NEP1-40对局灶性脑缺血大鼠生长相关蛋白43和微管相关蛋白2表达的影响

目的观察局灶性脑缺血大鼠生长相关蛋白43(GAP-43)和微管相关蛋白2(MAP-2)的表达变化,及轴突生长抑制因子A(NogoA)拮抗剂NEP1-40给药后对其表达的影响,探讨NogoA抑制神经再生的可能机制。方法雄性SD大鼠48只,随机分为3组:假手术组、模型组和给药组,每组16只,采用线栓法建立大脑中动脉闭塞模型,给药组于脑缺血术后1d给予NEP1-40溶液侧脑室注射。术后1、3、7和14d用免疫组织化学法检测缺血侧纹状体区域GAP-43和MAP-2的表达变化。结果脑缺血后缺血侧纹状体区域,在模型组和给药组脑缺血后1、3和7d GAP-43阳性表达的吸光度值逐步增高,14dGAP-43表达有所下降,但均明显高于假手术组。给药组1、3、7和14dGAP-43阳性表达的吸光度值均明显高于模型组(0.19±0.18 vs 0.17±0.23,0.24±0.10 vs 0.21±0.04,0.30±0.21 vs 0.25±0.06和0.26±0.23 vs 0.23±0.08,P0.05)。模型组和给药组各时间点MAP-2阳性表达的吸光度值逐渐升高,但均明显低于假手术组。给药组各时间点MAP-2阳性表达的吸光度值均明显高于模型组。结论抑制NogoA后可以通过增加缺血区GAP-43和MAP-2的表达,促进神经修复,这可能是NogoA抑制神经再生的机制。     

电针对脑缺血再灌注后大鼠脑缺血区生长相关蛋白-43与神经蛋白聚糖表达的影响

目的 探讨电针治疗对脑缺血再灌注后大鼠脑缺血区不同时间点生长相关蛋白(GAP)-43及神经蛋白聚糖(Neurocan)表达的影响.方法 将60只健康成年SD雄性大鼠随机分为假手术组(n=10)、大脑中动脉闭塞再灌注(MCAOR)组(n=25)和治疗组(n=25).用线栓法建立右侧MCAOR模型,治疗组选取人中、百会穴给予电针刺激.选取1、3、7、14、21 d五个时间点,应用免疫组化、RT-PCR方法检测缺血区皮层GAP-43及Neurocan阳性细胞及其mRNA的表达情况.结果 GAP-43及Neurocan在假手术组不表达,MCAOR后表达增加,且电针治疗组较MCAOR组表达差异显著(P<0.01).缺血2 h再灌注1 d MCAOR组出现GAP-43及Neurocan阳性表达细胞,并且呈先递增后减少的趋势.再灌注后7 d时,MCAOR组的GAP-43阳性细胞及其mRNA表达达到高峰,14 d时降至接近初始水平,但治疗组GAP-43表达仍维持较高水平.MCAOR组的Neurocan阳性细胞及其mRNA 7 d明显增多,14 d达高峰,21 d时下降,但仍高于假手术组水平(P<0.01);治疗组 Neurocan表达在缺血再灌注3、7、14、21 d较对照组显著减少(P<0.01).结论 电针上调脑缺血区GAP-43表达与下调Neurocan表达,可能是其促进脑损伤区中枢神经修复的重要机制之一.     

