补肾通络方对肺纤维化大鼠碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法采用博来霉素诱导建立实验性肺纤维化大鼠模型,以氢化可的松琥珀酸钠为对照,观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态及肺组织bFGF和bFGF mRNA表达的影响。结果同正常组比较,模型组大鼠肺组织病理纤维化显著,炎性反应明显,同时伴有肺组织bFGF和bFGF mRNA表达升高(P 0. 05,P 0. 01)。同模型组相比,补肾通络方高剂量组和氢化可的松琥珀酸钠对照组大鼠肺组织bFGF和bFGF mRNA表达明显下降(P 0. 05,P 0. 01),肺组织病理形态与模型组比较也得到改善。结论补肾通络方可能通过从蛋白和基因水平调节实验性肺纤维化大鼠肺组织bFGF表达,抑制肺纤维化。     

麻黄和五味子对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的影响

目的：研究麻黄、五味子对大鼠肺纤维化病理形态的影响及其作用机制。方法：90只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、氢化可的松组、麻黄组、五味子组以及麻黄＋五味子组,其中假手术组10只,其余各组均16只。采用博莱霉素A5气管滴入法建立大鼠肺纤维化模型。分别于治疗7和28d时观察各组肺组织病理切片,测量肺小动脉血管内径（inner diameter,ID）、中膜核密度（nuclear density,ND）,免疫组织化学法染色后检测微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：7和28d时与假手术组比较,模型组肺泡炎等级明显增高（P〈0.01）。与模型组比较,7d时氢化可的松组肺泡炎等级明显降低（P〈0.05）,28d时麻黄＋五味子组、氢化可地松组肺纤维化等级明显降低（P〈0.05）。与假手术组比较,模型组大鼠ND增高,ID降低（P〈0.05）;与模型组比较,五味子组、麻黄＋五味子组、氢化可的松组ND降低（P〈0.05）,麻黄组、麻黄＋五味子组、氢化可的松组ID增高（P〈0.05）。与假手术组比较,模型组大鼠MVD显著增高（P〈0.05）;与模型组比较,麻黄＋五味子组、氢化可的松组MVD降低（P〈0.05）。结论：麻黄和五味子联合应用对肺纤维化的肺部小动脉损伤有保护作用,可抑制肺微小血管增生。五味子可降低ND,减少微血管计数,麻黄可增高ID。     

补肾通络方对去势大鼠阴茎组织中细胞增殖的影响

目的探讨补肾通络方能否诱导去势大鼠阴茎组织细胞增殖增殖细胞包括成纤维细胞、平滑肌细胞及血管内皮细胞等.方法 40只成年SD雄性大白鼠随机分为对照组、去势组、补肾通络方组及丙酸睾酮组.补肾通络方组、丙酸睾酮组,术后2周分别灌胃补肾通络方药和肌注丙酸睾酮.各组分别于治疗后4 d和1周处死,取中断阴茎组织,用免疫组化技术(SP法)检测其细胞增殖情况.结果对照组阴茎组织中存在中等强度的细胞增殖(35.07±2.94),去势2周后几乎无细胞增殖(P＜0.01);丙酸睾酮组、补肾通络方组治疗4 d和1周后即诱导DNA合成,细胞增殖显著增多(20.60±2.66,19.62±1.75,P＜0.05).结论补肾通络方能诱导去势大鼠阴茎组织多种类型细胞增殖.     

补肾通络方对去势大鼠阴茎组织NOS基因表达的影响

目的　探讨一氧化氮合酶 (NOS)基因表达与补肾通络方在阴茎勃起中的关系。方法　将 4 0只成年雄性大白鼠随机分为对照组、去势组、补肾通络方组及丙酸睾酮组。去势组、补肾通络方组与丙酸睾酮组分别切除双侧睾丸 ,其中补肾通络方组和丙酸睾酮组在切除睾丸后给予中药及睾酮替代 ,于术后 3周取阴茎组织 ,用PCR仪检测其NOSmRNA的表达。结果　去势组NOSmRNA的表达较其他 3组下降 ;而表现NOSmRNA增多的组 ,由多到少排序为对照组、丙酸睾酮组及补肾通络方组 ;对照组、丙酸睾酮组及补肾通络方组其NOSmRNA内控量较多 ,与去势组比较有显著性差异(P <0 0 5 ) ,而丙酸睾酮组及补肾通络方组之间无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　补肾通络方可能通过调节NOSmRNA表达而在阴茎勃起中发挥重要作用。     

