乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响。方法将人结肠癌HT29细胞分为空白组、乙酰紫草素组(10μmol/L)、奥沙利铂组(1μmol/L)和联合给药组(10μmol/L乙酰紫草素+1μmol/L奥沙利铂),MTT法检测HT29细胞增殖抑制率,流式细胞术检测HT29细胞凋亡率、qRT-PCR法检测HT29细胞Ki-67、Bcl-2及Bax mRNA表达,Western blot法检测磷酸化磷脂酰肌醇-3-羟激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)蛋白表达。结果人结肠癌HT29细胞经乙酰紫草素、奥沙利铂和联合给药处理24、48、72 h后,细胞增殖抑制率均增加,其中联合给药组细胞增殖抑制率最高(P<0. 05)。药物处理HT29细胞48 h后,与空白组比较,乙酰紫草素组、奥沙利铂组和联合给药组凋亡率、Bax mRNA表达增加(P<0. 05),而Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P<0. 05);联合给药组的细胞凋亡率、Bax mRNA表达均高于乙酰紫草素组和奥沙利铂组,Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达低于乙酰紫草素组和奥沙利铂组。结论乙酰紫草素和奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞均具有抑制增殖及诱导凋亡作用,可能与调控PI3K/Akt信号通路有关,且两者联用时效果更好。     

芪贞汤对脂多糖诱导人结肠癌细胞上皮间充质转化的影响

目的研究芪贞汤对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导结肠癌细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的机制,为其发挥抗癌作用提供实验依据。方法将人结肠癌Lo Vo细胞分为4组,空白组不予干预,模型组、实验组和对照组分别予1μg/m L LPS、1μg/m L LPS+800μg/m L芪贞汤、1μg/m L LPS+100μg/m L 5-氟尿嘧啶(5-Fu)干预48小时。采用MTT实验计算芪贞汤诱导肿瘤细胞凋亡50%的浓度,即IC50 (half maximal inhibitory concentration);划痕实验观察细胞迁移能力;免疫荧光法检测NF-κB p65核转位情况; Western blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)蛋白的表达。结果芪贞汤在48小时诱导肿瘤细胞凋亡的IC50值为980. 855μg/m L。空白组、模型组、实验组和对照组划痕缩小面积分别为(46.38±5.15)(80.81±3.18)(17.78±9.87)和(16.95±3.45);与模型组相比,各组划痕缩小面积皆有极显著统计差异(P 0. 01)。空白组NF-κB p65多于细胞浆中表达;模型组可以明显看到NF-κB p65入核,核转位明显;对照组NF-κB p65在包浆和细胞核中都有表达;实验组NF-κB p65在细胞核中表达相对较少,核转移情况下降。相对于空白组,实验组E-cadherin表达量(1. 266±0.065)和对照组E-cadherin表达量(0.979±0.183)比模型组(0. 420±0. 071)显著升高,有极显著统计学差异(P 0. 01);实验组N-cadherin表达量(0. 518±0. 115)和对照组N-cadherin表达量(1. 275±0. 567)比模型组(2. 287±0. 257)显著降低,有极显著统计学差异(P 0. 01)。结论芪贞汤可通过抑制NF-κB p65活化而抑制结肠癌细胞EMT的发生,从而达到控制肿瘤细胞迁移的效果。     

紫草素对感染HPV16的宫颈癌Caski细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究紫草素(shikonin)对感染HPV16的宫颈癌Caski细胞作用。方法:对宫颈癌Caski细胞进行HPV病毒基因鉴定,将紫草素配成不同浓度(0、5、10、20、40、80μmol·L~(-1))作用于体外培养的宫颈癌Caski细胞,用MTT方法检测不同浓度紫草素作用不同时间(12 h、24 h、36 h)后对Caski细胞增殖能力的影响;采用Annexin V/PI试剂染色不同浓度紫草素(5、10、20、40μmol·L~(-1))作用24 h后的宫颈癌Caski细胞,上流式细胞仪观察细胞凋亡改变;用DAPI染色观察5、10、20、40μmol·L~(-1)紫草素作用于Caski细胞24 h后的凋亡形态学变化。结果:紫草素对宫颈癌Caski细胞具有抑制增殖、促进凋亡作用,在一定范围内,随着浓度和时间增加,抑制增殖作用逐渐增加;凋亡数目逐渐增多,其中20、40μmol·L~(-1)的紫草素可明显抑制细胞增殖并诱导其凋亡,DAPI染色可观察到典型的细胞凋亡改变:细胞核碎裂、固缩;且细胞凋亡现象随紫草素浓度增加而愈加明显。结论:紫草素可抑制感染HPV16的宫颈癌Caski细胞增殖并促进其凋亡。     

