电离辐射后大鼠组织中丙二醛、组织蛋白酶D及甲2巨球蛋自的变化

动物受电离辐射后,蛋白酶活力增高.给与广谱蛋白酶抑制剂甲₂巨球蛋白(a₂M),可减少动物死亡,推测与清除蛋白酶有关.用⁶⁰Co致死剂量照射wistar大鼠,组织激肽释放酶增加,脾脏组织蛋白酶D活性增高.虽血浆a₂M含量与甲巨球蛋白(aM)捕捉胰蛋白酶活力也增加,但脾脏a₂M增加倍数低于肝,肾等组织.脾脏失重明显.提示a₂M治疗急性放射损伤有效,与保护脾脏等敏感组织,减少组织蛋白水解有关.大鼠致死剂量照射后,脂质过氧化产物丙二醛也增加.人放射性皮肤损伤,血浆组织蛋白酶D活力与丙二醛均增高,超氧化物歧化酶活力降低,给与a₂M治疗,可得到纠正.有报道,蛋白酶参与粒细胞氧自由基的释放,清除蛋白酶似可减少体内氧自由基的含量.推测a₂M在减少蛋白酶的同时,也减少了氧自由基的生成.     

甲2-巨球蛋白制剂对放射性损伤组织愈合作用的临床疗效观察

甲２巨球蛋白（α２Ｍ）为大分子量球蛋白,分子量为７２－５万,已公认为广谱蛋白水解酶抑制剂。近年又有报道,体外实验观察到α２Ｍ与蛋白水解酶结合后尚有清除自由基的作用［１］。近年来,α２Ｍ在辐射损伤、肿瘤、炎症等方面的作用日益受到重视。上海在７０年代也已应用于临床,我院自８０年代以来共用于放射性膀胱炎,伤口延迟愈合等５９例,现报道如下：一、临床资料本组病例是应用α２Ｍ治疗放射性膀胱炎血尿,伤口延迟愈合等泌尿外科病人共５９例。其中男性４７例,女性１２例。用于伤口延迟愈合的有３２例,放射性膀胱炎血尿５…     

组织蛋白酶D mRNA转录和蛋白表达与卵巢癌的关系

目的：探讨组织蛋白酶DalRNA转录和蛋白表达与卵巢癌发生、发展及预后的关系。方法：选取2006年1月～2007年12月卵巢癌29例,对照组为14例正常卵巢组织,RT-PCR法和WB法检测两组中组织蛋白酶D mRNA转录和蛋白表达水平。CD34免疫组化法进行卯巢癌微血管密度（microvessel density,MVD）检测,统计不同病理分级及临床分期卵巢癌组织蛋白酶D阳性表达和MVD的关系。结果：卵巢癌组组织蛋白酶D mRNA转录和蛋白阳性表达率为62．1％和67．0％,均显著高于埘照组（P〈0.01）。低分化卵巢痛组织蛋白酶D mRNA转录和蛋白阳性率为92．9％和100％,显著高于高巾分化标本（P〈0．01）。Ⅲ～Ⅳ期卯巢癌标本组织蛋白酶D mRNA转录和蛋白阳性率为91．7％和100％,显著高于Ⅰ～Ⅱ期标本（P〈0．01）。有淋巴结转移的卵巢癌组织蛋白酶D mRNA转录和蛋白阳性率为91．7％和100％,显著高于未转移标本（P〈0．01）。低分化、Ⅲ～Ⅳ期及转移卵巢癌中MVD分别为（45．6±3．6）、（47．8±4．1）和（46．6±3．9）个,分别显著高于高中分化、Ⅰ～Ⅱ期和未转移标本。组织蛋白酶D mRNA转录和蛋白阳性卵巢癌MVD分别为（35．3±4．1）个和（34．2±4．3）个,显著高于组织蛋白酶D mRNA转录和蛋白阴性卵巢癌标本。结论：卵巢癌中组织蛋白酶D转录及蛋白水平均高于正常卵巢组织,其表达与卵巢癌病理分级及临床分期显著相关。     

二甲双胍下调ROS-PKCβ2通路对高糖波动加重的人内皮细胞损伤的干预作用

目的观察波动性高糖与持续性高糖对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管内皮生长因子(VEGF)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)mRNA表达的影响,探讨活性氧(ROS)和蛋白激酶Cβ2(PKCβ2)在其中的作用及二甲双胍的干预作用。方法将培养的HUVECs分为7组:①正常糖(NG,5mmol/L D-葡萄糖)组,②正常糖空载体转染组(NN,NG+Ad5-null)组,③持续性高糖(SHG,15mmol/L D-葡萄糖)组,④波动性高糖(I HG,5mmol/L D-葡萄糖与25mmol/L D-葡萄糖每24h更换一次)组,⑤波动性高糖+PKCβ2转染(I HGB,I HG+Ad5-PKCβ2)组,⑥波动性高糖+二甲双胍(I HGM,I HG+20μmol/L二甲双胍)组,⑦波动性高糖+选择性的PKCβ2抑制剂CGP53353(I HGI,I HG+10μmol/L CGP53353)组或波动高糖+α-硫辛酸(ALA)(I HGA,I HG+62.5μmol/L ALA)组。RT-PCR法检测细胞VEGF、VCAM-1 mRNA表达水平,荧光酶标仪测定细胞ROS水平,激光共聚焦显微镜下检测PKCβ2蛋白表达和转位情况。结果与NG组比较,NN组的空载体转染对细胞无明显生物学意义(P>0.05)。SHG组和I HG组VEGF、VCAM-1mRNA表达及ROS水平增加,分别为NG组的2.16倍、2.30倍、1.75倍和2.57倍、3.32倍、3.20倍,且I HG组增加更明显(P<0.05)。SHG组和I HG组PKCβ2核转位激活,定量分析显示胞质/胞核荧光强度比值较NG组分别下降了21%和26%,且I HG组下降更加明显(P<0.05);I HGB组PKCβ2核转位较I HG组更显著,胞质/胞核荧光强度比值为I HG组的75%,同时I HGB组VEGF、VCAM-1 mRNA表达以及ROS水平亦显著增高,分别为I HG组的1.38倍、1.45倍和1.25倍(P<0.05)。I HGM组VEGF、VCAM-1mRNA表达及ROS水平均较I HG组明显降低,为I HG组的44%、53%和39%;I HGM组PKCβ2核转位亦较I HG组减少,胞质/胞核荧光强度比值为I HG组的1.20倍(P<0.05)。结论波动高糖较持续高糖更易损伤HUVECs,该作用与ROS-PKCβ2活化密切相关;二甲双胍可通过抑制PKCβ2激活,减轻波动性高糖诱导的HUVECs损伤。     

