缺氧诱导因子-1在脑缺血后细胞凋亡中的作用

缺氧诱导因子-1(hypoxia-induciible factor-1,HIF-1)是细胞在缺氧环境中适应低氧的一种重要调节因子,其在细胞内的数量改变可调控低氧反应性基因的转录.脑缺血时,HIF-1可能抑制神经元凋亡而发挥神经保护作用,也可能通过诱导神经元凋亡而呈现神经毒性作用.     

NGF对CoCl2诱导的化学性缺氧神经元HIF-1α表达的影响

以CoCl2诱导的原代培养胚胎小鼠大脑皮层神经元为缺氧模型,Western blot分析神经生长因子(NGF)对神经元低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达的影响.发现正常培养的神经元HIF-1α、p-ERK表达水平较低,CoCl2缺氧处理后表达升高;单独NGF处理或预加NGF再缺氧处理时两者表达均明显上调;ERK特异性抑制剂PD98059处理后两者表达下调,NGF能阻止这种抑制作用;酪氨酸蛋白激酶的抑制剂Genistein处理能下调HIF-1α的表达,NGF不能阻止这种抑制作用;Genistein处理后p-ERK表达无变化,预加NGF则表达水平上调.认为NGF抗缺氧损伤作用可能与HIF-1α、p-ERK信号通路的激活有关.     

缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞活性氧与缺氧诱导因子1α在细胞增殖中的作用

活性氧可介导基因转录激活的启动和转录因子活性的调节。缺氧诱导因子1α（HIF-1α）是一种核转录因子，在缺氧性肺动脉高压（HPH）形成中起关键作用。我们观察缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）的活性氧变化，探讨其与HIF-1α和细胞增殖的关系。     

缺氧诱导因子1在支气管哮喘气道炎症机制中的研究进展

缺氧诱导因子1(HIF-1)是由α亚基和β亚基构成的异二聚体缺氧反应转录因子,可调节100多种基因的表达,参与机体的免疫反应、细胞代谢、诱导新生血管形成等过程,并通过多种途径引起支气管哮喘气道炎症反应.本文将以此为切入点,对HIF-1在支气管哮喘气道炎症反应机制中的研究作一综述.     

大肠腺瘤及腺癌组织中缺氧诱导因子-1α的表达及意义

缺氧诱导因子-1（HIF-1）是介导细胞对缺氧微环境进行适应性反应的关键性转录调控因子。HIF-1由HIF-1α及HIF-1β组成异二聚体，HIF-1α是特异性氧调节亚单位，决定HIF-1活性。HIF-1α激活后可调节多种下游基因表达，对维持肿瘤细胞能量代谢、新生血管形成、促进肿瘤侵袭和转移起重要作用Ⅲ。研究发现，HIF-1α在一些肿瘤及其癌前病变组织中过表达，提示其与肿瘤的发生及恶性进展密切相关啪。HIF-1α在大肠正常组织-腺瘤-腺癌序列中的表达研究较少。本研究采用免疫组化SABC法研究HIF-1α在大肠腺瘤及腺癌中的表达及意义，以探讨HIF-1α在大肠癌发生发展中的作用。     

一氧化氮对缺氧诱导因子1表达的影响

缺氧是导致缺氧性肺动脉高压(HPH)的直接原因．缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是目前所发现的介导细胞缺氧反应最关键的特异性中介因子^[1]。我们以前的研究提示．HIF-1α和内皮素1(ET-1)基因的表达增高与HPH的发生有密切关系^[2]。众多研究证明，一氧化氮(NO)可通过调节血管张力和血管平滑肌细胞的增殖而影响HPH的发生、发展。     