养肺活血方对肺纤维化大鼠肺组织血管新生的影响

目的 探讨养肺活血方对平阳霉素诱导肺纤维化大鼠肺组织血管新生的影响.方法 麻醉大鼠后,经气管软骨环间隙向心端穿刺,气管内注入平阳霉素5 mg/kg建立大鼠肺纤维化模型,假手术组大鼠在同样麻醉条件下气管内注入等量生理盐水.术后第2天开始每天灌胃给药,假手术组和模型组予5‰羧甲基纤维素钠(CMC钠)溶液,地塞米松组予等容积地塞米松蒸馏水溶液,养肺活血组予等容积养肺活血方合剂,灌胃28 d,麻醉处死大鼠,将左肺固定,包埋切片,常规脱蜡,用免疫组化SP法检测肺组织血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和CD34标记微血管.采用光学显微镜和全自动图像获取系统随机测量并计算平均光密度(IOD)值及微血管密度(Microvascular density,MVD).结果 模型组大鼠肺组织VEGF的水平明显高于假手术组(P＜0.01),养肺活血组肺组织VEGF的水平明显低于模型组(P＜0.01).模型组大鼠肺组织微血管密度明显低于假手术组,养肺活血组肺组织微血管密度明显高于模型组.结论 降低肺组织VEGF的水平和增加微血管密度可能是中药养肺活血方治疗肺纤维化的机制之一.     

补肾通络方对去卵巢大鼠破骨细胞组织蛋白酶K表达的影响

【目的】探讨组织蛋白酶K(cathepsin K,CK)在骨质疏松症发病中的意义,观察补肾通络方对去卵巢大鼠破骨细胞CK表达的影响。【方法】选用30只雌性SD大鼠随机分成3组:假手术组、模型组及补肾通络方组(中药组,剂量为12.46 g.kg-1.d-1);后2组切除双侧卵巢,4周后中药组给予补肾通络方灌胃。分别于第6、12周测定各组大鼠全身骨密度(BMD),并采用Western blot及逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法测定体外分离培养破骨细胞中CK的蛋白及基因表达。【结果】体外分离培养椎骨来源的破骨细胞具有成熟破骨细胞的表型特征,去卵巢模型大鼠骨密度在时效上与CK的表达呈现负相关;补肾通络方以时效方式下调CK蛋白及CK mRNA的表达水平(均P0.05)。【结论】CK的过度表达是导致骨密度下降的重要原因,是骨质疏松症发生的潜在危险因子;以时效方式下调CK蛋白及CK mRNA的表达进而治疗骨质疏松症可能是补肾通络方的作用机制之一。     

双参平肺方对博来霉素致肺纤维化大鼠肠道菌群的影响

目的 研究博来霉素(BLM)致肺纤维化(PF)及给予双参平肺方对肠道菌群结构的影响。方法 采用气管内滴注BLM(5 mg·kg^-1)复制PF大鼠模型,将造模后的大鼠随机分为模型组、双参平肺方组,并设空白对照组,每组6～8只,双参平肺方组灌胃双参平肺方6.5 g·kg^-1,模型组、空白对照组灌胃等量生理盐水,连续灌胃28 d后进行肺组织病理学评价,并测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量及金属酶蛋白7(MMP7)mRNA水平,采用16S rDNA测序技术检测肠道菌群变化,通过相关性分析,筛选与双参平肺方改善PF程度相关的菌群,通过ROC分析评估肠道菌群识别PF及双参平肺方对其作用的可能性。结果 与空白对照组比较,模型组大鼠肺组织出现病变,HYP含量及MMP7 mRNA水平显著升高(P<0.01);给予双参平肺方后,上述指标较模型组均显著改善(P<0.01)。16S rDNA测序结果显示,模型组有17个肠道菌发生了改变,给予双参平肺方后能改善这一变化,结合相关性分析,发现双参平肺方能下调部分致病菌属如梭杆菌属、志贺氏菌属、异杆菌属、梭菌属等...     

