姜黄素对前列腺癌PC-3M细胞生长抑制和凋亡的影响

为探讨姜黄素对人前列腺癌PC-3M细胞生长抑制及凋亡调控的作用,按姜黄素浓度分成10、20、30、40μmol/L4个处理组和对照组(未加姜黄素),处理PC-3M细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞的增殖抑制情况;荧光染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪进行细胞周期时相分析;免疫组化SP法检测细胞内caspase-3蛋白的表达水平。结果表明,与对照组比较,姜黄素处理组可使细胞明显变圆,体积缩小,脱壁细胞增多;MTT法检测显示,姜黄素处理组随着浓度增加和作用时间延长,对PC-3M细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.01);荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,对照组和4个处理组凋亡率分别为(9.83±1.53)%、(19.50±1.00)%、(24.83±2.52)%、(30.17±2.08)%和(38.50±2.65)%;流式细胞仪显示,处理组停滞在S、G2/M期细胞增加,而G0/G1期细胞减少;免疫组化结果显示,随着姜黄素浓度增加,caspase-3蛋白表达增强,呈剂量依赖性(P<0.01)。结论:姜黄素对人前列腺癌PC-3M细胞的生长具有明显抑制作用,上调caspase-3蛋白的表达,诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

姜黄素和顺铂联用对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3作用

目的:研究姜黄素和顺铂联用抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3增殖的影响.方法:MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞仪测定细胞周期时相变化及检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞超微结构变化.结果:姜黄素能显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞的体外生长,呈时间与剂量依赖性;细胞周期主要阻滞于G2/M期,部分细胞出现凋亡形态学改变.顺铂和不同浓度姜黄素联合可显著抑制PC-3细胞增殖.姜黄素和顺铂在一定程度上均可诱导PC-3细胞凋亡,两种药物联用后,诱导细胞凋亡作用增强.结论:姜黄素可与顺铂协同抑制人前列腺癌细胞株PC-3的增殖.     

姜黄素对前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用

目的研究姜黄素对PC-3细胞增殖活性的影响。方法以不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞24h,以中效浓度(40μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞4、12、24、48、72h,后用MTT法检测在不同浓度及时间作用下PC-3细胞的抑制率,应用流式细胞仪检测PC-3细胞周期的变化。结果姜黄素对PC-3细胞的增殖抑制作用与顺铂相似(P>0.05),具有剂量时间依赖性,并随着药物浓度及时间的增加,抑制率逐渐增高,流式细胞仪检测显示:姜黄素和顺铂组都能使PC-3细胞生长明显阻滞于G2/M期,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论姜黄素可以明显抑制PC-3细胞的增殖,在临床治疗前列腺癌方面有着良好的应用前景。     

丙泊酚对肝癌HepG2细胞侵袭的影响

目的:研究丙泊酚对肝癌Hep G2细胞侵袭的影响。方法:以0(阴性对照)、1、3、10μg/ml丙泊酚作用于肝癌Hep G2细胞48 h后,采用MTT法检测细胞活力,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、E-钙黏附素(E-cadherin)、锌指转录因子(Snail)的表达及核因子-κB p65(NF-κB p65)磷酸化水平。结果:与阴性对照比较,1、3、10μg/ml丙泊酚能降低Hep G2细胞活力和侵袭能力,下调NF-κB p65磷酸化水平和Snail表达,上调E-cadherin表达(P<0.01);3、10μg/ml丙泊酚能下调MMP-2、MMP-9表达(P<0.01)。上述效果均呈浓度依赖性(P<0.01)。结论:丙泊酚能抑制肝癌Hep G2细胞侵袭,其机制可能与抑制NF-κB/Snail信号通路有关。     

