DU20模拟振法对MCAO模型大鼠缺血区GAP-43表达的影响

目的 观察“百会”(DU20)模拟振法对局灶性脑缺血大鼠(MCAO)模型中生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的变化,探讨其对脑缺血早期结构可塑性的影响.方法 采用大鼠大脑中动脉栓塞法制成MCAO模型,研究缺血后1、7、14 d缺血区GAP-43的表达及振法对其影响.结果 各组大鼠在不同时间段GAP-43表达的比较:1)在造模后第1天,空白对照组和假手术组与其他3组有统计学意义(P＜0.01),空白对照组、假手术组和模型组与电针组、振法组无统计学意义(P＞0.05);2)第7天,模型组与空白对照组和假手术组有统计学意义(P＜0.01),模型组与电针组、振法组有统计学意义(P＜0.05),空白对照组和假手术组与电针组、振法组有统计学意义(P＜0.05);3)第14天,模型组与其他3组有统计学意义(P＜0.05),空白对照组和假手术组与电针组、振法组无统计学意义(P＞0.05);4)在各个时段,电针组与振法组比较无统计学意义(P＞0.05),空白组与假手术组无统计学意义(P＞0.05).结论 “百会”模拟振法可以提高MCAO模型大鼠GAP-43在缺血区的表达,对加快脑缺血早期结构可塑性具有一定的影响.     

GAP-43治疗大鼠完全性脊髓损伤后Nogo-A在神经元的表达

目的制备完全性脊髓损伤成年SD大鼠模型,研究生长相关蛋白(GAP-43)治疗大鼠脊髓损伤后神经元上Nogo-A的变化,探讨GAP-43在再生修复中的作用,为临床治疗提供实验信息.方法雌性8周龄SD大鼠75只,制成脊髓损伤模型,随机分为3组:GAP-43抗体组,GAP-43抗原组,对照组,每组25只.使用直接注射法将GAP-43抗原和GAP-43多克隆抗体分别注入抗原组和抗体组的大鼠脊髓断端,观察各组大鼠肢体功能的恢复情况,用BBB评分法进行不同时段的行为学评分;用HE染色和免疫组化染色及图像分析方法观察Nogo-A阳性神经元数目的变化,并对其进行相关性分析.结果对照组在不同的时间段行为学评分最低,抗原组评分最高,抗原组Nogo-A阳性神经元数量最少,且数量与后肢功能恢复呈反相关.结论说明GAP-43能够与Nogo-A相拮抗,促进损伤脊髓的恢复,对脊髓损伤的研究与治疗具有重要的意义.     

康复训练对脑梗死大鼠脑GAP-43表达的影响

目的：研究康复训练对脑梗死大鼠脑的生长相关蛋白（GAP－43）表达的影响。方法：SD大鼠采用光化学法制成脑梗死模型后,随机分康复组,制动组,自由组及正常组,每组大鼠在1,3,7,14,21,28d取脑组织免疫组化染色,以观察脑梗死大鼠各组不同时期脑的GAP－43表达。结果：1,3,7,14d脑梗死周边区可见GAP－43阳性细胞,21,28d时梗死周边GAP－43阳性细胞逐渐减少,康复组较制动组在7,14d明显增加,尤以胼胝体为。结论：康复训练可引起损伤周边区GAP－43表达的变化。提示该区有促进神经新生枝芽的生长作用。     