强制性使用运动疗法对脑缺血大鼠生长相关蛋白43和突触素表达的影响

目的观察强制性使用运动疗法(CIMT)对脑缺血大鼠生长相关蛋白43(GAP-43)、突触素表达的影响。方法健康SD大鼠90只,将其随机分为假手术组、模型组和CIMT组,各30只,各组再随机分为缺血后2、4、8周时处死的3个亚组。假手术组大鼠不做任何处理,模型组和CIMT组大鼠进行左侧大脑中动脉闭塞局灶脑缺血模型处理,且CIMT组大鼠在模型成功7 d后进行CIMT干预。时间终点采用原位杂交技术及免疫组化技术分别检测脑梗死区周围皮质GAP-43、突触素mRNA及蛋白的表达。结果脑缺血模型术后2、4周时,CIMT组和模型组GAP-43 mRNA及蛋白表达高于假手术组,CIMT组高于模型组(P0.05)。脑缺血模型术后8周时,CIMT组GAP-43 mRNA及蛋白表达高于模型组和假手术组(P0.05);模型组和假手术组GAP-43 mRNA及蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P0.05)。CIMT组大鼠突触素mRNA及蛋白表达均高于模型组和假手术组,模型组在脑缺血模型术后2、4周时突触素mRNA及蛋白表达高于假手术组(P0.05);脑缺血模型术后8周时模型组突触素mRNA及蛋白表达与假手术组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 CIMT能促进梗死灶周围皮质GAP-43及突触素的表达,促进脑缺血后的突触发生与重建。     

马来酸桂哌齐特对大脑中动脉缺血再灌注小鼠的脑保护作用及神经生长相关蛋白43早期表达的影响

目的 探讨马来酸桂哌齐特(CM)对大脑中动脉缺血再灌注(tMCAO)小鼠的脑保护作用及脑组织中神经生长相关蛋白43(GAP-43)的影响.方法 32只ICR小鼠随机分为正常组、假手术组、缺血2小时再灌注模型组(tMCAO)和马来酸桂哌齐特组(CM).应用线栓法制备大脑中tMCAO模型,腹腔注射CM建立CM组,48小时后观察不同组间小鼠行为学的差异,利用苏木素-伊红(HE)染色法检测小鼠脑组织的病理变化并计算梗死体积,利用尼氏染色法检测尼氏小体的变化,利用免疫荧光染色法检测Caspase-3和GAP-43的表达.结果 正常组及假手术组小鼠无异常行为变化,tMCAO组出现明显神经损伤性异常行为;与正常组及假手术组相比,tMCAO组脑组织出现严重病理变化,脑梗死体积增大,尼氏小体减少,Caspase-3和GAP-43的表达水平明显增高.CM组与tMCAO组比较,神经功能缺损程度明显减轻(P＜0.05),梗死体积减小(P＜0.01),尼氏小体多,Caspase-3和GAP-43的表达水平下降.结论 CM对tMCAO小鼠的脑损伤有一定的保护效果,GAP-43可能在缺血再灌注损伤早期以及CM药理作用中发挥与损伤应答相关的重要作用.     

C-erbB-2蛋白和缝隙连接蛋白43在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨C-erbB-2癌蛋白和缝隙连接蛋白43（connexin,Cx43）在腺型胃癌中的表达并分析其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法分别检测C-erbB-2癌蛋白、Cx43在48例腺型胃癌和26例胃炎组织中的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果C-erbB-2癌蛋白、Cx43阳性呈棕黄色颗粒定位于细胞膜或细胞质;C-erbB-2癌蛋白在胃癌中的阳性表达率（50.0%）显著高于胃炎黏膜组织的阳性率（2χ=6.70,P〈0.05）;Cx43在胃癌中阳性率（43.8%）显著低于胃炎黏膜组织的阳性率（χ2=23.03,P〈0.05）;C-erbB-2癌蛋白的表达与胃癌的大小、分化程度及淋巴结转移呈显著相关（2χ=6.00、9.41、5.49,P值均〈0.05）;Cx43蛋白表达降低或缺失同样与胃癌的分化程度及淋巴结转移呈显著相关（χ2=7.49、6.86,P值均〈0.05）;C-erbB-2癌蛋白和Cx43蛋白呈负相关（χ2=0.01,r=-0.378,P〈0.05）。结论C-erbB-2癌蛋白的高表达、Cx43表达降低或缺失与胃癌分化程度、浸润转移密切相关,联合检测C-erbB-2和Cx43有助于判断胃癌的生物学行为。     

