蛋白质组学在卵巢癌生物标志物筛选中的应用

基因的功能主要是通过其表达的蛋白质来实现的，因此以蛋白质为研究对象的蛋白质组学在生命科学研究中有重要的地位。近年来，应用蛋白质组学技术分析卵巢癌的发生、发展过程中蛋白表达谱的变化，为寻找卵巢癌特异性标志物并探讨其发病机制带来了新的希望，并已取得了一定的进展，该文就此进行简要综述。     

用裸鼠移植瘤为模型筛选和鉴定卵巢癌血清标志物

[目的]探索以浆液性囊腺癌细胞系SK-OV-3裸鼠移植瘤为模型筛选人类卵巢癌血清标志物的可行性.[方法]建立人卵巢癌细胞SK-OV-3的裸鼠移植瘤模型,收集血清,采用蛋白质芯片-飞行时闻质谱技术(Surface-en-hanced later desorption/ionization-time of flight,SELDI-TOF-MS),比较荷瘤鼠和正常对照小鼠血清蛋白谱表达差异,以发现与卵巢癌发生发展相关的标志物或分子. [结果]通过SELDI蛋白芯片分析发现:在分子量3 000-20 000 Da范围内,与正常对照小鼠和荷人肝癌小鼠相比,卵巢癌小鼠血清中有10个蛋白质分子明显上调,13个明显下调.经数据库检索(Aldenta软件,http://expasy.com)并结合文献综合分析,初步鉴定了8个可能的蛋白质,分别为:急性反应蛋白(Serum amyloid A2和Serum amyloid A3,简称为SAA2和SAA3),在卵巢癌血清中表达上调;趋化因子(CXCL12,CXCL14).在卵巢癌血清中表达上调;细胞因子(IL-7),在卵巢癌血清中表达下调;免疫调节分子(denfensin beta),在卵巢癌血清中表达下调. [结论]本研究表明以裸鼠移植瘤为模型,应用蛋白质组学方法来筛选人类肿瘤标志物是可行的.     

表达蛋白质组学技术及其在食管癌研究中的进展

蛋白质组学研究包括两种相互补充的策略。一种策略是表达蛋白质组学,观察某种细胞或组织中蛋白质的整体表达,并分析不同情况下表达图谱的变化;另一种策略是细胞图谱蛋白质组学,旨在定义蛋白质间的相互作用,以建立细胞内信号转     

蛋白质组学在妇产科领域里的应用

生物体在生长、发育、疾病等不同时期其蛋白质表达不同。蛋白质组学技术为研究蛋白质表达、蛋白质与蛋白质之间相互作用、修饰提供了可能。     

蛋白质组学在妇产科领域里的应用

生物体在生长、发育、疾病等不同时期其蛋白质表达不同。蛋白质组学技术为研究蛋白质表达、蛋白质与蛋白质之间相互作用、修饰提供了可能。     

蛋白质组学技术及在肿瘤研究中的应用

蛋白质组学作为后基因组阶段的主要研究领域,其理论和技术取得了较大的进展,在生物医学研究领域中逐步得到广泛的应用。肿瘤在发生发展过程中,由于多种基因变化而最终导致蛋白质的结构、表达和功能发生改变。利用蛋白质组学技术可以全面动态地分析肿瘤相关蛋白质的表达变化和作用机制,为进一步阐明肿瘤的发病机制,寻找肿瘤特异性标记物、判断预后、开发新的抗肿瘤药物提供依据。     

甲苯职业接触者血清蛋白质谱差异的研究

目的研究甲苯接触工人与健康人群蛋白质图谱差异。方法收集甲苯接触工人(6例)和健康人群(6例)的血清,采用蛋白质组学非标记Label free质谱分析技术进行蛋白鉴定和定量,对甲苯接触组与健康对照组样本差异表达的蛋白质进行分析,应用生物信息学工具分析筛选到的蛋白质功能及其参与生物过程。结果蛋白质组学结果显示甲苯接触工人组与健康对照组之间差异表达超过2倍以上有39个蛋白,其中24个在甲苯接触工人组血清中表达上调,15个蛋白质在甲苯接触工人组表达下调。筛选到的这些蛋白质主要涉及信号转导、丝氨酸内肽酶活力、炎性反应、蛋白修饰、应激反应、凝血反应等过程。结论差异表达的蛋白质为甲苯接触人群的健康评估和早期疾病诊断提供了潜在蛋白标志物,有助于对甲苯早期中毒的分子机制的理解。     

