HCa／16A3－F及HCa／A2－P两株小鼠淋巴道转移肝癌细胞系的特性研究

ＨＣａ／１６Ａ３－Ｆ及ＨＣａ／Ａ２－Ｐ两株小鼠淋巴道转移肝癌细胞系的特性研究凌茂英，王明辉，郭伶伶，王波为了克服肿瘤异质性对其生物学特性研究所造成的困难，我们从自建的６１５小鼠肝癌细胞系（ＨＣａ－Ｆ２５／Ｌ）中分离出高、低转移力克隆（ＨＣａ－Ｆ２５－...     

不同免疫力小鼠体内肝癌细胞转移特性的变化

ＨＣａ－Ｆ２５／１６Ａ３－Ｆ（Ｆ）和ＨＣａ－Ｆ２５／Ａ２－Ｐ（Ｐ）是从小鼠腹水型肝癌细胞中分离出来的，在有正常免疫功能小鼠体内只经淋巴道转移的同源而具有不同转移力的两株克隆细胞系。将Ｆ细胞和Ｐ细胞接种到三种不同免疫功能的小鼠皮下（皮下组）和尾静脉内，它们均出现了淋巴结转移。皮下组Ｆ细胞在６１５小鼠和ＳＣＩＤ小鼠体内转移率均很高，在ＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕ小鼠体内转移率最低。Ｐ细胞在三种小鼠体内随免     

利用流式细胞术研究榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca—F25／CL—1 …

采用小鼠肝癌腹水瘤细胞系Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３,利用流式细胞术研究了榄香烯对肿瘤细胞的作用,对Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｃｌ－１６Ａ３细胞周期的影响、ＤＮＡ含量的分析以诱导细胞凋亡。结果表明：榄香烯可以明显抑制Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞的增殖,有效地杀伤肿瘤细胞;榄香烯对ＣＯ／ＧＩ期细胞无明显作用,主要作用于Ｓ期,阻止由Ｓ期进入Ｇ２／Ｍ期,从而抑制肿瘤生长;可以ＧＯ／ＧＩ期前出现一个凋亡特异     

榄香烯合并加温对H_（22）－F_（25）／L肝癌细胞体外抑癌的实验研究

利用我国中药温莪术提取的抗癌有效部位榄香烯（ｅｌｅｍｅｎｅ）合并加温，对Ｈ２２－Ｆ２５／Ｌ小鼠肝癌细胞进行体外抑癌实验。结果显示：Ｅｌｅｍｅｎｅ（５０ｕｇ／ｍｌ）或加温（≥３９０℃）均对肝癌细胞有抑癌作用，并且随着加温温度的上升或时间的延长抑癌作用愈益明显。其中以Ｅｌｅｍｅｎｅ（５０ｕｇ／ｍｌ）合并加温（４３０℃）持续１小时抑癌效果显著。其３Ｈ－ＴｄＲ癌细胞掺入率仅为０．２４％，核分裂明显抑制（Ｐ＜０．０１），作用后的癌细胞不能再传代。这结果说明Ｅｌｅｍｅｎｅ合并加温对Ｈ２２－Ｆ２５／Ｌ小鼠肝癌细胞在体外有显著的抑癌作用，说明该药具有临床热化疗前景。     

1，25（OH）_2D_3及其类似物调节人原始巨核白血病细胞系增殖分化的机制

１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其两种新型类似物（ＭＣ９０３和ＥＢ１０８９）对人原始巨核白血病细胞系ＨＩＭｅｇ的增殖分化过程有重要调节作用。本研究利用分子杂交及逆转录－聚合酶链反应首次证明，ＨＩＭｅｇ细胞中有１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ的表达，强烈提示１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３对ＨＩＭｅｇ细胞的作用是由ＶＤＲ介导的。同时还发现，１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其类似物、维甲酸在调节ＨＩＭｅｇ细胞增殖分化过程中，Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平迅速降低，６ｈ时已基本达到最低水平，提示这些作用因子对ＨＩＭｅｇ细胞的抑制增殖和诱导分化作用是和Ｃ－ｍｙｃ癌基因的表达改变密切相关的。     