重楼皂苷Ⅰ对结肠癌HCT116细胞FOXQ1及上皮间质转化的影响

目的:观察重楼皂苷Ⅰ对转录因子叉头框Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)及上皮间质转化相关因子表达的影响,探讨重楼皂苷Ⅰ抑制结肠癌转移的可能作用机制。方法:用1.25,2.50μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ作用于结直肠癌HCT116细胞,蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测FOXQ1,E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin)蛋白和mRNA表达情况。结果:与空白组比较,1.25μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ组FOXQ1蛋白和mRNA相对表达量降低,E-cadherin mRNA相对表达量升高,但差异无统计学意义;Vimentin蛋白和mRNA相对表达量降低(P<0.05);E-cadherin蛋白相对表达显著升高(P<0.01)。与空白组比较,2.50μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ组中的FOXQ1,Vimentin蛋白和mRNA相对表达量降低,E-cadherin蛋白和mRNA相对表达量升高(P<0.05,P<0.01)。与1.25μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ组比较,2.50μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ组中的Vimentin蛋白和mRNA相对表达量降低,但差异无统计学意义;E-cadherin蛋白和mRNA相对表达量升高,FOXQ1蛋白和mRNA相对表达量降低(P<0.05,P<0.01)。结论:重楼皂苷Ⅰ抑制结肠癌的转移,可能与抑制FOXQ1的表达,上调E-cadherin的表达,降低Vimentin的表达相关。     

紫草素对白血病细胞HL-60增殖及凋亡作用的影响

目的研究紫草素诱导人早幼粒白血病HL-60细胞凋亡的作用机制。方法 MTT比色法检测紫草素对HL-60细胞增殖的影响;Annexin V/PI分析凋亡率;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2基因水平,分析白血病HL-60细胞凋亡作用与bcl-2表达水平关系。结果紫草素在1～8μg/mL浓度范围内能抑制HL-60细胞的增殖,具有时间和浓度的依赖性。2μg/mL紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,凋亡呈时间依赖性。在2μg/mL紫草素作用下,HL-60细胞bcl-2表达明显下调。结论紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,其作用机制与下调bcl-2表达有关。     

中药对骨髓间充质干细胞增殖、凋亡及分化的影响研究进展

骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是一类来源于骨髓的多能干细胞,不仅能够提供造血支持,且具有自我更新、高度增殖以及多向分化的潜能,是目前干细胞研究的热点。近年来,科研人员就中药对BMSCs的影响开展了一系列的研究,发现有的中药能够促进BMSCs的增殖,有的则能够抑制其凋亡,还有的能够诱导其向成骨细胞、软骨细胞等多个方向分化。其中,部分研究还就作用机制进行了探讨,作者对其研究进展进行了概述。     

败酱草乙醇提取物对人结肠癌细胞Caco-2凋亡与增殖的影响

正结、直肠癌是一类常见的恶性肿瘤,目前全球每年新增发病例数高达120万,每年近60万人死于大肠癌;其发病率和死亡率在全部恶性肿瘤中居第3位。手术、化疗、放疗仍然是目前常用的3种主要治疗方式。虽然手术被认为是目前该病的主要治疗手段,但仍有50%患者接受手术治疗后出现复发。对于术后复发及失去手术机会或转移性大肠癌患     