蛋白质组学技术在临床医学中的应用

蛋白质组学(proteomics)是一门新兴以研究蛋白质为主要对象的科学,目的是认识细胞内全部表达蛋白。目前应用的技术主要有蛋白质组学分离技术和蛋白质组学鉴定技术和生物信息分析技术。本文主要介绍了蛋白质组学在常见人类肿瘤诊断中的应用。     

080 蛋白质组学技术及其在高原医学中的应用

在后基因组时代,蛋白质组学的研究越来越受到关注.蛋白质组是指一种细胞、组织或有机体所表达的全部蛋白质;蛋白质组学研究技术方法主要包括双向电泳、质谱技术、蛋白质芯片技术、蛋白质复合物纯化技术、酵母双杂交系统、噬菌体显示技术、表面等离子体共振技术和生物信息学.本文对蛋白质组和蛋白质组学的概念及研究技术方法以及近年来蛋白质组学技术在高原医学领域的应用作了简要综述.     

蛋白质组学及其在脑科学研究中的应用

蛋白质组（proteome）是指细胞或组织所表达的全部蛋白质的集合体，而蛋白质组学（proteomics）则是指研究蛋白质组的科学。2001年人类基因组计划的顺利完成，标志着后基因组时代的到来，转录组学、蛋白质组学以及代谢组学蓬勃发展。但是，蛋白质才是生物体执行功能的直接载体，使得蛋白质组学的研究尤显重要。而脑在解剖、组织、细胞以及分子水平的复杂性，为利用蛋白质组学的高通量、高效率分析技术提供了良好的切入点。     

卵巢癌的诊治进展

卵巢癌的早期诊断除了经典的肿瘤标记物癌抗原125(cancer antigen 125,CA_125)及经阴道超声(transvaginal ultrasonography,TVS)以外,新型标志物人附睾蛋白4(human epididymis protein4,HE_4)及蛋白质组学对监测卵巢癌的发病、治疗效果、临床转归及复发等几个方面都有很好的临床意义。卵巢癌的初始治疗手术的规范性和彻底性,以及手术与化疗的合理配合至关重要。早期卵巢癌要进行全面的分期手术,必要时应该在化疗开始前进行再分期手术。晚期卵巢癌要尽量做到满意的肿瘤细胞减灭术,并要适时合理配合新辅助化疗。经过早期诊断和规范治疗,卵巢癌的生存率得到了明显上升,但较高的复发率及死亡率仍是妇科肿瘤医师不容忽视的问题。     

TLR4和TLR9在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)和TLR9在卵巢癌组织中的表达及其临床意义,为卵巢癌的临床诊疗及作用机制阐释提供参考依据.方法 选取卵巢癌手术患者60例、因子宫或者卵巢良性病变而行手术治疗的患者30例,采用免疫组化(SP)法检测卵巢癌病灶及癌旁组织、正常卵巢组织中TLR4、TLR9蛋白的表达,采用逆转录聚合酶链反...     

上皮性卵巢癌中P73蛋白、P21~(WAF1/CIP1)蛋白、PCNA蛋白的表达及其相关性

目的:探讨上皮性卵巢癌中P73蛋白、P21WAF1/CIP1蛋白与PCNA蛋白的表达及其相关性,为卵巢癌的临床诊断及治疗包括基因治疗提供实验依据。方法:采用Eli Visionplus免疫组化研究40例上皮性卵巢癌组织、15例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤组织、7例交界性上皮性卵巢肿瘤组织中P73蛋白、P21WAF1/CIP1蛋白与PCNA蛋白的表达。结果:随着上皮性卵巢癌病理学分级及临床分期增高,①P73蛋白表达率增高,差异有统计学意义(P0.05);但不同病理类型之间差异无统计学意义,在良性上皮性卵巢肿瘤与上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P0.05);②P21WAF1/CIP1蛋白表达率降低,差异有统计学意义(P0.05);但不同病理类型之间无统计学差异,在良性上皮性卵巢肿瘤与上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P0.05);③PCNA蛋白表达率增高,差异有统计学意义(P0.05);但不同病理类型之间无统计学差异,在良性上皮性卵巢肿瘤与上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P0.05)。结论:①P73蛋白、PCNA蛋白表达在上皮性卵巢癌中阳性率升高,并随恶性程度增高而增高。②P21WAF1/CIP1蛋白表达在上皮性卵巢癌中阳性率降低,并随恶性程度增高而降低,与P73蛋白表达呈负相关。     

