对阿米巴肝脓液中的溶组织内阿米巴种特异基因的分析

目的：分析引发肝脓肿的溶组织内阿米巴虫株的种特异基因（SSG）的差异。方法：直接从阿米巴肝脓液中扩增溶组织内阿米巴SSG，以溶组织内阿米巴HM－1；IMSS株SSG扩增产物为探针，用southern杂交的分析方法SSG的多态性。结果：扩增出的HM－1：IMSS株的SSG长650bp；14例阿米巴肝脓肿患的肝脓液中有4例未检出溶组织内阿米巴的SSG基因，其余10例的SSG具多态性，在650bp-980bp之间呈梯形分布。结论：使受检致病的溶组织内阿米巴虫株存在种内差异，其临床意义有待进一步研究。     

溶组织内阿米巴同工酶的初步研究

用3株溶组织内阿米巴及1株侵入内阿米巴以琼脂糖凝胶电泳法检测其四种酶的同工酶,即:苹果酸酶、葡萄糖磷酸异构酶、磷酸葡萄糖变位酶、己糖激酶,以酶谱来区别不同的酶株群。结果显示:3株溶组织内阿米巴与侵入内阿米巴的同工酶谱有显著差异,但3株溶组织内阿米巴的酶谱几无差异,属于强致病的酶株群ⅩⅣ,对来源不同的溶组织内阿米巴,却属同一酶株群的原因进行了讨论。     

阿米巴肝脓疡患者大便中检出溶组织阿米巴包囊体一例

溶组织内阿米巴是阿米巴疾病及各种阿米巴病的病原体.根据其生活史各期的变化可分滋养体和包囊体.主要寄生于结肠,在一定条件下侵入结肠壁组织形成溃疡,可随血流转移至肝、肺、脑等处引起阿米巴脓肿.笔者在1例以发热和咳嗽为主要症状的患者的大便常规中检出溶组织阿米巴包囊体.     

溶组织内阿米巴培养的几点体会

人体寄生虫学的教学与科研均离不开虫株 ,在以往 ,溶组织内阿米巴 (EntamoebahistolyticaSchaudinn ,Eh)感染率 <10 % [1] ,要临时建立虫株较容易 ,随着人们生活水平的提高、卫生知识的日益普及 ,发病人数越来越少 ,在我区 ,各县、市平均每年只有 4～ 5例 ,无论对我们的教学还是科研的临时建株都带来极大的麻烦 ,所以 ,保种就特别重要。笔者进行溶组织内阿米巴的有菌培养多年 ,现就有关内容谈谈几点体会。1　器皿的洗涤Eh是单细胞原生动物 ,环境因素对其生长影响极大 ,培养过程中最常用的器皿有培养管、滴管、烧瓶、烧杯等 ,必须彻底洗涤 …     

PCR鉴别致病性和非致病性溶组织内阿米巴原虫感染

选用编码溶组织内阿米巴原虫３００００－Ｍｒ抗原的基因片段中不同的保守序列作ＰＣＲ引物，建立检测原虫ｃＤＮＡ的两种方法，来鉴别致病性和非致病性原虫株，其结果与同工酶电泳谱株群分析、特异性单抗检测３００００－Ｍｒ抗原相比，对病原含量少的标本检出率高，敏感性强。     

溶组织内阿米巴滋养体的超微结构

溶组织内阿米巴滋养体表面呈波浪状,伪足呈叶状,偶见球状。质膜外可见外被,质膜下偶见膜下颗粒。胞质内主要为营养细胞器与糖原颗粒。虫体有溶酶体与内质网,缺乏高尔基体和线粒体。在虫体分裂期常可见晶格状聚合多核糖体。     

pH对溶组织内阿米巴运动的影响

用细胞电泳技术,对两株溶组织内阿米巴在pH梯度中的细胞电泳及伪足形成情况进行观察。结果表明:随着pH值变大,电泳速度加快,伪足出现率也增多,两者之间具有显著的相关性。提示阿米巴的伪足运动可能与其质膜的电荷变化有关。     

溶组织内阿米巴性宫颈阴道炎1例

患者50岁,近年常感下腹不适,痛胀,阴道痒痛,有脓性分泌物,时多吋少,近期加重,于1996年10月来本院就诊。妇科检查疑为宫颈癌,分泌物涂片做细胞学检查,发现大量的炎症细胞,瑞氏染色,发现大量的阿米巴滋养体,体积较大,20～30μm,形态不规则,胞浆呈天蓝色,有伪足样突出,内层呈颗粒状,细胞核偏中,     

单克隆抗体鉴别溶组织内阿米巴的致病性

用由溶组织内阿米巴致病株（ＨＭ－１：ＩＭＳＳ）为免疫原诱导产生的特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）４Ｇ６，与从急性阿米巴痢疾患者或包囊携带者分离的溶组织内阿米巴（Ｅｈ）滋养体进行间接荧光抗体反应和淀粉凝胶电泳同工酶分析。显示，从有发热、腹泻、脓血便患者体内分离的虫株与ＭｃＡｂ４Ｇ６出现阳性反应，滴度达１：５１２０；同工酶分析也属于致病性酶株群Ⅱ。而有发热、腹泻、无脓血便患者体内分离的虫体与ＭｃＡｂ４Ｇ６均为阴性反应，且为非致病性酶株群Ⅰ。提示，致病性虫株与非致病性虫株的免疫原性不同，应用本法可准确鉴别致病性虫株，且简便、价廉、快速，还可用于流行病学调查。     

