葛根素对动脉粥样硬化兔平滑肌细胞核因子-κB表达的影响

目的:探讨葛根素对动脉粥样硬化(AS)兔主动脉血管平滑肌细胞(VSM C)核因子(NF)-κB表达的影响。方法:24只雄性日本大耳白兔,随机分为正常组、模型组、葛根素组。正常组饲喂普通饲料,模型组在普通饲料中加入1%胆固醇及0.02%蛋氨酸,葛根素组高脂饲料喂养的同时每天给予葛根素0.2g/kg。饲喂9周后,麻醉采血,取主动脉-80°C保存。测定各组兔血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(H DL-C);H E染色观察兔主动脉病理学改变;免疫组织化学检测兔主动脉NF-κB p65的表达。结果:与正常对照组比较,模型组TC、TG、LDL-C明显升高,H DL-C显著降低,差异有显著性或非常显著性意义(P0.01或P0.05);与模型组比较,葛根素组兔血清TC、TG、LDL-C明显降低,H DL-C显著升高,差异有显著性意义(P0.05)。病理检验结果显示葛根素组AS病变显著延缓;葛根素组兔主动脉平滑肌细胞NF-κB p65表达明显减少,与模型组比较差异有非常显著性意义(P0.01)。结论:葛根素可以改善血脂异常,抑制AS时血管壁慢性炎症反应。     

隔药饼灸对动脉粥样硬化兔主动脉内皮细胞NF-κB及ICAM-1 mRNA表达的影响

目的:观察隔药饼灸对动脉粥样硬化(AS)兔主动脉内皮细胞核因子-κB(NF-κB)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨隔药饼灸干预AS形成的作用机制。方法:将50只新西兰大耳白兔随机分为5组:空白组、模型组、直接灸组、隔药饼灸组、西药组,每组10只,除空白组外,其余4组通过高脂饲料喂养及免疫损伤法建立兔AS模型。分别用RT-PCR技术、荧光定量PCR技术检测兔主动脉内皮细胞NF-κB mRNA、ICAM-1 mRNA表达。结果:与空白组相比,模型组主动脉内皮细胞NF-κB mRNA、ICAM-1 mRNA表达差异具有统计学意义(P<0.01);与西药组相比,隔药饼灸组NF-κB mRNA、ICAM-1 mRNA表达差异无统计学意义;直接灸组NF-κBmRNA、ICAM-1 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:隔药饼灸和直接灸抗AS与其降低AS兔主动脉内皮细胞NF-κB mRNA、ICAM-1 mRNA表达有关,隔药饼灸作用优于直接灸。     

丹参酮ⅡA对AS病灶中内质网应激相关基因表达的研究

目的探讨丹参酮ⅡA在HCY诱导兔动脉粥样硬化病灶内质网应激相关基因表达的作用。方法复制兔AS模型,对照组饲喂普通饲料,高脂组在普通饲料中加入1%胆固醇及0.02%蛋氨酸。饲喂9周后,快速截取胸主动脉上段,组织原位杂交检测兔动脉粥样硬化(AS)病灶中内质网应激相关基因BIP的表达。结果组织原位杂交发现VSMC BIP基因在AS病变部位高表达,BIP基因参与AS病变。结论丹参酮ⅡA促进VSMC凋亡作用机制之一是放大内质网应激信号,BIP基因是其作用靶点之一。     

心痛泰对动脉粥样硬化兔主动脉NF-κB表达的影响

目的:观察心痛泰对动脉粥样硬化(AS)兔主动脉组织病理学改变和主动脉组织NF-κB表达的影响。方法:将120只新西兰大耳白兔随机分成6组,分别为正常对照组、模型组(均灌胃等体积0. 9%氯化钠注射液),心痛泰低、中、高剂量组(分别灌胃心痛泰2. 3g/kg、4. 6g/kg、9. 2g/kg),阿托伐他汀钙组(灌胃阿托伐他汀钙1. 1mg/kg),每组20只。通过高脂饲料喂养及免疫反应损伤法制备兔AS模型,造模的同时给予药物干预。8周后,光学显微镜观察兔主动脉组织病理学改变;采用Western bolt法分别检测兔主动脉组织细胞核及细胞浆中NF-κB的表达;采用RT-PCR法检测兔主动脉组织NF-κB m RNA的表达。结果:与模型组比较,各用药组主动脉内膜厚度变薄,内膜下泡沫细胞及炎性细胞的浸润均有不同程度的减轻,主动脉NF-κB核转位及NF-κB m RNA明显降低(P 0. 01或P 0. 05)。结论:心痛泰对AS兔主动脉组织有一定的保护作用,通过下调AS兔主动脉组织NF-κB核转位和NF-κB m RNA表达,抑制炎症反应,从而延缓动脉粥样硬化的形成。     

