aβ_(1-42)含量明显增加,与模型组相比,参芪益智颗粒12.5、25μg/ml可明显增加该损伤细胞的细胞存活率,明显上调细胞内LRP1基因表达水平,下调细胞内RAGE基因表达水平,明显降低细胞内Aβ_(1-42)含量。结论:参芪益智颗粒可改善APP/PS1转基因小鼠学习记忆功能及海马病变,降低胞内Aβ_(1-42)含量与其调控脑内LRP1和RAGE的表达有关。     

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马IRS-1和p-IRS-1表达的影响

目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)和磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)表达的影响.方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照罗格列酮组(10mg.kg-1·d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,l00mg.kg-1·d-1),正常对照组为相同背景非转基因小鼠.灌胃3个月后,应用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR方法进行检测.结果:IRS-1和p-IRS-1免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区IRS-1阳性细胞较对照组明显增加(P＜0.01),p-IRS-1明显减少(P＜0.01);与模型组相比,姜黄素各干预组可减少IRS-1阳性细胞数(P＜0.05或P＜0.01),并升高p-IRS-1阳性细胞数(P＜0.05或P＜0.01).Westem blot检测海马IRS-I和p-IRS-1的蛋白表达结果与免疫组织化学检测结果一致.RT-PCR检测IRS-1 mRNA表达结果与免疫组织化学和Western blot结果相反.结论:姜黄素可以使APP/PS1双转基因小鼠海马增加的IRS-1和减少的p-IRS-1得以恢复,并增加IRS-1 mR-NA表达,改善APP/PS1双转基因小鼠胰岛素信号转导,提示姜黄素可能通过调节胰岛素信号转导机制发挥抗AD作用.     

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠突触 相关蛋白表达的影响

目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白突触后致密蛋白-95(postsynaptic densityprotein-95,PSD-95)和骨架蛋白Shank1表达的影响。方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮阳性对照组(10 mg.kg-1.d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg.kg-1.d-1),正常对照组为相同背景非转基因小鼠。灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法进行检测。结果:行为学检测,治疗组与模型组相比定位航行实验和空间探索实验存在不同程度的差异(P<0.01或P<0.05)。PSD-95和Shank1免疫组化,模型组小鼠大脑海马CA1区较对照组阳性细胞明显减少(P<0.01),姜黄素干预组有所恢复。Western blot检测海马PSD-95的蛋白结果显示,模型组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均比对照组小鼠明显变细、颜色变浅(P<0.01);姜黄素干预组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均明显增粗、颜色加深(P<0.05)。结论:姜黄素增加APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白shank1和PSD-95表达,改善APP/PS1双转基因小鼠突触的结构和可塑性,提高空间学习记忆能力。     

远志皂苷元对APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白表达的影响

目的观察远志皂苷元(TEN)对APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白PSD-95和Shank-1表达的影响。方法 50只转基因小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组、TEN低剂量组、TEN中剂量组、TEN高剂量组5组。同月龄C57BL/6J小鼠10只作为对照,分别给予多奈哌齐和不同剂量的TEN,对照组和模型组给予等剂量的双蒸水。3个月后,用免疫组织化学和Western blot方法检测突触相关蛋白PSD-95和Shank-1的表达。结果与对照组比较,APP/PS1双转基因小鼠海马PSD-95和Shank-1阳性细胞数明显减少,PSD-95和Shank-1蛋白表达降低;TEN各剂量组PSD-95和Shank-1阳性细胞数及蛋白表达较模型组均明显增加(P0.01)。结论 TEN能够增加APP/PS1双转基因小鼠PSD-95和Shank-1的表达,对突触的功能和可塑性具有改善作用。     

黄连解毒汤对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠自由基代谢及海马区病理形态学影响

目的 观察黄连解毒汤对阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease,AD）模型小鼠自由基代谢及海马CA1区的神经细胞形态学、组织病理学的影响,并探讨其可能治疗机制,为黄连解毒汤治疗AD提供实验依据。     