姜黄素对肺纤维化小鼠的保护作用及其机制研究

目的 研究姜黄素对百草枯所致小鼠肺纤维化的影响,并探讨其保护机制。方法 将60只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组及姜黄素20、40、80 mg/kg干预组和地塞米松5 mg/kg组,每组10只。制备小鼠肺纤维化模型的同时ig给药,对照组和模型组ig 0.1 mL的0.9%的生理盐水,每2天给药1次,第28天眼球取血后处死所有小鼠。取左侧肺组织制作组织切片进行HE染色和Masson染色,右侧肺组织进行羟脯氨酸（HYP）、丙二醛（MDA）以及超氧化物歧化酶（SOD）测定。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）水平。通过免疫组化分析肺组织中核因子NF-κB表达水平。结果 姜黄素20、40、80 mg/kg干预组及地塞米松组的肺纤维化程度明显轻于模型组。与模型组比较,姜黄素各剂量组和地塞米松组HYP及MDA水平均显著降低,而SOD含量显著升高（P<0.01）;与地塞米松组比较,姜黄素40、80 mg/kg干预组MDA水平显著降低（P<0.05）,姜黄素80 mg/kg干预组的SOD水平显著升高（P<0.05）。与模型组相比,姜黄素20、40、80 mg/kg干预组和地塞米松组血清中的TNF-α、IL-6、MMP-9浓度降低明显（P<0.01）,且姜黄素40、80 mg/kg干预组的TNF-α、MMP-9水平低于地塞米松组（P<0.05）。与模型组比较,姜黄素20、40、80 mg/kg干预组和地塞米松组肺组织细胞核NF-κB表达水平显著降低（P<0.01）。结论 姜黄素可有效降低肺纤维化模型小鼠HYP、MDA含量、血清中TNF-α、IL-6浓度,下调肺组织NF-κB蛋白表达水平,改善肺部形态学病变,增强抗氧化能力,对肺纤维化小鼠产生保护作用。     

姜黄素介导微小RNA-199a-3p基因对前列腺癌细胞的影响

目的 探讨姜黄素调控微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)的表达对前列腺癌C4-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 (1)将体外培养的前列腺癌C4-2细胞分为4组:空白组(无药物干预)和低、中、高3个剂量实验组(20,40,80μmol·L-1姜黄素干预),选取对C4-2细胞的增殖抑制最明显姜黄素浓度用于...     

姜黄素对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制研究

目的 探讨姜黄素对实验性糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）及其抑制物金属蛋白酶-2组织抑制物（tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2）表达的影响.方法 大鼠随机分为正常对照组（A组）、糖尿病组（B组）及姜黄素治疗组（C组）,采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）65 mg/kg建立糖尿病大鼠模型.治疗组给予姜黄素30 mg·kg-1·d-1腹腔注射.实验第3、6周各组分别宰杀6只大鼠,并检测24 h尿白蛋白排泄率（urinary albumin excretion rate,UAER）、肌酐清除率（creatinine clearance rate,Ccr）及肾重/体重.采用免疫组织化学染色法检测肾小球MMP-2、TIMP-2、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）和Ⅳ型胶原表达.结果 治疗组大鼠UAER（P〈0.05或〈0.01）、Ccr（P〈0.05）、肾重/体重（P〈0.05）均明显低于糖尿病组大鼠.免疫组织化学染色可见糖尿病大鼠肾小球TIMP-2、 FN和Ⅳ型胶原表达均明显增加（P〈0.05或〈0.01）,治疗组上述指标的表达均受到明显抑制（P〈0.05）.MMP-2在糖尿病大鼠肾小球的表达明显被抑制（P〈0.01）,治疗组其表达明显增加（P〈0.05）.结论 姜黄素通过上调糖尿病大鼠肾小球MMP-2表达、下调TIMP-2表达,对糖尿病大鼠肾脏病变具有保护作用.     

姜黄素对胶质瘤细胞MMP2 mRNA表达的影响

目的探讨姜黄素对人脑胶质瘤中MMP2 mRNA表达的影响。方法用RT-PCR检测不同浓度(0、5、10、20、40μmol·L~(-1))的姜黄素干预下的50例人脑胶质瘤细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)mRNA的表达。结果除了20μmol·L~(-1)组与10μmol·L~(-1)组间总体均数没有统计学意义外,其余任意2组浓度间总体均数差异均有统计学意义(P<0.05)。胶质瘤细胞中的MMP2 mRNA表达下降,并具有一定的浓度依赖性。结论姜黄素对胶质瘤细胞MMP2 mRNA表达有下调作用。     