青蒿素联合顺铂对胃癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化的影响

目的探讨青蒿素联合顺铂对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用青蒿素(50μmol/L)、顺铂(10 mg/L)单药或联合处理SGC-7901细胞,根据实验设计将SGC-7901细胞分为4组:对照组、青蒿素组、顺铂组和青蒿素+顺铂组,对照组仅加入培养基;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组SGC-7901细胞经处理24、48、72、96 h的增殖情况并计算增殖抑制率,采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测各组处理24、48 h的凋亡率,免疫印迹法检测各组处理48 h后的EMT相关标记分子(E-cadherin、N-cadherin及Vimentin),采用酶联免疫吸附法(ELISA)测各组处理24、48、72及96 h的细胞上清液中纤连蛋白(FN)水平。结果与对照组相比,青蒿素组、顺铂组和青蒿素+顺铂组均可呈时间依赖方式提高增殖抑制率,青蒿素+顺铂组在24、48、72和96 h后的增殖抑制率均高于青蒿素组和顺铂组(P0.05);3组处理后的早、晚期凋亡率及E-cadherin水平均高于对照组,而N-cadherin、Vimentin水平及上清液FN水平均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);与青蒿素组和顺铂组相比,青蒿素+顺铂组的早、晚期凋亡率及E-cadherin水平较高,N-cadherin和Vimentin水平及上清液FN水平较低,以上差异均有统计学意义(P0.05)。结论青蒿素和顺铂对胃癌SGC-7901细胞均有细胞毒性,如抑制增殖、诱导凋亡及抑制EMT;同时,青蒿素联合顺铂对胃癌细胞具有协同增效的作用。     

竹节香附素A对人结肠癌细胞HCT-116增殖、凋亡、迁移和侵袭活性的影响

摘要：目的 研究竹节香附素A (Raddeanin A,RA) 对人结肠癌细胞HCT-116增殖、凋亡、迁移及侵袭的活性影响,并初步探讨其作用机制。 方法 采用不同浓度的RA（0.125~50 μmol·L-1）处理?HCT-116细胞24,48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力。RA(1.0,2.0,4.0 μmol·L-1)干预后,采用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;JC-1染色法检测线粒体膜电位变化;DCFH-DA法检测细胞内活性氧簇（ROS）水平;采用Western Blot法检测细胞中Cleaved caspase-3蛋白表达。选择低于凋亡浓度的RA （0.25,0.5,1.0 μmol·L-1）作用HCT-116细胞,采用细胞划痕实验和Transwell穿膜实验观察不同浓度RA 对结肠癌细胞HCT-116细胞迁移的影响;采用铺有matrigel胶的Transwell实验检测RA对HCT-116细胞侵袭能力的影响;采用RT-PCR法和Western Blot法检测RA作用后各组细胞中MMP-2、MMP-9基因及蛋白表达。 结果 RA干预24,48 h后的IC50值分别为5.967 μmol·L-1和4.797 μmol·L-1,且呈现浓度与时间依赖性。与空白对照组比较,RA 1.0,2.0,4.0?μmol·L-1浓度组凋亡、坏死的HCT-116细胞明显增多（P < 0.05,P < 0.01）;线粒体膜电位坍塌率分别为70.2%,74.4%和91.6%,差异有统计学意义（P < 0.01）;细胞内ROS含量显著增加（P < 0.01）,且呈现浓度依赖性;Cleaved caspase-3蛋白的表达水平随RA浓度的增加而显著提高（P < 0.01）。RA干预后与空白对照组比较,0.5,1.0 μmol·L-1浓度组的细胞愈合率显著降低（P < 0.01）;RA 0.25,0.5,1.0 μmol·L-1浓度组均能显著抑制HCT-116 细胞的迁徙能力（P < 0.01）,均能显著抑制HCT-116 细胞体外侵袭能力（P < 0.05,P < 0.01）。与空白对照组比较,RA 0.5,1.0 μmol·L-1浓度组MMP-2、MMP-9 mRNA相对表达水平显著降低（P < 0.05,P < 0.01）;RA 0.5,1.0?μmol·L-1浓度组MMP-2、MMP-9 蛋白相对表达水平显著降低（P < 0.01）。结论 RA既能够有效抑制人结肠癌HCT-116细胞增殖,又能诱导该细胞的凋亡,可能与诱导细胞内ROS产生,导致线粒体膜电位坍塌,激活caspase信号通路有关。低于凋亡浓度的RA （0.25,0.5,1.0 μmol·L-1）能明显抑制HCT-116细胞的迁移与侵袭活性,可能与通过下调HCT-116细胞MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达有关。     

