利用基因芯片技术阐述中药复方对卵巢癌细胞株SKOV3的作用机制

目的：研究理冲生髓饮对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株SKOV3的治疗作用,并利用基因表达谱芯片探索其作用机制。方法：Wistar大鼠随机分组,灌胃给药,采血制备含药血清。提取对照组及理冲生髓饮组肿瘤细胞mRNA,制备DNA探针并分别用Cy3和Cy5两种荧光染料标记,与基因表达谱芯片进行杂交,经扫描、分析,得出药物作用后表达有差异的基因。结果：共筛选出显著表达差异基因136种,其中16种基因表达水平下调,120种基因表达上调。结论：理冲生髓饮对SKOV3生长有抑制作用。     

复方理冲生髓饮对二甲基苯蒽诱发的大鼠卵巢肿瘤组织形态学的影响

目的:观察中药复方理冲生髓饮对二甲基苯蒽诱发大鼠卵巢肿瘤组织形态学的变化。方法:采用苯溶二甲基苯蒽(DMBA)卵巢局部埋线法诱发大鼠卵巢肿瘤模型,观察理冲生髓饮对模型大鼠卵巢肿瘤组织光镜和电镜下病理形态学及超微结构的变化。结果:理冲生髓饮对诱发的卵巢肿瘤组织形态改变明显,光镜下细胞病理改变以卵巢实质增生和腺泡囊肿为主,细胞异型性不大,间质受浸较轻。电镜下细胞核固缩,染色体边集,胞浆内可见大量脂滴堆积,出现凋亡小体。结论:理冲生髓饮对化学致癌因子诱发的大鼠卵巢肿瘤有抑制和阻断作用,并且长期用药在抑制靶细胞的肿瘤性转归方面具有显著效果。     

理冲生髓饮对卵巢上皮性癌患者免疫状态影响的临床研究

目的：研究理冲生髓饮提高卵巢癌患者免疫功能的机理。方法：随机设单纯化疗组和理冲生髓饮加化疗组针对NK细胞活性、T淋巴细胞亚群、红细胞C3b受体等指标进行临床研究。结果：理冲生髓饮可以减轻化疗药物的毒副作用，保障化疗顺利进行，同时通过增强卵巢患者免疫功能而达到抗肿瘤的作用。结论：理冲生髓饮对卵巢癌具有减毒增效、抗肿瘤的作用。     

紫草素对人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究紫草素对人卵巢癌SKOV3细胞的影响,并对其机制进行初步研究。方法:以不同浓度的紫草素干预人卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法观察紫草素对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测经紫草素干预48 h后SKOV3细胞的凋亡情况和细胞周期,并以Western blot法测定Bax及Bcl-2蛋白表达。结果:紫草素(0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μg/ml)经过24 h,48 h及72 h对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为6.90%,12.11%,20.82%,30.20%,41.69%,56.81%;7.28%,12.16%,20.18%,40.81%,51.23%,70.51%;10.50%,15.90%,28.16%,46.86%,59.01%,78.58%,呈剂量依赖性和时间依赖性的关系。流式细胞术检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,其凋亡率分别为20.58%,35.10%及51.26%,G0/G1期细胞的比例分别62.10%,63.91%及83.86%。Western blotting检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,Bcl-2蛋白水平表达随紫草素浓度递增减少,而Bax蛋白水平随紫草素浓度递增而递增。结论:紫草素可抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的体外增殖并诱导其凋亡,其机制可能为上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

中药复方药物血清对人卵巢癌细胞SKOV3抑制作用的研究

目的：探讨中药复方理冲生髓饮药物血清对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖和细胞凋亡形态学变化的作用机理。方法：以不同剂量理冲生髓饮水煎荆灌饲大鼠，制备药物血清，培养SKOV3卵巢癌细胞株，应用MTT比色法观察SKOV3细胞生长情况和在电子显微镜下观察中药血清诱导SKOV3细胞凋亡的形态学变化。结果：理冲生髓饮药物血清对人卵巢癌细胞SKOV3的体外生长有抑制作用；电镜下可见凋亡的肿瘤细胞表面微绒毛消失，细胞核固缩，染色质凝集成新月状，形成凋亡小体等典型的形态学改变。结论：理冲生髓饮药物血清对人卵巢癌细胞SKOV3的体外增殖有抑制作用并可诱导其细胞凋亡。     