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马CA1区AKT及p-AKT表达的影响

目的: 观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠丝/苏氨酸激酶(serine-threonine kinase, AKT,又称PKB)和磷酸化的丝/苏氨酸激酶(phosphorylated serine-threonine kinase, 即p-AKT)表达的影响. 方法: 将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为5组,分别为模型组、罗格列酮组(10 mg·kg^-1·d^-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg^-1·d^-1),选取同月龄同背景的非转基因小鼠为对照组.连续灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法检测小鼠海马CA1区中AKT和p-AKT的蛋白表达. 结果: 免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区AKT和p-AKT阳性细胞均较对照组明显减少(P<0.05,P<0.01),与模型组相比,罗格列酮组与姜黄素高、中剂量组AKT和p-AKT阳性细胞均有明显恢复(P<0.05,P<0.01),其中姜黄素中剂量组p-AKT阳性细胞数增加最为显著(P<0.01).Western blot检测结果与免疫组化结果基本一致. 结论: 姜黄素可以使AD模型APP/PS1双转基因小鼠海马CA1区中减少的AKT和p-AKT细胞有所恢复,提示姜黄素可能通过调节AKT及其磷酸化过程,从而进一步调节PI3K/AKT途径的胰岛素信号转导通路发挥抗AD作用.     

异常黏液质成熟剂颗粒对APP/PS1转基因小鼠行为学和海马组织病理形态学的影响

目的观察异常黏液质成熟剂颗粒对APP/PS1转基因小鼠空间学习记忆、海马CA1区组织病理形态学变化的影响,探讨其作用机制。方法选取3月龄APP/PS1转基因模型小鼠并将其随机分为模型组、阳性药组和异常黏液质成熟剂高、中、低剂量组,每组18只。另取18只3月龄C57BL/6J小鼠作为正常组。各给药组给予相应药物灌胃,连续6个月。Morris水迷宫实验观察小鼠学习和记忆能力;HE染色光镜下观察海马CA1区病理形态;透射电镜观察小鼠海马CA1区有髓神经髓鞘、微管、微丝。结果水迷宫实验结果显示,模型组小鼠逃避潜伏期时间较正常组明显延长(P0.01),空间搜索实验穿越原平台位置次数较正常组明显减少(P0.01);与模型组比较,异常黏液质成熟剂除低剂量组第1日外其余各剂量组小鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05,P0.01),异常黏液质成熟剂低、高剂量组小鼠经过有效区域次数明显增加(P0.05,P0.01),异常黏液质成熟剂各剂量组小鼠原平台所在象限停留时间明显增加(P0.01)。HE染色显示,异常黏液质成熟剂各组小鼠脑组织海马CA1区,锥体细胞层完整性稍好,细胞排列整齐,形态正常,均匀分布;电镜观察,与模型组比较,异常黏液质成熟剂各组小鼠海马CA1区神经元核形不规则,核膜清楚,染色质清晰,核仁明显,细胞基质均匀,细胞器丰富,分布均匀,线粒体嵴明显,粗面内质网和游离核糖体多见。结论异常黏液质成熟剂颗粒可改善APP/PS1转基因小鼠空间学习记忆能力,减轻神经元超微结构受损。     

基于Keap1/Nrf2/ARE信号通路的天然产物在神经保护方面的研究进展

阿尔茨海默病、帕金森病、多发性硬化等神经退行性疾病的病理表现为异常蛋白质的聚集和积累、小胶质细胞激活和线粒体功能障碍等,最终导致神经元结构或功能逐渐丧失,并随着时间的推移而恶化,这些病理过程与活性氧（ROS）的产生有关,ROS会引起氧化应激并破坏蛋白质、脂质和DNA,引发细胞和组织损伤。Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件（ARE）信号通路是维持机体氧化还原平衡、防御氧化应激损伤的主要机制,Nrf2通过与细胞质中Keap1的解离和核转移,激活ARE相关的一系列抗氧化基因的表达,以保护机体免受氧化损伤,因此Keap1/Nrf2/ARE信号通路激活剂的发现与研究对神经退行性疾病的防治具有重要意义。天然产物因有显著的生物活性、不良反应小等特点,是新药研发的宝库。研究表明,多种天然产物能够激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路,发挥神经保护作用。根据天然产物的结构特点,可分为黄酮类、萜类及挥发油类、多酚类和苯丙素类等。该文概述了Keap1/Nrf2/ARE信号通路调节疾病的内在机制,并总结了基于该信号通路的天然产物在神经保护方面的研究进...     