紫草素对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的:研究紫草素(shikonin)对人宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养Hela细胞,分为对照组和紫草素组(浓度分别为4,8,16,32,64μmol·L-1),采用MTT法检测紫草素对Hela细胞增殖的抑制作用;紫草素处理Hela细胞24h后,采用流式细胞术观察细胞凋亡率的改变;Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移力的变化;Western blotting法分析黏着斑激酶(FAK)蛋白表达及FAK磷酸化水平的变化;实时荧光定量PCR技术检测FAK mRNA表达的情况。结果:紫草素对Hela细胞的增殖具有抑制作用,且具有浓度和时间依赖性;细胞凋亡率随着紫草素浓度的增加而逐步增高,其中32,64μmol·L-1的紫草素可明显抑制细胞增殖并诱导其凋亡(P<0.001)。4,8,16μmol·L-1的紫草素作用于Hela细胞后,能够显著降低Hela细胞的穿膜细胞数(P<0.05)。紫草素能够呈浓度依赖性的下调Hela细胞中FAK蛋白和mRNA的表达,使FAK磷酸化水平降低。结论:紫草素可显著抑制Hela细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制FAK磷酸化水平有关。     

紫草素对人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究紫草素对人卵巢癌SKOV3细胞的影响,并对其机制进行初步研究。方法:以不同浓度的紫草素干预人卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法观察紫草素对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测经紫草素干预48 h后SKOV3细胞的凋亡情况和细胞周期,并以Western blot法测定Bax及Bcl-2蛋白表达。结果:紫草素(0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μg/ml)经过24 h,48 h及72 h对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为6.90%,12.11%,20.82%,30.20%,41.69%,56.81%;7.28%,12.16%,20.18%,40.81%,51.23%,70.51%;10.50%,15.90%,28.16%,46.86%,59.01%,78.58%,呈剂量依赖性和时间依赖性的关系。流式细胞术检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,其凋亡率分别为20.58%,35.10%及51.26%,G0/G1期细胞的比例分别62.10%,63.91%及83.86%。Western blotting检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,Bcl-2蛋白水平表达随紫草素浓度递增减少,而Bax蛋白水平随紫草素浓度递增而递增。结论:紫草素可抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的体外增殖并诱导其凋亡,其机制可能为上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

薏苡附子败酱散对结肠癌细胞HCT116凋亡的影响及机制

目的：探究薏苡附子败酱散对结肠癌细胞HCT116凋亡的影响,并探讨其相关的细胞凋亡机制。方法：不同质量浓度(0.5、1、2、4、6、8、10、12、14、16 g·L^-1 )薏苡附子败酱散干预结肠癌细胞24、48、72 h,细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测细胞体外增殖的影响;设空白组、卡培他滨组(1.8 g·L^-1 )和薏苡附子败酱散组(6、10、14 g·L^-1 ),分别处理48 h,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,Hochest 33342荧光染色观察细胞凋亡形态,线粒体红色荧光探针(Mito-Tracker Red CMXRos)分析线粒体膜电位(MMP)变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测线粒体凋亡途径相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶(Caspase)-9、Caspase-3、活化的(cleaved) Caspase-9、cleaved Caspase-3的表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time...     

淫羊藿素对人卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的 观察淫羊藿素对人上皮性卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响，并探讨淫羊藿素通过调控A2780细胞上皮间质转化（EMT）相关分子表达抑制细胞侵袭迁移。方法 设置空白组，淫羊藿素低、中、高剂量组（5，10，20 μmol·L^-1）分别作用于人卵巢癌A2780细胞48 h。采用细胞增殖与活性检测CCK-8）法，流式细胞术检测各组细胞增殖抑制率及凋亡率；划痕实验及transwell迁移实验观察细胞迁移情况并计算划痕愈合率与迁移率；transwell侵袭实验观察细胞侵袭情况并计算侵袭率；蛋白免疫印迹法（Western blot）与实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测EMT相关分子E-钙黏蛋白（E-cadherin），N-钙黏蛋白（N-cadherin），波形蛋白（Vimentin）和肿瘤侵袭迁移相关分子基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白及mRNA表达情况。结果 CCK-8与流式细胞术结果显示，与空白组比较，淫羊藿素各组细胞抑制率显著上升（P<0.01），细胞总凋亡率上升（P<0.05）；划痕实验及transwell侵袭迁移实验结果显示，与空白组比较，淫羊藿素组的侵袭迁移能力减弱，细胞侵袭迁移数量和侵袭迁移率明显减少（P<0.05）；Western blot与PCR结果显示，与空白组比较，淫羊藿素各组中N-cadherin，MMP-9，Vimentin蛋白和mRNA表达总体呈下降趋势，E-cadherin的表达呈上升趋势。结论 淫羊藿素对人卵巢癌A2780细胞具有抑制增殖、促进凋亡的作用，可能通过调控EMT相关分子表达抑制A2780细胞的侵袭迁移。     