褪黑素对脊髓损伤大鼠GAP-43表达的影响

目的 研究褪黑素对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后生长相关蛋白(growth associated protein 43,GAP-43)表达的影响,从新的角度探讨褪黑素修复脊髓损伤的机制.方法 72只SD大鼠按照完全随机分组法分为3组:褪黑素治疗组、脊髓损伤组、空白对照组,每组24只.褪黑素治疗组、脊髓损伤组以改良Allen's法建立T11～T12水平脊髓损伤模型,褪黑素治疗组于术后即刻腹腔注射褪黑素(按100 mg/kg剂量注射),脊髓损伤组腹腔注射等体积5％无水乙醇(褪黑素溶剂),空白对照组不做任何处理.术后1、3、7d对各组大鼠进行BBB评分,检测血清中GAP-43的含量,并应用免疫组织化学染色法观察脊髓中GAP-43的表达.结果 术后1、3、7d大鼠血清中GAP-43含量各组间比较有差异统计学意义(P＜0.05),其中褪黑素治疗组最高,脊髓损伤组次之,空白对照组最低.免疫组织化学染色结果表明:褪黑素治疗组脊髓切片中GAP-43染色阳性细胞数最多,脊髓损伤组次之,对照组最低,各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 褪黑素治疗后可改变脊髓损伤区局部的微环境,并提高血清和脊髓中GAP-43的含量,促进损伤脊髓的恢复.     

血塞通对 MCAO 大鼠不同恢复时间点Nogo-A 蛋白表达的影响

目的：探讨血塞通冻干粉注射液对大鼠局灶性脑缺血模型不同恢复时间点7d,14d,28d大脑皮层的主要抑制因子Nogo-A表达的影响。方法健康雄性SD大鼠,随机分为手术组和非手术组,手术组采用改良Longa方法建立大脑中动脉阻塞（ MCAO）模型,待大鼠术后清醒2h后,进行EZLonga评分,根据评分和体重随机分为血塞通大剂量组（7．2mg／100g）、小剂量组（3．6mg／100g）、尼莫地平组（1．44mg／100g）、模型组（生理盐水）,于手术当日开始给药。待7d,14d,28d时,各组取6～8只动物,迅速取脑,于视交叉处将大脑前后分开,前端脑放入10％的甲醛中固定,48h后用PBS将脑组织洗净,石蜡包埋切片,用免疫组织化学染色方法观察不同时间点Nogo-A的表达变化,分别对梗死区、梗死周边区进行平均光密度分析。结果梗死区随着时间的延长,Nogo-A的表达逐渐减弱,在各时间点内,血塞通组和尼莫地平组Nogo-A的表达高于模型组。梗死周边区,模型组Nogo-A的表达趋势是7 d时已经高表达,14 d达到高峰,28 d比14 d略低,但仍保持较高水平,在各时间点,血塞通组比同时间点内的模型组表达低,与模型组差异显著（P＜0．05）。结论血塞通可以保护大鼠梗死区及梗死周边区的神经细胞,可以下调梗死周边区不同恢复时间点Nogo-A的表达。血塞通可能是通过下调Nogo-A的表达来实现大脑神经功能的重塑重建作用。     

首乌仙海片对缺血性卒中模型大鼠脑组织GFAP、GAP- 43表达的影响

目的 研究补益肝肾中药首乌仙海片对大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠星形胶质细胞活性及神经轴突生长的作用.方法 12周龄雄性Wistar大鼠40只,随机分为假手术组8只、模型组16只和中药组16只.模型组和中药组按Tamura法制成MCAO模型,假手术组大鼠行相同的开颅术而不凝闭大脑中动脉,于造模成功后6 d,中药组灌胃给予首乌仙海片9 g/kg,余2组分别灌胃给予等量生理盐水.假手术组大鼠于灌胃1周后,其余2组大鼠分别于灌胃1周、2周末各处死8只,断头取脑,ABC法染色,采用免疫组化法,进行脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经生长相关蛋白质(GAP- 43)的测定.结果 中药组给药1周时,GFAP的表达较同期模型组与假手术组均有显著增强(P<0.01),中药组给药2周时,GFAP的表达较给药1周时及同期模型组与假手术组均显著增强,差别均有高度统计学意义(P<0.01).中药组治疗2周时,梗死灶周围区GAP- 43表达明显增高,与其他2组比较差别有高度统计学意义(P<0.01).相关性分析表明,中药组灌胃2周时,GFAP与GAP- 43在大鼠脑组织中的表达具有相关性,r=0.75,P=0.031 9,GAP- 43表达随GFAP表达的上调而增强.结论 首乌仙海片可诱导缺血性卒中后神经功能重塑,与该药改善星形胶质细胞活性,促进神经轴突的再生有关.     

