冷冻对人精子遗传物质的影响

精液冷冻是辅助生殖技术的一个必要环节。由于AID的广泛应用及人类精子库的建立 ,关于冷冻保存对人精子遗传物质的影响日益受到重视。本文就冷冻保存对人精子染色体及染色质的影响以及防范措施进行综述     

两种冷冻方法对形态正常精子百分率的影响

目前人类精液冷冻方法主要分为速冻和缓慢冷冻法两大类。精液冷冻保存过程中，精子经历了降温冷却、冻结、解冻复温，其中冰晶形成对精子结构不可避免造成损伤。精子形态是决定精子能否受精的重要因素。低温是否对精子形态产生影响，本研究比较了两种冷冻方法对人精子形态影响，现报告如下。     

速冻和缓慢冷冻法对精子运动特征的影响

目的了解冷冻方法对人精子运动特征的影响。方法精液标本进行速冻和缓慢冷冻保存,应用计算机精液分析仪进行精子运动特征分析。结果冷冻复温后精子运动能力与冷冻前精子运动能力比较明显下降(P<0.001,P<0.05);速冻与缓慢冷冻方法保存的精子运动参数相比较差异均无显著性(P>0.05)。结论冷冻保存易导致精子运动能力下降,速冻与缓慢冷冻方法对精子运动参数影响无明显差异。     

冷冻复温后处理对精子功能影响的研究：I.不同介质处理的影响

本文对冷冻复温后精子在不同介质中进行了离心孵育处理，结果显示：精子营养液可使低温冷冻保存后复温的精子在较长时间内保持良好的活动率；细胞培养液１６４０能显著提高复温后精子的人宫颈粘液的穿透力（Ｐ〈０．０５）。细胞培养液Ｍ１９９、Ｈａｍ’ｓＦ１０和正常精浆对复温后精子功能无明显改善作用。离心处理（２０００ｒ／ｍｉｎ）对复温后精子功能无损害作用。     

冷冻复温后处理对精子功能影响的研究Ⅰ．不同介质处理的影响

本文对冷冻复温后精子在不同介质中进行了离心孵育处理，结果显示∶精子营养液可使低温冷冻保存后复温的精子在较长时间内保持良好的活动率；细胞培养液１６４０能显著提高复温后精子的人宫颈粘液的穿透力（Ｐ＜０．０５）。细胞培养液Ｍ１９９、Ｈａｍ＇ｓＦ１０和正常精浆对复温后精子功能无明显改善作用。离心处理（２０００ｒ／ｍｉｎ）对复温后精子功能无损害作用。     

经皮睾丸微穿刺活检后冷冻精子的卵胞质内单精子注射

目的:对经皮睾丸微穿刺活检后冷冻保存精子卵胞质内单精子注射(ICSI)治疗非梗阻性无精子症所致不育进行临床总结,并对其影响治疗结果的因素进行探讨。方法:对62例非梗阻性无精子症患者进行经皮睾丸微穿刺活检,发现活动精子者(35例)对睾丸活检组织进行冷冻保存;女方促排卵常规使用促性腺激素释放激动剂(GnRHa)/卵泡刺激素(FSH)/人绒毛膜促性腺激素(hCG)方案,B超监测卵泡发育情况并引导经阴道取卵,冷冻的睾丸组织解冻后行ICSI,良好胚胎进行移植。结果:取卵周期为35个,冷冻的睾丸精子解冻后行ICSI,35个周期进行常规胚胎移植。13例临床妊娠。启动周期、取卵周期与移植周期临床妊娠率均为37.14%(13/35)。结论:经皮睾丸微穿刺活检后ICSI是治疗非梗阻性无精子症所致不育的最主要和有效的方法;活检后对有活动精子的睾丸组织进行冷冻保存不影响治疗结果,可以减少患者睾丸活检的次数,减轻患者痛苦。     

简易精子冷冻保存法

简易精子冷冻保存法赵安仁，荆成宝，白萍关键词精子；冷冻保存法现今制备冻精的冷冻剂多采用液氮（－１９６℃），保护剂为甘油、糖类、蛋黄、乳汁、柠檬酸盐等成分。冷冻方法大都应用慢速分步降温（Ｓｈｅｒｍａｎ法），但我们测定液氮内和液氮面温度均为－１９４℃，而...     

