甲醛暴露对哮喘大鼠气道反应性及肺组织病理学改变影响

目的 探讨甲醛暴露对哮喘大鼠气道反应性及肺组织病理学改变的影响.方法 选择Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只.A组为正常对照组,B组为哮喘模型组.C和D组分别为甲醛低、高质量浓度(12.5、25.0mg/m<'3>)哮喘组.每只大鼠染毒结束1周后处死,测量每只大鼠的气道阻力30 min的变化,观察肺组织病理形态学变化,测定血清中白细胞介素(IL)-13和免疫球蛋白(Ig)E的水平.结果 ①B、C、D组大鼠的气道阻力、血清IgE、IL-13水平均明显高于A组(P<0.01),C、D组大鼠的气道阻力、血清IgE、IL-13水平均较B组明显升高(P<0.01);②D组比C组气道阻力,血清IL-13、IgE水平均明显升高(P<0.01);③肺组织病理切片中C、D组管壁周围均出现大量炎性细胞浸润,以中性粒细胞、淋巴细胞为主;可见上皮细胞绒毛倒伏、粘连、脱落;杯状细胞大量增生,基底膜明显增厚等改变.结论 吸入甲醛可加重哮喘大鼠气道阻力和气道炎症反应.     

乙酰半胱氨酸对肥胖哮喘小鼠气道炎症和重建的作用

目的探讨乙酰半胱氨酸对哮喘气道炎症和重建的影响。方法60只雌性C57／6J小鼠按随机数字表法分为哮喘组（A组）,肥胖哮喘组（B组）,治疗组（C组）,对照组（D组）,每组15只。经腹腔注射与雾化吸入卵蛋白（OVA）制作慢性哮喘模型,高脂饮食制造肥胖模型。计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及分类,ELISA法测定肺组织匀浆中IL-6和8-异前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）水平,肺组织切片观察各组小鼠病理变化,并测定气管壁面积（WAt）、气管平滑肌面积（WAm）、管腔基底膜周长（Pbm）。结果,A组、B组小鼠BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞比例、肺组织IL-6水以及病理切片中气管壁厚度（WAt／Pbm）、气管平滑肌厚度（WAm／Pbm）均较D组明显增加,且B组IL-6和WAt／Pbm较A组进一步增加（P〈0．05）。C组小鼠BALF中白细胞总数、IL-6和WAt／Pbm均较B组明显下降（P〈0．05）。四组小鼠肺组织匀浆8-iso—PGF2α水平按D组、C组、A组、B组依次升高,各组差异有统计学意义（F=101．8,P〈0．01）。Pearson相关分析表明,8-iso—PGF2α水平与肺组织IL-6水平和WAt／Pbm和呈正相关（r=0．817、0．737,P〈0．01）。结论乙酰半胱氨酸能够通过抑制氧化应激反应,抑制哮喘小鼠的气道炎症和气道重建。     

平喘益肺合剂对哮喘气道重塑大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的探讨平喘益肺合剂对哮喘大鼠气道重塑和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响及可能的作用机制。方法选取40只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)、地塞米松组(C组)、平喘益肺合剂组(D组),每组各10只。用卵白蛋白致敏吸入激发制备哮喘模型。在哮喘激发4周后测量肺组织α-SMA mRNA和气道壁Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果 B组α-SMA mRNA、Ⅲ型胶原表达明显高于A组(P0.05);C组和D组α-SMA mRNA、Ⅲ型胶原表达显著低于B组(P0.05)。结论平喘益肺合剂通过降低α-SMA mRNA的过度表达,抑制Ⅲ型胶原的沉积,减轻气道重塑的发生。     