环维黄杨星D对脑缺血再灌注大鼠生长相关蛋白-43 mRNA表达的影响

目的观察易卒中型肾血管性高血压大鼠（RHRSP）脑缺血-复流脑组织大鼠脑缺血生长相关蛋白-43（GAP-43）mRNA表达情况及中药单体环维黄杨星D（CVBD）的影响。方法采用环形银夹使SD大鼠的双侧肾动脉狭窄，制成RHRSP，将大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组及CVBD组．再用线栓法制成一侧大脑中动脉闭塞（MCAO）脑缺血再灌注模型，用原位杂交观测脑缺血2h后再灌注1d、7d、14d、30d不同时间点大鼠的GAP-43 mRNA表达。结果脑缺血再灌注2h后，缺血区周围及海马1d后可见GAP-43 mRNA表达。7d明显增多，14d开始下降，CVB—D组在上述区域各时间点较对照组显著增加。结论CVB-D上调实验性脑缺血再灌注大鼠脑GAP-43 mRNA的表达，可能与促进轴突的再生有关．     

甲状腺激素对脑发育的重要影响

甲状腺激素(TH)在哺乳类动物脑发育中具有重要的作用。孕母亚临床甲状腺功能减退症(甲减)可造成胎儿神经发育受损，对孕妇作甲减筛查是值得推荐的做法。脑TH反应基因的鉴定及功能研究有助于阐明TH调节脑发育的分子机制。     

葡萄籽原花青素对放射性脑损伤大鼠学习能力和生长相关蛋白-43表达的影响

目的观察葡萄籽原花青素(GSPE)对放射性脑损伤大鼠学习能力及生长相关蛋白(GAP)-43的表达。方法 62只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、低、高剂量GSPE组。用直线加速器进行脑部照射22 Gy制作放射性脑损伤模型。HE染色观察海马区神经细胞组织形态变化;免疫组织化学法及RT-PCR法检测再生相关因子GAP-43的表达;穿梭箱评测大鼠学习能力。结果与模型组比较,GSPE组海马区神经细胞结构损伤减轻;GAP-43表达水平显著增高,差异有统计学意义(P0.05);穿梭箱评测显示GSPE组动物主动回避反应率明显升高,被动回避潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P0.05);上述变化在高剂量GSPE组最为显著。结论 GSPE对放射性脑损伤大鼠学习能力障碍有较好的防治作用,与增强GAP-43的表达有关。     

缝隙连接蛋白43在去卵巢大鼠骨细胞中的表达及其与骨质疏松的关系

目的　探讨去卵巢致骨质疏松大鼠骨细胞中缝隙连接蛋白 4 3(Cx4 3)的表达及意义。　方法　采用 10月龄未孕产Wistar雌性大鼠 30只 ,随机分为去卵巢组、假手术组和尼尔雌醇治疗组。于术后 8周末测量 3组大鼠全身及腰椎骨密度 (BMD) ,采用放免法测定血清雌二醇水平 ,采用SABC免疫组化法观察Cx4 3在成骨细胞和破骨细胞中的表达情况 ,采用 3’ OH末端DNA原位标记技术观察凋亡细胞变化。　结果　术后 8周末去卵巢组全身及腰椎BMD和血清雌二醇水平明显低于假手术组和尼尔雌醇治疗组 (P <0 0 1)。去卵巢组成骨细胞内Cx4 3阳性表达率 (13 80 %±1 14 % )低于假手术组 (6 3 6 0 %± 2 4 6 % )和尼尔雌醇治疗组 (6 3 6 0 %± 2 12 % ) (P <0 0 1) ,而破骨细胞内去卵巢组Cx4 3阳性表达率 (6 6 10 %± 1 37% )高于假手术组 (42 2 0 %± 1 93% )和尼尔雌醇治疗组 (41 80 %± 1 81% ) (P <0 0 1)。去卵巢组成骨细胞的凋亡变化 (49 30 %± 3 86 % )高于假手术组 (2 4 2 0 %± 2 78% )和尼尔雌醇治疗组 (2 5 5 0 %± 3 0 3% ) (P <0 0 1) ,破骨细胞凋亡变化(5 80 %± 1 14 % )低于假手术组 (19 2 0 %± 1 75 % )和尼尔雌醇治疗组 (19 70 %± 1 6 9% ) (P <0 0 1)。而上述观察指标中假手术组和尼尔雌醇治疗     