补肾通络防衰方对大鼠脑线粒体自由基水平的影响

目的：探讨衰老的机理和补肾通路防衰方延缓衰老的作用机制，观察补肾通路防衰方对大鼠脑线检体自由基的影响。方法：将84只SD大鼠分成青年组、老年空白组、补肾对照组、通路对照组、维生素E对照组、补肾通路防衰方大剂量组和小剂量组共7组，予以相应治疗60天后，提取脑线检体，检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD）活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果：补肾通路防衰方能明显提高脑线检体SOD活性和GHS含量，降低线检体MDA含量，其作用优于单纯补肾治疗、单纯通路治疗以及维生素E治疗，且与剂量呈正相关。结论：肾虚夹瘀血痰浊阻络是衰老的基本病理。补肾通路防衰方能通过影响线粒体自由基水平来阻止线粒体老化，从而起到延缓衰老的作用。     

肺纤维化动物模型肺组织形态定量分析

目的：采用光镜组织病理学检查及电子计算机图像分析仪形态定量分析，更客观地评价肺纤维化形成的过程。方法：气管内一次注入博莱霉素Ａ５（ＢＬＭＡ５）制成肺纤维化动物模型，于第７、１４、２８、４３、５６天分批处死动物，光镜下依据Ｓｚａｐｉｅｌ等的方法测定肺泡炎和肺纤维化程度，同时采用电子计算机图像分析仪测算肺泡腔、肺泡炎及肺纤维化所占面积。结果：注入ＢＬＭＡ５第７天肺泡炎最重，第２８天肺纤维化最明显。结论：组织学定量与电子计算机图像分析仪所测得结果有良好的相关性。采用本方法可以客观地评价各种药物治疗肺纤维化的疗效。     

肺纤维化动物模型肺组织形态定量分析

目的：采用光镜组织病理学检查及电子计算机图像分析仪形态定量分析，更客观地评价肺纤维化形成的过程。方法：气管内一次注入博莱霉素Ａ５（ＢＬＭＡ５）制成肺纤维化动物模型，于第７、１４、２８、４２、５６天分批处死动物，光镜下依据Ｓｚａｐｉｅｌ等的方法测定肺泡炎和肺纤维化程度，同时采用电子计算机图像分析仪测算肺泡腔、肺泡炎及肺纤维化所占面积。结果：注入ＢＬＭ Ａ５第７天肺泡炎最重，第２８天肺纤维化最明显。结     

肺纤维化大鼠模型肺组织病理超微结构观察及定量分析

目的:观察以气管内灌注博来霉素方法建立的肺纤维化大鼠模型肺组织的病理演变规律,建立定量评价病变程度的方法.方法:30只大鼠随机分成5组:正常组,第7天模型组,第14天模型组,第21天模型组,第28天组,按时取肺组织进行电镜观察,以肺泡间隔面积和肺泡间隔灰度为定量分析指标,行光镜下的图像分析.结果:电镜观察显示肺泡间隔中胶原沉积随时间增多,与低倍镜下形态定量分析对比观察,肺泡间隔面积随时间增大,肺泡间隔灰度随时间减小.从第14天起与正常组比较差异有统计学意义.结论:低倍镜条件下肺泡间隔面积和肺泡间隔灰度基本能反映间隔中胶原沉积的程度,可以作为病变程度的一个主要评价指标.     

化瘀理肺方对肺纤维化大鼠肺组织miR-27a与α-SMA表达的影响

目的：探究化瘀理肺方对博莱霉素诱导大鼠肺纤维的抑制作用与对miR-27a、α-SMA表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分成正常组、模型组和化瘀理肺方治疗组各10只。采用注射博莱霉素构建肺纤维化大鼠模型。化瘀理肺方治疗组在造模7 d后给与化瘀理肺方灌胃治疗7 d。于造模后第14天分组处死大鼠。取右肺进行HE染色,Masson染色和免疫组化观察α-SMA的表达。通过qRT-PCR检测miR-27a的表达,同时采用双荧光素酶报告基因技术检测miR-27a与ACTA2(α-SMA蛋白编码基因)的结合位点。结果：与模型组比较,化瘀理肺方治疗组大鼠肺组织的病理形态学变化明显减轻,肺泡炎及纤维化明显降低,肺组织中胶原沉积明显减少,α-SMA蛋白表达明显降低。同时,化瘀理肺方治疗组肺组织miR-27a表达显著上升,双荧光素酶报告基因证实miR-27a与ACTA2基因存在结合位点。结论：化瘀理肺方可以抑制博莱霉素诱导大鼠肺纤维化,其机制可能与促进miR-27a表达有关。     