桑皮素对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨桑皮素对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制及其凋亡诱导作用。方法用10、15、20μmol/L桑皮素作用Hela细胞24 h后,在扫描电镜、透射电镜及倒置显微镜下观察细胞形态学变化;利用MTT法检测桑皮素对Hela细胞的增殖的影响;应用Hoechst单染实验检测Hela细胞的凋亡情况;采用qRT-PCR和Western blot检测Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结果桑皮素(2.5、5、7.5、10、15、20、25μmol/L)处理Hela细胞24、48 h,能明显的抑制Hela细胞增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性。桑皮素(10、15、20μmol/L)处理Hela细胞24 h,细胞呈现早期凋亡。与0μmol/L桑皮素组比较,桑皮素(10、15、20μmol/L)能显著上调Bax mRNA及蛋白表达(P<0.05),下调Bcl-2 mRNA及蛋白表达(P<0.05)。结论桑皮素通过上调Bax表达和下调Bcl-2表达,从而诱导Hela细胞发生凋亡。     

紫草素通过抑制上皮间质转化缓解结肠癌细胞5-氟尿嘧啶耐药

目的:探讨紫草素在结肠癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药中的作用及Src-FAK通路的介导作用.方法:以结肠癌HT-29细胞为研究对象构建5-FU耐药细胞HT-29/DR、紫草素处理细胞.克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;MTT法检测细胞活力;蛋白印迹实验检测p-Src、p-FAK、E-cadherin及Fibrone...     

洋葱黄酮类物质对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察两种不同提法的洋葱黄酮类物质对人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用热水浸提法和乙醇抽提法从洋葱中提取黄酮类物质,MTT法测定其对人结肠癌细胞HCT116增殖的影响,免疫细胞化学染色检测Caspase-3蛋白的表达,TUNEL法观察细胞凋亡,并通过基因组DNA电泳观察凋亡特征性“梯状“条带。结果:MTT法结果显示两种不同方法提取的黄酮类物质对HCT116细胞的增殖均有抑制作用,呈现时间和剂量依赖性,而热水浸提法和乙醇抽提法相比,后者提取的物质抑制作用优于前者,发挥作用的起始浓度也较低;基因组DNA琼脂糖凝胶电泳显示黄酮类物质作用于HCT116细胞后出现凋亡细胞特有的DNA阶梯状条带;免疫细胞化学染色和TUNEL结果均表明在一定药物浓度作用后,细胞出现凋亡。结论:洋葱中的黄酮类物质对体外培养的人结肠癌HCT116细胞有明显的增殖抑制和凋亡诱导的作用,其中乙醇抽提法提取的黄酮类物质作用更强。     

紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的研究紫草素(Shikonin)对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养Ishikawa细胞,设空白对照组、紫草素0.3μg/m L组、紫草素0.5μg/m L组、紫草素0.7μg/m L组和顺铂40μg/m L组,每组设10个复孔。各组给予相应干预48 h后,采用MTT比色法测定细胞增殖抑制率,Flow Cytometry法检测细胞周期和细胞凋亡状况并计算细胞凋亡率,RT-PCR法检测细胞中bcl-2 mRNA、bax mRNA表达情况并计算bax/bcl-2比值,Western blotting法检测细胞中Caspase-3蛋白表达情况并进行半定量分析。结果与空白对照组相比,紫草素0.5μg/m L组、紫草素0.7μg/m L组和顺铂40μg/m L组Ishikawa细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、bax mRNA表达量及bax/bcl-2比值、Caspase-3蛋白表达量均显著升高(P均0.05),而G2/M期细胞比例及bcl-2 mRNA表达量均显著降低(P均0.05);且紫草素0.7μg/m L组Ishikawa细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、bax/bcl-2比值和Caspase-3蛋白表达量均明显高于顺铂40μg/m L组(P均0.05),bcl-2 mRNA表达量明显低于顺铂40μg/m L组(P均0.05)。结论紫草素具有抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖并促进其凋亡的作用,机制可能与紫草素调节凋亡相关基因和蛋白表达有关。     