异氟烷和异丙酚对前列腺癌细胞HIF-1α通路的调控

目的通过观察麻醉剂诱导活化缺氧诱导因子(HIF)-1α对前列腺癌细胞生长、迁移和侵袭过程的影响,比较吸入麻醉剂异氟烷与静脉麻醉剂异丙酚单独和组合使用的区别。方法采用异氟烷和异丙酚处理前列腺癌PC3细胞,观察HIF-1α的表达水平及其下游分子效应,研究前列腺癌细胞增殖、迁移能力。结果异氟烷在临床常用浓度可诱导HIF-1α及PC3细胞系中的下游效应分子上调,使癌细胞的增殖、迁移能力增加;磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-Akt抑制剂通过上游途径抑制HIF-1α的生成;特异性HIF-1αsiRNA可消除异氟烷诱导的效应。异丙酚可抑制由缺氧或氯化钴(CoCl_2)诱导的HIF-1α激活,预防异氟烷诱导的HIF-1α激活并减少癌细胞运动。结论在前列腺癌细胞中,异氟烷通过PI3K/Akt/mTOR途径上调HIF-1α,引起标记物和血管生成,同时导致癌细胞活性增加、抗药性增加;异丙酚联合异氟烷可通过拮抗Akt磷酸化抑制上述效应。因此,在癌症手术时应避免异氟烷的使用。     

重组腺病毒介导的缺氧诱导因子-1α对脑缺氧后神经元中缺氧诱导因子-1α的调控

目的探讨重组腺病毒介导的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)转染对缺氧后的大鼠大脑皮层神经元中HIF-1α的调控作用及可能机制。方法 (1)制备大鼠大脑皮层神经元原代培养模型及缺氧模型。重组腺病毒缺氧诱导因子-1α(AdHIF-1α)转染和重组腺病毒空载体(Ad)转染正常及缺氧细胞;将其分为正常对照组(Normal)、缺氧组(Hypoxia)、AdHIF-1α基因转染组、Ad组。(2)荧光显微镜下观察AdHIF-1α/Ad转染情况;采用蛋白印迹(Western blot)法分别在12 h、24 h、48 h及72 h观察各实验组HIF-1α蛋白的表达。结果用Ad/AdHIF-lα转染缺氧的神经元后, 在荧光显微镜下观察转染48 h时荧光表达最明显。Western blot检测经AdHIF-1α基因转染组各时间点HIF-1α的表达明显增加, 12 h有阳性表达, 24 h表达有所增加, 48 h达高峰, 持续到72 h开始下降, 与缺氧组相比差异均有统计学意义(P<0.01, P<0.05), Ad组与缺氧组相比无统计学意义。结论重组腺病毒介导的HIF-1α基因转染能明显提高缺...     

食管鳞癌细胞系EC-109中缺氧诱导因子-1α的表达意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在食管鳞癌细胞系EC-109中的表达及其意义.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot分别检测HIF-1αmRNA和蛋白在常氧及缺氧状态下在食管鳞癌EC-109细胞中的表达.结果:HIF-1αmRNA在缺氧食管鳞癌EC-109细胞中过表达(P<0.05),在缺氧24h时HIF-1αmRNA表达最高,其后随时间延长表达下降;HIF-1α蛋白水平在缺氧食管鳞癌EC-109细胞中无明显上调(P>0.05).结论:低氧可诱导食管鳞癌EC-109细胞中HIF-1αmRNA的过度表达,缺氧状态下HIF-1α蛋白水平较常氧时无明显增加.     