隔药饼灸对动脉粥样硬化兔主动脉内皮细胞NF-κ BmRNA及MMP-2mRNA、MMP-9mRNA的影响

目的观察隔药饼灸对动脉粥样硬化(artherosclerosis,AS)兔主动脉内皮细胞核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κ B)转录RNA及基质金属蛋白酶-2、9(matrix metalloproteinases,MMP-2、9)转录RNA的影响,探讨隔药饼灸对动脉粥样硬化(AS)形成的干预作用。方法将75只新西兰大耳白兔随机分为5组,即:空白组(空白对照组)15只;模型组(AS模型组)15只;直接灸组(AS模型+艾炷直接灸)15只;隔药饼灸组(AS模型+隔药饼灸)15只;西药组(AS模型+阿托伐他汀)15只。除空白组外,其余4组通过高脂饲料喂养及免疫损伤法建立兔AS模型。分别运用RT-PCR技术、原位杂交法检测兔主动脉内皮细胞NF-κ BmRNA、MMP-2、9mRNA的表达。结果直接灸、隔药饼灸和西药均能抑制动脉粥样硬化兔主动脉内皮细胞NF-κ BmRNA、MMP-2、9mRNA的表达(P0.01或P0.05);隔药饼灸和西药抑制作用明显优于直接灸(P0.01或P0.05)。结论隔药饼灸能够起到抗AS的作用,可能是通过抑制NF-κB的核结合活性,进而降低MMP-2、9的表达完成的。     

绞股蓝总甙对高脂诱导动脉粥样硬化大鼠炎性分子表达的影响

目的研究绞股蓝总甙(gyrenosides,GP)对高脂诱导动脉粥样硬化(AS)大鼠病变部位炎性因子表达的影响及可能机制。方法采用高脂饲料喂饲和腹腔注射维生素D3建立大鼠AS模型。60只雄性健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、GP 3个剂量组、辛伐他汀组。7周后处死大鼠,光镜下观察胸主动脉病理学改变;免疫组织化学染色法检测主动脉壁细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和核因子κB p65(NF-κB p65)的表达;ELISA法测定血清氧化型低密度脂蛋白水平(ox-LDL);比色法测定血清总抗氧化能力、硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛(MDA)水平。结果与模型组比较,GP各剂量组可减轻AS病变;下调主动脉壁ICAM-1、MCP-1和NF-κBp65的表达(P0.01);降低血清MDA、ox-LDL水平(P0.01),升高血清总抗氧化水平(P0.01)。结论GP可下调ICAM-1及MCP-1的表达、抑制实验性大鼠AS病变的形成,其机制可能与其抗氧化进而抑制NF-κB的激活有关。     