格列苯脲和尼可地尔对哮喘大鼠BALF中IL-4/IFN-γ表达及气道重塑的作用

目的：观察钾离子通道开放剂尼可地尔和阻滞剂格列苯脲对哮喘大鼠肺泡盥洗液（BALF）中IL-4/IFN-γ的影响以及对气道重塑的作用。方法：SD雄性大鼠50只,随机分为正常对照组、哮喘模型组、尼可地尔组、地塞米松组和格列苯脲组。采用卵清蛋白（OVA）致敏复制大鼠哮喘模型,模型成功后取相关组织分别进行图像分析测定各组支气管壁各层的厚度、ELISA检测肺泡盥洗液（BALF）中IL-4/IFN-γ表达情况。结果：哮喘模型组和格列苯脲组支气管平滑肌明显增厚（P〈0.05）,有典型的气道重塑表现,尼可地尔组和地塞米松组无明显增厚;尼可地尔组和地塞米松组IL-4表达低于哮喘模型组和格列苯脲组,IFN-γ表达高于哮喘模型组和格列苯脲组（P〈0.05）。结论：尼可地尔通过开放KATP通道,能够明显改善哮喘大鼠气道炎症和抑制哮喘大鼠气道重塑的形成,其可能机制与IL-4表达降低,同时IFN-γ表达升高有关。     

二氧化硫暴露对哮喘大鼠速发相反应影响

目的 探讨二氧化硫(SO2)暴露对哮喘大鼠速发相反应的影响.方法 选择Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,每组各10只;A组为正常对照组,B组为哮喘模型组,C组为SO2低质量浓度(15 mg/m3)哮喘组,D组为SO2高质量浓度(30 mg/m3)哮喘组.每只大鼠染毒结束1周后处死,测量每只大鼠的气道阻力30 min的变化,观察肺组织病理形态学变化,采用酶联免疫吸附试验法测定血清中白细胞介素(IL)-13和IgE的水平.结果 ①B组大鼠的气道阻力明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.01),C、D组大鼠的气道阻力较B组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);②B组大鼠血清中IL-13和IgE的水平较A组明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),C、D组大鼠血清中IL-13和IgE的水平与B组比较差异无统计学意义(P>0.05);③肺组织病理切片实验组大鼠支气管上皮细胞部分脱落或全部脱落,大量的嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润,也出现单核细胞的浸润,杯状细胞大量增生,并充填上皮细胞的位置,有大量的黏液分泌,可见黏液栓,基底膜出现纤维化.结论 SO2可加重哮喘大鼠气道高反应性和肺部变态炎症反应.     

阿奇霉素对支气管哮喘小鼠气道重构及转化生长因子-β1表达的影响

目的 观察阿奇霉素对哮喘小鼠气道重构指标、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）表达的影响,探讨阿奇霉素对哮喘小鼠气道重构的影响.方法 30只雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、阿奇霉素治疗组（C组）,每组各10只,复制哮喘模型后收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,行白细胞（TOT）,嗜酸性粒细胞（EOS）计数;医学图像分析软件观测支气管总管壁面积（Wat）、内壁面积（Wai）、平滑肌面积（Wam）;SABC免疫组化法检测肺组织TGF-β1的表达.结果 B组BALF中嗜酸性粒细胞明显高于其他组（8.12±0.54 vs 0.70±0.40,8.12±0.54 vs 0.87±0.25,P＜0.01）;C组气道Wat、Wai、Wam均较B组减轻（10.15±0.95 vs 15.36±0.85,4.16±0.32 vs 10.64±1.03,3.77±0.15 vs 7.97±0.17,P＜0.01）,但较A组加重;B组TGF-β1（168.58±21.71 vs 130.47±18.22 vs 126.30±16.15）表达最强,C组减弱,A组微弱;TGF-β1的表达与EOS%（r=0.840,P＜0.01）、Wat（r=0.735,P＜0.01）、Wam（r=0.870,P＜0.01）呈正相关.结论 阿奇霉素可抑制哮喘小鼠气道重构,可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现的.     