缺氧诱导因子-1α shRNA 重组质粒的构建及对人结肠癌细胞生长的影响

目的 构建靶向缺氧诱导因子-1α特异性短发卡RNA(shRNA)的真核表达载体,为结肠癌的靶向治疗奠定基础.方法 设计、合成针对缺氧诱导因子-1α的特异性短链寡核苷酸,构建缺氧诱导因子-1α特异性shRNA的重组质粒,稳定转染结肠癌SW480细胞;采用氯化钴制备缺氧诱导培养基,模拟肿瘤缺氧状态.采用实时定量聚合酶链反应和免疫印迹法检测转染前后SW480细胞中缺氧诱导因子-1α的表达;MTT法检测SW480细胞活性.结果 经酶切和测序鉴定,成功构建HIF-1α特异性shRNA的重组质粒,并能转染SW480细胞.转染后,缺氧诱导因子-1α mRNA和蛋白水平表达分别下降约86.1%和79.7%,肿瘤细胞增殖活性明显降低.结论 运用pGenesil-1质粒载体构建的靶向HIF-1α特异性shRNA的重组质粒已成功构建,该质粒可转染SW480细胞,有效抑制HIF-1α的表达;本研究可为结肠癌的靶向治疗提供新方法.     

肾小管缺氧损伤中肾损伤分子-1表达信号通路的调节

目的:观察肾损伤分子-1(KIM-1)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在人近端小管上皮细胞(HK-2)缺氧复氧过程中的表达及相互关系,探讨HIF-1α对KIM-1表达的调控作用及机制.方法:收集缺氧、缺氧复氧后不同时段培养的HK-2细胞,用RT-PCR和Western-Blot检测KIM-1及HIF-1α表达,同时观察HIF激动剂(CoCl2)及抑制剂(雷帕霉素)对KIM-1表达的影响;应用凝胶迁移实验(EMSA)和染色质免疫沉淀实验(ChIP)验证KIM-1启动子区和HIF-1结合情况.结果:HK-2细胞缺氧复氧过程中KIM-1和HIF-1在mRNA水平和蛋白水平表达相关,HIF-1激动剂CoCl2或抑制剂雷帕霉素可上调或下调KIM-1表达,并呈剂量依赖性;EMSA表明HIF-1α可以和KIM-1启动子区HRE结合位点为模板所设计的双链寡核苷酸探针特异性结合,而且这种特异性结合受HIF-1α调节,同时ChIP实验证实了KIM-1启动子区和HIF-1α的结合.结论:KIM-1在近端肾小管上皮细胞缺氧损伤时的表达受HIF-1α调控,KIM-1可能作为HIF-1的下游分子参与肾损伤及修复过程.     

缺氧诱导因子-1α在食管鳞状细胞癌中的研究

食管癌是常见的消化系统恶性肿瘤,我国90%以上的食管癌为食管鳞状细胞癌,其病因和发病机制尚未明确。近年来研究表明,肿瘤微环境参与食管鳞状细胞癌的发生、发展。肿瘤的快速生长导致肿瘤微环境缺血缺氧,而缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)作为细胞对缺氧环境适应的重要调节因子,在食管鳞状细胞癌的血管生成、增殖、侵袭、转移及放化疗敏感性等方面发挥重要作用。本文通过探讨HIF-1α对食管鳞状细胞癌发生、发展及预后的影响,评估HIF-1α在食管鳞状细胞癌治疗中的作用,为研究食管鳞状细胞癌的机制、治疗及预后提供新思路。     

缺氧诱导因子-1在缺血性脑损伤中的作用

作为低氧反应的核转录调节因子,缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)在缺氧时表达上调,并通过与低氧反应元件结合,调控一系列下游靶基因,如血管内皮生长因子、葡萄糖转运体、红细胞生成素等的基因表达,在血管生成、无氧代谢以及细胞存活、增殖、迁移、分化等方面起着重要作用.文章对HIF-1的结构功能、活性调节及其在急性缺血性脑损伤中的作用进行综述.     

缺氧诱导因子-1在肿瘤中的调节作用

缺氧时,缺氧诱导因子-1(HIF-1)结构发生变化,并在细胞核内聚积,通过一系列的调节机制如转录活性的调节、不同的信号通路在HIF-1α翻译中的调节来调控HIF-1α下游靶基因的的转录,引起肿瘤细胞的增殖、转移及耐药.     