电针“百会”“涌泉”对4 月龄APP/PS1双转基因小鼠海马LC3 和Aβ影响的研究

目的：探讨电针对4月龄APP/PS1双转基因小鼠海马LC3和Aβ的影响。方法：将16只4月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为电针组和模型组;以8只4月龄雄性C57BL/6小鼠作为正常组。电针组电针“百会”“涌泉”穴,正常组、模型组以与电针组相同的方法束缚,干预均隔日一次,6周后取其脑组织。免疫组化法观察小鼠皮质和海马内LC3的表达情况;免疫荧光双标法观察小鼠海马内LC3和Aβ的共表达情况;Westernblot（WB）法检测小鼠海马内LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的表达水平。结果：免疫组化结果显示,在小鼠海马和皮质中,LC3主要表达于神经元的胞质和轴突。免疫荧光双标法结果显示,LC3和Aβ存在共表达。WB结果显示,正常组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值大于模型组,差异有统计学意义（P＜0.01）;电针组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值大于模型组,但差异无统计学意义（P >0.05,P = 0.19）。结论：5月龄时APP/PS1双转基因小鼠海马内自噬处于抑制状态;电针干预对4月龄APP/PS1小鼠海马内的自噬功能是否存在促进作用,需要进一步实验证实。     

脑还丹对APP/PS1双转基因小鼠海马区学习记忆功能及细胞内钙离子浓度的影响

目的:观察脑还丹对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆功能及海马区细胞内钙离子浓度的影响。方法:将3月龄APP/PS1双转基因小鼠(雄性)36只,随机分为模型组、脑还丹组和多奈哌齐组,每组各12只,同月龄同遗传背景C57BL/6J小鼠12只为正常对照组。治疗组分别以脑还丹浓缩液及多奈哌齐灌胃;正常对照组和模型组以同体积蒸馏水灌胃,5月后进行行为学测试,并测定各种小鼠海马组织细胞[Ca2+]i。结果:Morris水迷宫实验:与模型组相比,正常对照组、脑还丹组和多奈哌齐组逃避潜伏期较模型组明显缩短(P0.05),药物治疗组在原平台象限停留时间明显增加(P0.01,P0.05)。海马区[Ca2+]i:模型组较对照组海马细胞[Ca2+]i明显增高(P0.01);脑还丹组及多奈哌齐组[Ca2+]i较模型组明显降低(P0.01);而脑还丹组和多奈哌齐组之间无明显差异(P0.05)。结论:脑还丹对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆功能具有改善作用,这可能与其稳定海马区细胞内[Ca2+]i,减少自由基的产生,保护细胞生物膜。     

电针对APP/PS1转基因小鼠海马P-糖蛋白和间质液β淀粉样蛋白水平的影响

目的:通过观察电针对于APP/PS1双转基因小鼠海马P-糖蛋白表达和脑间质液Aβ水平的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的作用机制。方法:12只4月龄雄性APP/PS1转基因鼠,随机分为电针组和模型组;6只4月龄雄性C57BL鼠为正常对照组。电针"百会""涌泉"2周后,采用脑微透析检测技术取小鼠脑间质液,Elisa法检测小鼠间质液Aβ水平;免疫组化法观察小鼠海马P-糖蛋白表达情况。结果:免疫组化结果显示,与正常对照组比较,模型组P-糖蛋白表达明显减少;与模型组比较,电针组的表达相对增加。ELISA检测显示,与正常对照组比较,模型组的间质液Aβ明显减少;与模型组比较,针刺组Aβ水平明显下降。结论:电针可以降低脑间质液Aβ水平,并可以升高海马内P-糖蛋白的表达。     