理冲生髓饮药物血清对卵巢癌细胞集落形成和Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨中药复方理冲生髓饮药物血清对人卵巢癌细胞株SKOV3集落形成和对Bcl-2蛋白表达的作用机理.方法:以不同剂量理冲生髓饮水煎剂灌饲大鼠,制备药物血清,培养SKOV3卵巢癌细胞株,采用SABC法检测SKOV3细胞Bcl-2蛋白表达和显微镜观察集落形成情况.结果:理冲生髓饮血清组Bcl-2基因蛋白表达低于顺铂组和空白血清组(P＜0.01);显微镜下可见集落内SKOV3细胞数量少,结构松散.结论:理冲生髓饮药物血清对人卵巢癌细胞SKOV3的体外生长有抑制作用,可阻断Bcl-2癌基因蛋白的表达,提示Bcl-2是一种重要的细胞生存基因.     

土荆皮酸诱导卵巢癌细胞系SKOV3凋亡的实验研究

目的:研究土荆皮酸(PAB)对体外培养的SKOV3细胞的生物学效应和作用机制。方法:用MTT法、流式细胞术、电镜检测体外培养的SKOV3细胞在PAB作用下的增殖抑制及凋亡程度,用RT-PCR法检测P53/Bcl-2/Bax的表达水平。结果:①PAB对SKOV3细胞的增殖抑制作用随浓度升高而明显增强,其IC50约10μmol/L。②流式细胞术证实PAB呈浓度依赖性改变细胞周期分布,一方面降低G0/G1期的细胞比例,另一方面增高G2/M期细胞的比例。③RT-PCR法显示SKOV3细胞在10μmol/LPAB作用12、24、48h均显示Bax上调和Bcl-2的下调,P53则未检测到表达。结论:在体外PAB能抑制SKOV3细胞增殖,诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与Bax的上调和Bc1-2的下调相关。     

理冲生髓饮对大鼠卵巢肿瘤组织P53和PCNA表达影响的研究

目的:观察理冲生髓饮对大鼠卵巢肿瘤组织P53和PCNA表达的影响。方法:采用二甲基苯蒽(DMBA)卵巢局部埋线法诱发大鼠卵巢肿瘤模型,观察理冲生髓饮对癌组织P53和PCNA表达的影响,免疫组化SABC法检测卵巢肿瘤组织的P53和PCNA阳性表达。结果:大鼠卵巢肿瘤组织存在P53蛋白基因和PC-NA的过度表达。理冲生髓饮组可降低卵巢肿瘤细胞的PCNA和P53的表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:P53基因蛋白的突变可能是导致大鼠卵巢恶性肿瘤发生发展的原因,理冲生髓饮对其过度表达有调节作用。     

木犀草素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响

目的观察木犀草素(Luteolin)对人卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响,并通过转录组学探讨其分子机制。方法体外培养人卵巢癌细胞,设立空白对照组、Luteolin组(10、20、40μmol·L^-1),给予药物干预48 h。CCK-8法检测细胞增殖抑制率;EdU实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Hochest33342染色观察细胞的形态学变化;转录组测序分析空白对照组与40μmol·L^-1Luteolin组干预48 h的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs);根据转录组测序结果,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中CDKN1A、CDC20、GADD45A、ATF4、DDIT3、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1 mRNA的表达。结果与空白对照组比较,Luteolin组细胞增殖抑制率均显著升高(P<0.05),呈明显的浓度依赖性;Luteolin组EdU阳性细胞率均显著降低(P<0.05);Luteolin组G0/G1期细胞比例均显著降低(P<0.05),S期细胞比例均显著升高(P<0.05),呈明显的浓度依赖性;Luteolin组细胞凋亡率均显著升高(P<0.05),呈明显的浓度依赖性;Luteolin组Hochest33342染色存在细胞凋亡现象;通过转录组测序分析,筛选获得1476个DEGs,挖掘到包括CDKN1A、CDC20、GADD45A、ATF4、DDIT3、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1调控细胞增殖与凋亡的DEGs;与空白对照组比较,Luteolin组的CDKN1A、GADD45A、ATF4、DDIT3 mRNA表达水平上调(P<0.05),CDC20、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1 mRNA表达水平下调(P<0.05)。结论 Luteolin可抑制SKOV3细胞的增殖及诱导其凋亡,其机制可能涉及CDKN1A、CDC20、GADD45A、ATF4、DDIT3、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1多基因的调控。     

