Adinbitor对人胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的作用

目的探讨Adinbitor对人胃癌MGC803细胞生长及凋亡的作用。方法应用Adinbitor作用于体外培养的人胃癌MGC803细胞,采用MTT比色法分析其对MGC803细胞生长的影响;采用相差显微镜、苏木精-伊红（HE）和Hoechst染色观察不同浓度的Adinbitor诱导MGC803细胞凋亡的形态变化。结果Adinbitor可呈剂量依赖性方式抑制MGC803细胞的增殖,其抑制MGC803细胞增殖的ID50为3.52μmol/L。Adinbito诱导的MGC803细胞凋亡实验,显示出细胞凋亡的典型的形态学特征,如胞间连丝消失,细胞皱缩成团,胞内出现空泡等现象,而且随Adinbitor浓度的增加,凋亡现象越明显。结论Adinbitor对人胃癌MGC803细胞生长具有抑制作用,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

罗格列酮对MGC803细胞小鼠肾囊膜下移植瘤生长的影响

目的 探讨过氧化酶体增生物激活受体γ(PPARγ)配体罗格列酮对小鼠体内人类胃癌MGC803细胞移植瘤生长的影响.方法 建立人类胃癌MGC803细胞小鼠肾囊膜下移植瘤模型,通过解剖显微镜和HE染色观察50 mg/kg的罗格列酮连续灌胃5 d作用于荷瘤小鼠后对移植瘤生长的抑制作用.结果 50 mg/kg的罗格列酮能明显抑N4,鼠肾囊膜下移植瘤MGC803细胞增生、诱导肿瘤细胞凋亡而抑制移植瘤的生长,抑瘤率达62.9%.结论 PPARγ配体罗格列酮能抑制小鼠体内肾囊膜下MGC803细胞移植瘤生长.     

伊班膦酸钠对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-453的体外生长抑制作用

目的：研究伊班膦酸钠（IBN）对体外培养的人乳腺癌细胞MDA—MB-231、MDA—MB-453细胞生长增殖的影响及其潜在的作用机制。方法：采用MTT法检测不同浓度的IBN、及相同浓度不同作用时间的IBN对MDA—MB-231、MDA—MB-453两类不同的人乳腺癌细胞系生长增殖的影响；应用流式细胞仪检测不同浓度IBN作用下，MDA—MB-231、MDA—MB-453细胞细胞周期的变化。结果：在（10～100）μg／ml的浓度范围内，IBN对MDA—MB-231、MDA—MB-453细胞生长增殖均有抑制作用（P〈0．01），抑制效果与IBN浓度呈剂量依赖性，与其作用时间呈时间依赖性；IBN可使细胞明显阻滞于S期，G2／M期细胞比例则明显减少，且呈剂量依赖趋势。结论：在（10～100）μg／ml的浓度范围内，IBN对体外生长的人乳腺癌细胞MDA—MB-231、MDA—MB-453产生剂量、时间依赖性的抑制作用，其机制可能与其将细胞阻滞在DNA合成的S期，阻碍肿瘤细胞分裂增殖有关。     

过氧化物酶体激活物活化受体γ活化对人胃癌细胞周期的影响

目的:探讨过氧化物酶体激活物活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)活化在诱导人胃癌MGC803细胞周期停滞中的作用。方法:MTT法检测吡格列酮(pioglitazone,PGZ)对MGC803细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测肿瘤细胞周期的改变;RT-PCR方法检测PPARγ、细胞周期蛋白Cyclin D1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4的表达。结果:0.1~10μmol/L PGZ作用MGC803细胞96 h后能显著抑制细胞增殖;10μmol/L PGZ分别作用48、72和96 h,G1期细胞随着作用时间的延长而增加,呈明显的G1期阻滞;在MGC803细胞中PPARγ表达较弱,经10μmol/L PGZ作用48 h表达水平显著增加;作用96 h,细胞中细胞周期调节因子CDK4表达显著降低(P<0.01),Cyclin D1轻微下调。结论:PPARγ活化能诱导MGC803细胞周期G1期阻滞,该作用可能与其下调细胞周期因子CDK4和Cyclin D1的表达有关。     

三氧化二砷对人胃癌细胞系MGC803凋亡及耐药基因表达影响的实验研究

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人胃癌细胞系MGC803的抑制和诱导凋亡作用及对MRP基因表达的影响.方法:选用人胃癌MGC803细胞系,运用体外细胞培养法,MTT法,流式细胞术检测As2O3对人其抑制和诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MRP mRNA的表达.结果:As2O3对人胃癌MGC803 细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系.不同浓度的As2O3均可诱导凋亡.1.0μmol/L、2.0μmol/L的As2O3可下调MRP mRNA的表达.结论:As2O3具有抗肿瘤作用,主要是通过诱导细胞凋亡实现的,其机制与下调MRP mRNA 表达有密切关系.     