天香丹对动脉粥样硬化秽浊痰阻证 ApoE（－/－） 小鼠血清炎性细胞因子及NF-κB p65信号通路的影响

目的观察天香丹对动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）秽浊痰阻证载脂蛋白E基因敲除 ［apolipoprotein E gene knock-out,ApoE（－/－） ］ 小鼠血清中炎性细胞因子白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）以及主动脉组织中核因子-κB p65（NF-κB p65）信号通路的影响,探讨天香丹防治AS的可能机制。方法48只8周龄ApoE（－/－） 小鼠分为正常对照组（12只,给予普通饲料室温饲养）,高脂饲料复合气候箱干预组（36只）。喂养12周后,成功复制ApoE（－/－） 小鼠AS秽浊痰阻证模型后,分为3组：模型组、天香丹组、阿托伐他汀组。12周后处死各组小鼠,采用酶联免疫双抗夹心（ELISA）法检测血清中IL-1β和TNF-α含量;蛋白免疫印迹（Western blot）法检测主动脉组织中NF-κB p65蛋白表达水平。结果模型组IL-1β、TNF-α浓度高于正常对照组（P<0.01）,天香丹组、阿托伐他汀组IL-1β、TNF-α浓度低于模型组（P<0.01）;天香丹组与阿托伐他汀组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;此外,模型组主动脉组织中NF-κB p65蛋白磷酸化水平高于正常对照组（P<0.01）,天香丹组、阿托伐他汀组NF-κB p65蛋白磷酸化水平均低于模型组（P<0.01）;天香丹组与阿托伐他汀组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论天香丹能够防治AS,其机制可能与抑制NF-κB p65信号通路的活性,下调炎性细胞因子IL-1β、TNF-α表达水平,进而抑制炎症反应有关。     

大黄虫丸对动脉粥样硬化大鼠UPP/NF-κB信号通路的影响

目的观察泛素蛋白酶体UPP/NF-κB信号通路在动脉粥样硬化模型中的表达,并探讨大黄虫丸抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法采用高脂饲料喂养联合大剂量维生素D3腹腔注射复制大鼠动脉粥样硬化模型。随机分为:正常对照组,模型组、辛伐他汀组、大黄虫丸低剂量组、大黄虫丸高剂量组。12周后酶法检测血脂,放射免疫法检测TNF-α,采用免疫组化检测泛素蛋白Ub表达,RT-PCR检测UBE1mRNA、NF-κBmRNA及IκBmRNA表达变化。结果大黄虫丸高、低剂量组中泛素蛋白Ub的表达与模型组相比均有不同程度减弱(P0.01,P0.05);大黄虫丸高剂量组UBE1mRNA与NF-κBmRNA的表达均比模型组减弱(P0.01),IκBmRNA的表达明显增强(P0.05)。结论大黄虫丸通过抑制泛素蛋白Ub合成,下调主动脉泛素活化酶(E1)及NF-κBmRNA水平,上调IκBmRNA的表达,阻断UPP/NF-κB信号转导通路的活化,从而防治AS形成。     

基于NF-κB信号通路探讨散寒化痰方外敷对兔模型膝骨关节炎的影响

目的基于NF-κB信号通路探讨散寒化痰方外敷对兔模型膝骨关节炎的影响。方法以改良Hulth法制备兔KOA模型。将36只新西兰兔随机分为正常组、模型组、阳性对照组(扶他林软膏)及散寒化痰方低、中、高剂量组,每组6只,外敷给药6周。HE染色、MASSON染色法及电镜分别观察家兔膝关节软骨组织形态学及软骨细胞超微结构变化;ELISA法测兔血清IL-1β、TNF-α水平;Western blot及RT-PCR检测MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5、CollagenⅡ蛋白及mRNA表达;免疫组化法检测NF-κB p65入核表达。结果与正常组比较,模型组兔膝关节软骨细胞结构破坏严重;血清IL-1β、TNF-α水平上升(P0.01),MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5蛋白及mRNA表达上调(P0.05,P0.01),CollagenⅡ蛋白及mRNA表达下调(P0.01),NF-κB p65入核表达升高(P0.05)。与模型组比较,散寒化痰方各剂量组兔膝关节软骨细胞结构仅轻度损伤,血清IL-1β、TNF-α水平降低(P0.01),MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5蛋白及mRNA表达下调(P0.05,P0.01),NF-κB p65入核表达降低(P0.05,P0.01);散寒化痰方低、高剂量组兔膝关节软骨组织中CollagenⅡ蛋白及mRNA表达均上调(P0.05,P0.01)。结论散寒化痰方可能通过抑制膝关节软骨细胞NF-κB p65入核表达,阻止NF-κB信号通路激活,下调MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5及上调CollagenⅡ表达,抑制兔血清IL-1β、TNF-α水平升高,进而保护膝骨关节软组织,延缓KOA发生与发展。     