实验性大鼠肺纤维化病理形态及超微结构观察

目的 从形态学上研究肺纤维化的形成过程，为防治研究和客观地评价用药物治疗肺纤维化的疗效提供依据。方法 向大鼠气管内一次性注入博莱霉素(5mg／kg)，观察注药后各模型组的肺系数、肺组织定量分析、肺组织病理及超微结构的变化。结果 模型组肺系数从第7d开始呈逐渐升高趋势；定量分析：7d组肺泡炎最严重，28d组肺泡腔明显缩小，胶原纤维成分增加；光镜下7d组肺泡腔及肺泡间质内以炎细胞浸润为主，14d时肺泡间质增宽，成纤维细胞增多，28d时胶原纤维增生，部分肺泡腔萎缩消失；电镜下3d和7d时肺泡上皮线粒体肿胀，空泡化，核固缩或核染色质边集，肺毛细血管基膜水肿或增厚，14d时Ⅱ型肺泡上皮细胞增生，其内板层小体增多，成纤维细胞增多；28d时肺间质增宽，巨噬细胞及成纤维细胞增多，胶原纤维呈灶性沉集。结论 建立的大鼠肺纤维化模型符合肺泡炎一纤维化的早期演变过程。     

补肾方对流产大鼠胎盘超微结构的影响

为了在组织形态学上探讨补肾方药对流产的治疗作用，寻找其作用的形态学基础，对澳隐亭致流产SD大鼠模型，以补肾方高、低剂量为治疗组、黄体酮肌注为阳性对照组，于孕12d处死，取下胎盘组织以透射电镜观察各组超徽结构。结果发现与正常组相比，模型组的胎盘组织出现下列明显的超微结构改变：在合体滋养层，游离面的血窦密度明显减小；数量较多的线粒体肿胀；粗面内质网池扩张，膜上核糖体有脱颗粒现象；基底膜弯曲、增厚；在基底膜内或附近常见电子致密球状颗粒；微血管内皮增厚，伴有微绒毛样突起。补肾中药组和黄体酮组滑面内质网增加，呈扩张状态，线粒体丰富，胞质内有大量脂滴，其它细胞器基本正常。结果提示，溴隐亭引起大鼠胎盘结构改变，影响其进行物质交换和分泌激素的功能，从而引起流产的发生。补肾中药作用后可逆转流产胎盘超微结构的形态学改变，使其向有利于甾体激素合成的方向转化，起到维持妊娠的作用。     

补肾活血方对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构的影响

目的观察模型大鼠睾丸组织结构及超微结构的改变,以及补肾活血方对其病理改变的影响.方法本实验设5组:将35只3月龄雄性SD大鼠先随机抽出7只为假手术组,其余28只大鼠采用肾静脉缩窄法建立实验性精索静脉曲张病理模型,造模完成后再随机均分为模型组、补肾活血方低剂量组、补肾活血方中剂量组、补肾活血方高剂量组.造模完成后48天开始给药,连续给药60天,光镜观察睾丸组织结构改变,透射电镜观察睾丸超微结构改变.结果模型大鼠睾丸组织可见明显的病理性改变补肾活血方各组大鼠睾丸组织的病理性改变较模型组显著减轻.结论精索静脉曲张可引起睾丸组织的病理性损伤,补肾活血方可不同程度地修复这种病理性损伤.     