大鼠脑缺血预处理后脑组织胱天蛋白酶-3蛋白的表达

目的　探讨胱天蛋白酶 3(caspase 3)在脑缺血预处理过程中的表达和意义。方法　用免疫组织化学染色技术分别检测假手术对照组、缺血预处理对照组、缺血组和缺血预处理组大鼠脑组织石蜡切片中caspase 3蛋白的表达情况。结果　缺血组和缺血预处理组CA1区caspase 3蛋白免疫反应强度明显高于假手术对照组 ;缺血预处理组再灌注 4 8和 72h与再灌注时间相同的缺血组比较 ,caspase 3蛋白免疫反应强度差异有显著性意义。结论　脑缺血预处理的保护机制可能与抑制caspase 3蛋白表达、减少脑细胞凋亡有关。     

大鼠脑发育期甲状腺激素对突触体素表达的影响

目的 探讨甲状腺激素对发育关键期大鼠大脑皮层、海马各区域突触体素表达的作用及影响.方法 Wistar大鼠分为4组:(1)甲减组:孕鼠自第5天起给予0.02%甲疏咪唑饮水,出生仔鼠即为先天甲减鼠;(2)T4替代组:孕鼠司样自第5天起给予0.02%甲巯咪唑饮水,仔鼠于出生当日起腹腔注T4,剂量为每日 0.02μg/g;(3)T4甲亢组:正常仔鼠于出生当日起腹腔注射T4,剂量为每日0.4μg/g;(4)正常对照组:孕鼠采用标准饲料和饮用自来水,其仔鼠作为正常对照组.采用原位杂交法对突触体素mRNA阳性信号表达进行定性及定量的测定.结果 (1)正常对照组在大脑顶叶皮层、海马突触体素表达模式基本相同且具有层状分布的特点.出生当日表达很低,在第4天表达最高.以后,随日龄增加而逐渐减少,至第30天表达水平基本接近于成年鼠水平.(2)甲减组大脑顶叶皮层和海马各时点突触体素表达均明显低于正常对照组(P＜0.01);甲减组表达高峰延迟3天,在第7天达到高峰.(3)T4-替代组在出生后第4、7、14、21、30天突触体素表达较同日龄甲减组明显增加,但仍低于同日龄正常对照组(P＜0.05或P＜0.01,除第7天海马DG区P＞0.05).(4)T4-甲亢组突触体素表达在第14、21、30天较同日龄正常对照组明显增加(P＜0.05或P＜0.01).结论在脑发育关键期,甲状腺激素的减少及T4-替代和T4-甲亢改变了大鼠大脑皮层、海马各区域突触体素的表达和时相性,进一步影响了该区域突触的发生及相关神经回路的建立,出现神经元的旷置或错误神经通路,阻碍了脑发育与功能成熟.而及时T4-替代治疗是纠正由于甲状腺激素缺乏而造成的中枢神经系统突触发育障碍的重要方法.     

缺碘大鼠补碘对脑内甲状腺激素受体的影响

目的研究缺碘大鼠补充不同质量浓度碘后脑内甲状腺激素受体与激素结合动力学参数的变化。方法复制Wistar低碘大鼠,然后根据饮用不同质量浓度的碘水来分组。选用第2代20日龄仔鼠实验,测定甲状腺功能状态,利用放射配体结合分析法测定脑内T3受体。结果①血清T3浓度:低碘组(LI)、高碘组(HI)、适碘组(AI)与正常对照组(N)相比,差异无显著意义(P> 0.05)。血清FT3:LI组、HI组明显高于N组(P< 0.05);②血清T4和FT4:LI组和HI组均显著低于N组(P< 0.05);③受体最大结合容量(MBC):LI组明显高于N组(P< 0.05)。结论LI组血中TT4和FT4低于N组,而脑中T3核受体MBC高于N组,提示甲状腺功能低下(甲低)状态下,脑组织中T3核受体有代偿性升高。高碘状态下缺碘大鼠脑细胞核T3核受体、MBC虽略有升高,但血中TT4和FT4却低于正常,提示长期缺碘后过量补碘会出现碘性甲低。长期缺碘后,即使补充适量碘也会出现一过性碘性甲状腺功能亢进(甲亢)。     

