人参皂苷Rg1对急性心肌梗死后VEGF和HIF-1α的作用

目的研究人参皂苷Rg1，对急性心肌梗死（AMI）后血管新生的影响及其作用机制。方法建立Wistar大鼠急性心肌梗死模型，104只大鼠分为假手术组、急性心肌梗死对照组、人参皂苷Rg1低剂量治疗组（1mg／kg）和高剂量治疗组（5mg／kg），于术后3、7、10、14天测定梗死区微血管密度，RT-PCR法检测梗死区心肌组织血管内皮生长因子（VEGF）和缺氧诱导因子1α（HIF-1α）mRNA，免疫组化法检测VFGF在梗死区内的表达。结果梗死区的血管生成数量稳定持续的增加，治疗组显著高于对照组（P〈0．01）；心肌梗死后VEGF、HIF-1α mRNA表达随缺血时间的延长（3、7、10天组）有增高趋势，治疗组明显升高（P〈0．01），14天时VEGF的增长出现停止或下降，而HIF-1α继续升高；假手术组VEGF表达明显低于各手术组。结论严重缺血可刺激心肌组织产生大量的VEGF、HIF-1α，其对缺血心肌起保护作用，人参皂苷Rg1可通过增加其表达而刺激心肌梗死区的血管生成和侧支循环建立。     

人参皂甙Rg3促进同系小鼠外周血干细胞移植后免疫恢复研究

目的研究人参皂甙Rg3对小鼠外周血干细胞移植（PBSCT）后免疫恢复的促进作用。方法首先建立PBSCT小鼠模型，然后将90只接受移植的小鼠随机分成6组，分别从移植后第15天起腹腔注射不同剂量Rg3、IL-2及生理盐水。淋巴细胞转化实验观察T淋巴细胞功能的恢复；抗体形成实验（溶血素分光光度法）观察B淋巴细胞功能的恢复；杀伤实验观察NK细胞的功能恢复；流式细胞计数观察T亚群、B和NK细胞的恢复。结果9mg／kg＋IL-2联合治疗组显现出了良好的协同免疫增强作用，对细胞及体液免疫恢复的促进作用明显好于其他实验组及盐水组。NK细胞的恢复，各实验组之间无明显差异，但都要好于盐水组。结论人参皂甙Rg3与IL-2联合应用可明显加快移植后小鼠的免疫恢复过程，具有显著的免疫增强作用。两者的联合治疗要明显好于IL-2或Rg3单药治疗效果。     

泛素-结核抗原融合基因DNA疫苗诱导的小鼠细胞免疫应答

目的 构建结核杆菌Ag85A抗原DNA疫苗(pA)和泛素基因与Ag85A抗原基因融合的DNA疫苗(pUA),观察疫苗在小鼠中的免疫应答.方法 将构建的DNA疫苗pA和pUA分别肌肉注射免疫BALB/c雌性小鼠,检测小鼠的血清抗体(IgG、IgG1、IgG2a)、细胞因子(IFN-γ、IL-4)和细胞毒性T淋巴细胞反应,比较融合基因DNA疫苗和单基因DNA疫苗诱导的免疫应答的强度.结果 pA组小鼠血清IgG水平高于pUA组(P＜0.01),但IgG2a/IgG1比值(4.16±0.20)低于pUA组(7.88±0.30)(P＜0.01).与pA组比较,pUA组小鼠IFN-γ分泌水平增高(P＜0.01),IL-4分泌水平下降(P＜0.01);pUA组的CTL活性高于pA组.结论 融合的DNA疫苗pUA诱生的抗原特异的体液免疫应答不及单基因DNA疫苗pA,但其能诱导更强的细胞免疫应答.提示泛素-Ag85A融合基因DNA疫苗对于防治结核病比单基因DNA疫苗更为有效.     