哮喘豚鼠气道中血管内皮细胞生长因子和内皮抑素动态变化对气道重塑的影响

目的探讨哮喘豚鼠气道中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和内皮抑素（ES）动态变化对气道重塑的作用。方法将40只豚鼠随机分为正常对照组（C组）、生理盐水组（N组）、哮喘3d组（A1组）、哮喘7d组（A2组）和哮喘21d组（A3组），8只／组。C组豚鼠不行任何处理。N组分别于1d和8d腹腔注射生理盐水2ml，15d开始用37℃生理盐水雾化吸入，1次／d，3～5min／次，共3d；A1、A2和A3组用卵蛋白（OVA）10mg、氢氧化铝20mg制成2ml悬液代替生理盐水作腹腔注射，用1％OVA代替生理盐水分别水雾化吸入3d、7d和21d，其他方法同N组。末次激发24h后麻醉行支气管肺泡灌洗，收集支气管肺泡灌洗液（BALF）用酶联免疫（ELISA）法测VEGF和ES浓度。用图像分析仪测定气道内周径（Pi），外周径（Pe），并计算管壁面积（WA），气道平滑肌面积（SMC—A），气道平滑肌细胞数（N），且WA、SMC—A、N均用Pi进行标准化。结果哮喘豚鼠随病程延长，WA／Pi、SMC-A／Pi、N／Pi和气道中VEGF浓度进行性升高，与C组和N组比较，哮喘各组中SMC-A／Pi、N／Pi和VEGF浓度差异有统计学意义，A，和A，组中WA／Pi差异有统计学意义。哮喘豚鼠气道中VEGF浓度与wA／H呈正相关（r=0．51，P〈0．05），VEGF／ES与WA／Pi呈正相关（r=0．78，P〈0．01）。结论VEGF／ES平衡失调可能在哮喘豚鼠气道重塑起重要作用。     

柴朴汤下调哮喘大鼠血管内皮生长因子表达抑制气道的重塑

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)在慢性哮喘大鼠中的表达水平及柴朴汤的干预作用,探讨柴朴汤在气道重塑中的作用。方法以卵清白蛋白致敏及反复激发建立大鼠慢性哮喘模型,常规切片观察气管内管壁厚度及气道平滑肌厚度。免疫组化及逆转录-聚合酶链方法检测肺内VEGF蛋白和mRNA的表达。结果慢性哮喘模型组大鼠气管内壁及气道平滑肌增厚,肺组织VEGFmRNA、VEGF蛋白的表达增高(P<0.01)。结论VEGF参与了慢性哮喘大鼠的气道重塑。柴朴汤能够抑制气道重塑。     

IL-32及TNF-α在哮喘小鼠肺组织中的表达及布地奈德的干预作用

目的:探讨哮喘小鼠发病过程中白细胞介素32(IL-32)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在肺内表达的变化及布地奈德的干预作用。方法:将30只健康雌性BALB/c小鼠随机分为3组:卵蛋白(OVA)致敏并激发的哮喘模型组(A组),OVA致敏、激发并予布地奈德吸入治疗组(B组)及正常对照组(C组),每组10只。观察卵蛋白激发及布地奈德干预后哮喘小鼠气道的病理变化;免疫组织化学染色观察IL-32及TNF-α表达的变化。结果:IL-32及TNF-α在对照组中呈低表达,在哮喘组中表达明显增加,使用布地奈德干预后,IL-32及TNF-α的表达明显降低(P<0.05),且二者表达量均与气道壁厚度呈正相关(r=0.716,P<0.05;r=0.459,P<0.05)。结论:IL-32及TNF-α可能参与了哮喘小鼠气道重塑过程,布地奈德干预改善哮喘小鼠的气道重塑可能与降低IL-32及TNF-α的表达有关。     

实验性哮喘气道细胞DNA合成和气道重塑研究

【目的】　观察重复过敏原吸入刺激致敏的大鼠气道细胞DNA合成和气道壁结构的改变 ,并探讨气道重塑反应发生的机制。　【方法】　应用SD大鼠建立哮喘模型 ,采用双标免疫组化技术和计算机图像分析系统对气道细胞的DNA合成和气道重塑进行研究。　【结果】　①模型组气道平滑肌细胞和上皮细胞的DNA合成Brdu阳性计数明显高于正常对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ;②模型组气道平滑肌细胞和上皮细胞DNA合成Brdu阳性计数和气道直径呈高度正相关 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,正常对照组无明显相关性 (P >0 .0 1,P >0 .0 5 ) ;③模型组上皮层厚度明显大于正常对照组 (P <0 .0 1) ,平滑肌层厚度、气道直径和α 平滑肌肌动蛋白阳性区面积和正常对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。　【结论】　变态反应性炎症所致的微环境改变可以导致气道细胞DNA合成增加以及细胞增生 ,可能是导致气道重塑反应发生的主要机制     

