靶向G蛋白偶联受体91的小发夹RNA慢病毒载体的构建及功能初步检测

目的　构建靶向大鼠Ｇ蛋白偶联受体９１（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ-ｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ９１,ＧＰＲ９１）基因的小发夹ＲＮＡ（ｓｍａｌｌｈａｉｒｐｉｎＲＮＡ,ｓｈＲＮＡ）慢病毒载体,探讨ＧＰＲ９１受体对高糖诱导下血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）释放的调节作用。方法　设计合成４对针对大鼠ＧＰＲ９１（ＮＭ＿００１００１５１８）的特异性单链寡核苷酸链,两端分别引入ＡｇｅＩ和ＥｃｏＲＩ酶切位点,退火后得到小片段带黏性末端的双链ＤＮＡ,克隆入慢病毒载体ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ,行聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ,ＰＣＲ）和ＤＮＡ测序鉴定重组体。将各慢病毒ｓｈＲＮＡ干扰载体和辅助包装载体共转染２９３Ｔ细胞,收集病毒颗粒并行浓缩滴度检测。将各慢病毒载体转染ＲＧＣ-５细胞后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法筛选有效的慢病毒ｓｈＲＮＡ干扰载体。使用４５ｍｍｏｌ?Ｌ－１的高糖刺激ＲＧＣ-５细胞２４ｈ,用ＥＬＩＳＡ法观察干扰ＧＰＲ９１后ＶＥＧＦ的表达情况。结果　ＰＣＲ及ＤＮＡ测序结果均显示慢病毒载体ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ-ｓｈＧＰＲ９１构建正确;包装病毒颗粒后,ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ-ｓｈＧＰＲ９１-１、２、３、４组病毒浓缩液的滴度依次为１．５×１０９ ＴＵ?ｍＬ－１、１．５×１０９ＴＵ?ｍＬ－１、３．０×１０９ＴＵ?ｍＬ－１、３．０×１０９ＴＵ?ｍＬ－１。将慢病毒颗粒感染ＲＧＣ-５细胞后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测显示ＮＣ组ＧＰＲ９１蛋白（０．６０±０．０８）空白组（０．６２±０．０７）的表达无明显差异（Ｆ＝４９．０３,Ｐ＞０．０５）。而与空白组相比,４个慢病毒载体组（０．４８±０．０５、０．３４±０．０６、０．３０±０．０４和０．１１±０．０６）均能不同程度沉默ＧＰＲ９１的表达,差异有统计学意义（Ｆ＝４９．０３,Ｐ＜００１）,其中ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ-ｓｈＧＰＲ９１-３干扰效率最高。ＥＬＩＳＡ结果显示空白组、高糖组、高糖＋ＮＣ组、高糖＋ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ-ｓｈＧ-ＰＲ９１-３组ＶＥＧＦ蛋白表达分别为（２５．６３±４．５２）ｐｇ?ｍＬ－１、（７２．７４±８．２４）ｐｇ?ｍＬ－１、（７１．６８±８．３１）ｐｇ?ｍＬ－１和（４６．７７±６２１）ｐｇ?ｍＬ－１,表明ＧＰＲ９１病毒干扰载体可显著降低高糖引起的ＶＥＧＦ分泌,差异有统计学意义（Ｆ＝３０．８５２,Ｐ＜０．０１）。结论　本实验成功构建了靶向大鼠ＧＰＲ９１的ｓｈＲＮＡ慢病毒载体并进行病毒颗粒包装。所构建的慢病毒载体能够降低高糖作用下的ＶＥＧＦ表达,为进一步研究ＧＰＲ９１基因在糖尿病视网膜病变中的作用机制和动物基因治疗奠定基础。     