老年冠心病患者免疫功能探讨

目的：探讨老年人免疫功能改变与冠心病的关系。方法：选择老年冠心病68例（冠心病组）及健康对照组34例,分别检测T淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋,免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,补体C3、C4,抗氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）抗体、可溶性白细胞介素-2受体（sIL-2R）,超敏C反应蛋白（hs-CRP）,肿瘤坏死因数-α（TNF-α）。结果：冠心病组活化T淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋比例、CD4＋／CD8＋比值均显著低于对照组（P〈0．01）;观察组sIL-2R水平显著高于对照组（P〈0．01）;观察组IgG、IgA、IgM含量、补体C3、C4水平、抗ox-LDL抗体、hs-CRP、TNF-α水平均显著高于对照组（P〈0．01）。结论：免疫炎症指标可作为冠心病临床监测的辅助参考。     

热休克蛋白65增强小鼠对HBV DNA 疫苗免疫反应的研究

目的:观察热休克蛋白65的真核表达载体(pHSP65)对HBV DNA疫苗诱导BALB/c小鼠(H-2d)免疫应答的调节作用。方法:肌内注射空载体pcDNA3,HBV DNA疫苗加HSP65佐剂(pHBVS2S pHSP65)或不加佐剂(pHBVS2S);ELISA法测定血清抗HBs抗体;ELISPOT检测分泌IFN-γ的脾淋巴细胞;4 h51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTLs活性。结果:HBV DNA佐剂组免疫小鼠抗HBsAg抗体滴度虽高于不加佐剂组,但无显著性差异;其IgG1/IgG2 a的比例不同于多肽免疫组,二者分别为0.395与10。佐剂组小鼠分泌IFN-γ的脾淋巴细胞量是不加佐剂组的2~3倍。CTLs细胞杀伤活性(E∶T=100)佐剂组与不加佐剂组分别为:(53.68±7.5)%、(42.81±7.7)%,差异显著(P<0.05)。结论:HBV DNA疫苗具有较强的免疫原性,能够诱导机体产生特异性的抗体及CTLs反应;HSP65佐剂能够有效提高小鼠对DNA疫苗的细胞免疫应答,有望成为DNA疫苗的免疫佐剂。     

人参总皂甙抗动脉动脉粥样硬化作用的实验研究

目的：探索人参总皂甙对大鼠降血脂作用。方法：建立大鼠高脂模型,采用人参总皂苷（高、中、低剂量）进行治疗,测定血清中TG、TC、HDL-c、LDL-c、NO、NOS及血清、肝组织中SOD,GSH-Px活性。结果：（1）与正常对照组相比,人参总皂甙中剂量和低剂量组TG、TC均明显升高（P〈0.05）;各人参总皂甙组TG明显低于模型组（P〈0.05）;人参总皂甙高、中剂量组TC明显低于模型组（P〈0.01）。各剂量组NO水平和NOS活性与正常对照组和模型组大鼠相比均有一定差异（P〈0.05）;②人参总皂甙中、低剂量组大鼠血清SOD、GSH-Px活性均低于正常对照组（P〈0.01）;人参总皂甙高剂量组SOD、GSH活性与模型组差异显著（P〈0.01）。人参总皂甙各剂量组大鼠肝组织中SOD、GSH-Px的活性均低于正常对照组（P〈0.05）高于模型组（P〈0.01）。结论：人参皂甙能明显降低高胆固醇血症大鼠血清TG、TC、HDL-c,表明人参皂甙具有阻滞动脉粥样硬化发生与发展的作用,而且人参总皂甙还能增加高血脂大鼠血中GSH-Px含量、增强SOD活性,使冠状动脉病变分级及动脉粥样硬化病变发生率降低。     

人参皂苷Rg1对小鼠学习记忆环节的影响

目的考察人参皂苷Rg1对小鼠学习记忆环节的影响。方法分别以戊巴比妥钠(500 mg·kg^-1)、亚硝酸钠(120 mg·kg^-1)、30%乙醇(10 ml·kg^-1)将昆明种小鼠造成记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍模型,给予人参皂苷Rg1(100mg·kg^-1),采用Morris水迷宫考察其对上述模型小鼠学习记忆的影响。结果人参皂苷Rg1对模型小鼠的学习记忆获得障碍、巩固障碍和再现障碍均有显著的改善作用。结论人参皂苷Rg1改善学习记忆的机理是同时作用于获得、巩固和再现3个环节。     