吡格列酮对胃癌细胞生长的影响及其机制

 目的研究过氧化物酶体激活物活化受体γ(PPARγ)在人胃癌MGC803中的表达及其配体吡格列酮(PGZ)对胃癌细胞生长的影响。方法用不同浓度的吡格列酮处理人胃癌MGC803细胞,采用RT-PCR法检测MGC803中PPARγ的表达变化;MTT法观察细胞增殖抑制作用;Hoechst33342/PI双荧光活细胞染色法和DNA凝胶电泳技术分析细胞凋亡。结果MGC803中存在PPARγ表达;PGZ能显著抑制MGC803生长(P<0.05),IC50值为9.01×10-6μmol/L,且作用呈剂量依赖性;高浓度PGZ能明显诱导凋亡产生;PGZ作用MGC803细胞后PPARγ表达呈剂量依赖性上调趋势(P<0.05)。结论吡格列酮依赖激活PPARγ能在体外抑制肿瘤细胞生长并诱导其凋亡,提示PPARγ可能是胃癌治疗的一个新的分子靶点。     

二烯丙基二硫增强胃癌细胞对5-Fu敏感性的研究

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对5-Fu诱导胃癌MGC803细胞增殖与凋亡的作用及机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT),测定DADS对5-Fu诱导MGC803细胞增殖活性的作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Westernblot检测MGC803细胞Bcl-2,Bax,Mcl-1蛋白的表达情况。结果1mg/L、3mg/L的DADS分别与5-Fu联合应用,可增强5-Fu对MGC803细胞增殖抑制作用。DADS(1mg/L)能促进5-Fu诱导MGC803细胞的凋亡。DADS作用于MGC803细胞后,Bcl-2、Mcl-1蛋白表达水平下调,Bax蛋白表达水平上调呈浓度依赖方式。结论ADS能增强5-Fu对MGC803细胞增殖抑制和诱导凋亡,起化疗增敏作用,可能与其下调Bcl-2、Mcl-1蛋白表达水平,上调Bax蛋白表达水平有关。     

薯蕷皂苷元体外抗肿瘤作用的研究

[目的]研究薯蓣皂苷元(diosgenin,Dio)的体外抑瘤谱,并初步探讨其抗肿瘤的作用机制.[方法]MTT法测定Dio对肿瘤细胞的生长抑制情况;采用光镜和电镜观察药物对MGC-803细胞形态的影响;流式细胞技术检测Dio对MGC-803细胞的抑制作用和细胞周期的影响.[结果]Dio对MGC-803等10种肿瘤细胞有选择性的生长抑制作用,30mg/L的Dio处理后的MGC803细胞变圆,体积变小,有多于70%的细胞脱壁,透射电镜下可见细胞表面微绒毛消失、胞质空泡化、核染色质浓集、边聚,核碎裂:流式细胞检测表明Dio导致DNA片断化,但对细胞周期影响不明显,S期细胞略有增加,C2/M期细胞略有减少.[结论]Dio选择性地抑制肿瘤细胞的生长,引起MGC-803细胞形态改变和DNA片断化,可能通过诱导该细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用.     

活性氧在EGCG诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用

背景与目的:表没食子儿茶素没食子酸(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)抗肿瘤作用的机制目前尚不十分清楚,本研究旨在探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)在EGCG诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用.方法:采用噻唑蓝比色法(MTT)检测MGC803细胞的存活率;采用荧光显微镜观察MGC803细胞的凋亡率;流式细胞术检测MGC803细胞凋亡率及细胞内活性氧水平.结果:EGCG可诱导MGC803细胞凋亡,细胞内活性氧水平升高.抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cystein,NAC)干预后,EGCG抑制MGC803细胞生长的作用明显减弱,细胞凋亡率下降,NAC抑制了细胞内活性氧水平的升高.结论:EGCG可诱导MGC803细胞凋亡,该作用可被NAC显著抑制,提示EGCG诱导MGC803细胞凋亡与细胞内活性氧产生增加有关.     