小鼠高低转移性肝癌微卫星不稳定性的研究

目的：了解小鼠高、低转移性肝癌细胞系Ｈｃａ／１６Ａ３－Ｆ（Ｆ）和Ｈｃａ／Ａ２－Ｐ（Ｐ）发生微卫星不稳定性（ＭＳＩ）情况,探讨它们与肝癌发生及转移之间的关系。方法：随机选择３号和１６号染色体上１５个多态微卫星标记,采用聚合酶链式反应－简单重复序列多态性（ＳＳＬＰ）和单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法对Ｆ和Ｐ细胞系进行分析。结果：Ｆ和Ｐ细胞系有信息的微卫星位点其等位基因与Ｃ３Ｈ相同,且存在多位点ＭＳＩ。结     

异搏停对小鼠肝癌腹水瘤细胞Hca－F_（25）／CL－16A_3内某些钙稳态指标的影响

Ｃａ２＋与肿瘤代谢有着极为密切的关系。本文报道了钙拮抗剂异搏停作用于Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞后胞内某些钙稳态指标的改变。结果表明，用药后细胞有分化现象且生长速度减慢，同时胞液Ｃａ２＋浓度和微粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性明显降低，而线粒体和微粒体贮钙水平显著升高，细胞核钙和细胞总钙明显下降。结果提示，钙拮抗剂可使肿瘤细胞内的钙分布发生变化，从而改变了与肿瘤细胞的分化和增殖密切相关的钙恒稳状态。     

凋亡相关基因bcl—2,bax,Fas及FasL在乙型肝炎病毒相关性？…

目的 探讨原发性肝癌中乙型肝炎病毒感染与凋亡基因ｂｃｌ－２、ｂａｘ、Ｆａｓ及ＦａｓＬ表达的关系。方法 采用免疫组化技术分析４０例原发肝细胞癌组织中乙肝病毒表现抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性组和ＨＢｓＡｇ阴性组ｂｃｌ－２、ｂａｘ、Ｆａｓ及ＦａｓＬ的表达。结果 癌组织中ＨＢｓＡｇ阳性率为３０％（１２／４０）,癌旁组织中ＨＢｓＡｇ阳性率为６２．５％（２５／４０）,１２例ＨＢｓＡｇ阳性的癌组织中ｂｃｌ－２的ｂａｘ     

抗HSV－1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７～１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＬｇＧ＿１、ＩｇＧ＿（２ｇ）、ＩｇＧ＿３，腹水抗体效价在１０￣（－５）～１０￣（－７）之间免疫沉淀。ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３株与１２０～１２８Ｋ多肽，２株与６０Ｋ多肽发生特异性反应，具有ＨＳＶ型共同抗原特异性。７株ＭｃＡｂ与ＣＭＶ均不发生特异反应。这些杂交瘤细胞系的建立对于ＨＳＶ的临床早期、快速诊断有重要的应用价值。     

胎儿LAK／IL—2治疗长期HBV无症状携带者的临床研究

应用儿脾ＬＡＫ细胞，配合ｒＩＬ－２和ｒＩＦＮ－γ治疗８例长期ＨＢＶ无症状携带者，结果表明：有７５％（６／８）的患者ＨＢｅＡｇ转阴，其中有２５％（２／８）的患者ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ均转阴，治疗后ＣＤ＾＋８Ｔ细胞稍有增高，Ｔａｃ抗原比治疗前和对照组均显著增高，血ｓＩＬ－２Ｒ，ＩＬ－８和ＮＴＦ－α治疗后均显著增高。     

高和低转移能力的小鼠肝癌细胞凝集素结合的组化观察

本文对同源高、低转移能力的小鼠肝癌细胞与六种凝集结合特性进行了初步观察。结果表明，高转移细胞株（１６Ａ_３）与ＣｏｎＡ有更多和更强的结合，与ＳＢＡ结合的例数亦多于低转移的细胞株（Ａ_２）。这些差别是否与它们的转移能力有联系尚需进一步观察。     