剂量和佐剂对丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗免疫效果的影响

目的研究几种佐剂对不同剂量丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗免疫效果的影响.方法小鼠分别用脂质体溴化二甲基双＋烷基铵/卵黄卵磷脂和氢氧化铝为佐剂的丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗免疫3次,用酶联免疫斑点测定方法观察脾淋巴细胞受丙型肝炎病毒蛋白抗原刺激后细胞因子的产生情况.结果溴化二甲基双＋烷基铵/卵黄卵磷脂组产生γ-干扰素和白细胞介素-4较多,用核心、E2或E1/E2刺激,显著高于裸脱氧核糖核酸和氢氧化铝组（P〈0.05）.以氢氧化铝为佐剂,用每种脱氧核糖核酸100 μg剂量免疫的小鼠,在受抗原刺激后,其脾淋巴细胞产生白细胞介素-4的能力显著高于相应的裸脱氧核糖核酸组（P＜0.05）.在多数情况下,接受每种脱氧核糖核酸100 μg剂量的小鼠产生γ-干扰素和白细胞介素-4的能力显著高于接种每种50 μg者 （P〈0.05）;与裸脱氧核糖核酸组及溴化二甲基双＋烷基铵/卵黄卵磷脂组比较,氢氧化铝组小鼠淋巴细胞产生的白细胞介素-4多于γ-干扰素.结论溴化二甲基双＋烷基铵/卵黄卵磷脂对丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗有很强的免疫佐剂效应,为Ⅰ型辅助性T细胞佐剂,氢氧化铝是Ⅱ型辅助性T细胞佐剂,可将脱氧核糖核酸疫苗Ⅰ型辅助性T细胞为主的免疫特性转换为以Ⅱ型辅助性T细胞为主,50 μg的丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸疫苗似乎不能诱导小鼠产生有效的免疫反应.     

人参皂苷Rg1对MPTP致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元保护作用研究

目的研究人参皂苷Rg1（GinsenosideRg1,Rg1）对1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetra—hydropyrldine,MPTP）致帕金森病小鼠黑质（substantla nigra,SN）多巴胺（dopamine,DA）能神经元变性的保护作用及其可能机制。方法C57BL6小鼠随机分为对照组（NS,ip）、MPTP组（30mg·kg^-1×5d,ip）及Rg,（5mg·kg^-1×8d,ip）预处理组。应用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）、免疫组织化学染色等技术观察了SN Caspase-3mRNA、Bcl-2 mRNA、Bax mRNA、酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）mRNA的表达水平和黑质致密带（substantia nigra zona compacta,SNzc）TH免疫反应阳性细胞数量等多项指标的变化,用高效液相色谱法检测小鼠纹状体（stfiatum,Str）内DA及其代谢物二羟基苯乙酸（dihydroxyphenylaceti cacid,DOPAC）和高香草酸（homovanillic acid,HVA）含量。结果MPTP组SN内TH阳性细胞数量、Str内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量明显减少,应用Rg1后可逆转上述改变（P〈0．01）。MPTP组SN Bcl-2、THmRNA的表达明显降低（P〈0．01）;Caspase-3、Bax mRNA的表达明显增加（P〈0．01）。应用Rg1后可逆转上述改变（P〈0．05）。结论Rg1对MPTP致帕金森病小鼠SNDA能神经元具有明显的保护作用,其机制可能与抗凋亡过程有关。     

丙型肝炎病毒高变区1模拟表位7肽细胞免疫应答作用的研究

目的探讨丙型肝炎病毒高变区1模拟表位7肽在体外刺激免疫小鼠脾淋巴细胞后的细胞增殖情况。方法选用经7肽皮下多点免疫和脾内直接注射两种免疫途径的免疫小鼠,无菌条件下分离脾淋巴细胞后,实验组分为刺激组与未刺激组,刺激组脾细胞再经7肽刺激,应用单溶液细胞增殖检测法体外检测7肽对免疫小鼠脾淋巴细胞在不同浓度和不同培养时间点增殖的影响。结果体外7肽刺激免疫小鼠脾淋巴细胞后,刺激组的脾淋巴细胞增殖反应与未刺激组比较存在促进作用,与对照组比较出现了明显的增殖反应。结论丙型肝炎病毒高变区1合成肽在体外对免疫小鼠脾淋巴细胞具有一定的促增殖作用。     