血管紧张素Ⅱ和转化生长因子在哮喘大鼠发病中的作用及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对其影响

【目的】探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)与转化生长因子(TGF-β1)在哮喘大鼠发病中的作用,及血管紧张素受体拮抗剂(AT1)对其影响。【方法】SD清洁级大鼠40只,随机分为正常对照组(A)、卵蛋白(OVA)激发3d组(B)、OVA激发2周组(C)、OVA激发4周组(D)、OVA激发4周后AT1干预组(E)。观察各组大鼠气道结构的病理变化,OVA不同时间激发后,TGF-β1、AngⅡ在哮喘大鼠气道中的表达变化和意义及AT1对其的影响。【结果】哮喘大鼠气道随着OVA激发时间的增加而逐渐发生纤维化,AT1干预后气道纤维化有改善;AngⅡ、TGF-β1表达随OVA激发时间的延长而持续增加。应用AT1后,AngⅡ、TGF-β1表达明显低于D组(P<0.05)。【结论】①AngⅡ、TGF-β1随着气道重塑的病理改变,表达逐渐增加,说明二者对哮喘大鼠的气道重塑有促进作用;②AT1可改善气道重塑过程,可能是通过抑制气道AngⅡ、TGF-β1表达水平达到抗纤维化的作用。     

AnnexinⅠ N末端肽对哮喘大鼠肺泡灌洗液PGD2、IL-5水平及肺功能检测气道反应性的研究

目的:通过对哮喘大鼠肺泡灌洗液(BALF)中PGD2、IL-5水平及肺功能的检测,探讨Annexin Ⅰ的N-末端肽段Ac2-26在W istar大鼠哮喘模型气道炎症中的作用。方法:清洁级雌性Wiatar大鼠40只随机分为4组,分别为正常对照组(A组),哮喘组(B组),地塞米松治疗组(C组)和Ac2-26治疗组(D组),以卵清蛋白复制大鼠哮喘模型,ELISA法检测肺泡灌洗液中PGD2、IL-5含量,乙酰甲胆碱(MCH)诱发气道高反应性。结果:B组大鼠BALF中PGD2以及IL-5水平均明显高于A组(P<0.01)。C组和D组大鼠BALF中PGD2和IL-5水平均明显低于B组(P<0.01)。C组和D组比较也具有统计学意义。结论:本实验在成功地建立哮喘动物模型基础上,观察到了AC2-26治疗组在改善气道炎症反应作用中较地塞米松治疗组弱,抗炎作用还有待于研究。     

亚氨乙基赖氨酸拮抗噪声损伤豚鼠听力的实验研究

目的　探讨亚氨乙基赖氨酸对豚鼠噪声性损伤的拮抗作用。方法　选健康白色红目豚鼠 4 0只 ,随机分为 4组 :A组为正常对照组 ,B组为噪声组 ,C组为噪声 +药物组 ,D组为亚氨乙基赖氨酸组。B、C组豚鼠暴露于 115dB白噪声连续 6d ,每天连续 6h ;C组豚鼠每天腹腔注射亚氨乙基赖氨酸 10mg/kg ,B组豚鼠腹腔注射等量的生理盐水 ,D组豚鼠每天腹腔注射亚氨乙基赖氨酸 10mg/kg,并不暴露于噪声。各组豚鼠在实验前、后均行ABR听阈检测。用免疫组化方法检测诱生型一氧化氮合成酶 (NOSⅡ )在各组豚鼠耳蜗的表达。各组豚鼠耳蜗行扫描电镜检查。观察比较各组豚鼠ABR听阈、NOSⅡ染色强弱及耳蜗形态。结果　实验前 ,A、B、C、D各组间ABR听阈的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。实验后 ,A组、D组ABR听阈无明显改变 ,而B组和C组ABR听阈则有明显改变 ,B组ABR听阈为 (6 0 .2 3± 11.2 3)dB ,C组为 (38.4 6± 7.2 4 )dB ,两组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。NOSⅡ在A、D组耳蜗表达阴性 ,B组耳蜗表达较强 ,C组耳蜗表达较弱。B组豚鼠耳蜗外毛细胞损伤较C组重。结论　NOSⅡ在噪声所致豚鼠耳蜗损伤中呈阳性表达 ,亚氨乙基赖氨酸能抑制NOSⅡ的活力 ,且对噪声所致豚鼠耳蜗损伤有拮抗作用 ,表明一氧化氮在噪声性聋的发病中起重要作用。     