养血祛风方对抽动障碍大鼠纹状体GAP-43表达影响的研究

目的:观察养血祛风方对抽动障碍(Tic Disorders,TD)大鼠行为学特征与纹状体GAP-43和多巴胺受体D1/D2 (DRD1/D2) mRNA表达的影响,探讨其对TD大鼠纹状体突触可塑性影响。方法:采用亚氨基二丙腈(IDPN)复制TD大鼠模型,按随机数字表法将TD模型大鼠分为模型组、西药组及低、中、高剂量中药组,每组各8只,另取8只健康SD大鼠做空白组;给药组TD大鼠予以相应药物灌胃,空白组及模型组则予以等量生理盐水。从刻板运动方面对各组大鼠行为学特征进行评估和比较;持续灌胃8周后,取大鼠纹状体,采用免疫组化SP法检测GAP-43表达水平。结果:刻板运动测试显示大鼠模型能良好模拟TD的特征性行为变化,中药组及西药组刻板运动评分均不同程度低于模型组(P 0. 05)。各组GAP-43表达水平比较,差异具有显著统计学意义(P 0. 001)。其中,模型组GAP-43表达水平明显低于空白组及各给药组(P 0. 05);而各剂量中药组GAP-43表达水平均高于西药组(均P 0. 05);不同剂量中药组之间比较,高剂量组和中剂量组GAP-43表达水平均较低剂量组明显增高(P 0. 05)。结论:养血祛风方可通过上调GAP-43表达水平,在TD大鼠纹状体突触重塑方面发挥正向调节作用。     

通督调神电针法对脑梗死模型大鼠GAP-43表达的影响

目的 观察通督调神电针法对脑梗死模型大鼠GAP-43表达的影响,探索其对神经功能再塑的影响机制,为临床运用通督调神电针法治疗脑梗死提供实验依据。方法 SPF级雄性大鼠64只,体质量250～280g,采用随机数字法随机分为4个大组,每组16只大鼠。每个大组再随机分为2个亚组,选取7d和14d两个时间点,每组8只。用电凝法制备脑梗死模型。电针组针刺主穴为百会、水沟、大椎、神庭,每天针刺1次,留针30min。模型组、假手术组、正常对照组予以同一时间捆绑固定不予针刺处理。最后免疫组化法观察每组大鼠7d、14d两个时间点梗死灶周围GAP-43阳性细胞的表达,采用JD801形态学图像分析系统进行分析,并对结果进行统计学分析。结果 正常对照组和假手术组中无GAP-43阳性细胞,模型组在7d和14d两个时间点与假手术组比较有极显著意义（P<0.01）;模型组与电针治疗组比较,在7d和14d两个时间点电针组的GAP-43的阳性细胞均较模型组多,且两组差别有极显著意义（P<0.01）。结论 通督调神电针法可促进各时间点脑梗死大鼠脑组织内GAP-43的表达。     

肌苷对大鼠脑缺血再灌注后GAP-43 mRNA表达影响

目的探讨肌苷对脑缺血再灌注后中枢神经再生的作用。方法线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为治疗组和对照组,每组再随机分为缺血1.5 h再灌注2 h、12 h、1 d、2 d、3 d、7 d1、4 d组(n=4),另取4只作假手术组。应用BEDERSON等神经功能评分法评定神经功能,原位杂交技术检测脑缺血再灌注后各时间点脑组织生长相关蛋白基因(GAP-43 mRNA)的表达。结果对照组于再灌注2 h~7 d、治疗组于再灌注12 h~7 d,GAP-43 mRNA表达与假手术组比较明显增多(t=2.70~29.84,P<0.05),治疗组与对照组比较GAP-43mRNA表达于再灌注2 h一过性下降,12 h和7 d明显增高(t=1.97~7.41,P<0.05);治疗组与对照组比较神经功能恢复于再灌注7 d有显著性差异(t=2.31,P<0.05)。结论肌苷可促进大鼠脑缺血再灌注后神经功能恢复,其作用机制可能是通过调节与神经轴突再生有关的GAP-43 mRNA表达而实现的。     