白芍总苷对动脉粥样硬化大鼠 TNF-α./P38MAPK/NF-κB/RBP4 信号通路及其血清IL-17，IL-27，IL-33 影响的研究

目的:观察白芍总苷(Total glucosides of paeony,TGP)对动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)大鼠TNF-α/P38MAPK/NF-κB/RBP4信号通路的影响及对血清中白细胞介素-17 (Interleukin-17,IL-17),白细胞介素-27 (Interleukin-27,IL-27),白细胞介素-33 (Interleukin-33,IL-33)的调节作用。方法:30只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组和TGP组,每组10只。除正常组外,模型组和TGP组大鼠均通过喂养高脂饲料结合腹腔注射维生素D3的方法建立大鼠AS模型,共12周,同时TGP组大鼠按照200 mg/(kg·d)剂量在造模过程中同步连续灌胃给药12周,正常组和模型组则同步给予等体积生理盐水。以上各组大鼠于建立模型第12周末处死,称取各组大鼠体质量及心脏组织质量计算心脏指数(Cardiac index,CI);HE染色观察各组大鼠主动脉形态结构病理学变化;采用ELISA试剂盒测定各组大鼠血清中IL-27、IL-17、IL-33的水平;采用蛋白印记法检测大鼠主动脉中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 Mitogen activated protein kinase,p38MAPK)、核因子κB (Nuclear factor kappa-B,NF-κB)、视黄醇结合蛋白4 (Retinol-binding protein 4,RBP4)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠的CI、主动脉HE染色病理评分、细胞因子水平(IL-27、IL-17、IL-33)以及TNF-α、p38MAPK、NF-κB、RBP4蛋白相对表达量均显著增加(P 0.05);与模型组比较,TGP组大鼠的CI、主动脉HE染色病理评分、细胞因子水平(IL-27、IL-17、IL-33)以及TNF-α、p38MAPK、NF-κB、RBP4蛋白相对表达量均显著降低(P 0.05)。结论:TGP对AS大鼠心脏具有显著的保护作用,可改善其主动脉粥样硬化程度,同时抑制TNF-α/P38MAPK/NF-κB/RBP4信号通路相关蛋白的表达,减少IL-17、IL-27及IL-33等炎症细胞因子的表达。     

芹菜素对动脉粥样硬化大鼠LOX-1和NF-κB表达的影响

目的探究芹菜素对动脉粥样硬化大鼠LOX-1和NF-κB表达的影响。方法构建大鼠动脉粥样硬化模型,SD大鼠随机分为正常组、模型组、芹菜素低、中、高剂量组(20、40、80 mg/kg),阳性对照组(辛伐他汀14 mg/kg)。HE染色法光镜观察大鼠主动脉组织病理改变,生化分析仪检测大鼠血脂(TC、TG、LDC-C、HDL-C)水平,qRT-PCR检测大鼠主动脉组织LOX-1 mRNA表达,Western blot检测大鼠主动脉组织NF-κB蛋白表达。结果与正常组比较,模型组TC、TG、LDC-C水平升高(P<0.01),HDL-C水平降低(P<0.01),LOX-1 mRNA、NF-κB p65蛋白表达增强(P<0.01)。加入不同剂量的芹菜素干预后,TC、TG、LDC-C水平降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平升高(P<0.05,P<0.01),LOX-1 mRNA、NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论芹菜素对动脉粥样硬化大鼠有改善作用,其分子机制可能与抑制LOX-1、NF-κB表达有关。     

黄杞总黄酮对2型糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠主动脉损伤的保护作用

目的探讨黄杞总黄酮对2型糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠主动脉损伤的保护作用。方法高脂饲料结合腹腔注射N-硝基-L-精氨酸甲酯(5 mg/kg)诱导GK大鼠动脉粥样硬化后,将其随机分为5组,模型组,二甲双胍组,阿托伐他汀组,黄杞总黄酮高、低剂量组,以Wistar大鼠为正常对照组。各组(除模型组和正常对照组外)大鼠分别灌胃给予二甲双胍(150 mg/kg)、阿托伐他汀(10 mg/kg)、黄杞总黄酮(500、250 mg/kg),持续8周,检测空腹血糖、HDL、LDL、TG、TC水平。然后,离体主动脉环灌流法评价黄杞总黄酮对离体胸主动脉舒缩功能的影响,HE染色、Masson染色观察主动脉病理变化,Real-time PCR法检测主动脉NF-κB p65、ICAM-1 mRNA表达。结果黄杞总黄酮降低空腹血糖、LDL、TG、TC水平,抑制去甲肾上腺素介导的主动脉收缩,改善主动脉损伤,下调NF-κB p65、ICAM-1 mRNA表达,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论黄杞总黄酮可通过抑制主动脉收缩和NF-κB信号通路、降低炎性因子表达来对2型糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠主动脉损伤起到保护作用。     