甘油、卵黄及其复合液对新鲜精子的影响

甘油、卵黄及其复合液对新鲜精子的影响王新生王沛涛崔向东甘油和卵黄是精子低温冷冻保存的常用保护剂成分。本研究分别对甘油溶液、卵黄溶液及甘油－卵黄－枸椽酸钠复合液（ＣＰＭ）对新鲜精子的功能指标的影响进行了观察。一、材料与方法１．材料来源：正常生育男性，年...     

抽取附睾精子作人工受精治疗梗阻性无精子症初步报告

本文从５例梗阻性无精子症不育患者输精和收集附睾精子。其中除１例为附睾先天性梗阻，作附睾－输精管吻俣术外，余均为远端输精管不通畅或缺如。第二性症发育良好，性激素，睾丸容积等均正常。抽吸附睾液放入术前精浆和精子保养液中冷冻保存，解决复苏后４例行人工授精。     

精子冷冻对卵胞质内单精子注射治疗结果的影响

目的 了解冷冻保存对射出精子和经皮附睾、睾丸微穿刺抽吸精子进行卵胞质内单精子注射（ICSI）临床结果的影响。方法 将射出精子152个治疗周期和经皮附睾、睾丸微穿刺抽吸精子55个周期分别分为新鲜组和冷冻组，对其ICSI后的结果进行对照。结果 射出精子新鲜组和冷冻组受精率、卵裂率和临床妊娠率（分别为79．70％ vs 76．79％、97．08％ vs 98．35％、39．02％ vs 37．93％）与经皮附睾、睾丸微穿刺抽吸精子新鲜组和冷冻组受精率、卵裂率和临床妊娠率，穿刺周期（分别为77．07％ vs 74．54％、97．47％ vs 94．3l％、35．00％ vs 37．14％）均无显著差异（P〉0．05）。结论 精子的冷冻保存对射出精子和经皮附睾、睾丸微穿刺抽吸精子进行ICSI的临床结果没有影响，我们认为对于经皮附睾、睾丸微穿刺抽吸精子应该进行冷冻保存，以减少对附睾、睾丸的穿刺次数。     

精子DNA损伤与辅助生殖技术

精子DNA损伤与辅助生殖技术(ART)结局密切相关,精子DNA损伤影响到ART中的受精比率、胚细胞发育、妊娠率和子代的健康。同时,精子低温冷冻保存和诸多体外处理技术均能影响精子DNA的完整性。检测精子DNA断裂指标(DFI),采取适当措施获得DNA无损伤或损伤较小的精子,对改善ART结局十分必要。现就精子DNA损伤与ART相关性的研究做一综述。     

冻融附睾精子卵浆内显微注射治疗阻塞性无精子症不育二例

附睾取精结合卵浆内单精子注射（ＩＣＳＩ）治疗无精子症不育［１］时,若将ＩＣＳＩ后多余的附睾精子冷冻保存,当患者助孕治疗失败需要再次治疗时,可用冻融附睾精子进行ＩＣＳＩ,避免再次附睾手术。作者用冻融附睾精子ＩＣＳＩ治疗２对阻塞性无精子症的不育夫妇获得妊...     

二硫苏糖醇对冷冻复温的人类精子保护作用的研究

在精子冷冻保存液中加入二硫苏糖醇(DTT),观察复温后精子复苏率、运动速度、测定精子内ATP和精浆内GOT含量。发现DTT能够显著提高精子的复苏率和运动速度,提高精子内ATP含量,降低GOT的释放。本文指出冷冻复温的损伤使精子的细胞膜和顶体膜通透性增加或破损,代谢酶逸漏及能量代谢降低。DTT通过与自由基作用,防止脂质过氧化或修复过氧化物,保护了细胞和顶体膜,提高精子能量代谢,使精子复苏率增高和运动速度加快。     

弗司扣林对人精子运动功能的影响

目的 通过研究弗司扣林(forskolin)对体外人精子的运动功能有无影响，了解环磷酸腺苷／蛋白激酶A(cAMP／PKA)信号传导途径是否参与人精子运动功能的调节。方法 10例健康成年男性手淫获得新鲜精液，经上游优化处理后与不同浓度的forskolin一起孵育20、30、60min后，采用计算机辅助的精子分析系统(CASA)检测精子的各项运动参数，并进行对比分析。结果 forskolin在体外能显著提高人精于的活率及前向性运动百分率，而对精子的形态及直线速度(VSL)和曲线速度(VCL)无明显影响。结论 forskolin在体外能提高人精子的运动功能，此结果为证实cAMP/PKA信号传导通道参与调节人精子运动功能提供了一定的实验依据。     