弱视儿童治疗前后PR—VEPP100波变化探讨

为了进一步评价全视野图形反转刺激的弱视治疗前后与正常儿童的图形反转视诱发电位Ｐ１００波变化,随机选择我院２９例（５８眼）治疗前后弱视儿童及３０例正常儿童,两组年龄均在４～１２岁,采用Ｎｏｍａｄｌｅ电生理仪进行电生理检查。结果：弱视组ＰＲ—ＶＥＰＰ１００振幅明显低于正常对照组Ｐ＜０．０１（１１．１６±６．７４μｖｎ＝５６ｖｓ１６．７８±５．５５μｖｎ＝６０）潜伏期比正常对照组明显延长Ｐ＜０．０１（１１０．３９±１０．０１ｍｇｎ＝５６ｖｓ１０１．８１±４．３８ｍｓｎ＝６０）。弱视经治疗视力达基本正常时的ＰＲ—ＶＥＰＰ１００潜伏期与治疗前的Ｐ１００潜伏期比较有显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论：弱视儿童的ＰＲ—ＶＥＰＰ１００振幅降低,Ｐ１００潜伏期延长。弱视儿童视力降低同时有ＰＲ—ＶＥＰ参数异常的趋势。弱视儿童的ＰＲ—ＶＥＰＰ１００潜伏期经治疗视力达基本正常时Ｐ１００潜伏期可以逆转。     

外斜视儿童多导视觉诱发电位的研究

目的探讨不伴有弱视的恒定性外斜视儿童的多导视觉诱发电位（ｖｉｓｕａｌｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎ－ｔｉａｌｓ,ＶＥＰｓ）的临床意义及外斜视的发病机理。方法采用１４个盘状作用电极行全视野及半视野棋盘格翻转刺激,记录正常对照组与不伴有弱视的恒定性外斜组儿童的视觉诱发电位。结果斜视组全视野刺激所记录的双眼与单眼ＶＥＰｓ潜伏期（ＬＰ１）、振幅（ＡＮ１Ｐ１）比较,差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,此结果与正常对照组不同;斜视组主眼和非主眼ＬＰ１较正常对照组延长（Ｐ＜０．０１）,斜视组非主眼ＡＮ１Ｐ１较正常对照组下降（Ｐ＜０．０１）;斜视组鼻、颞侧视网膜ＬＰ１、ＡＮ１Ｐ１比较,差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论ＶＥＰｓ检测可为恒定性外斜视者的双眼视功能异常提供客观依据;恒定性外斜视者视力虽正常但ＶＥＰｓ并非正常,提示有初级视皮层功能障碍存在;不伴有弱视的恒定性外斜视者在单眼半视野刺激条件下,无颞侧视网膜抑制现象。     

弱视儿童治疗前后PR-VEP P_(100)波变化探讨

目的为了进一步评价弱视治疗前后全视野图形反转视诱发电位Ｐ１００波变化。方法随机选择２９例（５８眼）弱视儿童及３０例正常儿童，两组年龄均４～１２岁，采用Ｎｏｍａｄｌｅ电生理仪进行电生理检查。结果发现弱视组ＰＲ－ＶＥＰＰ１００振幅明显低于正常对照组；潜伏期则比正常对照组明显延长。弱视经治疗后，其视力达０９～１０时，ＰＲ－ＶＥＰＰ１００潜伏期与治疗前的Ｐ１００潜伏期比较明显缩短。结论弱视儿童的ＰＲ－ＶＥＰＰ１００振幅降低，Ｐ１００潜伏期延长。弱视经治疗，视力达基本正常时Ｐ１００潜伏期可以逆转；但ＶＥＰ振幅恢复不明显     

多发性硬化及其视觉诱发电位的临床表现

本文报导了１１例多发性硬化（ＭＳ）和它们的视觉诱发电位（ＶＥＰ）。在２２眼中２１眼为ＭＳ视神经炎，１眼视功能正常。２１眼ＭＳ视神经炎的ＶＥＰ全部异常，另１眼ＶＥＰ正常。ＭＳ视神经炎的ＶＥＰ检查结果是：１．ＰＶＥＰ６眼不能记录到波形，１２眼的Ｐ１００成分峰时延迟（１２４．６±９．７ｍｓ，Ｐ＜０．００１）、振幅降低（７．６±２．８μｖ，Ｐ＜０．００１）；２．ＦＶＥＰＰ１的峰时全部延迟（８６．５±８．９ｍｓ，Ｐ＜０．０５），振幅降低（１０．４±６．５μｖ，Ｐ＜０．０５），具有统计学的差异。     

黄斑部病变的局部视网膜电图和图形视觉诱发电位

目的观察黄斑病变局部视网膜电图（ｌｏｃａｌｅｌｅｃｔｒｏｒｅｔｉｎｏｇｒａｍ，ＬＥＲＧ）和图形视觉诱发电位（ｐａｔｅｒｎｖｉｓｕａｌｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌ，ＰＶＥＰ）的变化，评价二者的临床应用价值。方法对２７例（５４只眼）正常人进行黄斑部视角５°、１０°和１５°ＬＥＲＧ测定，并对２５例（３５只眼）黄斑病变患者进行ＬＥＲＧ和ＰＶＥＰ的测定。结果黄斑病变患者５°、１０°和１５°ＬＥＲＧ的ａ、ｂ波振幅均值较正常对照组均有显著性降低（Ｐ＜０．０１），３６．５′、７３′及１４６′ＰＶＥＰ的Ｐ１波潜伏期及振幅均值分别较正常对照组明显延长和降低（Ｐ＜０．０１）。在ＬＥＲＧ（１５°）与ＰＶＥＰ（１４．８°×１９．０°）刺激野相近的条件下，黄斑病变ＬＥＲＧ异常率为６２．２％、ＰＶＥＰ的异常率分别为４８．５％（１４６′）、５４．５％（７３′）及４８．５％（３６．５′），ＬＥＲＧ和ＰＶＥＰ的异常率差异均无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论ＬＥＲＧ与ＰＶＥＰ的异常率相接近。由于ＬＥＲＧ不受视路功能的影响，故认为此项检查是一种较有效和较直接的黄斑功能测定方法     

生后早期双眼形觉剥夺对大鼠视觉传导通路电生理学特性的影响

目的　探讨生后早期双眼形觉剥夺对大鼠视觉传导通路电生理学特性的影响。方法　５０只８ｄ龄健康ＳＰＦ级Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为两组:双眼形觉剥夺组与正常对照组。两组均在正常光照环境下饲养（１２ｈ白天／黑夜交替环境）,于视觉发育关键期后期（生后３８～４４ｄ）利用眼电生理诊断系统观察比较两组大鼠图形视觉诱发电位（ｐａｔｔｅｒｎｖｉｓｕａｌｅ-ｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌ,ＰＶＥＰ）中Ｐ１００波潜时及振幅的差异,利用全细胞膜片钳技术记录两组大鼠视皮层单个神经元固有膜特性值的差异。结果　双眼形觉剥夺组ＰＶＥＰ中Ｐ１００波的潜时值为（９５．６７±１４．６７）ｍｓ,与正常对照组的（８３．６６±１０．８２）ｍｓ相比明显延长（Ｐ＝０．００２）;双眼形觉剥夺组ＰＶＥＰ中Ｐ１００的振幅为（３．０２±１．０２）μＶ,明显低于正常对照组的（７．４２±１．６５）μＶ,差异有统计学意义（Ｐ＝０．０００）。双眼形觉剥夺组与正常对照组视皮层神经元细胞的膜电容分别为（５０．０１±１５．８６）ｐＦ和（４５．１８±１９．０９）ｐＦ,膜电阻分别为（５８．８５±１４．１５）ＭΩ和（５５．８４±１２．０３）ＭΩ,时间常数值分别为（４３．６０±１２．０９）ｍｓ和（３７．５２±１０．８４）ｍｓ,两组相比差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。结论　生后早期双眼形觉刺激不足对视觉传导通路信号传递有延迟作用,但对视皮层单个神经元细胞的固有电生理学特性无影响。     

早期糖尿病视网膜病变患者颜色视觉运动觉特性

目的研究早期糖尿病视网膜病变（ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＤＲ）患者的颜色视觉运动觉的改变，探讨ＤＲ早期诊断方法。方法在ＰＣ兼容机上，应用运动觉测试软件，由微机控制，于ＶＧＡ显示器产生等亮度的颜色光栅条纹和黑白光栅条纹运动，测试早期ＤＲ患者及正常对照者颜色视觉运动觉，并与色觉、视网膜电图（ＥＲＧ）振荡电位（ＯＰｓ）检查结果作比较。结果在时间和空间频率一致时，正常人可观察到等亮度的颜色光栅比黑白光栅运动慢。在黑白光栅亮度对比度为８０％，速度为２０．２ｍｍ／ｓ及１４．３ｍｍ／ｓ时，ＤＲ患者的蓝／黄运动觉和正常人比较，差异有非常显著性（Ｐ＜０．００１）。在黑白光栅亮度对比度为８０％，速度为２０．２ｍｍ／ｓ时，颜色视觉运动觉的异常率（６９．２％）比色觉异常率（４３．６％）及ＥＲＧＯＰｓ异常率（４８．９％）要高。结论颜色视觉运动觉检查提供了一种新的ＤＲ早期诊断方法     

慢性青光眼的图形视诱发电位

目的探索图形视诱发电位（ｐａｔｅｒｎ－ｖｉｓｕａｌｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌ，Ｐ－ＶＥＰ）对慢性青光眼的诊断价值。方法对７０眼慢性青光眼采用Ｐ－ＶＥＰ检测，以Ｐ１００波峰潜伏期及杯／盘面积比作为观察指标。结果杯／盘面积比（ＳＣ／Ｄ）＞０．２与ＳＣ／Ｄ≤０．２两者Ｐ－ＶＥＰ潜伏期阳性检出率，差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１），ＳＣ／Ｄ与Ｐ－ＶＥＰ潜伏期之间呈正相关关系（ｒ＝０．５０３８，Ｐ＜０．０１）。结论Ｐ１００波峰潜伏期延长与青光眼视功能损害程度密切相关；青光眼损害轻时，Ｐ－ＶＥＰ潜伏期阳性率低，而青光眼损害重时，Ｐ－ＶＥＰ潜伏期阳性率较高。提示应用Ｐ－ＶＥＰ检查对青光眼的病情追踪观察及疗效评估有一定价值。     

组织激肽释放酶在糖尿病视网膜病变患者血清中的变化及其调节血管新生机制

目的　检测组织激肽释放酶（ｔｉｓｓｕｅｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ,ＴＫＬＫ）、血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）和可溶性细胞间黏附分子-１（ｓｏｌｕｂｌｅｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｎｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌ-１,ｓＩＣＡＭ-１）在糖尿病视网膜病变（ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＤＲ）患者血清中的变化,观察ＴＫＬＫ在低氧条件下对人视网膜微血管内皮细胞（ｈｕｍａｎｒｅｔｉｎａｌｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＨＲＭＥＣｓ）中ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１表达的影响。方法　收集２型糖尿病患者６０例,按照ＤＲ分期标准将患者分为糖尿病无ＤＲ组（ＤＭ组）、非增生性ＤＲ组（ＮＰＤＲ组）和增生性ＤＲ组（ＰＤＲ组）,收集同期在本院体检的志愿者作为对照组,每组２０例。ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＴＫＬＫ、ＶＥＧＦ和ｓＩＣＡＭ-１的水平。体外ＨＲＭＥＣｓ分别进行常氧和低氧培养,不同浓度重组ＴＫＬＫ处理后,检测细胞增殖、凋亡以及ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１的表达。结果　ＤＭ、ＮＰＤＲ和ＰＤＲ组患者血清中ＴＫＬＫ、ＶＥＧＦ和ｓＩＣＡＭ-１水平明显高于对照组,４组总体差异有统计学意义（Ｆ＝２８．８０５,Ｐ＝０．００２;Ｆ＝３２．０４１,Ｐ＝０．００２;Ｆ＝２６．１６９,Ｐ＝０．００１）;ＰＤＲ患者血清中ＴＫＬＫ、ＶＥＧＦ和ｓＩＣＡＭ-１水平显著高于ＤＭ和ＮＰＤＲ组（均为Ｐ＜０．００１）。ＴＫＬＫ与ＶＥＧＦ（ｒ＝０．６２３,Ｐ＜０．０１）和ｓＩＣＡＭ-１水平（ｒ＝０．５９８,Ｐ＜０．０１）均呈正相关。１０μｇ?ｍＬ－１ｒｈＴＫＬＫ可显著抑制低氧诱导的ＨＲＭＥＣｓ增殖以及ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１的表达,并可促进细胞凋亡（Ｐ＜０．０５）。结论　ＴＫＬＫ通过与ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１相互作用而影响ＤＲ的进展。     

玻璃体内注射雷珠单抗治疗病理性近视黄斑部脉络膜新生血管

目的　评估玻璃体内注射雷珠单抗治疗病理性近视黄斑部脉络膜新生血管的临床疗效及安全性。方法　选择我院门诊于２０１２年１１月至２０１５年５月明确诊断为高度近视性黄斑部脉络膜新生血管患者５６例５６眼,视治疗情况给予玻璃体内注射单次或多次雷珠单抗,注射后随访６个月,记录最佳矫正视力（ｂｅｓｔｃｏｒｒｅｃｔｅｄｖｉｓｕａｌａｃｕｉ-ｔｙ,ＢＣＶＡ）及光学相干断层扫描和眼底荧光血管造影结果。结果　治疗过程中,行一次注射者１７例１７眼,两次者３２例３２眼,三次者７例７眼,平均注射１．８２次。治疗后ＢＣＶＡ为０．３１±０．３６,较治疗前的０．０８±０．２６明显提高（Ｐ＜０．０５）,视力提高及稳定者占８７．３％。年龄≥５０岁者１６例１６眼,治疗前ＢＣＶＡ为０．０４±０．３８,治疗后为０．２５±０．３１（ｔ＝２．２３８,Ｐ＜０．０５）;年龄＜５０岁者４０例４０眼,治疗前ＢＣＶＡ为０．１８±０．３２,治疗后为０．５４±０．３３（ｔ＝３．３４１,Ｐ＜０．０５）;脉络膜新生血管位于中心凹下者１９例１９眼,治疗前ＢＣＶＡ为０．０５±０．２６,治疗后为０．２９±０．３７（ｔ＝２．３１９,Ｐ＜０．０５）,位于中心凹旁者３７例３７眼,治疗前ＢＣＶＡ为０．２１±０．２７,治疗后为０．５６±０．３１（ｔ＝２．９８１,Ｐ＜０．０５）。光学相干断层扫描示黄斑部视网膜厚度治疗前为（３６５．１３±９８．７７）μｍ,治疗后为（２５４．２４±５４．８６）μｍ（ｔ＝３．１６４,Ｐ＜０．０５）。ＦＦＡ检查黄斑部ＣＮＶ荧光渗漏消失者４９例４９眼;黄斑部脉络膜新生血管渗漏持续存在,但较治疗前渗漏面积明显减弱者７例７眼。结论　玻璃体内注射雷珠单抗治疗病理性近视黄斑部脉络膜新生血管安全、有效。     

玻璃体内注射Lucentis治疗中心性渗出性脉络膜视网膜病变的临床疗效

目的　评价玻璃体内注射Ｌｕｃｅｎｔｉｓ治疗中心性渗出性脉络膜视网膜病变（ｃｅｎｔｒａｌｅｘｕｄａｔｉｖｅｃｈｏｒｉｏｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＣＥＣ）的临床疗效。方法　ＣＥＣ所致黄斑部脉络膜新生血管（ｃｈｏｒｏｉｄａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ,ＣＮＶ）患眼３２例,对比分析单次玻璃体内注射Ｌｕ-ｃｅｎｔｉｓ治疗前后最佳矫正视力（ｂｅｓｔｃｏｒｒｅｃｔｅｄｖｉｓｕａｌａｃｕｉｔｙ,ＢＣＶＡ）、光学相干断层扫描（ｏｐｔｉｃａｌｃｏｈｅｒｅｎｃｅｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ,ＯＣＴ）及荧光素钠血管造影（ｆｕｎｄｕｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ,ＦＦＡ）的变化。结果　玻璃体内注射Ｌｕｃｅｎｔｉｓ治疗前与治疗后１周、１个月和３个月ＢＣＶＡ分别为０．７２±０．０７、０．６８±０．１６、０．３９±０．１０、０．１５±０．０８;黄斑中心厚度（ｆｏｖｅａｃｅｎｔｒａｌｉｓｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＣＭＴ）分别为（４３９２０±１０１．１６）μｍ、（３２１．１０±９８．２０）μｍ、（２５７．３５±６９．８５）μｍ、（２６７．５２±６５．３７）μｍ。玻璃体内注射Ｌｕｃｅｎｔｉｓ治疗后１周、１个月和３个月,ＢＣＶＡ显著提高,ＣＭＴ显著降低,与治疗前相比差异均有显著统计学意义（均为Ｐ＞０．０１）;治疗后１个月、３个月分别与治疗后１周相比,ＢＣＶＡ显著提高,ＣＭＴ显著降低,差异均有显著统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）;治疗后１个月和３个月间相比,ＢＣＶＡ、ＣＭＴ变化差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。ＦＦＡ检查显示:治疗后１周:ＣＮＶ病灶渗漏停止或渗漏减少者２１眼（６５．６３％）,持续渗漏１１眼（３４．３８％）;治疗后１个月:ＣＮＶ病灶渗漏停止或渗漏减少者２８眼（８７５０％）,持续渗漏４眼（１２５０％）;治疗后３个月:ＣＮＶ病灶渗漏停止或渗漏减少者２７眼（８４．３８％）,持续渗漏５眼（１５．６３％）,１眼（３．１３％）出现渗漏复发。结论　玻璃体内注射Ｌｕｃｅｎｔｉｓ治疗可以在短期内部分或完全封闭ＣＥＣ所致的ＣＮＶ,减轻黄斑水肿、提高ＢＣＶＡ,为ＣＥＣ的临床治疗提供了新的思路,但其长期效果有待进一步观察。     

紫外光A/核黄素角膜交联后兔角膜基质内基质金属蛋白酶-1含量的变化

目的　检测紫外光Ａ／核黄素角膜交联（ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔＡ／ｒｉｂｏｆｌａｖｉｎｃｏｒｎｅａｌｃｒｏｓｓ-ｌｉｎｋ-ｉｎｇ,ＵＶＡＲＣＸＬ）后兔角膜基质内基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ,ＭＭＰ）-１的短期含量变化。方法　１５只新西兰白兔,随机分为３组,每组５只,Ａ组为空白对照组,Ｂ组为角膜交联后３ｄ,Ｃ组为角膜交联后７ｄ。Ｂ、Ｃ两组行ＵＶＡＲＣＸＬ。各组取角膜后去除角膜上皮和内皮细胞,应用ＥＬＩＳＡ法检测角膜基质内ＭＭＰ-１的含量。结果　Ａ组角膜基质内ＭＭＰ-１／总蛋白含量为（０．１４０±０．０３６）×１０－６,Ｂ组为（０．２４２±０．０５９）×１０－６,Ｃ组为（０．３７２±０．０６１）×１０－６,３组之间差异有统计学意义（Ｆ＝２４．０５１,Ｐ＝０．０００）。ＵＶＡＲＣＸＬ后３ｄ,兔角膜基质内ＭＭＰ-１含量显著升高,与Ａ组相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）,术后７ｄ其含量进一步升高,与Ｂ组相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。结论　ＵＶＡＲＣＸＬ后７ｄ内,兔角膜基质内ＭＭＰ-１含量持续增加,推测ＭＭＰ-１可能对ＵＶＡＲＣＸＬ后的角膜基质重塑起一定作用。     

儿童屈光参差性和斜视性弱视多导图形视觉诱发电位的研究

目的通过用多导图形视觉诱发电位（Ｐ－ＶＥＰ）进一步研究儿童弱视的发病机制及两种弱视之间的相互关系。方法采用１６导视觉诱发电位仪，分别检查了２５例屈光参差性弱视和３３例内斜视性弱视，将检查的Ｐ－ＶＥＰ三个主要参数分别与正常对照组和弱视眼对侧眼的相应参数进行了比较。结果两种类型弱视的三个主要参数的平均结果都发生了明显的改变，内斜视性弱视的对侧眼与正常对照组相比Ｎ１、Ｐ１波的潜伏期也明显延长，振幅下降，说明内斜视对侧眼并非正常；结果还提示屈光参差性弱视其振幅比值较其对侧眼小于０．８、潜伏期大于５ｍｓ，可作为诊断的参考依据。结论临床上根据Ｐ－ＶＥＰ的检查结果来判断弱视是可靠的     

高度近视合并白内障行超声乳化吸出并人工晶状体植入手术前后P-VEP与黄斑OCT的变化

目的　观察高度近视合并白内障患者术前及术后图形视觉诱发电位（ｐａｔｔｅｒｎｖｉｓｕａｌｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌ,Ｐ-ＶＥＰ）、黄斑光学相干断层成像（ｏｐｔｉｃａｌｃｏｈｅｒｅｎｃｅｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ,ＯＣＴ）的改变。方法　回顾性分析２３例（３４眼）年龄４０～７１岁行白内障超声乳化吸出联合人工晶状体植入术治疗的高度近视合并白内障患者的临床资料。于术前１ｄ及术后１个月行Ｐ-ＶＥＰ、黄斑部ＯＣＴ检查,观察低空间频率及高空间频率下Ｐ１００波的振幅、潜时和黄斑中心凹视网膜厚度。结果　术后１个月低空间频率Ｐ１００波振幅为（８．９４±４．６５）μＶ,潜时为（１０８．２５±１６．６５）ｍｓ,与术前１ｄ的振幅（５．６６±４．０２）μＶ和潜时（１１７．８５±１５．８５）ｍｓ相比差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。术后１个月高空间频率Ｐ１００波振幅为（７．９９±２．８２）μＶ,潜时为（１０６．０５±１６．０５）ｍｓ,与术前１ｄ的振幅（６．４１±４．０６）μＶ和潜时（１１０．４５±１９．９５）ｍｓ相比差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。术后１个月ＯＣＴ检查黄斑中心凹视网膜厚度为（１８８．００±７７．００）μｍ,与术前１ｄ的（１８３．００±８２．００）μｍ相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论　对于高度近视合并白内障患者,Ｐ-ＶＥＰ的Ｐ１００波在白内障超声乳化吸出联合人工晶状体植入术后与术前比较,低空间频率及高空间频率的振幅升高、潜时缩短;术后黄斑中心凹视网膜厚度较术前增加。超声乳化吸出联合人工晶状体植入术治疗高度近视合并白内障是一种安全、有效的手术方法。     

原发性开角型青光眼的客观色觉测定

评估等亮度颜色图像翻转视诱发电位作为一种客观色觉检查在原发性开角型青光眼所致的后天性色觉障碍的临床意义。方法对３１眼原发性开角型青光眼和３３眼正常对照测定ＣＰＲ－ＶＥＰ，包括白／黑、红／黑、绿／黑、蓝／黑、红／绿和蓝／黄７种颜色棋盘格。所有量者同时作ＦＭ１００－ｈｕｅ试验。     

获得性免疫缺陷综合征并发巨细胞病毒视网膜炎患者抗病毒治疗前后视功能的变化

目的　探讨获得性免疫缺陷综合征并发巨细胞病毒（ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＣＭＶ）视网膜炎的患者在抗病毒治疗前后视功能的变化。方法　对１１例感染人类免疫缺陷病毒并且第１次发生ＣＭＶ视网膜病变的患者,给予膦甲酸钠和更昔洛韦治疗。治疗前、治疗后１个月、３个月,通过多焦视网膜电图对每例患者的视功能进行评估,以未感染人类免疫缺陷病毒的正常人眼作为正常对照组,观察患眼视功能的改善情况。结果　ＣＭＶ视网膜炎患者ｍｆＥＲＧ一阶反应中心区域Ｎ１-Ｐ１的振幅密度,治疗前为（３６．９８±１７．９３）ｎＶ?ｄｅｇ－２,治疗１个月后为（４１．３３±１６．７８）ｎＶ?ｄｅｇ－２,治疗３个月后为（３６．１２±１５．４６）ｎＶ?ｄｅｇ－２,正常对照组为（７６．９９±１１．２７）ｎＶ?ｄｅｇ－２。患眼发病时与正常对照组相比较,１～４环区域ｍｆＥＲＧ的一阶反应Ｎ１-Ｐ１的振幅密度均显著降低,差异有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。患眼在治疗后１个月和３个月,１～６环区域ｍｆＥＲＧ的一阶反应Ｎ１波和Ｐ１波的潜时,以及Ｎ１-Ｐ１的振幅密度与治疗前相比均没有明显改变,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。结论　ＣＭＶ视网膜炎的患者在经过积极地抗病毒治疗后,视力虽然能够得到不同程度上的恢复,但视网膜外层仍然受到不可逆的损伤,视网膜的功能显著降低。     

视觉诱发电位在视神经挫伤诊断治疗中的应用

目的 探讨视神经挫伤后的视觉诱发电位（ＶＥＰ）的异常率、挫伤程度及预后估计。方法记录单眼挫伤患者的伤眼、对侧眼及治疗后伤眼的视觉诱发电位（ＶＥＰ）。结果 （１） 挫伤眼各视力组ＶＥＰ异常率明显高于对照组,且随挫伤眼视力的下降而增高。（２）挫伤眼矫正视力〈０．１者ＶＥＰ异常更明显,且预后差。结论 ＶＥＰ是视神经 失伤早期诊断、判断预后的客观检查方法。     

缺氧对脑脊液-视神经屏障中脑膜上皮细胞内质网和线粒体膜电位的影响

目的　探讨脑膜上皮细胞（ｍｅｎｉｎｇｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＭＥＣｓ）参与视神经疾病的发病机理,研究缺氧对ＭＥＣｓ功能变化的影响。方法　将培养的ＭＥＣｓ分别在体积分数２１％Ｏ２（对照组）和体积分数１％ Ｏ２（缺氧组）环境下孵育１ｄ和２ｄ,采用酶联免疫吸附实验测定和比较ＭＥＣｓ的总抗氧化能力（ｔｏｔａｌａｎｔｉ-ｏｘｉｄａｔｉｖｅｃａｐａｃｉｔｙ,Ｔ-ＡＯＣ）;采用ＭｉｔｏＴｒａｃｋｅｒＲｅｄ检测和比较ＭＥＣｓ在正常氧和缺氧环境下作用２ｄ的线粒体膜电位的变化;通过测定钙联蛋白的荧光染色,以评价ＭＥＣｓ暴露于氧化应激环境后对内质网功能的影响。结果　与对照组相比,缺氧组的氧化应激能力降低,结果显示Ｔ-ＡＯＣ下降。对照组和缺氧组细胞分别培养１ｄ后,细胞中Ｔ-ＡＯＣ分别为（０．０１２４＋０．００１１）Ｕ?Ｌ－１和（０．０１１９＋０．００９０）Ｕ?Ｌ－１,差异无统计学意义（ｔ＝０．９１５、Ｐ＝０３８２）。分别培养２ｄ后,缺氧组细胞中Ｔ-ＡＯＣ（０．０１０７＋０．００８３）Ｕ?Ｌ－１低于对照组（０．０１２９＋０．００８７）Ｕ?Ｌ－１,差异有统计学意义（ｔ＝４．６１６、Ｐ＝０．００１）。不同氧环境作用于细胞２ｄ后,采用共焦显微镜荧光探针方法分析作用于对照组和缺氧组的ＭＥＣｓ线粒体膜电位的变化,结果发现缺氧组细胞荧光强度与对照组相比明显减低;同时通过荧光显微镜观察发现,缺氧组ＭＥＣｓ钙联蛋白绿色荧光强度较对照组明显增强。结论　缺氧通过影响ＭＥＣｓ内质网及线粒体功能而影响其氧化应激能力。     

图形视觉诱发电位鉴别伪盲的临床应用研究

目的　用图形视觉诱发电位（ｐａｔｔｅｒｎｖｉｓｕａｌｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌ,Ｐ-ＶＥＰ）来评价客观视力以及用来鉴别伪盲的临床应用价值。方法　取志愿受检者１５８例（１５８眼）患黄斑病变或视神经病变眼,其中６５眼为黄斑病变组（Ａ组）,９３眼为视神经病变组（Ｂ组）,通过多元回归分析Ｐ-ＶＥＰ波幅和潜伏期与最佳矫正视力的关系。由此得出最佳关系方程,进而得出１５８眼Ｐ-ＶＥＰ推算视力（ＰＶＥＰ-ＶＡ）,以及５３只伪盲眼（包括２１眼黄斑病变及３２眼视神经病变）的ＰＶＥＰ-ＶＡ,最后用受试者工作特征曲线（ＲＯＣ曲线）得出可接受ＰＶＥＰ-ＶＡ及主观视力差值范围,从而鉴别伪盲。结果　在１５′视角黑白棋盘格刺激下引出的Ｐ-ＶＥＰ波形,该波形的Ｐ１００波幅（记录为Ａｍｐ１５′）与主观视力的相关性最好,Ａｍｐ１５′与主观视力显著相关（Ａ组:Ｐ＝０．０１６;Ｂ组:Ｐ＜０．０００１）。Ａｍｐ１５′的对数［ｌｏｇ（Ａｍｐ１５′）］与主观视力（ｌｏｇＭＡＲ）的回归方程为:Ａ组:ｙ＝１．８６７－１．１００ｘ,Ｐ＜０．０００１,Ｂ组:ｙ＝１．５０２－０．７９９ｘ,Ｐ＜０．０００１［ｘ为ｌｏｇ（Ａｍｐ１５′）,ｙ为ｌｏｇＭＡＲ］。利用回归曲线和ＲＯＣ曲线可以得到Ａ组辨别伪盲的截断值为０．３９７２时,其诊断敏感性为７３．３％,特异性为６８．０％;Ｂ组辨别伪盲的截断值为０．４１５０,其诊断敏感性为９０．５％,特异性为６７．５％。结论　Ｐ-ＶＥＰ的Ａｍｐ１５′用来判断客观视力最有效,对于鉴别伪盲也很有意义。