溶组织内阿米巴ELISA试剂盒在阿米巴病调查的应用

目的了解景洪市爱尼族人群阿米巴病流行情况,为阿米巴病监测和防治提供依据,并评价ELISA试剂盒在阿米巴病调查应用的效果。方法以整群随机抽样爱尼族村寨,逐户收集新鲜粪便标本,用观察法、碘液涂片镜检法和TECHLAB第二代溶组织内阿米巴ELISA试剂盒对照检测粪便标本溶内阿米巴。结果镜检278例,E·h/E·d感染为9·71%;ELISA检测366例,E·h感染率为9·29%;镜检和ELISA共同阳性15例,占镜检阳性的55·56%;粪便观察和ELISA检测结果诊断5例为肠阿米巴病,发病率为1·37%,E·h致病率为14·71%。结论景洪爱尼族阿米巴病流行严重,应加强阿米巴病的监测和防治工作,同时积极推广新技术。     

用间接荧光抗体试验检查肝脓液中溶组织阿米巴滋养体

在我国,阿米巴肝脓肿仍相当常见。由于用常规显微镜检查方法检查肝脓液中溶组织阿米巴滋养体的检出率低,因此常只能根据有关的流行病学资料、临床表现、实验室检查、从肝脓肿内抽出棕褐色脓液和抗阿米巴治疗有效     

用限制性内切酶分析溶组织内阿米巴的致病性

用SH-3、SH-5、SH-6、SH-7和SH-85株溶组织内阿米巴的DNA增殖35个周期,将其基因DNA用内切酶HinfⅠ和EcoT22Ⅰ进行消化后,作琼脂糖凝胶电泳分析,显示,5株虫株DNA经35个循环周期后产生531-bp的产物;经HinfⅠ消化后,SH-3、SH-5、SH-6和SH-7的基因DNA产生3个相同的片段,而显示其均与非致病性虫株SAW142的电泳谐完全相同;而SH-8基因DNA的电泳谱与致病性虫株SAW408的电泳谱一致,而用EcoT22Ⅰ消化结果也显示SH-8的图谱与致病性虫株SAW408的相同,证实了从包囊携带者和有发热、腹泻而无脓血便患者粪便中分离的虫株均属于非致病性虫株,从有发热、腹泻、脓血便的急性阿米巴痢疾患者粪便中分离到的虫株属于致病性虫株,均与酶株群分析相一致。提示,应用多聚酶链反应和限制性内切酶消化基因DNA来检测溶组织内阿米巴的基因型是十分有意义的。     

从溶组织内阿米巴教学中得到的启示

激发学生学习的兴趣现在一直是教学改革的大课题。在溶组织内阿米巴的教学过程中引入一定数量的非医学知识而又与其密切相关的信息,调动学生学习的积极性,提高学习兴趣,收到良好的课堂教学效果。     

性激素对溶组织内阿米巴致病力的影响

为进一步探索性激素在阿米巴致病中的影响,用加性激素培养的阿米巴进行了白细胞触杀实验,观察其毒性的改变.结果,雄性激素可以增强阿米巴对白细胞的触杀作用,而雌性激素无明显的增毒作用.另以肌注性激素的大白鼠进行了肝脏阿米巴接种实验,观察其对阿米巴肝脓肿形成的影响.结果提示两种性激素均能促进大白鼠阿米巴肝脓肿的形成,尤以雄性激素作用更明显.     

卡介苗、孕酮对溶组织内阿米巴致病性的影响

本文研究了卡介苗和孕酮对溶组织内阿米巴致病性的影响。用从急性阿米巴痢疾患者分离的、在实验室多菌培养的B株进行实验。以5×10~4个滋养体作仓鼠肝内接种。实验结果表明:注射卡介苗的仓鼠肝脏病变平均计分明显低于对照组;而注射孕酮者,肝脏病变平均计分虽略有升高,但统计学上无显著意义。     

单克隆抗体鉴别溶组织内阿米巴的致病性

用由溶组织内阿米巴致病株为免疫原诱导产生的特异性单克隆抗体４Ｇ６，与从急性阿米巴痢疾患者或囊携带者分离的溶组织内阿米巴滋养体进行间接荧光抗体的反应和淀粉凝胶电泳同工酶分析。显示，从有发热，腹泻，脓血便患者体内分离的虫株与ＭｃＡＢ４Ｇ６出现阳性反应，滴度达１：５１２０；同工酶分析也属于致病性酶株群Ⅱ。而有发热，腹泻，无脓血例患者体内分离的虫体与ＭｃＡｂ４Ｇ６均为阴性反应，且为非致病性酶株群Ⅰ。提示，     

结构生物学在溶组织内阿米巴致病机制研究中的应用

溶组织内阿米巴（Entamoeba histolytica,Eh）是寄生于人类肠道的原生动物,可引起阿米巴性结肠炎和肠外脓肿。结构生物学在原子水平上研究生命大分子结构和功能,是一种重要的生物学研究方法,经过半个多世纪的理论和技术发展,已应用于生物学和基础医学的各个研究领域。本文综述了目前结构生物学的研究技术,并以阿米巴穿孔素A和半胱氨酸蛋白酶抑制剂为例介绍结构生物学在Eh致病机制研究中的应用,总结了今后结构生物学在Eh研究领域可能的应用方向和研究热点。