"清心通脉饮"对动脉粥样硬化兔模型相关炎症因子的影响研究

目的:观察清心通脉饮对动脉粥样硬化(AS)兔模型的治疗作用,并探索其可能的机制。方法:新西兰兔采用股动脉球囊扩张术建立AS模型,造模成功后随机分为模型组、阿托伐他汀组和清心通脉饮低、中、高剂量[3.33,6.66,13.32g/(kg·d)]组,每组10只,另取10只兔作为正常组。各组均灌胃给予相应药物或生理盐水,每日1次,连续4周。末次给药后麻醉采血,全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,酶联免疫吸附测定(Elisa)法检测血清C反应蛋白(CRP)、白介素-1(IL-1)、干扰素-β(IFN-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。取腹主动脉,苏木精-伊红染色法(HE)观察腹主动脉病理学变化,蛋白免疫印迹法(WB)检测腹主动脉组织中p38丝裂原活化蛋白酶(p38MAPK)、核转录因子kappaBp65(NF-κBp65)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、调节蛋白激酶(ERK)蛋白及磷酸化p38MAPK、NF-κBp65、JNK、ERK(p-p38MAPK、p-NF-κBp65、p-JNK、p-ERK)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组兔血脂水平和TNF-α、IL-1、CRP、IFN-β含量均显著升高(P0.01),腹主动脉p-p38MAPK、p-NF-κB、p-JNK、p-ERK蛋白表达明显升高(P0.01)。与模型组比较,清心通脉饮中、高剂量组和阿托伐他汀组血清TC、TG、LDL-C水平明显降低(P0.01,P0.05);清心通脉饮高剂量组和阿托伐他汀组HDL-C水平明显升高(P0.01,P0.05);清心通脉饮各剂量组和阿托伐他汀组TNF-α、IL-1、CRP、IFN-β含量明显降低(P0.01),腹主动脉p-p38MAPK、p-NF-κBp65、p-JNK、p-ERK蛋白表达明显降低(P0.01,P0.05)。模型组腹主动脉内膜破坏,结缔组织增生,泡沫细胞形成,纤维斑块钙化,坏死;清心通脉饮高剂量组和阿托伐他汀组动脉壁规整,平滑,未见明显脂质沉积,动脉内皮增生不明显。结论:清心通脉饮可改善动脉粥样硬化进展,其治疗动脉粥样硬化的机制可能与调节血脂代谢,下调p-p38MAPK、p-NF-κBp65、p-JNk、p-ERK蛋白表达,抑制炎症反应,降低炎症因子的表达有关。     

肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NF-κB/TNF-α信号通路表达的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NF-κB/TNF-α信号通路表达的影响,探讨其改善慢性肾功能衰竭微炎症状态、延缓慢性肾脏病进展的作用机制。方法采用5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除法制作慢性肾功能衰竭动物模型。实验大鼠随机分为模型组、西药对照组、肾衰Ⅱ号方组,每组14只,另设假手术组14只,各给药组给予相应药物。测定大鼠血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(CCr),采用Western blot测定磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)p65、NF-κB p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达,RT-PCR测定TNF-αm RNA表达。结果与假手术组比较,模型组SCr、BUN水平明显升高,CCr明显降低(P0.01),左肾质量/体质量明显增加(P0.05),肾脏皮质、髓质p-NF-κB p65、NF-κB p65及TNF-α表达均明显升高(P0.01);与模型组比较,肾衰Ⅱ号方组、西药对照组SCr、BUN水平明显降低(P0.05,P0.01),CCr明显升高(P0.01),左肾质量/体质量明显降低(P0.05),肾衰Ⅱ号方组在改善肾功能方面优于西药对照组(P0.05);肾衰Ⅱ号方组、西药对照组肾脏皮质、髓质p-NF-κB p65、NF-κB p65及TNF-α表达均明显降低(P0.01),肾衰Ⅱ号方组下调NF-κB/TNF-α信号通路表达作用优于西药对照组(P0.01)。结论肾衰Ⅱ号方可能通过下调NF-κB/TNF-α信号通路的表达,改善慢性肾功能衰竭微炎症状态,减轻肾间质纤维化,达到延缓肾功能减退的作用。     