姜黄素对心脏压力过负荷大鼠主动脉细胞外基质的影响

目的：探讨姜黄素对心脏压力过负荷大鼠主动脉基质的影响。方法：腹主动脉部分结扎致大鼠心脏压力负荷增高，姜黄素灌胃3wk后测定大鼠单单位长度主动脉湿重／体重比值；Woessner法测主动脉胶原含量，酶谱半定量测定法测基质金属蛋白酶（MMP2）活性。结果：模型组主动脉显重／体重比值增加、组织胶原含量增高，主动脉MMP2活性下降，姜黄素灌胃3wk后降低主动脉湿重／体重比值，主动脉胶原含量降低，MMP2活性改变不明显。结论：姜黄素可逆转心脏压力过负荷大鼠主动脉的肥厚，其机制主要与抑制胶原合成有关。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和迁移侵袭的影响

目的探究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和迁移侵袭的作用。方法建立稳定表达EMMPRIN基因的SKOV3细胞为实验组,分别以转染pc DNA3.0空载体的SKOV3细胞和正常卵巢上皮细胞IOSE80分别作为对照组和空白组。用流式细胞术检测凋亡率,用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,用免疫印迹法检测EMMPRIN、Bcl-2和Bax的表达水平。结果空白组、对照组和实验组的凋亡率分别为(10.27±1.35)%,(12.40±0.70)%和(5.67±0.96)%,平均相对迁移指数分别为(0.25±0.03),(0.64±0.03)和(0.83±0.02),平均侵袭细胞数分别为(45.75±2.87),(120.00±3.92)和(153.25±8.06),EMMPRIN表达量分别为(0.12±0.02),(0.22±0.01)和(0.34±0.02),Bcl-2表达量分别为(0.06±0.01),(0.55±0.02)和(0.87±0.03),Bax表达量分别为(0.37±0.02),(0.28±0.01)和(0.12±0.01)。实验组的上述指标与空白组和对照比较,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.01)。结论 EMMPRIN过表达后人卵巢癌细胞SKOV3细胞凋亡能力降低,细胞迁移和侵袭能力增强。     

姜黄素衍生物对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗作用

目的:探讨姜黄素衍生物(Curc-OEG)对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗效果。方法:以四氯化碳诱导形成大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型。大鼠分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量组(C组)、中剂量组(D组)、高剂量组(E组)、秋水仙碱组(F组)。除A组外,各组给予四氯化碳和橄榄油混合液皮下注射,2次/周,4周后B组给予生理盐水尾静脉注射,C、D、E组分别给予25、50、100mg.kg-1.d-1的Curc-OEG尾静脉注射,F组给予0.1mg.kg-1.d-1秋水仙碱灌胃。10周后测定肝功能及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;做肝脏HE和天狼星红染色;定量PCR法测金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、金属蛋白酶-13(MMP-13)基因的表达,Western Blot法测CollagenⅠ蛋白的表达。结果:与模型组比较,中、高剂量组ALT、AST明显降低(P<0.05),羟脯氨酸及CollagenⅠ蛋白表达明显降低(P<0.05),MMP-13 mRNA明显上调(P<0.05),以及TIMP-1 mRNA明显下调(P<0.05),并且HE及天狼星红染色结果也观察到肝脏炎症及纤维化程度明显减轻。结论:Curc-OEG能减轻四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化。     

姜黄素对脂多糖诱导小鼠早产的防治作用研究

目的了解感染性早产小鼠胎盘核转录因子-kappa Bp65(nuclear factor-kappa Bp65,NF-κBp65)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)mRNA的表达以及姜黄素的干预影响,探讨未来预防感染性早产的新措施。方法建立感染性早产小鼠模型,15d孕鼠被随机分成3组:NS组,LPS组,CUR+LPS组,每组18只。利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测姜黄素干预后的各组小鼠胎盘NF-κBp65和TNF-αmRNA的表达变化。结果LPS组孕鼠的早产率为87.5%,明显高于对照组(P=0.001);CUR+LPS组与LPS组相比早产率差异有统计学意义(P=0.041)。NS组有NF-κBp65和TNF-αmRNA的少量表达,LPS组与NS组相比,二者表达显著升高(P<0.05);CUR+LPS组和LPS组相比,二者表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素对于感染性早产有防治作用,并且降低了早产小鼠胎盘NF-κBp65和TNF-αmRNA的表达。     