雷公藤甲素对变应性鼻炎大鼠模型Th2类细胞因子和血管细胞黏附分子-1的影响

目的探讨雷公藤甲素（Triptolide,TP）对变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）大鼠模型Th2类细胞因子及血管细胞黏附分子（VCAM-1）的作用机制。方法60只健康sD大鼠随机分为3组,参照安云芳造模方法建立AR大鼠模型,A组[卵清蛋白（OVA）致敏组],B组（TP处理组）和C组（生理盐水SC处理组）分别用TP和SC在激发前30min,腹腔注射和鼻腔滴入。对各组鼻黏膜组织切片分别行HE染色,进行病理观察;用免疫组化技术观察鼻黏膜组织中白细胞介素-5（IL-5）、IL-13和VCAM-1的表达情况。结果A组：大鼠鼻黏膜肿胀增厚,腺腔及小血管腔扩张,杯状细胞增多;在黏膜及黏膜下层,小血管及腺体周围,有大量炎性细胞浸润。B组：炎症表现较轻;C组无明显炎症表现。鼻黏膜组织中IL-5、IL-13、VCAM-1的表达,B组与其他2组比较,差异均有统计学意义,P〈0．05。结论TP对OVA致敏的变应性鼻炎大鼠模型症状有明显的控制效果。11P可显著抑制变应性鼻炎大鼠模型鼻黏膜组织中IL-5、IL-13和VCAM-1的表达。     

丹参注射液抑制哮喘大鼠肺IL-13和嗜酸性粒细胞趋化因子表达

目的 探讨丹参注射液抑制哮喘气道变应性炎症的分子机制.方法 30只SD大鼠随机分成正常对照组,哮喘组,丹参组,每组10只.HE染色行肺组织病理学检查,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,应用免疫组化SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织中白细胞介素-13(IL-13)和嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)表达.结果病理组织学显示:丹参组较哮喘组肺组织炎性细胞浸润明显减少.丹参组BALF细胞总数及淋巴细胞(Lym)、中性粒细胞(Neu)和嗜酸性粒细胞(Eos)百分率较哮喘组明显减少(P<0.05,P<0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).哮喘组肺组织IL-13和Eotaxin表达较正常对照组明显增加(P<0.05),丹参组IL-13和Eotaxin表达较哮喘组明显减少(P<0.05).IL-13和Eotaxin表达呈正相关(r=0.90,P<0.01).结论 丹参注射液可减轻哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与降低哮喘大鼠肺内IL-13和Eotaxin表达有关.     

淫羊藿苷对哮喘模型大鼠氧化应激的影响

目的探讨淫羊藿苷对哮喘模型大鼠氧化应激的影响。方法选取SPF级健康雌性Wistar大鼠40只,采用随机数字表法分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、布地奈德组(C组)及淫羊藿苷组(D组)。建立哮喘大鼠模型,于末次雾化激发后对模型大鼠进行气道灌洗,随后取出右肺组织,使用ELISA法检测氧化因子ROS、MDA及SOD的表达,RT-PCR方法检测Nrf2 m RNA的表达。结果与B组比较,D组和C组均可有效降低哮喘模型大鼠BALF中白细胞计数及其氧化因子ROS、MDA表达,同时提升哮喘模型大鼠Nrf2 m RNA的表达,均具有显著差异(P0.05),但D组和C组比较无明显差异(P0.05)。结论淫羊藿苷可减轻哮喘模型大鼠气道炎症反应,并改善其氧化应激水平,对哮喘具有较好的调控作用。     