卵巢上皮性癌组织中WWOX蛋白的表达

目的:探讨卵巢上皮性癌组织中WWOX蛋白的表达。方法:应用免疫组化SP法,检测39例卵巢上皮性癌、7例卵巢交界性上皮性肿瘤、10例卵巢良性上皮性肿瘤及15例正常卵巢组织中WWOX蛋白的表达情况。结果:卵巢上皮性癌组织中WWOX蛋白的表达阳性率64.10%,明显低于正常卵巢组织100%、卵巢良性上皮性肿瘤100%及卵巢交界性上皮性肿瘤85.71%(P0.01),但卵巢交界性上皮性肿瘤与正常卵巢组织及卵巢良性上皮性肿瘤比较,差异无统计学意义(P0.05)。WWOX蛋白表达阳性率随卵巢上皮性癌临床分期的增加而降低(P0.05)。结论:WWOX蛋白在卵巢上皮性癌组织中低表达,其表达水平与肿瘤的进展密切相关。     

Survivin和Caspase-3在卵巢上皮性癌中的表达

目的:探讨Survivin和Caspase-3在上皮性卵巢癌发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法,检测Survivin蛋白和Caspase-3蛋白在100例上皮性卵巢肿瘤中的表达。结果:①Survivin蛋白和Caspase-3蛋白在良恶性两组上皮性卵巢肿瘤中阳性表达率差异有显著性(P<0.05);②Survivin蛋白与恶性上皮性卵巢肿瘤的病理分级、临床分期有关(P<0.05),而与组织学类型无关(P>0.05),Caspase-3蛋白与恶性上皮性卵巢肿瘤的病理分级、临床分期及组织学类型均无关(P>0.05);③Survivin与Caspase-3两种蛋白在恶性上皮性卵巢肿瘤中的表达呈负相关关系。结论:①Survivin可能参与了上皮性卵巢癌的发生、发展过程,可成为具有潜在价值的肿瘤标志物。②Caspase-3可能在上皮性卵巢癌发生过程中起重要作用。③Survivin可能通过直接或间接抑制Caspase-3的活性阻断细胞凋亡过程从而导致上皮性卵巢癌的发生、发展。     

骨形成蛋白-2在卵巢癌组织中的表达检测及其对卵巢癌细胞增殖影响的研究

目的:探讨骨形成蛋白-2(BMP-2)在卵巢癌上皮性癌(EOC)中的表达检测及对卵巢癌细胞增殖影响的研究。方法:选择该院2007年4月~2010年7月收治的98例卵巢癌患者,提取患者肿瘤细胞后,采用SABC免疫组化方法和RT-PCR技术,检测卵巢上皮性肿瘤和正常卵巢组织中BMP-2蛋白及其mRNA的表达,分析其与卵巢癌细胞增殖及癌细胞组织分级之间的关系。结果:BMP-2蛋白在卵巢癌细胞组织中的阳性表达率为79.59%(78/98),与正常卵巢组织中的阳性表达率30.43%(7/23)比较有统计学差异(P<0.01);BMP-2蛋白与mRNA在卵巢癌组织高级别组(Ⅲ级、Ⅳ级)中的表达显著性高于低级别组(Ⅰ级,Ⅱ级),表明了随着癌细胞级别的升高,BMP-2的表达也逐渐增强。结论:BMP-2的表达对卵巢上皮性癌细胞增殖具有抑制的作用,同时BMP-2蛋白及其mRNA的异常表达可能与卵巢癌的恶性程度相关,因此可以作为检测肿瘤的一个标志物在临床中应用。     