甲状腺功能减退对新生早期大鼠各脑区甲状腺激素受体mRNA表达的影响

目的探讨甲状腺功能减退（甲减）对新生早期大鼠各脑区甲状腺激素受体（TR）mRNA表达的影响。方法建立甲减Wistar大鼠动物模型，分别于仔鼠0、14、21、45d，用实时荧光定量PCR方法检测大脑、小脑、脑干和海马TR mRNA的表达。结果与对照组相比，各时间点甲减仔鼠各脑区TRα1 mRNA的表达量呈总体下调趋势，而甲减0d仔鼠大脑、小脑、脑干TRα2 mRNA表达量明显增高（t=8．18、6．23、3．68，P〈0．01），且45d仔鼠各脑区TRα2 mRNA表达量仍高于对照组（t大脑=5．50、t小脑=5．46、t脑干=4．10、t海马=11．83，P〈0．01），TRα1、TRα2 mRNA表达峰（21d）均延迟于对照组（14d）出现。甲减仔鼠TRβ1 mRNA表达变化趋势与对照组相一致，但45d仔鼠各脑区TRβ1 mRNA表达量均低于对照组（t大脑=4．64、t小脑=2．73、t脑干=3．90、t海马=5．07，P〈0．01或〈0．05）。结论甲减时甲状腺激素受体mRNA表达峰值的延迟出现以及异常的表达变化与克汀病脑损伤机制密切相关。     

大鼠脑单胺氧化酶对甲状腺激素反应的实验观察

目的 探讨甲状腺激素对甲状腺功能低下（甲低）鼠脑单胺氧化酶（MAO）活性的影响和保护作用。方法 用1%NaClO4诱发大鼠甲状腺功能低下,实验组大鼠分别注射T3、T4,观察脑MAO活性变化,同时观察生后不同时期甲低仔鼠MAO活性。结果 甲低大鼠脑MAO活性增强,20日龄仔鼠MAO活性增加的百分比高于成熟鼠。注射T4脑MAO活性恢复,脑MAO活性与血清T4呈负相关。结论 大鼠甲低时脑MAO活性变化反映了MAO在维持大脑发育和功能上起重要作用,T4对脑MAO活性有保持作用。     

甲状腺激素调节脑发育的分子机制

本文复习了甲状腺功能减退时脑组织的病理变化和甲状腺激素影响脑发育的分子机制。     

Regulation of thyroid hormone availability in liver and brain by glucocorticoids

Glucocorticoids as well as thyroid hormones are essential for normal brain development. Exogenous glucocorticoids stimulate 3,3',5-triiodothyronine (T(3)) availability in circulation of birds and similar effects have been observed in sheep. Chicken data indicate that glucocorticoid administration also stimulates thyroid hormone metabolism in brain but the effects on local thyroid hormone concentrations are not known. Therefore, the current study: (1) determined local thyroid hormone availability in separate brain areas of 18-day-old embryonic chickens (E18) after injection of dexamethasone (DEX), and (2) investigated the impact on the thyroid hormone metabolic pathways in these brain parts and compared the results with the hepatic situation. For this, E18 chicken embryos were treated with a single intravenous dose of DEX (25 microg). Despite the decreased 3,5,3',5-tetraiodothyronine (T(4)) availability in the liver of the DEX treated embryos, the T(3) content was strongly increased, parallel to the plasma T(3) surge. This T(3) surge was primarily related to a fall in hepatic T(3) breakdown through a downregulation of the type III deiodinase (D3). The sulfation pathway in liver seems not to be affected by DEX. In all brain parts, DEX affects the T(3) production capacity by upregulation of the type II deiodinase (D2). This enables the brain to compensate for the decrease in T(4) availability, although the T(3) concentrations are not consistently increased like in plasma and liver. This observation points to the existence of a fine-tuning mechanism in brain that enables the brain to keep the T(3) concentrations within narrow limits.     