糖皮质激素受体β在肥胖哮喘大鼠气道平滑肌中的表达

目的观察糖皮质激素受体β在肥胖哮喘大鼠气道平滑肌中的表达情况,探讨肥胖哮喘易发生激素抵抗的可能机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为正常体重组和肥胖组,正常体重组进一步分为正常体重对照组(A组)和正常体重哮喘组(B组),肥胖组进一步分为肥胖对照组(C组)和肥胖哮喘组(D组)。正常体重组大鼠给于基础饲料,肥胖组大鼠给于高能饲料,B、D两组鸡卵蛋白(OVA)多次腹腔注射和反复雾化激发以建立哮喘模型,A、C组以生理盐水代替OVA。末次激发后24h处死大鼠,体外原代培养大鼠ASMC,Western-blot法检测各组GRβ蛋白表达。结果 Western blot检测显示:B、C两组细胞GRβ蛋白表达量(分别为0.40±0.02,0.37±0.05)均较A组蛋白表达量(0.17±0.03)明显增加(均P<0.05),均较D组蛋白表达量(0.48±0.02)明显减弱(均P<0.05),而B、C两组蛋白表达量之间无明显差异(P>0.05)。结论肥胖哮喘大鼠较正常体重大鼠ASMCGRβ的表达明显升高,其可能是肥胖哮喘易发生激素抵抗的作用机制之一。     

反复肺炎合并支气管哮喘患儿自三烯E4和自三烯B4水平及临床意义

目的测定反复肺炎合并支气管哮喘患儿尿白三烯E2（leukotrieneE4,LTE4）和血清白三烯B4（leukotriene B4,LTB4）水平,探讨LTE4、LTB4在反复肺炎和支气管哮喘之间的关系。方法收集30例反复肺炎合并支气管哮喘患儿（A组）、21例反复肺炎不伴有支气管哮喘患儿（B组）以及22例健康对照者的尿液以及血清。处理后进行血细胞计数和分类,应用酶联免疫吸附法检测尿LTE4和血清LTB4、白细胞介素-8（interleukin-8,IL-8）水平,并分析LTE4与LTB4、IL-8、中性粒细胞之间以及LTB4与LTE4、IL-8、中性粒细胞之间的相关性。结果①尿LTE4表达水平,A组为（385±43）pg／ml,B组为（232±66）Pg／ml,均显著高于健康对照组（153±51）pg／ml（P〈0．05）,而且A组水平显著高于B组水平（P〈0．05）。②血清LTB4表达水平,A组为（151±28）pg／ml,B组为（86±32）pg／ml,均显著高于健康对照组（65±25）pg／ml（P〈0．05）,而且A组水平显著高于B组水平（P〈0．05）。③血清IL-8表达水平,A组为（124±13）pg／ml,B组为（85±13）pg／ml,均显著高于健康对照组（56±25）pg／ml（P〈0．05）,而且A组水平显著高于B组水平（P〈0．05）。④血中性粒细胞比例表达水平,A组为0．58±0．07,B组为0．52±0．04,均显著高于健康对照组0．28±0．08（P〈0．05）,而且A组水平显著高于B组水平（P〈0．05）。⑤尿LTE。表达水平与血清LTB4、IL-8、中性粒细胞比例表达水平呈正相关（P〈0．05）。血清LTB4表达水平也与尿LTE4、血清IL-8、中性粒细胞比例表达水平呈正相关（P〈0．05）。结论LTB4和LTE4在反复肺炎和支气管哮喘之间扮演着桥梁的角色,降低LTB4和LTE4水平或许可以切断两者之间的恶性循环。     