卵巢癌患者血清、腹水上清中VEGF表达及在卵巢癌诊断中的意义

目的:通过检测卵巢癌患者血清、腹水上清中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平,探讨其在卵巢癌诊断中的意义。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定卵巢癌患者血清和腹水上清中VEGF蛋白的表达水平,并与结核及良性卵巢肿瘤血清和腹水中VEGF的表达情况进行比较。结果:卵巢癌性腹水上清中VEGF蛋白浓度高于血清(P<0.05);卵巢癌患者血清和腹水上清中VEGF蛋白浓度分别高于良性卵巢肿瘤和正常对照组患者(P<0.05);卵巢癌患者腹水上清中VEGF水平高于结核性腹水上清(P<0.05)。血清CA125在卵巢癌诊断中的灵敏度和特异度分别为83.9%和90.9%,血清VEGF的灵敏度为90.6%,特异度为39.3%;腹水VEGF的灵敏度和特异度分别为77.3%和93.9%。三者联合检测时,卵巢癌诊断的灵敏度提高至96.5%,特异度提高至93.9%。结论:检测血清和腹水上清中VEGF水平,在卵巢良恶性肿瘤的鉴别诊断中有参考价值;在卵巢癌与盆腹腔结核的鉴别诊断中,VEGF有着特殊的意义,可以弥补CA125在这方面的不足;对于卵巢癌疑似病例,进行包括VEGF在内的多因子联合检测,卵巢癌诊断的灵敏度和特异度均明显提高。     

卵巢上皮性肿瘤的临床病理特征及其KLK7蛋白的相关性研究

目的:研究KLK7蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及与肿瘤的临床病理特征的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测50份卵巢上皮性癌,20份卵巢交界性肿瘤,10份卵巢良性肿瘤,10份正常卵巢组织中KLK7蛋白的表达,并分析其临床意义。结果:KLK7蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率(68.0%)明显高于交界性肿瘤,良性肿瘤及正常卵巢组织(分别为30.0%,20.0%,10.0%,P<0.05),在卵巢癌组织中,KLK7蛋白阳性表达率与手术病理分期,病理分级,淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:KLK7基因可能通过KLK7蛋白促进肿瘤的生长,浸润与转移,临床可以通过检测KLK7蛋白的表达率推断肿瘤的预后,选择治疗方案。     

GATA3在上皮性卵巢癌中的表达及其意义

目的:探讨GATA3在上皮性卵巢癌组织中的表达及其意义。方法:应用RT-PCR和Western Blotting检测30例上皮性卵巢癌标本和18例正常卵巢组织中GATA3 mRNA及蛋白水平表达情况,应用免疫组化检测肿瘤组织和正常卵巢组织中GATA3蛋白定位及表达情况。结果:RT-PCR提示上皮性卵巢癌组织中GATA3 mRNA表达升高,在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的阳性表达率分别为90.0%和44.4%,差异有统计学意义(P<0.05);Western Blotting和免疫组化提示卵巢癌组织中GATA3在蛋白水平的表达明显降低,正常卵巢组织中定位在细胞核内,而卵巢癌组织中细胞核内表达不明显。结论:卵巢癌组织中GATA3在基因水平表达较正常卵巢组织上调,其翻译的蛋白表达却降低,可能是GATA3 mRNA合成的蛋白大多由核内转移而出,从而促进肿瘤的发生与发展,为进一步探讨上皮性卵巢癌的发病机理提供了实验依据。     

飞行时间质谱技术筛查卵巢癌患者血清特异性蛋白的研究

目的:应用飞行时间质谱技术筛选卵巢癌患者与正常人血清中差异性蛋白,为卵巢癌的早期诊断提供理论依据。方法:应用弱阳离子芯片(WCX2)及表面增强激光解析电离飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测30例正常人(对照组)和30例卵巢癌患者(实验组)血清中蛋白质的含量,并作比较。结果:对照组与实验组在2 000～30 000 Da间质荷比为3 812.556 Da与7 237.904 Da的2个蛋白峰差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SELDI-TOF-MS技术对卵巢癌早期诊断和特异性肿瘤标记物的筛选等方面具有一定价值。