PPARγ配体Ciglitazone对人胃癌MGC803细胞增殖的影响及其机制

目的探讨PPARγ配体Ciglitazone对人胃癌MGC803细胞增殖的影响及其机制。方法RTPCR检测MGC803细胞PPARγ mRNA。MTT及流式细胞术检测Ciglitazone对MGC803细胞增殖及凋亡的影响。相差倒置显微镜和Hoechst33342染色观察凋亡的形态学变化。免疫组化和流式细胞术检测PPARγ、Bcl-2、Bag-1及Bax蛋白表达和变化。结果PPARγ配体Ciglitazone（5、10、20和50μmol／L）可抑制MGC803细胞增殖和诱导其凋亡,增殖的抑制和凋亡的诱导有平行性,且有浓度和时间依赖性。随20μmol／L Ciglitazone作用时间的延长,MGC803细胞的PPARγ mRNA及蛋白表达、Bax蛋白表达及Bax／Bcl-2蛋白的比值升高,Bcl-2和Bag-1蛋白表达降低。结论Ciglitazone可能主要通过激活PPARγ抑制人胃癌MGC803细胞增殖和诱导其凋亡。Bax蛋白表达和Bax／Bcl-2蛋白表达比值升高,Bcl-2和Bag-1蛋白表达降低在Ciglitazone诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中起重要作用。提示Ciglitazone可能对治疗胃癌有效。     

三氧化二砷对人胃癌细胞系MGC803凋亡及耐药基因表达影响的实验研究

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对人胃癌细胞系MGC803的抑制和诱导凋亡作用及对MRP基因表达的影响。方法：选用人胃癌MGC803细胞系,运用体外细胞培养法,MTT法,流式细胞术检测As2O3对人其抑制和诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测MRPmRNA的表达。结果：As2O3对人胃癌MGC803细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系。不同浓度的As2O3均可诱导凋亡。1．0μmol／L、2．0μmol／L的As2O3可下调MRPmRNA的表达。结论：As2O3具有抗肿瘤作用,主要是通过诱导细胞凋亡实现的,其机制与下调MRPmRNA表达有密切关系。     

胃癌细胞来源的exosomes对肿瘤细胞增殖的影响

目的:观察胃癌细胞来源的exosomes对肿瘤细胞增殖的影响,并对PI3K/Akt、MAPK/ERK通路在此过程中的作用机制进行了探讨.方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心的方法从胃癌MGC803细胞的上清液中分离出肿瘤来源的exosomes.透射电子显微镜下观察exosomes形态,Western blot检测其蛋白的表达.采用MTT法检测exosomes对MGC803细胞增殖能力的影响.结果:透射电子显微镜下观察胃癌MGC803细胞来源的exosomes具有特征性的盘状结构,由双层膜构成,直径在30-100 nm之间.Western blot结果显示exosomes富含FGF、EGFR和Her-2分子.Exosomes以时间和剂量依赖性的方式促进MGC803细胞的增殖,在此过程中伴随p-Akt和p-ERK1/2表达上调.结论:胃癌细胞来源的exosomes能促进肿瘤细胞MGC803增殖,其机制可能与其表面表达FGF、EGFR和Her-2分子及激活PI3K/Akt和MAPK/ERK通路有关.     

PPARγ激活剂罗格列酮对人胃癌MGC803细胞周期及其PTEN表达的影响

目的探讨不同浓度的罗格列酮对人胃癌MGC803细胞增殖及其PTEN蛋白表达的影响。方法不同浓度的罗格列酮(12.5、25、50、100μmol/L)分别与MGC803细胞系共同培养48 h后,采用流式细胞仪检测罗格列酮对MGC803细胞周期的影响,免疫细胞化学检测MGC803细胞PTEN蛋白表达。结果罗格列酮使MGC803细胞停滞于细胞周期G1期,呈剂量依赖性,并诱导PTEN表达上调。结论罗格列酮可以通过诱导PTEN表达上调,使MGC803细胞停滞于细胞周期G1期,进而抑制人胃癌MGC803细胞生长,这可能是PPARγ激活剂抗肿瘤的机制之一。     