小柴胡汤对CFA大鼠滑膜组织NF-κB信号通路作用的探讨

目的:观察小柴胡汤治疗后弗氏完全佐剂(CFA)大鼠滑膜组织核转录因子(NF)-κB信号通路中肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域(TARDD),NF-κB抑制蛋白α(IκBα),IκB激酶-α(IKKα),NF-κB p65蛋白的表达。方法:将SPF级健康成年雌性Wistar大鼠应用弗氏完全佐剂和牛Ⅱ型胶原制备CFA动物模型。根据随机数字表,将大鼠随机分为正常组、模型组、小柴胡汤低、中、高剂量组、雷公藤多苷组。各组于造模后7 d开始灌胃给药,正常组及模型组均予注射用水,小柴胡汤低、中、高剂量组(5. 94,11. 88,23. 76 g·kg~(-1)),雷公藤多苷片(0. 006 3 g·kg~(-1)),分别2 mL/次,每天3次灌胃,连续给药28 d后观察实验大鼠踝关节组织病理学及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB信号通路中TARDD,IKKα,IκBα,NF-κB p65蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠右后踝关节组织病理评分显著增加(P 0. 01),NF-κB信号通路中TARDD,IKKα,IκBα,NF-κB p65蛋白表达显著增高(P 0. 01)。与模型组比较,随着小柴胡汤剂量的增加,实验大鼠右后踝关节组织病理评分显著减少(P 0. 01),在大鼠踝关节组织标本NF-κB信号通路中TARDD,IKKα,IκBα,NF-κB p65关键蛋白的表达上,小柴胡汤低剂量组蛋白表达明显减低(P 0. 05),而小柴胡汤中剂量组、小柴胡汤高剂量组、雷公藤多苷组蛋白表达显著减低(P 0. 01)。结论:研究显示小柴胡汤随着剂量的增加,可以有效地改善滑膜炎症,抑制NF-κB炎症信号通路中关键蛋白的表达,从而阻止炎症而抑制骨侵蚀。     

痰瘀同治方含药血清对ox-LDL损伤人脐静脉内皮细胞 NF-κB和ICAM-1表达的影响

目的:观察痰瘀同治方含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)核因子-κB(NF-κB)的活化和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨痰瘀同治方抗动脉粥样硬化的分子机制.方法:SD大鼠随机分为正常组,痰瘀同治方低、中、高剂量组( 24,48,72 g·kg-1·d-1)和辛伐他汀组(18 mg·kg-1·d-1),制备含药血清.体外培养HUVECs,实验分为6组:①正常组;②模型组;③痰瘀同治方低剂量组;④痰瘀同治方中剂量组;⑤痰瘀同治方高剂量组;⑥辛伐他汀组.其中①、②组用20％正常鼠血清,③～⑥组用20％各组含药血清,除正常组外其余各组加入100 mg·L-1 ox-LDL刺激3h或24 h后进行各项指标测定.Real-time PCR法检测HUVECs NF-κB p65和ICAM-1mRNA表达,Western blotting检测ICAM-1蛋白表达,细胞免疫荧光法检测NF-κB p65核移位变化.结果:HUVECs经ox-LDL刺激后NF-κB p65和ICAM-1的表达与正常组比较均明显升高(P＜0.01).痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清能显著降低NF-κB p65 mRNA表达及抑制其核移位(P＜0.05),降低ICAM-1 mRNA和蛋白表达(P＜0.05),其中以辛伐他汀和痰瘀同治方大剂量含药血清作用尤为显著(P＜0.01).结论:痰瘀同治方能够通过抑制血管内皮细胞NF-κB通路,降低ICAM-1表达,进而减少炎症反应,这可能是其抗动脉粥样硬化分子机制之一.     