甲状腺激素缺乏对发育期鼠脑蛋白激酶C活性的影响

目的 研究甲状腺激纱缺乏对发育期大鼠脑蛋白激素Ｃ（ＰＫＣ）活性的影响,以探讨甲状腺激素调节脑发育的机制。方法 以丙基硫氧嘧啶溶液灌胃造成大鼠围生期甲状模型,部分甲状仔嫌每日腹腔注射Ｔ４２μｇ／１００ｇ体重。收集５天、１５天和２５天的正常、甲减及Ｔ４－替代治疗仔鼠脑组织、测定脑组织胞液和膜ＰＫＣ活性。结果 生后５天、１５天和２５天的甲减仔鼠脑胞液ＰＫＣ活性组织,测定脑组织胞液和膜ＰＫＣ活性。结果 和     

甲状腺功能低下对大鼠小脑细胞凋亡的影响

目的　观察发育期大鼠小脑细胞程序化死亡（ Ｐ Ｃ Ｄ）的发生及甲状腺素（ Ｔ４）对大鼠小脑 Ｐ Ｃ Ｄ 的影响。方法　用丙基硫氧嘧啶（ Ｐ Ｔ Ｕ）复制甲状腺功能低下的大鼠动物模型,然后用原位末端标记方法检测 Ｐ Ｃ Ｄ 阳性细胞。结果　（１） Ｐ Ｔ Ｕ 组母鼠和各日龄仔鼠血清 Ｔ４ 水平明显低于对照组（ Ｐ＜ ０．０１ 或 Ｐ ＜ ０．０５）; Ｐ Ｔ Ｕ＋ Ｔ４ 组仔鼠用 Ｔ４ 替代后血清 Ｔ４ 水平恢复正常; Ｐ Ｔ Ｕ 组 Ｔ３ 代偿性升高;（２）正常小脑各层内均有散在的凋亡细胞,以内颗粒层最多;正常小脑生后 １０ 天和 ２０ 天有两个 Ｐ Ｃ Ｄ高峰;甲低使小脑各层结构内 Ｐ Ｃ Ｄ 数量均增加,而且 Ｐ Ｃ Ｄ 峰分别延迟到生后 １５ 天和 ３０ 天;补充 Ｔ４后 Ｐ Ｃ Ｄ 数量及峰值基本恢复正常。结论　 Ｔ４ 不但促进发育期脑细胞的增殖、迁移和分化,对脑细胞的 Ｐ Ｃ Ｄ 也有明显影响。     

Vitamin A modulates the effects of thyroid hormone on UDP-glucuronosyltransferase expression and activity in rat liver

We studied the influence of thyroid hormones and vitamin A status on the regulation of UDP-glucuronosyltransferase (UGT) expression and the glucuronidation of thyroid hormones by UGTs. For this, we used an original model of rats fed with different vitamin A diets and implanted subcutaneously by osmotic minipumps delivering vehicle or thyroid hormones, which permitted the control of plasma thyroid hormone concentrations. The activity and expression of family 1 UGTs are correlated and were significantly modified by both thyroid status and amounts of retinol in the diet. Dietary vitamin A did not perturbe the UGT1A expression in thyroidectomized animals. Thyroid hormones and dietary vitamin A did not affect the activity and expression of family 2 UGTs. We conclude that thyroid hormones and vitamin A are co-regulator of the UGT1 family expression, without affecting the UGT2 family; by modifying activity and expression of the bilirubin UOT isoform, a member of UGT1 family, thyroid hormone reduced the glucuronidation of T4 and rT3.     

甲状腺激素类似物的研究进展

甲状腺激素类似物是一类新兴药物,通过与甲状腺激素受体选择性结合,在特定组织中发挥拟甲状腺激素作用,尤其在降血脂和能量代谢方面.本文主要介绍了靶向特异的甲状腺激素类似物在临床前动物实验和临床试验的研究进展及应用前景.