复方苦参注射液诱导胃癌细胞株MGC803增殖抑制和细胞凋亡的实验研究

观察复方苦参注射液在体外抑制人胃癌细胞株MGC803增殖和诱导其凋亡的生物学效应,并对其分子机制作初步探讨。方法：分别采用不同浓度梯度的复方苦参注射液干预胃癌细胞MGC803,通过MTT比色法检测复方苦参注射液对该细胞系生长增殖的影响。TUNEL法分析经1、2、4 mg/mL复方苦参注射液作用24 h后的MGC803细胞凋亡率。Western blot法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达情况。结果：复方苦参注射液在体外能明显抑制人胃癌细胞株MGC803的增殖,且呈浓度、时间依赖性（P<0.001）。TUNEL法检测实验组细胞凋亡率均明显高于未加复方苦参注射液的空白对照组（P<0.05）;Western blot分析表明复方苦参注射液能下调Bcl-2蛋白表达,降低蛋白Bcl-2/Bax比值,并且可以促使Caspase-3原蛋白发热活化（P<0.05）。结论：复方苦参注射液具有体外抑制胃癌细胞增殖的作用,并能诱导其凋亡,其机制可能与Bcl-2/Bax比值降低导致Caspase-3活化相关。     

p38通路在二烯丙基二硫诱导人胃癌MGC803细胞G2/M期阻滞中的作用

背景与目的:研究表明p38通路参与了细胞G2/M期阻滞过程的调控,但对其调控机制研究很少.本研究旨在探讨p38通路在二烯丙基二硫(diallyldisulfide,DADS)诱导人胃癌MGC803细胞G2/M期阻滞中的作用及其机制.方法:采用MTT法检测MGC803细胞的生长活性;流式细胞仪检测药物对细胞周期分布的影响;Western blot法检测药物对P38蛋白、磷酸化P38蛋白、Cdc25C蛋白的表达.结果:MTT法检测结果显示,P38特异性抑制剂SB203580可拮抗DADS对MGC803细胞的抑制增殖作用.流式细胞仪分析表明,30 mg/L的DADS处理MGC803细胞24 h后,G2/M期的比率为39.4%,高于对照组的9.3%(P＜0.05);但用SB203580抑制P38的活性后,DADS诱导的G2/M期比率从39.4%降到21.2%(P＜0.05).Western blot结果表明,DADS处理MGC803细胞后,p38通路快速激活,磷酸化P38的表达与对照组相比,在20 min内升高3.52倍,而P38总蛋白量没有发生明显改变;DADS作用24 h后,Cdc25C磷酸酶表达降低了62%,而用SB203580抑制剂后,DADS对Cdc25C的抑制作用可以部分逆转(P＜0.05).结论:DADS可能通过激活p38通路使部分MGC803细胞停滞在G2/M期,p38通路调节Cdc25C磷酸酶的表达在DADS诱导MGC803细胞G2/M期阻滞中起着重要作用.     

PKC抑制剂对 MGC803细胞中 P-gp表达及耐药性的影响

背景与目的:既往研究发现,肿瘤细胞的多药耐药 (multidrug resistance,MDR)与蛋白激酶 C(protein kinase C,PKC)信号转导系统关系密切 ,但其作用机制有待于进一步研究.本实验拟通过研究长春新碱( vincristine,VCR)及选择性 PKCα、β抑制剂 myr ψ PKC对人胃癌细胞 MGC803的作用,探讨 PKC信号转导系统与 mdr1基因的关系.方法:用 Western blot检测 MGC803细胞中 mdr1基因编码的 P 糖蛋白( P-glycoprotein,P-gp)的表达以及 VCR作用对其表达的影响,用流式细胞术对 VCR及作用后的细胞进行周期分析,同时用 MTT法验证 VCR诱导后及其作用下 MGC803细胞的药物敏感性.结果: MGC803细胞在 VCR短期作用下, P-gp表达增加,在 myr ψ PKC的作用下其表达受到抑制.通过细胞周期分析发现 VCR和 myr ψ PKC共同作用的细胞其凋亡比例为 31.23%,显著高于 VCR单独作用时的细胞凋亡率( 18.41%)( P< 0.05). VCR刺激后 MGC803细胞对 VCR的 IC50为 (284.0± 13.2)ng/ml,是阴性对照组 IC50[(127.0± 17.6)ng/ml]的 2.24倍,是 myr ψ PKC组 IC50[(212.0± 30.4)ng/ml]的 1.33倍.结论: MGC803细胞在 VCR的短期作用下可 诱导产生 P-gp,而 myr ψ PKC可通过选择性抑制 PKCα、β而抑制 P-gp的表达和逆转其耐药性,从而促进 MGC803细胞的凋亡. PKC可能对胃癌 mdr1表达有调节作用.     