DMSO诱导小鼠肝癌腹水瘤细胞16A-3分化前后胞液磷酸化酶a活性和Ca~(2+)浓度的改变

本文采用二甲亚矾(DMSO)诱导近交系615小鼠肝癌腹水瘤细胞系Hca-F25/CL-16A_3,测定了细胞分化前后胞液磷酸化酶a活性和Ca~(2+)浓度。结果表明,经DMSO促分化后,胞液磷酸化酶a活性明显升高,而胞液Ca~(2+)浓度则显著下降。结果提示,磷酸化酶a在肿瘤细胞分化前后对Ca~(2+)的敏感性不同,不能反映肿瘤细胞胞液Ca~(2+)浓度变化情况。     

多药耐药细胞系A549/ADM的建立及部分特性

目的建立多药耐药细胞系A549/ADM和初步探讨人肺腺癌细胞多药耐药的发生。方法对肺腺癌细胞A549采用持续低浓度和逐渐增加阿霉素浓度间歇诱导,建立多药耐药细胞系;使用流式细胞仪器分别检测敏感细胞系和耐药系的P-gp和MRP的表达;采用MTT法检测其对多种常用化疗药物的耐药程度。结果与母细胞系相比,耐药细胞系A549/ADM对ADM的耐药程度增加了14.29倍,对VCR、DDP、VP-16均有不同程度的耐药,对5-FU无耐药性;耐药细胞系A549/ADM表面P-GP、MRP表达分别为74.8%和61.2%(P<0.01)。结论A549/ADM对多种常用肿瘤化疗药物表现有不同程度的耐药,其耐药性可能与P-GR和MRP高表达有关。     

不同转移力瘤株的免疫原性及对宿主淋巴样器官过氧化反应的影响

本文探讨不同转移力瘤细胞株免疫原性与淋巴结转移及淋巴样器官过氧化状态的关系。结果显示高转移株(16A_3)的转移潜伏期较短、免疫原性较低转移株(A_2)弱。荷癌小鼠淋巴样器官SOD/LPO比值变化特征为:荷癌组显著低于正常组;16A_3组显著低于A_2组;两瘤株组内,已转移组明显低于未转移组。提示肿瘤的发展、转移与瘤细胞免疫原性及宿主淋巴样器官中过氧化反应的加强和抗氧化活性的下降密切相关;作者认为宿主免疫功能可能与过氧化反应有紧密联系,值得深入研究。     

THE INTERRELATIONSHIP BETWEEN TUMOR CELLS＇ ELECTROPHORETIC MOBILITY，ADHESIVE AND INVASIVE ABILITIES，AND THEIR METASTATIC POTE

ＴＨＥＩＮＴＥＲＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＢＥＴＷＥＥＮＴＵＭＯＲＣＥＬＬＳ＇ＥＬＥＣＴＲＯＰＨＯＲＥＴＩＣＭＯＢＩＬＩＴＹ，ＡＤＨＥＳＩＶＥＡＮＤＩＮＶＡＳＩＶＥＡＢＩＬＩＴＩＥＳ，ＡＮＤＴＨＥＩＲＭＥＴＡＳＴＡＴＩＣＰＯＴＥＮＴＩＡＬＧａｏＪｉｎ（...     