早期强化他汀治疗对急性冠脉综合征患者血清中MMP-8及TIMP-1水平的影响

目的：探讨早期强化他汀治疗对急性冠脉综合征（ACS）患者血清中基质金属蛋白酶8（MMP-8）和组织抑制因子1（TIMP-1）水平的影响。方法：ACS患者148例,随机分为常规他汀组（阿托伐他汀20 mg/d）和强化他汀组（阿托伐他汀40mg/d）,治疗1月后观察两组治疗前后MMP-8和TIMP-1水平的变化。结果：两组治疗后血清中MMP-8均下降,强化组下降明显（P〈0.05）,而TIMP-1均有升高,强化组上升显著（P〈0.05）。结论：早期大剂量应用阿托伐他汀治疗可降低ACS患者血清MMP-8水平和升高TIMP-1水平,抑制炎性反应,促进斑块的稳定。     

依托咪酯对普鲁卡因、丁卡因致惊厥半数有效量的影响

目的：观察依托咪酯对普鲁卡因、丁卡因致惊厥半数有效量的影响。方法：将64只小鼠随机分为4组（n=16）,分别为普鲁卡因组、丁卡因组、依托咪酯＋普鲁卡因组、依托咪酯＋丁卡因组。实验小鼠均采用腹腔注射的给药方法,用序贯法测各组惊厥的半数有效量。结果：与普鲁卡因组比较,依托咪酯＋普鲁卡因组致惊厥ED50显著提高（P〈0.01）;与丁卡因组比较,依托咪酯＋丁卡因组致惊厥的半数有效量显著提高（P〈0.01）。结论：预先给一定剂量的依托咪酯可以提高普鲁卡因或丁卡因致惊厥阈值,说明依托咪酯对局麻药引起的惊厥有一定的防治作用。     

人前列腺特异性抗原的原核表达及多克隆抗体制备

目的：建立人前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）的可溶性大肠杆菌表达系统,获得高活性重组人PSA及多克隆抗体,为临床相关疾病的监测、诊断和治疗提供关键材料。方法：构建可溶性表达载体pET-S1-S2-PSA质粒,采用化学法将pET-S1-S2-PSA质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）细胞,IPTG诱导BL21（DE3）细胞表达rPSA,阳离子交换层析纯化rPSA,经Western印迹鉴定后免疫大耳白兔制备PSA抗体,ELISA法检测抗体效价。结果与结论：构建了可溶性表达载体pET-S1-S2-PSA,获得了可溶性高表达rPSA的BL21（DE3）细胞株,并制备了可特异性结合天然PSA的抗体,其效价在1∶20000以上。     

肝硬化背景胆管细胞癌的MSCT影像诊断及实验室检查分析

目的:探讨乙肝相关性肝硬化背景下ICC影像及实验室检查特征,以期提高对ICC的诊断水平。方法:将49例经病理证实的ICC患者进行分组:①非肝硬化组(N组)40例,乙肝相关性肝硬化组(C组)9例,对两组MSCT征象及实验室检查进行比较;②乙肝阳性组(HbsAg+)24例,乙肝阴性组(HbsAg-)25例,对AFP、Ca-199、肝内胆管结石3指标进行比较。使用SPSS 11.5统计软件,检验水准ɑ=0.05。结果:N、C两组ICC的MSCT影像表现及实验室检查之间比较统计学上无显著差异。HbsAg+组ICC 1例合并肝内胆管结石,HbsAg-组9例,差别有统计学意义(P=0.016)。HbsAg+组10例AFP指标阳性,HbsAg-组3例,差别有统计学意义(P=0.019);HbsAg+组7例Ca-199指标阳性、HbsAg-组15例阳性,差别有统计学意义(P=0.03)。结论:乙肝相关性肝硬化下ICC与非肝硬化下ICC在MSCT影像表现上无特殊,乙肝相关性肝硬化下ICC常可有血清AFP的升高。只有熟悉ICC的影像表现,才能减少肝硬化背景ICC的误诊。     