肺纤维化大鼠BALF中细胞成分与肺组织病理的动态研究

以博莱霉素致大鼠肺纤维化为模型，动态观察肺组织病理与支气管肺泡灌洗液细胞学所见，探讨支气管肺泡灌洗的临床评价及炎性细胞在肺纤维化中的动态变化和作用。结果：肺组织病理所见与支气管肺泡灌洗液中的细胞成份变化在炎症过程中有其一致性；巨噬细胞和中性粒细胞首先出现于肺内，而淋巴细胞则继其后；给予博莱霉素后第１～７天（早期）的肺部病变以肺泡炎为主，而第１４天以后则进入慢性纤维化阶段。提示：ＢＡＬＦ细胞学改变能较准确地反映肺内细胞成分的变化，ＢＡＬ可作为一项重要的检测手段；中性粒细胞主要在急性肺损伤／肺泡炎期起作用，而淋巴细胞则在慢性纤维化阶段扮演重要角色。     

肺纤维化大鼠BALF中细胞中分与肺组织病理的动态研究

以博莱毒素致大鼠肺纤维化的模型，动态观察肺组织病理与支气管肺泡灌洗液细胞学所见，探讨敢管肺泡灌洗的临床评价及炎性细胞在肺纤维化中的动态变化和作用。结果：肺组织病理所见与支气管肺泡灌洗中的细胞成份变化在炎症过程中有其一致性；巨噬细胞和中性粒细胞首先出现于肺内，而淋巴细胞则继其后；给予博莱霉素后第１－７天（早期）的肺部病变以肺泡炎为主，而第１４天以后则进行慢性纤维化阶段。提示：ＢＡＬＦ细胞学改变能较准     

化淤理肺方对肺纤维化大鼠MMP 2和TIMP 1表达的影响

目的探讨化淤理肺方对肺纤维化的干预作用和对MMP 2/TIMP 1表达的影响。方法肺纤维化Wistar雄性大鼠84只,随机分成4组:中药组、激素组、模型组和对照组。所有大鼠第7、14、28天各处死7只。经HE染色评价肺组织肺泡炎和肺纤维化程度,免疫组化检测法检测MMP 2与TIMP 1的表达。结果① 肺泡炎、肺纤维化程度评价：模型组肺泡炎和肺纤维化程度较重,且胶原纤维沉积较多;中药组可见炎性细胞较少,肺泡结构基本正常,肺泡炎与肺纤维化较轻;激素组肺泡炎及纤维化与中药组相似。 ② MMP 2蛋白的表达：中药组第7、14、28天较模型组表达明显减轻,于第14天达到高峰,此后降低,表达水平与激素组相似。③ TIMP 1蛋白表达：中药组在这3个时段的表达均较对照组增高, 但均较模型组低,且呈逐渐升高趋势。结论化淤理肺方能减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能是通过调节MMP 2、TIMP 1途径起作用。     

肺炎合剂对肺纤维化大鼠组织形态和胶原纤维的影响

目的观察肺炎合剂对肺纤维化大鼠病理学组织形态、胶原纤维的影响。方法将动物分成假手术组、模型组、氢化可地松组和肺炎合剂低、中、高剂量组6组,采用博莱霉素A5造模,于第7天和第28天行常规病理形态观察和苦味酸天狼猩红-偏光法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维变化。结果肺炎合剂能抑制博莱霉素A5造成的肺泡炎、肺纤维化的病变程度,抑制Ⅰ型胶原的增加,对抗Ⅲ/Ⅰ型胶原比例下降。结论肺炎合剂通过抑制肺泡炎的发展、抑制胶原纤维的沉积,特别是维持胶原沉积与降解动态平衡而抑制纤维化的发展。     

生地提取物对肺纤维化大鼠肺系数及肺组织HYP的影响

目的研究生地提取物对肺纤维化模型大鼠肺系数及肺组织羟脯氨酸(HYP)的影响。方法博莱霉素气管内注入法复制大鼠肺纤维化模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、生地注射组、生地口服组和甲强龙组,观察大鼠肺系数和肺组织HYP指标。结果与模型组比较,生地注射组和生地口服组第28天肺系数降低(P 0. 05,P 0. 001),各给药组第3天HYP均有降低趋势,生地注射组和生地口服组第28天HYP降低(P 0. 05,P 0. 01)。结论生地提取物可改善肺纤维化大鼠肺系数,从而有效治疗肺纤维化,其机制可能和抑制HYP胶原蛋白的表达有关。