健脾益智胶囊对MCAO大鼠海马β-catenin表达的影响

目的 :探讨健脾益智胶囊对大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠海马β-连环蛋白(β-catenin)基因与蛋白表达的影响。方法:SD大鼠120只,建立MCAO大鼠模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、西药组、中药组,模型组、假手术组给予0.9%氯化钠溶液,中药组、西药组分别给予健脾益智胶囊、尼莫地平混悬液灌胃。采用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR法于术后7 d、14 d、28 d观察海马β-catenin蛋白及m RNA表达情况。结果:术后7 d,中药组β-catenin蛋白及m RNA表达均高于其他各组(P0.05);术后14 d中药组蛋白及m RNA表达高于正常组、假手术组、模型组(P0.05);术后28 d中药组β-catenin蛋白及m RNA表达高于模型组(P0.05),低于中药组7 d、14 dβ-catenin蛋白及m RNA表达(P0.05)。结论:健脾益智胶囊可提高β-catenin蛋白及基因的表达,提示健脾益智胶囊能可能通过激活Wnt通路以促进缺血后神经干细胞增殖分化。     

半导体激光照射对大鼠神经损伤后脊髓GAP-43表达的影响

目的　研究 1 5m W半导体激光照射对大鼠损伤坐骨神经后脊髓中神经生长相关蛋白 (growth associated pro-tein,GAP-4 3 )表达的影响 .方法　 96只雄性 SD大鼠制成坐骨神经损伤模型 ,1 5m W半导体激光照射神经损伤部位 ,免疫组化方法观察脊髓内 GAP-4 3表达的变化 .结果　 1 wk内激光照射组和对照组无明显差异 .第 2周和第 4周时激光照射组脊髓内 GAP-4 3表达明显高于对照组 .第 8周时激光照射组较对照组脊髓内 GAP-4 3表达稍低 .结论　 1 5m W半导体激光照射可引起损伤神经后大鼠脊髓中 GAP-4 3表达的变化 ,有促进完成神经再生的作用 .     

雌激素对脊髓损伤大鼠运动功能及GAP-43表达的影响

目的 探讨雌激素对脊髓损伤(SCI)大鼠运动功能和损伤区域生长相关蛋白-43 (GAP-43)表达的影响。方法 72只雄性SD大鼠按随机数表法分为假手术组(A组)、生理盐水模型组(B组)、雌激素组(C组),每组24只,B组、C组制作SCI模型,B组等量生理盐水腹腔注射,C组雌激素腹腔注射。术后3 d、1周、2周、3周检测BBB评分和Rivlin斜板试验。术后3 d、1周、2周、3周时间点处死大鼠取脊髓组织,行免疫组织染色观察GAP-43的表达情况。结果 A组大鼠术后3 d、1周、2周、3周BBB评分分别为(20.48±0.57)分、(21.00±00)分、(21.00±00)分、(21.00±00)分,B组分别为(3.18±0.12)分、(4.28±0.15)分、(6.93±0.50)分、(8.95±0.34)分,C组分别为(3.27±0.15)分,(9.67±0.30)分、(14.06±0.69)分、(16.46±0.39)分,术后3 d、1周、2周、3周比较,A组明显高于B组和C组,C组术后1周、2周、3周明显高于B组,差异均有统计学意义(P<0.05);A组大鼠术后3 d、...     