地奥心血康对动脉粥样硬化大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的调节作用

观察地奥心血康对动脉粥样硬化大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。将60只SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,阿托伐他汀组(4.0 mg·kg~(-1)),地奥心血康组(100,30,10 mg·kg~(-1)),每组10只。采用高脂饲料加维生素D_2复制动脉粥样硬化模型,第9周灌胃给药,连续8周。生化分析仪检测血脂TG,TC,LDL-C,HDL-C水平;ELISA法检测血清TNF-α,IL-6,IL-1β水平;主动脉苏丹Ⅳ和HE染色进行病理形态学观察;RT-PCR和Western blot法检测主动脉组织TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA和蛋白表达。结果显示,与模型组比较,阿托伐他汀组和地奥心血康高、中剂量组血清TC,TG,LDL-C含量显著降低,HDL-C含量显著升高,血清TNF-α,IL-6,IL-1β水平显著下降。阿托伐他汀组和地奥心血康组主动脉病变明显改善,主动脉TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA和蛋白表达均下降。地奥心血康对大鼠动脉粥样硬化具有防治作用,其作用机制可能是通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号转导,减轻炎症反应,从而抑制动脉粥样硬化进程。     

补肾清肝中药配伍对间歇性低氧诱导人脐静脉内皮细胞损伤模型p38MAPK/NF-κB信号通路的干预效应研究

研究补肾清肝中药配伍对间歇性低氧致人脐静脉内皮细胞损伤模型p38MAPK/NF-κB信号通路的干预效应。实验采用改良的间歇性低氧诱导人脐静脉内皮细胞建立体外细胞损伤模型,以补肾清肝中药有效成分配伍(异钩藤碱、桃叶珊瑚苷及川芎嗪)作为干预药物,首先进行中药最优配伍浓度体外筛选,然后选择最优配伍浓度作为干预剂量,观察其对模型p38MAPK/NF-κB信号通路的干预效应。结果显示异钩藤碱、桃叶珊瑚苷及川芎嗪在0.01 mg·L~(-1)时具有最佳的体外抗炎效应。间歇性低氧组NF-κB p65入核量及p-IκB较对照组与其他各组均显著增加,同时免疫荧光染色NF-κB p65可见间歇性低氧组出现明显NF-κB p65核移位表现,内皮细胞黏附程度明显增加;与间歇性低氧组相比,p38MAPK抑制剂组及补肾清肝中药配伍组p-p38MAPK,NF-κB p65入核量及p-IκB表达量均明显较少,内皮细胞黏附明显被抑制。该研究表明,补肾清肝中药最优浓度配伍通过将抑制p38MAPK的磷酸化作为起始,继而阻断了NF-κB的核移位行为,抑制其转录功能,实现对间歇性低氧诱导血管内皮细胞损伤模型的保护效应。     

复方甘草酸苷对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体介导的NF-κB信号通路的影响

目的:探讨复方甘草酸苷对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体介导的NF-κB信号通路的影响。方法:健康SD大鼠49只取10只作为正常对照组(A组),其余39只大鼠采用TNBS/乙醇联合建模法制备溃疡性结肠炎大鼠模型,39只大鼠再随机平分为模型对照组(B组),柳氮磺吡啶组(C组)、复方甘草酸苷组(D组),分别给予生理盐水、柳氮磺吡啶与复方甘草酸苷干预处理。结果:肉眼与病理学观察发现大鼠溃疡性结肠炎模型造模成功。复方甘草酸苷组的血清TLR4与NF-κB p65表达量明显低于模型对照组,与柳氮磺吡啶组及正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。正常对照组的NF-κB p65与TLR4蛋白阳性表达率明显低于模型对照组,与柳氮磺吡啶组与复方甘草酸苷组对比无明显差异(P0.05)。Pearson相关分析显示NF-κB p65与TLR4在溃疡性结肠炎模型中的表达呈正相关关系(P0.05)。结论:Toll样受体介导的核因子-κB信号通路在溃疡性结肠炎的发生发展中起重要作用,复方甘草酸苷可阻断该通路中TLR与NF-κB p65的表达,进而为临床用药提供理论依据。