M3受体亚型在NSCLC细胞增殖、侵袭和迁移中的作用及机制研究

目的探讨M3R在NSCLC细胞增殖、侵袭和迁移中的作用及信号机制。方法 CCK-8法、划痕法和Transwell细胞侵袭实验检测M3R拮抗剂对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响;钙成像观察M3R拮抗剂对卡巴胆碱诱导的内钙增加的影响;Western blot验证M3R拮抗剂对细胞增殖、迁移和细胞周期相关信号分子蛋白表达的影响。结果M3R拮抗剂1.25~80μmol·L~(-1)作用48 h后,能明显抑制NSCLC细胞增殖,抑制效果为R2-8018>达非那新(Darifenacin),H1299>H460;p-Akt、p-GSK3β、cyclin D1蛋白表达水平均随M3R拮抗剂作用时间延长明显下降,p21蛋白表达水平明显上调;R2-8018处理后,H1299细胞迁移和侵袭能力下降,MMP-2蛋白表达水平明显下降。结论拮抗M3R抑制Akt/GSK3β信号通路,抑制cyclin D1活性并上调p21,阻滞细胞周期进程,进而抑制细胞增殖;并通过下调MMP-2抑制H1299细胞的迁移和侵袭。     

姜黄素对细胞转录因子的调控作用研究进展

<正>转录因子是类蛋白质,它能够与DNA在启动子和增强子的区域相结合,起到调控下游基因表达的功能。转录因子能够被其他的蛋白分子激活或失活,经常是作为信号转导的最终步骤。真核生物的转录因子大多对转录进行正向调控,而仅有少数的转录因子是对转录过程起到负向的调控功能。     

石榴皮鞣质对前列腺癌细胞侵袭转移影响的研究

目的探讨石榴皮鞣质对人前列腺癌PC-3细胞侵袭转移的影响。方法以人前列腺癌PC-3细胞为靶细胞,通过划痕愈合实验检测石榴皮鞣质对体外培养的PC-3细胞运动能力的影响;采用Transwell小室实验(无基质胶)检测石榴皮鞣质对PC-3细胞运动能力的影响,采用Transwell小室实验(有基质胶)检测石榴皮鞣质对PC-3细胞侵袭能力的影响;采用裸鼠肺转移模型检测石榴皮鞣质对PC-3细胞体内侵袭能力的影响。结果划痕愈合实验结果显示,石榴皮鞣质能够抑制PC-3细胞的运动性,随着石榴皮鞣质浓度增加,其抑制PC-3细胞运动能力也逐渐增强,呈明显的浓度依赖性,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);Transwell小室实验(无基质胶)显示,石榴皮鞣质能够抑制PC-3细胞运动;与空白对照组相比,随着石榴皮鞣质浓度增加,其降低PC-3细胞运动性也逐渐增强(P<0.05);Transwell小室(有基质胶)侵袭实验显示,与空白对照组相比,含有不同浓度石榴皮鞣质的实验组中,PC-3细胞穿膜细胞数即抑制其侵袭性得到有效抑制,与空白对照组相比,随着药物浓度的增加,其抑制侵袭性能力也逐渐增强(P<0.05);此外,裸鼠肺转移模型结果显示,石榴皮鞣质能够抑制PC-3细胞的侵袭性;与空白对照组相比,随着石榴皮鞣质浓度增加,PC-3细胞形成的肺转移瘤减少(P<0.05)。结论石榴皮鞣质对人前列腺癌PC-3细胞侵袭转移具有抑制作用,能抑制前列腺癌的侵袭转移。     

姜黄素对压力超负荷兔心肌基质金属蛋白酶表达及胶原重构的作用

目的:观察姜黄素对慢性压力超负荷兔左室肌基质金属蛋白酶 2, 9 (MMP 2,MMP 9 )表达及胶原重构的影响,并探讨其机制。方法: 36只家兔随机分为假手术组、结扎组和姜黄素组,腹主动脉次全结扎制备压力超负荷家兔模型,姜黄素组给予姜黄素(100mg·kg-1·d-1 )的聚乙二醇溶液灌胃,假手术组、结扎组给予等量的聚乙二醇。术后12wk取兔心肌行VG染色及免疫组化染色,观察胶原容积百分比 (CVF)及MMP 2,MMP 9表达情况。结果: 假手术组、结扎组、姜黄素组MMP 2的表达灰度值分别是(68±s5), (153±12), (90±7),MMP 9分别是(64±6), (148±10), (86±6);含小血管的CVF分别是 ( 8. 1±0. 9 ) %, ( 17. 7±0. 6 ) %,(13. 0±0. 8) %。慢性压力超负荷下,兔心室肌MMP 2,MMP 9表达显著增强;姜黄素显著抑制MMP 2,MMP 9的表达,并降低CVF。结论:基质金属蛋白酶(MMPs)是促使慢性压力超负荷下心肌胶原重构的重要因素,姜黄素通过抑制MMPs能够改善胶原重构。     