淫羊藿素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制及促凋亡作用

基于PI3K/Akt信号通路,观察人卵巢癌SKOV3细胞在不同浓度淫羊藿素(icaritin)干预下的增殖与凋亡变化过程,探讨可能存在的分子机制.研究对象为人卵巢癌细胞SKOV3,设置空白对照组和淫羊藿素不同浓度组(5,10,20μmol· L-1),药物干预48 h,采用cell counting kit-8 (CC...     

洋葱提取物对人结肠癌细胞凋亡及周期的影响

目的研究洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株凋亡及细胞周期的影响。方法采用水提取和乙醇提取洋葱后,用紫外可见分光光度仪检测提取物中黄酮类化合物含量。体外培养结肠癌细胞株(LoVo cells、SW480 cells、HT-29 cells、HCT-8 cells),采用含黄酮类化合物浓度40 mg/L和60 mg/L的提取物对其进行干预,流式细胞仪检测洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株凋亡影响,检测含黄酮类化合物浓度为40 mg/L的水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞周期的影响。结果洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株的凋亡具有剂量依赖性,其中水提取物引起SW480、HCT-8细胞株凋亡率较乙醇提取物高。而乙醇提取物引起HT-29细胞株凋亡率较水提取物高。洋葱提取物能将结肠癌细胞株的细胞周期阻滞在G1期,阻碍其向S期转换,以抑制细胞增殖。结论洋葱水提取物和乙醇提取物能够诱导结肠癌细胞株的凋亡,并能够对结肠癌细胞周期产生影响,其具体机制需进一步探讨。     

基于免疫相关细胞因子研究理冲汤对子宫肌瘤细胞凋亡和增殖的影响

目的：从免疫相关细胞因子表达情况研究理冲汤对子宫肌瘤细胞凋亡和增殖的影响。方法：用异种移植法建立子宫肌瘤小鼠模型,随机分为正常组、模型组、理冲汤组和阳性药组,每组6只,连续药物干预4周;通过透射电子显微镜观察子宫平滑肌细胞的超微结构;采用免疫组织化学染色检测促进细胞凋亡因子胱天蛋白酶3(Caspase-3)、抑制细胞增殖因子Ki67的表达情况;采用MSD电化学发光技术检测白细胞介素-12p70(IL-12p70)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤生长相关基因(GRO/KC)的表达情况。结果：与模型组比较,理冲汤组子宫平滑肌细胞超微结构改善明显,细胞排列紊乱和细胞膜增厚现象均有所减轻;子宫组织中Caspase-3表达升高(P<0.01),Ki67表达降低(P<0.01);血清中IL-12p70表达升高(P<0.05),IL-1β、IL-6、GRO/KC表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论：理冲汤具有促进子宫肌瘤细胞凋亡、抑制细胞增殖的作用,其分子机制与调控免疫相关细胞因子表达有关。     

胃宁方对人胃癌SGC-7910细胞增殖凋亡的影响

目的观察胃宁方对人胃癌SGC-7910细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法不同浓度不同时间的胃宁方处理人胃癌SGC-7910细胞,MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期、凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)、c-Myc、Bcl-2表达。结果胃宁方能抑制SGC-7910细胞增殖,抑制率与浓度呈依赖关系;细胞周期G0/G1期、S期比例增加,胃宁方能诱导细胞凋亡,凋亡率与时间、剂量呈依赖关系;胃宁方作用后PCNA、c-Myc、Bcl-2表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论胃宁方能抑制SGC-7910细胞增殖,诱导其凋亡;其作用机制可能与下调PCNA、c-Myc、Bcl-2的表达有关。     

白英甾体皂苷组分诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡的研究

目的：探讨白英甾体皂苷组分体外抑制人卵巢癌细胞（SKOV3）及诱导凋亡的作用。方法：MTT法测定SKOV3细胞体外增殖情况、姬姆萨-瑞氏染色观测形态学改变、通过流式细胞仪及Caspase-3和Caspase-9活化程度检测研究细胞凋亡及其途径。结果：白英甾体皂苷组分能显著抑制SKOV3细胞的体外增殖,诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞,上调Caspase-3和Caspase-9的活性。     