p38MAPK在EGCG诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用

目的：探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen—activaced protein kinase，v38MAPK）在表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用。方法：采用MTT法检测MGC803细胞的存活率，荧光显微镜观察和碘化丙啶染色FCM检测MGC803细胞凋亡率，Western印迹法检测MGC803细胞中p38MAPK蛋白及磷酸化p38MAPK蛋白的表达。结果：EGCG可诱导MGC803细胞凋亡，且p38MAPK被激活。用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后，EGCG抑制MGC803细胞生长的作用明显减弱，细胞凋亡率下降，p38MAPK活性显著下降。结论：EGCG可诱导MGC803细胞凋亡，该作用可被SB203580显著抑制，提示EGCG可能通过激活D38MAPK使部分MGCR03细胞凋亡。     

蟾蜍毒素联合紫杉醇抑制人胃癌MGC803细胞增殖和诱导凋亡的作用

目的探讨蟾蜍毒素联合紫杉醇抑制人胃癌MGC803细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法应用MTT法检测不同浓度蟾蜍毒素及紫杉醇单药及联合对胃癌细胞MGC803增殖抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡和周期阻滞;Westernblot法检测C-FLIPL、Caspase-8蛋白的表达。结果(1)蟾蜍毒素及紫杉醇单药均抑制MGC803细胞增殖,呈剂量-时间依赖效应,且联合用药的细胞增殖抑制率明显高于单药组,差异有统计学意义(P<0.05)。24、48及72 h联合指数(CI)分别为0.77、0.86、0.72;(2) 40 nmol/L蟾蜍毒素、25 ng/ml紫杉醇单药及联合作用细胞24 h,流式细胞仪检测凋亡率分别为14.13%、19.74%及53.30%,联合组与单药组比较差异有统计学意义(P<0.05);(3)Western blot结果显示,蟾蜍毒素、紫杉醇单药组及联合组作用细胞24 h后,C-FLIPL蛋白表达依次下降至对照组的78.38%、64.71%、46.73%,Caspase-8蛋白表达上调至对照组的150.25%,156.86%,180.58%。结论蟾蜍毒素协同紫杉醇诱导胃癌MGC803细胞凋亡,且可能与下调C-FLIP、上调Caspase-8蛋白有关。     

紫杉醇提高胃癌MGC803细胞对TRAIL的敏感性

目的：研究紫杉醇对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响,探讨死亡受体5（DR5）在TRAIL诱导细胞凋亡中的作用。方法：采用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,western blot检测蛋白表达。结果：在MGC803细胞中,100ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制和细胞凋亡,TRAIL（100ng/ml）联合紫杉醇（3.41g/ml）引起明显的增殖抑制和细胞凋亡（P〈0.05）。TRAIL单药没有改变死亡受体5（DR5）的表达,而3.41g/ml紫杉醇作用MGC803细胞后明显上调了DR5的表达。结论：紫杉醇通过上调DR5的表达增强TRAIL诱导的胃癌MGC803细胞凋亡。     

紫杉醇提高胃癌MGC803细胞对TRAIL的敏感性

目的:研究紫杉醇对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响,探讨死亡受体5(DR5)在TRAIL诱导细胞凋亡中的作用。方法:采用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,western blot检测蛋白表达。结果:在MGC803细胞中,100ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制和细胞凋亡,TRAIL(100ng/ml)联合紫杉醇(3.41g/ml)引起明显的增殖抑制和细胞凋亡(P<0.05)。TRAIL单药没有改变死亡受体5(DR5)的表达,而3.41g/ml紫杉醇作用MGC803细胞后明显上调了DR5的表达。结论:紫杉醇通过上调DR5的表达增强TRAIL诱导的胃癌MGC803细胞凋亡。