缺氧诱导因子1α在糖尿病心肌病微血管病变中的作用机制

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是一种核转录调节因子,通过其下游基因的调控,参与糖尿病微血管并发症的发生与发展,对微血管的生成起关键作用.糖尿痛心肌病作为一种独立性疾病,其主要病理基础包括心肌微血管病变.HIF-1α可通过调控下游多种促血管新生因子,改善糖尿病心肌微血管病变、促进微血管生成,对改善心肌缺血、缺氧,延缓糖尿病心肌病的发生与发展起重要作用.HIF-1α对糖尿病心肌病的防治有潜在的临床意义.     

缺氧诱导因子-1α和p53在原发性肝癌中的表达及其与临床病理参数的相关性

缺氧诱导因子(HIF)-1α在大多数正常组织中检测不到,在缺氧、癌基因激活、抑癌基因失活、生长因子等因素的刺激下,HIF-1 α与另一亚单位HIF-1 β结合,作用于结构基因的调控序列,促进下游基因转录,使组织细胞对缺氧产生适应性调节.     

肝缺氧诱导因子-1α与肝癌发生、发展及治疗研究新进展

失控的增殖导致缺氧(hypoxia)是肝细胞癌(HCC)形成的特征性微环境.缺氧可促进癌细胞增殖、转移、血管新生、抑制癌细胞分化、凋亡以及对放化疗耐受.缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是介导生理性和病理性低氧反应的关键转录因子,在转录水平上调控百余种靶基因,参与调节血管新生及糖代谢等过程,与HCC生长、浸润、转移和预后等密切相关.近年来以HIF-1α为靶点的基因疗法如RNA干扰、反义技术和自杀基因技术等,成为HCC辅助治疗的新策略.本文综述了HIF-1α转录水平异常与HCC发生、发展及靶向HIF-1α基因治疗HCC的新进展.     

缺氧诱导因子-1α及其靶基因在人肝癌HepG2细胞中的表达和意义

缺氧诱导因子-1（HIF-1）存在于大多数实体肿瘤中，是肿瘤细胞维持氧平衡的重要的转录调节子。HIF-1包含α和β两个亚基（HIF-1α和HIF-1β），其中HIF-1α是主要的功能亚基，对HIF-1的转录活性起关键作用。缺氧条件下，HIF-1α被运输到核内，与HIF—1β形成二聚体，通过与靶基因上的缺氧反应元件（HRE）结合而促进靶基因转录，其蛋白质产物发挥多种生物学功能，如参与肿瘤血管的形成与发展，肿瘤细胞能量代谢，肿瘤细胞增殖与存活等。     

缺氧对人胰腺癌SW1990细胞HIF-1α及靶基因Glut1、VEGF表达的影响

目的 探讨缺氧对人胰腺癌SW1990细胞HIF-1α及靶基因Glut1、VEGF表达的影响.方法 建立人胰腺癌SW1990细胞体外缺氧培养模型,随机分为缺氧培养8 h、16 h、24 h组及常规培养组.采用RT-PCR和Western blot方法分别检测各组细胞HIF-1α、Glut1、VEGF mRNA和蛋白的表达.结果 HIF-1α在常规培养细胞中的表达较弱,而在缺氧培养细胞中的表达水平明显增高.SW1990胰腺癌细胞株HIF-1α、Glut1、VEGF mRNA和蛋白在缺氧条件下的表达显著增强,并随缺氧时间的延长而升高.结论 缺氧可诱导人胰腺癌SW1990细胞Glut1和VEGF的表达,这种作用可能是通过HIF-1α途径介导的.     

缺氧诱导因子-1α在缺血性心脏病中的研究进展

心脏是体内对缺血缺氧最敏感的器官之一.缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是普遍存在于哺乳动物细胞内维持机体氧稳态的主要调控转录因子,其通过调节血氧利用、葡萄糖代谢、血管生成、心肌细胞凋亡等过程,参与多种缺血性心脏病的适应性反应.