柴朴汤对气道上皮细胞表达TGF-β1的调控作用

目的观察柴朴汤调控气道上皮细胞表达转化生长因子-β1(transfoming growth factor-β1,TGF-β1)的影响,探讨柴朴汤治疗哮喘的分子机制。方法在2012年12月—2014年1月选取健康雄性SD大鼠进行实验,将大鼠气道上皮细胞均匀等量接种于6孔板上,大鼠气道上皮细胞共分6组:正常血清组(A组),柴朴汤高剂量血清组+哮喘血清组(B组)、柴朴汤中剂量血清组+哮喘血清组(C组)、柴朴汤低剂量血清组+哮喘血清组(D组)、生理盐水血清组+哮喘血清组(E组)、哮喘血清组(F组)。以免疫组织化学法(免疫组化)检测TGF-β1蛋白在气道上皮细胞中的表达。以半定量RT-PCR检测TGF-β1 m RNA的表达。组间差异显著性检验用F检验,两两比较用t检验,P0.05为差异有统计学意义。结果 A组TGF-β1蛋白阳性颗粒的平均光密度(average optical density,AOD)值最低,为(0.25±0.08),B、C、D、E、F组TGF-β1蛋白的AOD值分别为(0.40±0.10)、(0.49±0.06)、(0.60±0.06)、(0.65±0.11)、(0.67±0.12),AOD值依次增高,A组与其余各组比较差异均有统计学意义(均P0.05);B、C组比较差异无统计学意义(P0.05),B、C组与D、E、F组分别比较差异均有统计学意义(均P0.05),D、E、F组相互比较差异均无统计学意义(均P0.05)。TGF-β1 m RNA在A组中表达最低,为(0.47±0.05),B、C、D、E、F组分别为(0.58±0.05)、(0.59±0.04)、(0.66±0.04)、(0.67±0.06)、(0.68±0.06),表达逐渐增加,A组与其余各组比较差异均有统计学意义(均P0.05);B、C组相互比较,差异无统计学意义(P0.05);D、E、F三组相互比较差异均无统计学意义(均P0.05),B、C组与D、E、F组比较差异均有统计学意义(均P0.05)。结论哮喘血清刺激气道上皮细胞后使TGF-β1表达上调,而柴朴汤可调控气道上皮细胞TGF-β1表达。     

细胞因子IL-12在哮喘小鼠发病机制中的作用

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)在哮喘小鼠发病机制中的作用及对气道炎症的影响。方法 65只小鼠随机分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、重组白细胞介素-12(rm IL-12)组(C组)和IL-12基因敲除组(D组),以卵白蛋白(OVA)致敏和激发制备哮喘模型。C组在每次激发前30 min给予rm IL-12腹腔注射,D组在激发前1 d给小鼠植入含有抗IL-12多克隆抗体的缓释泵,A组小鼠在末次激发后24 h处死,其余三组小鼠在末次激发后的1 d、2 d、4 d、7 d分别处死。摘眼球取血进行血浆一氧化氮(NO)和免疫球蛋白E(Ig E)的检测。收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测其上清中白细胞介素-10(IL-10)、IL-12、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。离心后的细胞沉淀行白细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)分类计数;剪下结扎右肺下叶用于HE染色。结果(1)细胞计数:小鼠BALF中的细胞总数和EOS百分比,B组明显高于A组(P0.05),C组明显低于B组(P0.05),D组较B组明显升高(P0.05)。(2)ELISA检测:与A组相比,B组小鼠BALF中IL-10、IL-12水平明显降低(P0.05),TNF-α、NO、Ig E水平明显升高(P0.05)。与B组相比,C组小鼠BALF中IL-10、IL-12水平明显升高,TNF-α、NO、Ig E水平明显降低;D组小鼠TNF-α、NO、Ig E水平明显升高,IL-10、IL-12水平明显降低;于1 d、2 d、4 d、7 d差异均有统计学意义(P0.05)。(3)肺组织病理改变:A组小鼠HE染色未见异常;B组小鼠肺泡间隔及小血管周围可见大量炎性细胞浸润;C组小鼠的炎性细胞浸润较B组缓解;D组小鼠部分可见小气道管腔完全闭塞,炎性细胞浸润较B组明显加重。结论 rm IL-12能够明显抑制哮喘小鼠炎症细胞的浸润,同时降低炎症因子TNF-α、NO和Ig E的表达,促进抑炎因子IL-10的表达,从而在哮喘发病过程中起到保护作用。