白英甾体皂苷组分诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡的研究

目的：探讨白英甾体皂苷组分体外抑制人卵巢癌细胞（SKOV3）及诱导凋亡的作用。方法：MTT法测定SKOV3细胞体外增殖情况、姬姆萨-瑞氏染色观测形态学改变、通过流式细胞仪及Caspase-3和Caspase-9活化程度检测研究细胞凋亡及其途径。结果：白英甾体皂苷组分能显著抑制SKOV3细胞的体外增殖,诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞,上调Caspase-3和Caspase-9的活性。     

蛇床子素对卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响

目的:探讨蛇床子素对卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响以及其潜在的机制。方法:不同浓度蛇床子素作用于卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法检测蛇床子素对细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色和流式细胞术检测蛇床子素对细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western Blot检测Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平。结果:蛇床子素明显抑制SKOV3细胞的增殖;蛇床子素干预后,有典型的凋亡小体形成,SKOV3细胞的凋亡率随着药物浓度的增加而增加,80mg/L处理组细胞的凋亡率达到(24.90±5.35)%;qRT-PCR和Western Blot结果显示各浓度蛇床子素对SKOV3细胞促凋亡因子Bax mRNA和蛋白水平表达均有上调作用,而抗凋亡因子Bcl-2mRNA和蛋白表达均下调。结论:蛇床子素能够抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与其下调抗凋亡因子Bcl-2和上调促凋亡因子Bax的表达有关。     

半夏泻心汤及其拆方对胃腺癌SGC-7901细胞周期和凋亡的影响

目的:从细胞增殖、凋亡、细胞周期角度,研究半夏泻心汤治疗胃癌机制。方法:把半夏泻心汤拆分为苦降、辛开和补益3个组方,1×104细胞/孔接种于96孔板,药物浓度为4,2,0.5,0.125 g·L-1,MTT法检测细胞增殖;1×105/孔接种于6孔板,全方和苦降高、低浓度为0.5,0.125 g·L-1,辛开和补益高、低浓度为4,2 g·L-1,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。观察半夏泻心汤及其拆方对胃癌细胞SGC-7901增殖、细胞周期和凋亡的影响,并与5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)比较。结果:半夏泻心汤全方及苦降、辛开组方能够抑制SGC-7901细胞增殖,全方IC50为1.645 g·L-1,苦降组为1.446 g·L-1,辛开组为3.867 g·L-1;它们增加SGC-7901细胞S期和G0-G1期百分比,促进细胞凋亡,高浓度强于低浓度,但补益组方对此没有作用。结论:半夏泻心汤及其拆方能够一定程度的抑制细胞增殖,以苦降组为最,补益组作用甚微,其机制可能与药物阻滞细胞至G1/S期和诱导细胞凋亡有关。     

白头翁汤对人肺腺癌细胞增殖及周期调控的影响

目的观察白头翁汤对人肺腺癌细胞增殖及周期阻滞、促凋亡的影响,初步探讨其抗癌作用机制。方法以人肺腺癌细胞株A549、H1975细胞为研究对象,不同浓度白头翁汤干预后,运用CCK8法检测A549、H1975细胞增殖,细胞克隆形成实验观察A549、H1975细胞克隆形成,流式细胞术检测A549细胞周期,Western blot检测A549细胞周期相关蛋白CDK1、CyclinB1和细胞凋亡相关蛋白Caspase 8、9、3及PARP、Bcl2的表达。结果与对照组比较,不同浓度白头翁汤均能抑制A549、H1975细胞增殖和细胞克隆形成,不同浓度白头翁汤G2/M期细胞比例明显增加,且将A549肺腺癌细胞周期阻滞在G2/M期,0.2mg/mL白头翁汤均明显降低CDK1、CyclinB1和Caspase8、9、3及PARP、Bcl2蛋白的表达。结论白头翁汤有促进人肺腺癌细胞凋亡的作用,其机制可能与其降低细胞周期和细胞凋亡相关蛋白的表达有关。