电针“百会”“涌泉”对6月龄APP/PS1双转基因小鼠行为学及海马Dynein、CTSD水平影响的研究

摘要 目的：从细胞内Aβ及自噬溶酶体角度探讨电针干预AD的作用机制。方法：将20只6月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为电针组和模型组;10只6月龄雄性C57BL/6野生小鼠作为空白对照组。电针组针刺“百会”“涌泉”穴,双“涌泉”连接电针,留针15min/次;空白对照组和模型组小鼠用与电针组相同的方法束缚15min/次。隔日1次,共治疗6周。利用Morris水迷宫检测小鼠空间学习和记忆能力;透射电镜观察小鼠海马自噬体、自噬溶酶体情况;免疫荧光双标法观察小鼠海马CA1区CTSD和Aβ的共表达情况;Western blot（WB）法检测小鼠海马内Dynein和CTSD的相对表达量。结果：Morris水迷宫检测结果显示,在定位航行实验中,与空白对照组相比,模型组小鼠平均逃避潜伏期增加,差异有统计学意义（P＜0.05);与模型组相比,电针组小鼠平均逃避潜伏期减少,差异有统计学意义（P＜0.05)。在空间探索实验中,与空白对照组比较,模型组小鼠平均穿越平台次数减少,平台象限游泳路程减少,差异均有统计学意义（P＜0.05);与模型组相比,电针组小鼠平均穿越平台次数增加,平台象限游泳路程增加,差异均有统计学意义（P＜0.05)。透射电镜实验结果显示,空白对照组海马可观察到少量的自噬溶酶体;模型组海马有大量的自噬体堆积,主要是在神经元轴突末端,胞体核周可见许多自噬溶酶体;电针组海马神经元轴突中也可以观察到部分自噬体堆积,胞体核周可见部分自噬溶酶体。免疫荧光双标法结果显示,CTSD和Aβ在小鼠海马CA1区神经元内存在共表达。Western blot结果显示,与空白对照组相比,模型组动力蛋白中间链DIC表达量降低,CTSD表达量增加,差异均有统计学意义（P＜0.05);与模型组相比,电针组动力蛋白中间链DIC表达量增加,CTSD表达量降低,差异均有统计学意义（P＜0.05)。结论：8月龄APP/PS1双转基因小鼠海马神经元自噬功能紊乱;电针可能通过调节小鼠紊乱自噬状态,促进自噬体运输及自噬溶酶体降解,改善AD小鼠的空间学习和记忆功能。     

基于Nrf2-HO-1/CYP2E1 通路探讨五指毛桃醇提取物对酒精性肝损伤小鼠的抗氧化保护机制

目的探讨五指毛桃（Fici Hirtae Radix,FHR）醇提取物对小鼠酒精性肝损伤的保护作用及其机制。 方法将60 只小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组及五指毛桃醇提取物高、中、低剂量组。除对照组 给予生理盐水灌胃外,其余各组小鼠以梯度酒精灌胃法复制酒精性肝损伤模型。复制模型同时,阳性对照组灌 胃给予50 mg·kg-1 水飞蓟素,五指毛桃醇提取物组分别灌胃给予2、1、0.5 g·kg-1 五指毛桃醇提取物进行干 预,对照组、模型组灌胃给予等体积生理盐水,连续6 周。复制模型成功后取材,HE 染色法观察肝组织病理 变化;比色法测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平,肝组织内丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘 肽（GSH）含量,超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性;并采用蛋白质印迹法测定核因 子E2 相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）、超氧化物歧化酶1（SOD-1）和细胞色素P450 2E1（CYP 2E1） 的蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组小鼠肝细胞肿胀,排列散乱,中央静脉周围小变性明显,呈现 肝细胞灶状坏死;血清中ALT 和AST 水平明显升高（P＜0.01）;肝组织中MDA 含量明显升高（P＜0.01）,SOD 活性明显降低（P＜0.01）,GSH 含量和GSH-Px 活性明显降低（P＜0.01）; Nrf2、HO-1 及SOD-1 蛋白水平明显 降低（P＜0.05）,CYP2E1 蛋白水平明显升高（P＜0.05）。与模型组比较,五指毛桃醇提取物各剂量组肝脏炎性 细胞浸润减少,肝脏组织坏死减轻;五指毛桃醇提取物高、中剂量组明显降低ALT、AST 水平（P＜0.05）;五 指毛桃醇提取物高、中剂量组明显降低MDA 水平（P＜0.05）,五指毛桃醇提取物低剂量组明显升高GSH 含量 （P＜0.05）,五指毛桃醇提取物各剂量组均明显升高SOD 水平（P＜0.05）,五指毛桃醇提取物高、低剂量组明 显升高GSH-Px 活性（P＜0.05）;五指毛桃醇提取物高剂量组明显上调Nrf2 蛋白表达水平（P＜0.05）,五指毛桃 醇提取物高、低剂量组明显上调HO-1 蛋白表达水平（P＜0.05）,五指毛桃醇提取物高、中剂量组明显上调 SOD-1 蛋白表达水平（P＜0.05）,五指毛桃醇提取物中、低剂量组明显下调CYP2E1 蛋白表达水平（P＜0.05）。 结论五指毛桃醇提取物对酒精性肝损伤小鼠具有保护作用,其机制可能是通过激活Nrf2,诱导调控下游抗氧 化因子或抗氧化系统,并抑制CYP2E1 异常活化,减轻氧化应激反应,从而降低酒精对肝脏的损伤。