抗环瓜胺酸肽抗体和葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原在类风湿性关节炎中的意义

目的探讨抗环瓜胺酸肽抗体（cyclic citrullinatedpeptide,CCP）和葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原（glucose-6-phosphate isomerase,GPI）在类风湿性关节炎中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）间接法检测90例RA患者血液中的CCP抗体,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）同样检测90例RA患者血液中的GPI。结果在GPI组Ⅳ期的RA阳性率明显高于Ⅰ期及Ⅱ期～Ⅲ期患者（P〈0.05）,有统计学意义。CCP组在Ⅰ期、Ⅱ期～Ⅲ期和Ⅳ期无统计学意义。GPI在ESR〉100组的阳性率显著高于ESR〈40和40≤ESR≤100组（χ^2=10.045,P=0.007）;抗CCP在各组的阳性率无显著性差异（χ^2=4.432,P=0.109）。结论抗CCP抗体和GPI抗原在RA的诊断中都有重要意义。抗CCP抗体在RA的早期诊断和骨侵蚀方面更有价值,而GPI抗原特异性高于抗CCP抗体和RF,同时,它还能反映关节的炎症程度及RA的活动性。     

周围型肺癌CT表现及与血清肿瘤标志物SCC-Ag的相关性

目的：探讨周围型肺癌CT表现及与血清肿瘤标志物SCC-Ag浓度关系。方法：回顾性分析48例周围型肺癌CT表现及与血清肿瘤标志物SCC-Ag资料,对比分析其病理、CT表现与血清肿瘤标志物SCC-Ag关系。结果：30例腺癌血清SCC-Ag浓度为（1.04±0.75）ng/ml,11例鳞癌血清SCC-Ag浓度为（5.57±5.39）ng/ml,腺癌与鳞癌血清SCC-Ag浓度差异有统计学意义。肺癌的分化程度与血清SCC-Ag浓度相关系数r值为0.269。有空泡征或毛玻璃征的肺癌,其血清SCC-Ag浓度较无空泡征或毛玻璃征的肺癌低。肺癌有无深分叶征、胸膜凹陷征、瘤体直径≥3 cm、毛刺征、支气管气相、增强值≥20 HU、空洞、钙化或肺门、纵隔淋巴结肿大与血清SCC-Ag浓度差异无统计学意义。肺癌Ki-67抗原阳性百分率与血清SCC-Ag浓度相关系数r值为0.118。26例p53表达阳性肺癌SCC-Ag浓度（1.70±2.11）ng/ml,22例p53表达阴性肺癌SCC-Ag浓度（2.49±4.17）ng/ml。结论：肺癌的空泡征或毛玻璃征与其血清SCC-Ag浓度有一定负相关性;肺癌的分化程度、Ki-67抗原及p53表达与血清SCC-Ag浓度之间无明显相关性。     

EMA和Ki67在不同分期及分型胸腺瘤中的表达及意义

目的 探讨不同临床分期和病理分型的胸腺瘤生物学特性、预后及术后治疗手段.方法 收集手术切除胸腺瘤标本109例,应用Masaoka和WHO标准分别进行临床分期和病理分型,采用上皮膜抗原（epithelial membrane antigen,EMA）和Ki67两组单克隆抗体行免疫组化染色,观察两组抗体在不同临床分期和病理分型胸腺瘤中的表达状况,进行统计分析.结果 不同临床分期和病理分型胸腺瘤患者,EMA阴性和阳性率表达,差异均无统计学意义,但从Ⅱb期和B2型开始,表达强度逐渐增强,与Ⅰ期和Ⅱa期及A、AB和B1型相比,差异有统计学意义（P〈0.01）.Ki67指数从Ⅱb期和B2型开始,Ⅲ级和Ⅳ级明显增加,与Ⅰ期和Ⅱa期及A、AB和B1型相比,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 Masaoka分期Ⅱb期,WHO分型B2型开始以上的胸腺瘤可能更具有侵袭性或恶性倾向,术后应采用放疗或化疗等辅助治疗措施.     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在哮喘小鼠肺组织的表达及其与气道炎症关系