金思维对老年性痴呆大鼠海马CA1区GAP-43表达的影响

目的观察β淀粉样肽(Aβ)对大鼠海马CA1区GAP-43表达的改变及中药金思维对其的影响。方法应用凝聚态Aβ1-42在大鼠海马内注射以建立老年性痴呆(AD)动物模型;4周后取脑冰冻切片,采用免疫组化法和计算机图像分析技术测定海马CA1区GAP-43阳性神经元数目及光密度值。结果海马CA1区GAP-43阳性细胞数模型组和正常组(分别为52.33±28.45和59·60±22.84)相比无显著差异;金思维组(77.06±14.66)与模型组和多奈哌齐组(51.26±22·44)相比均有显著性差异(P<0.01)。海马CA1区GAP-43阳性细胞OD值模型组和正常组(分别为92.77±7.37和71·30±11.65)相比有显著差异(P<0·01);金思维组(75.44±5.29)与模型组比较有显著差异(P<0.01);而与多奈哌齐组(73.09±5·18)相比无显著性差异(P>0.05)。结论金思维可使老年性痴呆模型大鼠海马区GAP-43的表达量增加,为金思维促神经生长、改善突触可塑性和学习记忆功能的分子机制提供了新的内容。     

白脉软膏对脑缺血大鼠脑组织p38 MAPK及GAP-43蛋白表达影响的实验研究

目的通过观察脑缺血后白脉软膏对大鼠脑组织p38MAPK及GAP-43蛋白表达的影响,探讨白脉软膏对脑组织的神经保护作用。方法60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组、白脉干预组,大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型,分别于1、3、7、14d处死动物,采用免疫组织化学法观察各组脑组织p38MAPK和GAP-43蛋白的表达。结果p38MAPK缺血组的表达在7、14d分别为178．2±18．7、164．8±21．5,显著高于白脉组的153．2±21．9、120．2±18．6（P〈0．01）;GAP-43白脉组的表达在7、14d分别为62．2±6．4、55．0±7．6,也显著高于缺血组的35．7±4．0、33．0±3．7（P〈0．01）。结论白脉软膏可调节脑缺血后p38MAPK和GAP-43的表达,并与损伤时间的变化有一定相关性,提示白脉软膏可能与损伤后神经元的再生、修复有关,有进一步研究的价值。     

电针对坐骨神经损伤大鼠BDNF、NGF和GAP-43表达的影响

目的 观察电针对大鼠坐骨神经损伤的保护作用,探究其作用机制。方法 取雄性SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、电针组。除假手术组外,其他各组采用钳夹法复制坐骨神经损伤模型,2 d后对电针组大鼠“足三里”和“环跳”进行电针治疗,7 d为1个疗程,共治疗2个疗程,并分别在7 d和14 d对大鼠坐骨神经功能进行评价,治疗结束后,采用免疫组织化学法对坐骨神经中脑源性神经营养因子（brain derived nerve growth factor,BDNF）、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和生长相关蛋白-43（growth associated protein-43,GAP-43）进行检测,同时在光镜下观察坐骨神经的病理变化。结果 与模型组比较,电针组大鼠坐骨神经功能指数（sciatic nerve function index,SFI）明显增加,最大诱发电位和神经传导速度（nerve conduction velocity,NCV）明显加快,潜伏期明显缩短。病理检查显示电针组神经纤维排列相对整齐,空泡样变性减少,可见到施万细胞的增殖。坐骨神经中BDNF、NGF和GAP-43表达明显上调。结论 电针治疗能促进大鼠坐骨神经损伤修复,可能与其上调BDNF、NGF和GAP-43表达有关。     