抑制LRP16基因的表达降低了MCF-7细胞对5-FU的杀伤敏感性

目的:探讨LRP-16基因对MCF-7细胞增殖的影响及其潜在的临床意义。方法:既往用逆转录病毒介导RNA干扰的方法,已构建了能不同程度抑制MCF-7细胞LRP16基因表达的细胞系pL668(抑制率60%)、pL374(抑制率90%)及其阴性对照pGFPi细胞系。应用台盼蓝排斥实验法观察三种细胞增殖速率和用细胞周期S期特异性的化疗药物5-FU诱导pL374、pGFPi细胞的死亡情况。结果:pGFPi、pL668、pL374三种转染细胞的增殖能力依次降低(P<0.05)。5FU作用于细胞后,pGFPi从24h开始即有10%以上的细胞死亡,48h死亡率达20%,72h死亡率为75%,至96h基本全部死亡;而pL374在72h以后死亡率才明显上升,96h死亡率达30%。结论:抑制LRP16基因表达,可有效抑制MCF7细胞的增殖,并降低了细胞对5-FU的杀伤敏感性。表明LRP16基因参与了MCF-7细胞周期转化的调节,可能作用于G1/S关卡点。提示该基因在肿瘤的发生和发展过程中发挥重要的作用,可能是雌激素依赖性乳腺癌的一个良好治疗靶标。     

黑素瘤细胞体外穿透性体内转移性及tPA释放量研究

tPA是蛋白分解酶类,在肿瘤细胞侵袭和转移中起重要作用。黑素瘤细胞株可释放tPA。我们研究了A_(375)M和A_(375)P两株细胞株的体外穿透性,A_(375)M对基底膜的穿透能力是A_(375)P的4.3倍,体内的转移性前者较后者高,tPA释放量前者多于后者,表明tPA产量和肿瘤细胞的转移性相关。     

Isolation and characterization of clonal cell lines with different metastatic capacity from hepato-carcinoma in mice

By means of soft agar colonization and limiting dilution, 5 clonal cells with different metastatic capacity, [one with high metastatic rate (78.6-89.4%), three moderate (33.3-66.6%) and one low (15-15.4%)], were separated from Hca-F25/L cell line. Their common features were: All clones metastasize to lymphatic system except a small percentage (1.88%) associated with lung metastasis; five clones as well as their parents all reacted with Keratin monoclonal antibody (HK2), which indicated the epithelial character with poor differentiation; Cells of each clone have highly identical karyotype. Five clone lines have similar marker chromosomes (M1, M2, M3, M4) with different stem line karyotypes. We also found different features of five cell lines in pathomorphological indicators and cell electrophoresis rate. Our results indicated that the Hca-F25/L strain is heterogeneous in phenotype and karyotype.     

DMSO致小鼠肝癌腹水瘤细胞Hca-F25/CL-A_2分化后钙恒稳的变化

本文测定了小鼠肝癌腹水瘤细胞Hca-F25/CL-A_2经二甲亚砜(DMSO)诱导分化前后钙恒稳的有关指标。结果表明,细胞经DMSO诱导向正常形态转化,细胞内总钙水平、胞液Ca~(2+)浓度和微粒体Ca~(2+)-ATP酶活性均明显下降,线粒体内钙含量显著提高。结果提示,细胞内钙恒稳状态与肿瘤细胞的分化和增殖密切相关。     

Aβ25-35诱导PC12细胞周期紊乱及对P53和Cyclin D1基因表达的影响

目的:探讨Aβ25-35诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化及对P53和Cyclin D1基因表达的影响。方法:PC12细胞同步于G0期,采用终浓度为0-45μmol/L或浓度为25μmol/L Aβ25-35处理PC12细胞,用MTT比色法分析细胞存活率;流式细胞仪检测分析细胞周期的改变;RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测P53和Cyclin D1基因的变化。结果:随着Aβ25-35剂量的增加,PC12细胞存活率降低(P<0.01);流式细胞仪分析表明去血清培养24 h可使约90%PC12细胞停滞于G0/G1期,25μmol/L Aβ25-35诱导组8,16,24 h与对照组比较,S期百分率明显增加(P<0.01),16 h后细胞凋亡率明显增加(P<0.01),可见明显的亚二倍体峰(Ap峰);P53 mR-NA表达和P53蛋白表达降低、Cyclin D1 mRNA表达和Cyclin D1蛋白表达增高。结论:Aβ25-35降低去血清培养的PC12细胞存活率,诱导同步化于G0/G1的PC12细胞重新进入细胞周期,并阻滞于S期,同时出现凋亡,可能与下调P53的表达,上调Cyclin D1的表达有关。