1,25(OH)2D3对关节滑膜蛋白聚糖-4基因表达及分泌的影响

 

目的 探讨维生素D体内活性形式1,25(OH)₂D₃对关节滑膜蛋白聚糖-4 (proteoglycan 4,PRG4)基因表达及分泌的影响。方法 新西兰大白兔,分离膝关节滑膜体外培养。首先用10 nM浓度1,25(OH)₂D₃进行试验。Real time-PCR检测PRG4基因表达,ELISA 法检测培养液中PRG4分泌量的变化,确定1,25(OH)₂D₃作用后PRG4基因表达和PRG4分泌的最佳时间点。之后用不同浓度1,25(OH)₂D₃进行刺激,在最佳时间点测定1,25(OH)₂D₃对关节滑膜PRG4基因表达及分泌的影响。结果 Real time-PCR分析显示,1,25(OH)₂D₃作用6 h后PRG4 mRNA水平开始上调,24 h时PRG4 mRNA表达水平达峰值。ELISA分析结果显示,1,25(OH)₂D₃作用12 h时滑膜培养液中PRG4蛋白含量开始明显升高,48 h时滑膜培养液中PRG4蛋白含量达最高。Real time-PCR分析显示,在0.1~100 nM 浓度范围内1,25(OH)₂D₃均促进关节滑膜PRG4基因表达,随着1,25(OH)₂D₃浓度的提高,PRG4基因表达上调逐渐提高。ELISA分析显示,1,25(OH)₂D₃在0.1~100 nM浓度范围内均促进关节滑膜分泌PRG4,随着1,25(OH)₂D₃浓度的提高,滑膜分泌PRG4量逐渐增加。结论 1,25(OH)₂D₃对滑膜PRG4基因表达及分泌有明显的促进作用。

     

X射线对肺癌细胞株A549的P57kip2和TGF-β1蛋白表达的影响

目的 观察不同剂量X射线照射后不同时间A549肺癌细胞株中P57^kip2和TGF-β1蛋白表达水平,探讨X射线对p57^kip2和TGF-β1的影响及临床意义。方法 按常规方法培养肺癌细胞株A549,实验分5组,照射组分别给予不同剂量X射线(2、4、8和12 Gy)照射,于不同时间(6、12、24、36和48 h)提取蛋白,采用Western blot 检测p57^kip2和TGF-β1蛋白的表达水平。结果 X射线可导致肺癌细胞P57^kip2蛋白的表达增加,照后12 h达峰值,在2～8 Gy之间,p57随着照射剂量的增加而升高,12 Gy时,其含量较4～8 Gy减少。不同剂量和不同时间P57^kip2蛋白的表达,差异有统计学意义(P＜0.05),TGF-β1在照后6h达峰值,之后迅速下降,各不同剂量和不同时间水平之间差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 X射线照射可以上调肺癌细胞株A549的p57^kip2和TGF-β1蛋白表达,两者有一定的相关性,且在一定剂量范围内呈剂量依赖性,可以反映肺癌细胞损伤的程度。     

放射增敏药马蔺子甲素及甘氨双唑钠对H22小鼠CD4、CD8、IL-2、TNF-α的影响

马蔺子甲素和甘氨双唑钠都是具有放射增敏作用的药物，目前处于临床Ⅳ期试验中。国外报道某些硝基咪唑类增敏剂有增强免疫系统的作用，国内有关报道尚少。为进一步了解这两个新药对荷瘤机体照射后免疫功能的影响，我们进行了实验研究，现将结果报道如下。     

膝关节软骨的生化MRI（T2、T2*和磁化转移率）:超高场（7T）成像的可行性,并与高场（3T）的比较

目的本研究比较了在7T和3T场强下,对关节软骨进行定量T2、T2*和磁化转移率(MTR)测定的能力和可重复性。方法健康志愿者[(25.8±5.7)岁]的17个膝关节在3T和7T的MR设备上分别进行髌骨横断面扫描,使用同类型表面线圈和来自同一厂家的全身MR系统。其中,13个     

前瞻性比较T2加权MRI和动态增强MRI、3D MR波谱成像或扩散加权MRI在重复经直肠超声导引下活检的作用

目的比较T2WMRI和功能MRI技术在指导重复前列腺活检中的作用。方法68例活检阴性,直肠指诊阴性和前列腺特异抗原(PSA)升高病史的病人,在重复前列腺活检