苦参素对人前列腺癌PC-3细胞体外作用研究

目的探讨苦参素对人前列腺癌PC 3细胞的生长抑制作用及可能的作用机制。方法采用MTT法检测PC 3细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测PC 3细胞周期改变,免疫组化法检测PC 3细胞中Bcl 2和Bax的表达。结果随着苦参素浓度的增加和作用时间的延长,PC 3细胞生长抑制率呈明显上升趋势(P＜0.05)。随着苦参素浓度的增加,G0/G1期和S期PC 3细胞所占比例逐渐上升,而G2/M期所占比例逐渐下降,同时Bcl 2表达下调,而Bax表达上调。结论苦参素能通过诱导人前列腺癌PC 3细胞周期阻滞于G0/G1和S期,下调Bcl 2表达和上调Bax的表达抑制癌细胞的生长增殖。     

姜黄素对结肠癌HCT116细胞侵袭和抗失巢凋亡的影响

目的探讨姜黄素对结肠侵袭和失巢凋亡的影响。方法:应用姜黄素处理人结肠癌细胞系HCT116后,采用软琼脂集落培养试验检测锚着不依赖性增殖,采用Boyden小室模型试验检测癌细胞的侵袭性,采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测癌细胞失巢凋亡。结果:姜黄素可有效抑制结肠腺癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关。琼脂糖凝胶电泳和TUNEL结果显示,姜黄素可诱导结肠癌细胞失巢凋亡,且与浓度和时间相关。结论:姜黄素可抑制人结肠癌细胞侵袭,诱导失巢凋亡是其机制之一。     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的凋亡作用

目的研究葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的影响。方法将低、中、高剂量(分别为16、32和64μl/ml)的葡萄汁加入体外培养的人前列腺癌PC-3细胞,检测葡萄汁对PC-3细胞的毒性作用,用单细胞凝胶电泳测其对DNA损伤作用,流式细胞术测细胞凋亡,免疫组化法测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达。结果3种剂量的葡萄汁能抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖;DNA迁移长度与彗星细胞拖尾率逐渐增高,拖尾细胞率最高为71%;能诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡,细胞凋亡率分别是14.5%3、2.1%和40.5%,促凋亡基因Bax表达率分别是36.8%、50.4%和64.8%;抑凋亡基因Bcl-2表达率依次为39.1%、25.0%和12.4%。结论葡萄汁可抑制人前列腺癌PC-3细胞增长,诱导其细胞凋亡,能上调促凋亡基因Bax的表达,下调抑凋亡基因Bcl-2的表达。     

姜黄素对肝纤维化模型大鼠肝纤维化组织细胞因子的影响

目的 了解姜黄素对实验大鼠肝纤维化组织中的基质蛋白酶-13(MMP-13)和金属蛋白组织抑制因子-(TIMP-1)的干预. 方法将22只雄性SD大鼠随机分为正常组(n=7)、模型组(n=6)和治疗组(n=9). 模型组和治疗组用四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型,造模6周治疗组加用姜黄素,在10周末处死各组大鼠,取肝脏进行苏木精 伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色,运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MMP-13和TIMP-1的含量. 结果 HE染色病理分级明显,治疗组与其他两组比较,HE染色病理分级高于正常组,低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);而MMP-13mRNA的表达组间变化不大,但TIMP-1mRNA的含量在各组间差异有统计学意义(P<0.05),模型组和治疗组TIMP-1表达水平高于正常组,治疗组的TIMP-1mRNA表达与模型组比较明显下降(P<0.05). 结论 姜黄素有抗纤维化作用,其机制可能是通过抑制大鼠肝脏中TIMP-1mRNA表达,减少胶原在肝脏内沉积,从而逆转和阻遏纤维化形成.