肠胃清含药血清对人结肠癌HCT116/L-OHP耐药细胞凋亡作用的影响

目的探讨中药复方肠胃清(CWQ)逆转人结肠癌HCT116/L-OHP细胞耐药的分子机制。方法提取肠胃清含药血清,设置不同浓度,采用MTT法确定肠胃清的最大无毒剂量和逆转指数(RI);采用彗星实验法检测肠胃清联合奥沙利铂(L-OHP)对耐药细胞DNA损伤的影响,流式细胞术观察肠胃清联合奥沙利铂(L-OHP)对耐药细胞凋亡的影响。结果肠胃清含药血清可以逆转人结肠癌HCT116/L-OHP耐药细胞对L-OHP的耐药性,逆转指数(RI)为2.63倍。肠胃清联合L-OHP能促进耐药细胞发生DNA损伤(P0.001)及凋亡(P0.01)。结论肠胃清能够逆转人结肠癌铂类化疗耐药,其机制与促进肿瘤细胞DNA损伤、诱导凋亡有关。     

通关藤提取物通过调控上皮间充质转化抑制前列腺癌细胞的侵袭及迁移

目的探讨通关藤提取物对前列腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响,及其对上皮间充质转化（EMT）的作 用机制。方法采用CCK8 法检测通关藤提取物对前列腺癌细胞DU145、PC3、RM-1 和LNCaP 增殖的影响; 采用划痕实验和Transwell 法检测DU145、PC3 细胞迁移和侵袭情况;采用光学显微镜观察细胞形态学变化, 并用Western Blot 法检测EMT 相关核心蛋白E-钙黏蛋白（E-Cadherin）、β-连环蛋白（β-Catenin）、波形蛋白 （Vimentin）的表达。结果通关藤提取物可以明显抑制PC3、DU145、RM-1 和LNCaP 细胞的增殖,并呈现一 定的时间和浓度依赖性,在作用72 h 后,通关藤提取物对PC3、DU145、RM-1 和LNCaP 细胞的半数抑制浓 度（IC50）值分别为53.45、57.22、44.82、50.95 mg·mL-1。与对照组比较,通关藤提取物（30、60 mg·mL-1）可以明 显抑制DU145 和PC3 细胞的迁移及侵袭能力（P < 0.05,P < 0.01,P < 0.001）。通关藤提取物干预后, DU145、PC3 细胞的形态发生了明显改变,与对照组比较,EMT 标志物Vimentin 蛋白表达明显下调（P < 0.05,P < 0.01）。结论通关藤提取物能够抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,可能与其下调Vimentin 蛋 白表达,进而抑制EMT 有关。     

紫草素诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的探讨

目的:研究紫草素诱导人前列腺癌细胞(PC-3)凋亡及其作用机制。方法:以PC-3细胞为研究对象,以不同浓度的紫草素处理PC-3细胞,另设空白组,处理不同时间后,分别采用噻唑蓝(MTT)法检测紫草素对PC-3细胞增殖抑制情况;显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和磷酸化-细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达。结果:不同浓度的紫草素对PC-3细胞的生长抑制呈时间和剂量依赖性;形态学观察结果显示紫草素作用PC-3细胞后可使细胞变圆,脱落,皱缩,细胞内出现空泡,周围出现凋亡小体;与空白组比较,不同浓度的紫草素明显升高Caspase-3和Bax蛋白的表达,明显降低Bcl-2蛋白的表达,不同浓度的紫草素作用细胞48 h后可诱导细胞产生ROS,ROS清除剂二硫苏糖醇(DTT)可以明显逆转紫草素诱导的PC-3细胞的生长抑制率,且0.2 mmol·L-1DTT可以抑制由紫草素诱导的Caspase-3和ERK1/2的活化。结论:紫草素通过ROS/ERK1/2信号通路诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡。