氟对软骨细胞与成骨细胞凋亡及H2O2、SOD、NO的影响

目的：研究氟对体外培养的软骨细胞、成骨细胞凋亡及H2O2、SOD、NO的影响。方法：采用流式细胞仪对细胞周期进行分析及测定凋亡细胞的百分比；化学方法检测细胞培养液中的H2O2、SOD、NO；透射电镜观察软骨细胞超微结构。结果：软骨细胞：(1)不同剂量的氟均诱导细胞凋亡，培养基中的H2O2、NO均水平高于对照组，加SOD可使H2O2、细胞凋亡百分率明显下降，NaF2O、160μmol／L可使G2／M期细胞升高。(2)NaF320μmol／L．可使细胞超微结构损伤，加SOD可拮抗氟的损伤作用。成骨细胞：与对照组相比(1)加入不同剂量NaF，培养基中的SOD活性降低。但仅在加入160、240μmol/L，培养基中H2O2升高，NO亦同时升高。(2)NaF400μmol／L可诱导成骨细胞凋亡，同时使G0／G1期细胞增多，240、400μmol／L可使G2/M期细胞减少。结论:(1)低、中剂量的氟可促进软骨细胞、成骨细胞凋亡，损害细胞超微结构。与此同时培养物中H2O2升高，SOD活性降低，表明细胞凋亡及损伤与氧化应激有关。此外，NO也升高，可能也起一定作用。氟对细胞周期的影响：对软骨细胞主要作用于G2／M期，对成骨细胞可同时作用于G0／G1及G2／M期；(2)一定量的SOD可明显拮抗氟促进的H2O2释放及细胞凋亡，对细胞有保护作用。(3)一定剂量的氟促使软骨细胞、成骨细胞凋亡，同时也促进成骨细胞增殖。可能细胞凋亡产物刺激细胞增殖过程，是氟骨症增殖病变发生机制之一，NO可能也在其中起一定作用。     

氟剂对成骨细胞成骨功能表达的影响

目的　从不同剂量氟化钠 (NaF)对大鼠成骨细胞 (OB)功能表达的影响 ,研究氟剂促进成骨作用的机制及剂量效应关系。方法　经酶消化法从新生 2 4hSpregne Dawley (SD)种乳鼠头盖骨分离得到的成骨细胞。在 10 -7～ 5× 10 -4mol/LNaF中培养。用生化法测定细胞碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,用放射免疫法测定培养液中骨钙素 (OC)含量。结果　NaF对细胞ALP活性的影响呈双向 ,即低浓度NaF(10 -7～ 10 -5mol/L)增加ALP活性 ,高浓度NaF (10 -4～ 5× 10 -4mol/L)则抑制ALP活性 ;对骨钙素产生和分泌的影响则呈单向 ,即各浓度NaF均刺激细胞骨钙素分泌 ,并与氟剂剂量呈正相关 ,其中 5× 10 -4mol/L组骨钙素水平最高 ,与对照组相比增加 6 7 14 % (P <0 0 5 )。结论　适量氟剂能增加成骨细胞ALP的活性及骨钙素的产生 ,促进成骨细胞的骨形成功能 ,但有效剂量范围狭窄     

氟化物对成骨细胞增殖和分化的影响

目的研究不同浓度氟化物对体外培养大鼠成骨细胞增殖和分化的影响.方法经酶消化法从24h新生Wister乳鼠颅盖骨分离得到的成骨细胞经不同浓度的氟化钠(NaF)作用后,采用MTT法检测细胞增殖;PNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;放射免疫法测定培养液中骨钙素(BGP)含量.结果低浓度NaF(10-7mol/L～10-5mol/L)可刺激细胞增殖;高浓度NaF(10-4mol/L～10-3mol/L)则抑制细胞增殖.NaF对成骨细胞分化的影响则呈多样性.ALP的活性改变基本与细胞增殖率的变化相同,即各浓度NaF均促进细胞骨钙素分泌,与对照组相比有统计学意义.结论氟化物对成骨细胞的增殖及早期分化呈双向调节,即小剂量促进,大剂量抑制.但对其晚期分化呈一致性,即促进作用.     

金雀异黄酮对成骨细胞增殖的影响及其可能的分子生物学机制

目的观察金雀异黄酮（GS）对绝经期骨质疏松患者骨膜成骨细胞增殖的影响及其分子生物学机制。方法用噻唑蓝比色法和流式细胞术分别检测GS对成骨细胞增殖活力和细胞周期分布的影响；Western—blot技术分析GS对细胞周期蛋白D和E表达的影响。结果GS可显著提高成骨细胞增殖活力，与溶剂对照组比较，10^-8mol／L、10^-7mol／L和10^-6mol／L GS时，细胞增殖率分别为137％、155％和161％；提高S期和M／G2期细胞分布比例，并伴有G0／G1期细胞比例降低；它莫西芬可抑制10^-7mol／L和10^-6mol／L GS促成骨细胞增殖效应。Western—blot的检测结果显示，10^-8mol／L和10^-7mol／L GS对成骨细胞处理24h，提高细胞周期蛋白D和E蛋白质的表达（P〈0．05）。结论由于雌激素受体拮抗剂它莫西芬可抑制GS对成骨细胞的促增殖作用，表明金雀异黄酮可通过激活雌激素受体途径，表现出雌激素效应，并促进骨组织代谢中的骨形成作用。     

VC拮抗氟对大鼠成骨细胞增殖分化影响的实验研究

目的研究不同剂量的氟对体外培养大鼠乳鼠颅骨成骨细胞增殖分化的影响及维生素C的拮抗作用.方法酶消化法分离成骨细胞;通过细胞对染料AlamarBlue摄取检测细胞增殖;比色方法测定碱性磷酸酶活性.结果氟化钠浓度100μmol/L～1 mmol/L刺激细胞增殖,2 mmol/L以上抑制细胞增殖;10～50μmol/L增强细胞ALP活力,100 μmol/L以上降低细胞ALP活力.加入VC,2mmol/L氟化钠仍能使细胞增殖分化.结论氟对成骨细胞的增殖与分化具有双向作用;VC能拮抗较高浓度氟化钠对成骨细胞增殖分化的抑制.     

辛伐他汀对成骨细胞OPGmRNA RANKLmRNA水平的影响

目的评价辛伐他汀对前成骨细胞MC3T3-E1骨保护素（OPG）mRNA RANKL mRNA水平的影响，探讨辛伐他汀通过成骨细胞进而影响破骨细胞分化与成熟的可能机制。方法不同浓度的辛伐他汀（10^-9mol／L、10^-8mol／L、10^-7mol／L，10^-6mol／L）干预前成骨细胞MC3T3-E124h后用rt-PCR的方法检测OPGmRNA RANKL mRNA的表达水平。结果半定量RT-PCR显示在辛伐他汀（10^-9mol／L、10^-8mol／L、10^-7mol／L，10^-6mol／L）干预24h时，各组均有OPG mRNA的转录，随着药物浓度的增加转录水平逐渐增加，而RANKL mRNA水平随着药物浓度的增加转录水平逐渐减少。结论辛伐他汀促进了MC3T3-E1OPG的表达，同时抑制细胞RANKL的表达。     

不同剂量氟对大鼠成骨细胞激活与BMP-4、BMP-2和Smad-4表达的影响

目的探讨过量氟对大鼠成骨细胞系BMP-2、BMP-4及其信号转导物Smad-4表达水平的影响及其与氟骨症发病机制的关系。方法利用饮水加入氟化钠(NaF)进行大鼠染氟实验,采用原位杂交技术、 Western blot技术、免疫组织化学方法,对氟中毒大鼠骨组织成骨细胞系进行BMP-4、Smad-4的mRNA水平和 BMP-2、BMP-4蛋白质水平的定量分析。结果 NaF可刺激慢性氟中毒大鼠椎骨各包被成骨细胞增殖,并诱导 BMP-2、BMP-4和Smad-4的表达。在低钙偏食组慢性氟中毒大鼠BMP-4、Smad-4 mRNA和BMP-2、BMP-4 蛋白质水平稍增高但与对照组相比差异无统计学意义(P>0．05);在高钙和低钙加氟组Smad-4 mRNA的表达均增高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0．001);在低钙加氟组Smad-4 mRNA水平与BMP-4 mRNA水平和BMP-2、BMP-4蛋白质表达水平具有一定相关性(r=0．53)。结论过量氟可刺激大鼠成骨细胞系激活、增殖能力增强,但在增殖能力增强的成骨细胞中BMP-4 mRNA和BMP-2、BMP-4蛋白质水平表达无明显增高,可能与氟骨症的骨化不良有关;NaF刺激Smad-4 mRNA过表达可能与氟骨症骨相损害的信号转导途径激活有关。     

17β-雌二醇对新生大鼠成骨细胞护骨素和破骨细胞分化因子表达的调节

体外培养成骨细胞，用不同浓度（10^-11～10^-6mol／L）17β-雌二醇干预，RT—PCR测定护骨素、破骨细胞分化因子（ODF）mRNA的表达水平。雌二醇作用后，成骨细胞护骨素表达上调（P〈0．05），以10^-8mol／L最显著；ODF表达无明显变化。雌激素治疗骨质疏松症的作用可能与其在生理浓度时促进成骨细胞护骨素表达有关。     

硒锌制剂拮抗慢性氟中毒的实验研究

目的：探讨硒锌制剂对慢性氟中毒的影响及其机理。方法：Wistar大鼠在饮含50mg/L高氟水的同时通过灌胃方式给予不同剂量的硒锌制剂,2个月后,测量大鼠尿液氟浓度和r-GT活性,血液GSH－Px活性及肾组织中LPO水平,GSH含量和SOD活性,结果：发现硒锌制剂通过促进尿氟排泄,增强全血GSH－PX的肾SOD活性,增加肾GSH含量而抑制氟中毒引起的脂质过氧化作用,从面降低尿r-GT活性和肾LPO含量,结论：提示一定剂量的硒锌制剂对慢性氟中 明显的拮抗作用,其机理可能与通过促进尿氟排泄和抗脂质过氧化作用有关。     

白细胞介素-4对巨噬细胞缺氧诱导促有丝分裂因子分泌的影响

目的：探讨白细胞介素-4（IL-4）对巨噬细胞缺氧诱导促有丝分裂因子（HIMF）分泌及HIMF对血管平滑肌细胞增殖的影响。方法：用不同剂量的重组IL-4刺激培养的巨噬细胞，以逆转录聚合酶链反应（RTPCR）检测巨噬细胞HIMFmRNA表达，荧光免疫组化激光共聚焦显微镜检测巨噬细胞HIMF蛋白表达；用终浓度分别为3×10^-4mmol／L，9×10^-4mmol／L，2．7×10^-5 mmol／L的重组HIMF刺激培养的平滑肌细胞，以^3 H-胸腺嘧啶核苷（^3 H—TdR）掺入法测定HIMF对平滑肌细胞增殖的影响。结果：Th2型细胞因子IL-4刺激巨噬细胞，HIMFmRNA及其蛋白明显表达（P〈0．01）；浓度为3×10^-6 mmol／L，9×10^-4～mmol／L，2．7×10^-5mmol／L的重组HIMF明显促进平滑肌细胞增殖（与对照组比较P〈0．01），且随着HIMF剂量的增加，促增殖作用增强。结论：Th2型细胞因子IL-4能刺激巨噬细胞表达HIMF mRNA及其蛋白，HIMF能促进体外培养的血管平滑肌细胞增殖。     

氟对小鼠成骨细胞增殖与分化及骨保护蛋白和核因子κβ受体活化因子配体mRNA 表达的影响

目的 观察氟对体外培养的小鼠成骨细胞增殖、分化、骨保护蛋白(OPG)mRNA及核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达的影响.方法 取出生1～2 d昆明小鼠颅盖骨,分离成骨细胞后进行传代培养.按培养液中加入不同浓度氟化钠(NaF)将成骨细胞分为0(对照)、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3 mol/L组,分别在培养72 h或120 h后检测氟对成骨细胞增殖、分化(碱性磷酸酶,ALP)的影响;提取成骨细胞总mRNA,采用RT-PCR方法分析成骨细胞OPG mRNA、RANKL mRNA表达,并进行半定量分析.组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 培养72 h后,成骨细胞增殖组间比较差异有统计学意义(F=13.806,P<0.05);与对照组(0.434±0.010)比较,10-7～10-4mol/L组成骨细胞增殖明显增加(0.448±0.010、0.453±0.013、0.454±0.016、0.449±0.018,P均<0.05),10-3 mol/L组成骨细胞增殖降低(0.401±0.009,P<0.05).成骨细胞ALP活性组问比较差异有统计学意义(F=9.021,P<0.05);其中10-7～10-5 mol/L组[(2.447±0.756)×106、(2.603±0.183)×106、(2.687±0.886)×106 U/L]ALP活性明显高于对照组[(1.677±0.682)×106U/L,P<0.05或<0.01];10-4mol/L组[(1.479±0.366)×106 U/L]ALP活性明显低于对照组(P<0.05).OPG mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F=11.299,P<0.05);与对照组(11000±0.000)比较,10-7～10-4 mol/L组表达增强(1.058±0.027、1.053 ±0.026、1.088±0.055、1.069±0.008,P<0.05或<0.01),10-3mol/L组表达降低(0.941±0.029,P<0.05).成骨细胞RANKL mRNA表达组间比较差异无统计学意义(F=1.311,P>0.05).RANKL mRNA/OPG mRNA比值,在104～10-5mol/L组逐渐降低,10-4、10-3mol/L组升高,但组间比较差异无统计学意义(F=1.376,P>0.05).结论 氟对小鼠成骨细胞增殖、分化呈双向调节作用,表现为低剂量刺激而高剂量抑制.低剂量染氟可能通过增加成骨细胞OPG的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,抑制骨吸收;而高剂量可能通过降低OPG的表达来促进破骨细胞的分化、成熟,促进骨吸收.

Abstract：

Objective To investigate the effect of sodium fluoride(NaF) on proliferation, differentiation and the mRNA expression of osteoprotegerin (OPG) and receptor activator of nuclear factor κβ ligand (RAN KL) of mouse osteoblasts. Methods Osteoblasts were isolated from calvarias of Kunming mice born in 1 - 2 d and cultured. Various concentrations of NaF(0, 10-8, 10-7, 10-6, 10-5, 10-4, 10-3mol/L) were added to the culture medium, the proliferation and activity of alkaline phosphatase(ALP) was determined after 72 h or 120 h. The expression of OPG mRNA and RANKL mRNA was analyzed by semi-quantification RT-PCR. Difference among groups was analyzed by One-Way AN0VA. Difference between two groups was analyzed by LSD-t test. Results There was significant difference in cell proliferation among groups after 72 h(F = 13.806, P < 0.05). Compared with control group(0.434 ± 0.010) , the proliferation was significantly induced in 10-7 - 10-4 mol/L groups treated osteoblasts (0.448 ± 0.010, 0.453 ± 0.013, 0.454 ± 0.016, 0.449 ± 0.018, all P< 0.05), and was significantly suppressed in 10-3 mol/L group(0.401 ± 0.009, P < 0.05). There was statistic difference in the activity of ALP among groups(F = 9.021, P < 0.05). Compared with control group (1.677 ± 0.682), the activity of ALP significantly increased in 10-7 - 10-5 mol/L groups[ (2.447 ± 0.756) × 106, (2603 ± 0.183) × 106, (2.687 ± 0.886) × 106 U/L, P < 0.05 or P < 0.01 ] and significantly decreased in 10-4 mol/L group[ (1.479 ± 0.366) × 106 U/L, P < 0.05 ]. There was significant difference in the expression of OPG mRNA among groups(F = 11.299, P< 0.05). Compared with control group (1.000 ± 0.000), the expression of OPG mRNA was significantly increased in 10-7 - 10-4 mol/L groups( 1.058 ± 0.027, 1.053 ± 0.026, 1.088 ± 0.055, 1.069 ± 0.008, P < 0.05 or P < 0.01) , while significantly decreased in 10-3 mol/L group (0.941 ± 0.029, P< 0.05). There was no difference in RANKL mRNA expression among groups (F= 1.311, P> 0.05). The ratio of RANKL/OPG decreased with increasing doses of fluoride and increased in 10-4, 10-3 mol/L groups, but there was no difference between groups(F = 1.376, P> 0.05). Conclusions A biphasic pattern of proliferation and differentiation has been induced in mouse osteoblasts, which manifests stimulation effect in low doses and suppression in higher doses. Low doses of sodium fluoride suppress differentiation and maturation of osteoblasts by increasing expression of OPG mRNA, while high doses of sodium fluoride enhance differentiation and maturation of osteoblasts by decreasing expression of OPG mRNA.     

硒和维生素C对氟致大鼠肝细胞DNA损伤的影响

目的研究氟对大鼠肝细胞DNA的损伤作用以及硒和维生素C对氟致大鼠肝细胞DNA损伤的影响。方法氟(F)组、氟 硒(F Se)组、氟 维生素C(F VC)组分别用NaF 150mg／L、NaF 150mg／L Na2SeO2 5mg／L、NaF 150mg／L VC 1000mg／L喂养雄性SD大鼠4周，应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测肝细胞DNA的损伤率。结果F组肝细胞DNA损伤率(44．80％)明显高于对照组(9．40％)；而F Se组(12．60％)和F VC组(14．60％)的DNA损伤率明显低于F组，与对照组差异无显著意义。结论过量氟摄入可导致大鼠肝细胞DNA损伤，而适量的硒和维生素C对氟致DNA损伤有一定的拮抗作用。     

氟对大鼠成骨细胞Runx2表达的影响

目的 研究氟对体外培养大鼠乳鼠成骨细胞中Runx2表达的影响.方法 体外培养Wistar大鼠乳鼠成骨细胞,按染氟剂量分为0(对照组)、1、2.4 mg/L 4个水平,分别在48、72 h后,提取RNA,采用反转录聚合酶链反应(RT-PcR)方法检测Runx2 mRNA表达;采用酶联免疫吸附试验(EUSA)方法检测培养液上清中的Runx2蛋白质.结果 Wistar大鼠乳鼠成骨细胞在体外染氟培养48 h后,1、2、4mg/L染氟水平下Runx2的mRNA表达(0.613±0.055、0.773±0.070、0.775±0.070)与对照组(0.482±0.043)比较.差异均有统计学意义(P<0.05);在染氟培养72 h后,1、2,4 mg/L染氟水平和对照组的Runx2 mRNA表达量分别为0.969±0.048、1.229±0.061、1.255±0.063、0.724±0.036,任意两组问比较,差异均有统计学意义(P<0.05).各染氟组Runx2mRNA表达,72 h组均高于铝hm(P<0.05);染氟剂量和染氟时间有交互作用(F=189.20,P<0.05).在染氟培养48 h后,1、2、4 mg/L染氟水平下的Runx2蛋白质表达(0.141±0.007、0.143±0.008、0.143±0.011)与对照组(0.129±0.012)比较,差异有统计学意义(P<0.05);在染氟培养72 h后,1、2、4 mg/L染氟水平下的Runx2蛋白质表达(0.156±0.014、0.168±0.018、0.162±0.010)与对照组(0.137±0.016)比较.差异有统计学意义(P<0.05);各染氟剂量Rung2蛋白质表达.72 h组均高于48 h组(P<0.05),染氟剂量和染氟时间之间无交互作用(F=2.22,P0.05).结论 氟可促进成骨细胞Runx2的mRNA和蛋白质表达,与染氟的剂量以及作用时间有关.     

氟对大鼠成骨细胞骨保护蛋白表达的影响

目的 观察氟对体外培养大鼠乳鼠成骨细胞骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)mRNA和蛋白表达的影响.方法 体外培养Wistar大鼠乳鼠成骨细胞,按染氟剂量分为0(对照)、1、2、4 mg/L组.分别在染氟48、72 h后提取RNA,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测OPG mRNA表达;采用酶连免疫吸附实验(ELISA)法检测培养液上清中的OPG蛋白表达.结果 大鼠乳鼠成骨细胞在体外染氟培养48、72 h,OPG mRNA表达组间比较差异均有统计学意义(F值分别为333.48、808.34,P<0.05).在染氟48 h,1、2、4 mg/L组OPGmRNA表达(0.810±0.043、0.819±0.031、0.870±0.044)与对照组(0.800±0.040)比较,差异均有统计学意义(P<0.05);在染氟72 h,1、2、4 mg/L组(0.933±0.047、1.031±0.051、1.240±0.062)高于对照组(0.805±0.020),差异均有统计学意义(P<0.05);OPGmRNA表达,72 h均高于48 h,染氟剂量和染氟时间有交互作用(F=204.16,P<0.05).在染氟培养48、72 h,OPG蛋白表达组间比较差异均有统计学意义(F值分别为7.49、41.31,P<0.05);组间两两比较,仅4 mg/L组(0.228±0.014、0.277±0.048)与对照组(0.205±0.012、0.229±0.010)比较,差异有统计学意义(P<0.05);OPG蛋白表达虽然72 h均高于48 h,但染氟剂量和染氟时间无交互作用(F=1.21,P>0.05).结论 氟可促进成骨细胞OPG mRNA和蛋白表达,这种作用与染氟的剂量以及作用时间有关.     

卡托普利对体外新生大鼠颅骨成骨细胞的影响

目的 观察卡托普利对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化的影响。方法 应用酶序列消化分离培养法培养新生大鼠颅骨成骨细胞。在新生大鼠颅骨成骨细胞体系中加入不同浓度的卡托普利,应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、碱性磷酸酶染色法、紫外分光光度法、原子吸收光谱法鉴定成骨细胞,观察卡托普利对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶含量、钙和羟脯氨酸含量的影响。结果卡托普利能促进成骨细胞增殖,实验中最佳作用浓度是10^-11 mol/L,最佳作用时间是24h。卡托普利促进成骨细胞表达碱性磷酸酶,实验是最佳作用浓度是10^-11 mol/L,最佳作用时间是3d。卡托普利降低成骨细胞上清液中钙含量,对细胞内差劲脯氨酸的含量没有影响。结论 卡托普利有促进成骨细胞增殖和促进碱性磷酸酶表达的作用。     

吡格列酮对成骨细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 研究吡格列酮对成骨细胞增殖及凋亡的影响,并进一步了解其凋亡发生机制.方法 以MC3T3-E1成骨细胞株为实验对象,分别用0、5、10、20、30、40 μmol/L吡格列酮干预,观察细胞活性、细胞周期及凋亡率的变化,同时检测细胞Bcl-2,Bax蛋白表达.结果 随着浓度增加,成骨细胞的活性逐渐降低;与对照组相比,G0/G1,G2/M期细胞增多,S期细胞明显减少;凋亡率在5、10 μmol/L时低于对照组,30、40 μmol/L较对照组显著增高;Bax表达在10 μmol/L时明显减弱,20 μmol/L时回复到正常,30、40μmol/L较对照组显著增强;Bcl-2表达在浓度≤20 μmol/L时显著增强;对于Bax/Bcl-2相对表达强度与细胞凋亡率做相关性分析,两者呈显著性正相关(n=15,r=0.796,P＜0.01).结论 吡格列酮在低浓度抑制成骨细胞凋亡,对细胞起保护作用,较高浓度则促进细胞凋亡,Bax/Bcl-2参与其凋亡机制,并可能起关键调控作用.吡格列酮抑制成骨细胞DNA合成,抑制细胞增殖,导致细胞活性下降.

Abstract：

Objective To investigate the effects of pioglitazone on osteoblast proliferation and apoptosis.Methods MC3T3-E1 mouse osteoblastic cells were treated with 0, 5, 10, 20, 30, and 40 μmol/L pioglitazone for 24 h. Cell viability was measured by MTT, cell cycle and apoptosis were inspected with flow cytometry, the expressions of Bcl-2 and Bax proteins were examined via immuno-chemical staining. Results Survival of osteoblasts decreased in a dose-dependent manner. Compared with the control group, the cells in the G0/G1 and G2/M stages increased, while the cells in S stage decreased significantly. The percentage of apoptosis at 5 and 10 μmol/L were lower than that of the control group(P ＜ 0.05), While it was increased significantly at 30 and 40 μmol/L(P ＜0.01). Bax expression was attenuated at 10 μmol/L(P＜0. 01), returned to normal by 20 μmol/L, and was increased by 30 and 40 μmol/L(P ＜ 0. 01). Bcl-2 expression was enhanced at the dose ≤ 20 μmol/L(P ＜0.01). Positive correlation was found between the death rate and the expression intensity of Bax/Bcl-2(n = 15, r=0.796, P＜0.01). Conclusions Pioglitazone inhibits apoptosis of osteoblasts at low concentrations and protects the cells, but promotes their apoptosis at higher concentration, Bax/Bcl-2 may play an important role in mediating the piglitazone-induced apoptosis of osteoblasts. It inhibits DNA synthesis and cell proliferation.     

硒对氟致大鼠雄性生殖损害的拮抗研究

研究了饮水中亚硒酸钠的浓度分别为０．５、２．０、４．０ｍｇ／Ｌ时对氟致大鼠雄性生殖系统损害的影响。结果表明，适量亚硒酸钠对饮用１５０ｍｇ／Ｌ氟化钠所致雄性大鼠附睾精子总数减少，活动率降低，血清和睾丸组织中ＬＰＯ含量升高，睾丸乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及其同工酶（ＬＤＨｘ）活性降低，附睾ＡＴＰ酶活性抑制等损害作用具有明显的拮抗作用，以２．０ｍｇ／Ｌ亚硒酸钠的拮抗作用最佳。较低浓度的（０．５ｍｇ／Ｌ）亚硒酸     

锌对砷中毒小鼠肝脏Fas和FasL表达影响的实验研究

目的 探讨砷对小鼠肝脏Fas、FasL表达的影响及锌的拈抗作用.方法 选用健康昆明种小鼠60只,按体质量分成5组:阴性对照组(不给砷也不给锌),单纯给砷组(55 mg/L NaAsO2溶液),砷+低锌组、砷+中锌组、砷+高锌组均给55 mg/L NaAsO2溶液,并分别给20、40、80 mg/L ZnSO4溶液.经口连续灌胃(按体质量灌胃量为0.02 ml/g.1次/d)6周,待实验结束后处死小鼠,采用免疫组化法测定小鼠肝脏巾凋亡因子Fas、FasL表达.结果 干预组随着给锌量的增加,肝脏Fas、FasL的表达率逐渐降低.低、中锌+砷组的Fas的表达率[83.33%(10/12)、50%(6/12)]、FasL表达率[66.67%(8/12)、41.67%(5/12)]与阴性对照组Fas[8.33%(1/12)]、FasL[0.00%(0/12)]表达率比较,差异有统计学意义(P均<0.05);中、高锌+砷组的Fas的表达率[50%(6/12)、25%(3/12)]与阳性对照组[8.33%(1/12)]比较,差异有统计学意义(P均<0.01),中、高锌+砷组的FasL的表达率[41.67%(5/12)、16.67%(2/12)]与阳性对照组[91.67%(11/12)]比较,差异有统计学意义(P均<0.05).结论 砷可使小鼠肝脏Fas、FasL的表达率增高,促进肝脏的凋亡,锌可拮抗砷对细胞凋亡的作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of arsenic on liver Fas/FasL expression in mice and to observe the antagonize effect of zinc. Methods Sixty health Kunming mice were divided into five groups according to their body mass: negative control group(no arsenic and no zinc), arsenic group(55 mg/L NaAsO2 solution), low dose zinc intervention group(55 mg/L NaAsO2 solution and 20 mg/L ZnSO4 solution), middle dose zinc intervention group (55 mg/L NaAsO2 solution and 40 mg/L ZnSO4 solution), and high dose zinc intervention group (55 mg/LNaAsO2 solution and 80 mg/L ZnSO4 solution). Everyday the solution was given by oral gavage at a dose of 0.02 ml/g body weight for six weeks. The expression of Fas/FasL in mice liver was examined by immunohistochemistry.Results With the amount of zinc increasing, the expression of both Fas and FasL in mice liver decreased gradually. The expression rates of Fas[83.33%(10/12), 50%(6/12)] and FasL[66.67%(8/12), 41.67%(5/12)]in low dose zinc intervention group and middle dose zinc intervention group, respectively, were different from the expression rate of Fas[8.33%(1/12)] and FasL[0.00%(0/12)] in the negative control group(all P < 0.05). The Fas expression rate of middle dose zinc intervention group[50%(6/12)] and the high dose zinc intervention group [25%(3/12)] was compared with the arsenic group[8.33%(1/12)], and the difference was statistically significant (all P < 0.01 ). The FasL expression rate of the middle dose zinc intervention group [41.67% (5/12 )] and the high dose zinc intervention group[16.67%(2/12)] was compared with positive control group[91.67%(11/12)], and the difference was statistically significant (all P < 0.05). Conclusions Arsenic can increase the expression of Fas and FasL in mice liver, and promote apoptosis in liver, zinc may antagonize the effect of arsenic.     

Preptin对人成骨细胞增殖和分化的影响及机制研究

目的 探讨preptin对人成骨细胞增殖和分化的影响及其信号途径.方法 体外培养人成骨细胞,用10-10、10-9、10-8和10-7mol/L preptin干预24 h,以[3H]脱氧胸腺嘧啶苷掺入法分析细胞增殖,用分光光度计法测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性判断细胞分化程度.Western印迹法检测细胞外信号调节激酶(ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)的磷酸化水平.并在preptin干预前以ERK抑制剂(PD98059)、p38 MAPK抑制剂(SB203580)和JNK抑制剂(SP600125)预处理,观察preptin诱导人成骨细胞增殖和分化的途径.结果 Preptin剂量依赖地增加人成骨细胞的增殖和ALP活性,10-9mol/L浓度时达最大效应(均P<0.01).Preptin刺激人成骨细胞ERK的磷酸化,对p38MAPK和JNK无作用.PD98059阻断preptin刺激的成骨细胞增殖及ALP活性增加(均P<0.05),而SP600125和SB203580无此效应.结论 Preptin通过ERK途径促进人成骨细胞的增殖和分化.     

氟对猪甲状腺原代培养细胞甲状腺过氧化物酶活性及mRNA表达的影响

目的 探讨氟对猪甲状腺原代培养细胞甲状腺过氧化物酶(TPO)活性及mRNA表达的影响.方法 用原代培养的猪甲状腺细胞,按氟化钠(NaF)剂量不同分为:0(对照)、40、80、160 mg/L组.甲状腺细胞培养48 h后,采用吖啶橙染色观察甲状腺细胞形态学改变,改良愈创木酚法检测TPO活性,RT-PCR法测定TPOmRNA的表达水平.结果 培养48 h后,80、160 mg/L组吖啶橙染色可见凋亡小体及大量漂浮细胞、碎片.0、40、80、160 mg/L组TPO活性[(3.103±0.090)、(1.944±0.025)、(1.361±0.008)、(0.668±0.026)U/L]随着染氟剂量的升高而明显降低,组间比较差异有统计学意义(F=1563.864,P＜0.05),TPO活性与染氟剂量呈负相关r=-0.955,P＜0.05).4组TPO mRNA表达水平(0.947±0.013、0.634±0.018、0.448±0.028、0.210±0.009)也随着染氟剂量的升高而明显降低,组间比较差异有统计学意义(F=2713.855,P＜0.05).结论 氟可能是通过抑制TPO活性及TPO mRNA的表达来影响甲状腺功能.