不同冷冻方法对人睾丸精子冷冻保存效果的研究

目的比较不同冷冻保护剂和不同冷冻载体对人睾丸精子的冷冻保存效果。方法选取在兰州大学第一医院生殖医学专科医院进行诊断性睾丸穿刺获得成熟活动精子的患者,以及行睾丸精子ICSI术后的患者,在知情同意下将剩余睾丸组织冷冻保存,共46例。将每例睾丸组织分为4份,随机分成4组进行冷冻:1.8ml冷冻管+甘油复合冷冻剂(A组,46例);1.8ml冷冻管+Fasrun冷冻保护剂(B组,46例);0.25 ml麦管+Fasrun冷冻保护剂(C组,46例);超微量冷冻麦管+Fasrun冷冻保护剂(D组,46例)。冷冻标本经液氮熏蒸后投入液氮,比较各组复苏后精子活力和复苏率。结果冷冻前各组的活动睾丸精子能够满足ICSI操作所用精子量;冷冻复苏后,C组和D组能够容易找到正常活动精子(≥0.1/200倍视野)的例数显著高于A组、B组(P0.05);D组解冻后运动精子复苏率显著高于A组、B组(P0.05),C组解冻后运动精子复苏率显著高于A组(P0.05)。结论应用改良的超微量冷冻麦管+Fasrun冷冻保护剂能够提高睾丸精子的冷冻复苏率。     

获能时间对人精子染色体制备的影响

获能时间对人精子染色体制备的影响蔡敏，鄢采芹，计垣关键词获能，精子染色体自以色列学者Ｒｕｄａｋ首创制备人精子染色体标本以来［１］，这项技术在国内外不断得到改进，日臻完善。有关人精子染色体制备方法国内、外有很多报道，而获能时间的长短对精子的授精、精子染...     

孕酮对人精子受精能力的影响

用不同浓度孕酮处理人精子，研究孕酮对人精子穿透去透明带金黄地鼠卵能力的影响。结果发现低浓度孕酮使人精子的穿卵率和穿卵指数均有极显著的提高，而高浓度孕酮则对人精子穿卵率和穿卵指数有降低作用。     

IgA抗精子抗体对精子顶体反应的影响

目的 探讨精浆中IgA抗精子抗体对人精子顶体反应的影响。方法 利用免疫珠法（IBT）筛选出IgA抗精子抗体阳性精浆标本同正常人精子孵育，以孕酮诱发精子顶体反应；以特异性荧光标记物．络合异硫氰酸荧光素的花生凝集素（FITC-PNA）标记精子顶体，通过流式细胞仪检测精子顶体完整性。结果 与IgA抗精子抗体阳性精浆孵育的精子，其孕酮诱发的顶体反应发生率明显低于正常精浆及精子培养液组（P〈0．01），正常精浆组及精子培养液组间无显著性差异（P〉0．05）；IgA抗精子抗体阳性精浆组、正常精浆组、精子培养液组自发顶体反应的发生率无显著性差异（P〉0．05）。结论 免疫性不育患者精浆中的IgA抗精子抗体可以明显抑制孕酮诱发的顶体反应的发生，可能是导致不育的原因之一。     

人输卵管上皮细胞培养液对人精子活力的影响

哺乳动物输卵管是精子获能、受精和早期胚胎发育的重要场所，并通过其分泌的物质协助完成上述过程。为了解其对精子活力的影响，我们观察了月经中期人输卵管上皮细胞培养液和管腔液对人精子活动率、平均运动速度、高活力精子比例及活动指数的影响。结果在共育不同时间后对上述指标均有显著促进作用，输卵管上皮细胞培养液的作用强于管腔液。说明人输卵管上皮细胞培养液可提高人精子活动能力和生存能力。     

60KD、78KD精子膜抗原的抗体对精子的影响

目的：研究抗精子抗体对精子功能的影响。方法：使用抗60KD阳性血清及抗精子抗体阴性血清体外处理精子，比较它们对精子的凝集、细胞毒、穿透高度和顶体反应的影响。结果：抗60KD和抗78KD精子膜抗原的抗体都能对精子产生凝集作用和补体依赖的细胞毒作用，及降低精子的穿透高度，其中抗60KD精子膜抗原的抗体还能明显抑制精子的顶体酶活性。结论：抗精子抗体可通过对精子产生凝集作用和细胞毒作用，以及影响精子的穿透能力和顶体反应来降低精子的生育能力，60KD的精子膜抗原可能和精子的顶体反应有关。