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在哮喘小鼠肺组织的表达及其与哮喘气道炎症的关系。方法实验分为3组,随机将30只BALB/c小鼠分为对照组（N）、哮喘组（A）、原矾酸钠干预组（S）,每组10只。哮喘组采用OVA腹腔注射致敏、长时间反复OVA雾化吸入复制慢性哮喘动物模型。对照组采用等量生理盐水腹腔注射,生理盐水雾化吸入。原矾酸钠组早期同哮喘模型组一样采用OVA腹腔注射及OVA雾化吸入,在动物处死前末周采用原矾酸钠溶液腹腔注射。末次激发后24h内处死动物,支气管肺泡灌洗液（BALF）作细胞计数测小鼠的白细胞总数及分类,免疫组化测IL-4R的表达,逆转录PCR测小鼠肺组织SHP-1mRNA的表达。结果细胞总数A组（7.35±0.589）×105/ml与N组（1.35±0.369）×105/ml比较差异有统计学意义（P〈0.05）,S组（7.55±0.925）×105/ml与N组差异有统计学意义（P〈0.05）,A组与S组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。IL-4RIODA组（149.221±11.154）与N组（92.676±16.414）比较差异有统计学意义（P〈0.05）,S组（150.337±10.832）与N组差异有统计学意义（P〈0.05）,A组与S组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。SHP-1mRNA含量积分光密度A组（0.0763±0.018）与N组（2.728±0.101）比较差异有统计学意义（P〈0.05）,S组（0.064±0.011）与N组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,A组与S组差异无统计学意义（P〉0.05）。各组肺组织中IL-4R与SHP-1mRNA均呈负相关,相关系数分别是A组r=-0.963,S组r=-0.909,N组r=-0.956。结论 SHP-1mRNA的表达与哮喘小鼠炎性细胞及IL-4R的表达呈负相关。     

头顶一颗珠对D-半乳糖所致小鼠衰老模型的影响

目的 研究头顶一颗珠（TTM）注射液对D-半乳糖所致小鼠衰老模型的影响.方法 昆明种小鼠（雌雄各半）40只,随机分为对照组、模型组、7.2g/kg TTM组、3.6g/kg TTM组及1.8g/kg TTM组,各8只.腹腔注射D-半乳糖造模,Morris水迷宫测量小鼠学习和记忆能力.检测各组小鼠皮肤羟脯氨酸、心脑组织MDA、LP、SOD及GSH-Px含量,采用双抗体夹心ELISA法检测小鼠血清中IL-2及IL-6含量.结果 Morris水迷宫实验中,TTM各组潜伏期与模型组相比较明显减少（P〈0.05）,模型组小鼠穿越平台的次数比其它各组小鼠少（P〈0.05）.心、脑组织匀浆氧化性指标（SOD、MAD、LP及GSH-Px）的检测,对照组及TTM各组MAD与LP含量低于模型组（P〈0.05）.对照组及TTM各组SOD与GSH-Px的活性明显高于模型组（P〈0.05）.注射过D-半乳糖小鼠皮肤羟脯氨酸含量都明显低于对照组（P〈0.05）,TTM组小鼠皮肤中羟脯氨酸的含量明显高于模型组（P〈0.05）.TTM组小鼠血清中IL-2、IL-6含量显著高于对照组和模型组（P〈0.05）,模型组小鼠血清中的IL-2、IL-6比对照组要低（P〈0.05）.结论 TTM的有效成分具有多种生物学活性,可以通过不同途径发挥抗衰老作用,在改善学习记忆功能、清除体内自由基抗氧化、增强机体免疫能力等方面都有较好的作用.