黄芪注射液对MCAO大鼠模型ICAM-1表达的影响

目的观察黄芪注射液对局灶性脑缺血后大鼠脑组织ICAM-1表达的影响。方法将72只SD大鼠随机分成对照组、假手术组、模型组、黄芪注射液预处理组,各18只。建立大鼠左侧大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,黄芪注射液预处理组用黄芪注射液4.5 g/kg于术前7天开始腹腔注射,共7 d,每天1次。剩余各组予腹腔注射等量的生理盐水。各组大鼠在造模后（对照组、假手术组在相应时间点）24 h采集标本。在相应时间点对各大鼠进行断头取脑,行免疫组织化学染色观察ICAM-1表达情况,行TTC染色观察大鼠脑梗死体积的变化。结果在各时间点假手术组、对照组脑组织中ICAM-1表达较少,两组相比较,其差异无统计学意义（P〉0.05）。模型组与对照组及假手术组比较,ICAM-1蛋白表达有明显增加,可见较大体积梗死灶,其差异有统计学意义（P〈0.05）。另外黄芪注射液预处理组与模型组相比较,ICAM-1蛋白表达明显降低,脑梗死体积减小,且差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论脑缺血时,缺血侧脑组织ICAM-1有表达,黄芪注射液可使ICAM-1表达减少;黄芪注射液可能通过下调ICAM-1的表达抑制炎症反应,促进损伤修复,起脑保护作用。     

电针联合强制性运动对脑缺血大鼠GAP-43和GFAP表达的影响

目的:通过观察电针联合强制性运动对局灶性脑缺血大鼠灶周生长相关蛋白-43(GAP-43)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,探讨脑缺血后电针联合强制性运动疗法促进神经功能恢复的作用及机制。方法:将SD雄性大鼠采用线栓法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)局灶性脑缺血模型,随机平均分为模型组、强制性运动(CIMT)组、电针组和电针联合CIMT组,每组以7、14、21、28和35d为时间点再随机平均分为5个亚组,同时设立假手术组。分别行相应治疗,以Morris水迷宫试验进行神经功能评价,分别于相应时间点取脑采用免疫组织化学方法观察每个时间点脑梗死灶周围GAP-43、GFAP阳性细胞数,Westernblot法检测脑组织GAP-43、GFAP蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组潜伏期和穿台次数显著高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.001)。与模型组比较,CIMT组和电针组潜伏期和穿台次数比较,差异无统计学意义(P>0.05);电针联合CIMT组潜伏期和穿台次数显著低于模型组,也显著低于CIMT组和电针组,差异均有统计学意义(P<0.001);电针组与CIMT组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组进行比较,在14、21、28d时电针联合CIMT组GAP-43表达显著上调,而GFAP表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);且电针联合CIMT组GAP-43阳性细胞数多于CIMT组和电针组,差异有统计学意义(P<0.05);电针联合CIMT组GFAP阳性细胞数少于CIMT组和电针组,差异有统计学意义(P<0.05);在35d缺血区周围GAP-43表达增加、GFAP表达减少,但与CIMT组和电针组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针联合CIMT可促进脑梗死灶周围GAP-43的表达,抑制GFAP的表达,从而改善大鼠神经功能。     

线栓法大鼠MCAO模型的实验研究

目的 对大鼠线栓法脑缺血模型进行改进,评价短暂性脑缺血模型和永久性脑缺血模型两种试验方法的效果.方法 参照Zea-Longa改良法,制作大鼠局灶脑缺血模型,根据手术时间、成功率、病死率、神经功能评分、脑梗死体积百分比来比较两种模型.结果 神经功能评分及脑梗死体积百分比两种方法并无明显差别,而永久性缺血模型组成功率和病死率高于短暂性缺血模型组,手术时间明显缩短.结论 制备大鼠短暂性脑缺血模型和永久性脑缺血模型有各自的优点,术者应根据实际选择.     

参芝通络胶囊对大鼠长期毒性的实验研究

目的 考察参芝通络胶囊对大鼠的长期毒性,为临床用药提供依据。方法 SD大鼠随机分为对照组和参芝通络胶囊高、中、低剂量组（4、2、1 g/kg）。ig给药13周,除观察一般状况外,检测体质量、血液学指标、血液生化指标,解剖计算内脏系数并进行病理组织学检查。剩余大鼠停止给药,恢复2周后进行上述相同指标检测。结果 参芝通络胶囊各剂量组对大鼠一般状况、体质量、血液学指标、血液生化指标、内脏系数和病理组织学无明显影响,恢复期大鼠上述各指标与对照组比较无明显差异。结论 在确定的临床使用剂量下,参芝通络胶囊长期服用无明显毒性。