应用激光解吸电离飞行时间质谱技术筛选无精子症患者精浆差异蛋白

目的：用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）分析无精子症和正常人精浆蛋白指纹图谱的变化，建立能鉴别无精子症和正常人精浆标志物的诊断模型。方法：收集33例无精子症和31例正常人的精浆，用H50（疏水芯片）蛋白质芯片和SELDI-TOF-MS检测蛋白质质谱的表达。用Biomarker Patterns Software分析软件进行数据处理，建立区分无精子症和正常人精浆中蛋白质谱差异表达模型。结果：在分子量2000～20000范围内，共检测到78个有差异的蛋白峰，其中12个差异有显著性（P〈0.01），建立了由3个差异蛋白组成的无精子症诊断模型，其诊断灵敏度为96．9％（32／33），特异性为96．7％（30／31）。结论：用SELDI-TOF-MS技术初步建立的区分无精子症和正常人的精浆蛋白差异表达模型可以区别无精子症和正常人，可能为无精子症的诊断提供新的手段。     

蛋白质芯片技术在前列腺癌诊断中的应用

目的通过应用蛋白质芯片和生物信息学技术筛选前列腺癌患者的血清标志蛋白,诊断早期前列腺癌.方法以集团普查诊断的83例前列腺癌患者血清和95例正常人血清为研究对象.采用SELDI（surfaced enhanced laser desorption/ionization）蛋白质芯片技术检测血清的蛋白质谱.以蛋白质芯片阅读机读取谱图数据,后者应用Biomarker Wizard 和Biomarker Pattern软件进行分析比较.结果与正常人血清蛋白质谱比较发现,前列腺癌患者血清有18个标志蛋白,其中4个标志蛋白呈高表达（15 265,15 868,16 003,16 068）,14个标志蛋白呈低表达.Biomarker Wizard和Biomarker Pattern软件在设定条件下自动选取8个标志蛋白用于建立前列腺癌诊断的分类树模型.此模型可正确划分96.386%的前列腺癌患者和92.632%的正常人.结论 SELDI蛋白质芯片技术可筛选出前列腺癌标志蛋白并建立前列腺癌诊断分类树模型,可能成为前列腺癌诊断的有效方法.     

SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术在宫颈癌早期诊断和鉴别诊断中的应用

目的 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术检测宫颈浸润癌和原位癌患者血清蛋白质指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物.方法 应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集74例宫颈癌(44例宫颈浸润癌和30例宫颈原位癌)患者和51例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白,应用Biomarker patternsoftware 5.0.2版建立诊断模型,并盲法验证其诊断效率.结果 宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有12个差异表达的蛋白质峰(P<0.05),筛选出分子量分别为5642、5912、5905、5660、2288和8700 Da 6个标志蛋白,将125例血清随机分为30例宫颈癌和30例健康人血清作为训练组用于建立人工神经网络(ANN)模型,44例宫颈癌和21例健康人血清作为验证组,其对宫颈癌的诊断敏感性为95.45%,特异性为95.23%.宫颈浸润癌与原住癌血清蛋白质谱有16个差异表达的蛋白质(P<0.01),筛选出分子量分别为13776、2796、2697、2070、2768和9222 Da 6个标志蛋白,随机将15例宫颈浸润癌和15例原位癌血清分为训练组,29例浸润癌和15例原位癌作为验证组,其鉴别宫颈浸润癌的敏感性为93.10%.特异性为93.33%.宫颈原位癌患者与对照组血清蛋白质谱比较有6个差异表迭的蛋白质(P<0.05),分别随机选取15例宫颈原位癌和15例健康人血清作为训练组,15例原位癌和36例健康人血清作为验证组,其诊断宫颈原位癌的敏感性为60%,特异性为98.08%.结论 血清蛋白质谱技术可望用于宫颈浸润癌和原位癌的鉴别,标志蛋白的鉴定可能对宫颈癌浸润机制的探讨和新的治疗手段的开展具有重要的指导意义.     

胃癌血清蛋白指纹人工神经网络诊断模型的研究

目的建立胃癌人工神经网络蛋白分子诊断模型,寻找胃癌早期诊断的新方法。方法采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及配套芯片CM10和Biomarker Wizard 3.1软件筛选胃癌差异表达蛋白,通过人工神经网络(ANN)建立并验证胃癌的SELDI分子诊断模型。结果共建立3个胃癌诊断模型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),分别为胃癌的诊断、筛查、鉴别诊断模型。选其中由5个差异表达蛋白(质荷比为2502、2544、3085、8574、8740)组成的胃癌人工神经网络诊断模型Ⅰ作为胃癌人工神经网络诊断模型,对胃癌的诊断灵敏度为95.0%,特异度为98.33%,阳性预测值为95.0%,阴性预测值为98.33%,诊断准确度为97.5%。结论 SELDI-TOF-MS技术对胃癌的早期诊断具有一定的价值,值得进一步的研究。     

表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱在甲状腺癌诊断及临床分期中的应用

目的:用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析正常人和甲状腺癌患者血清蛋白指纹图谱的变化,建立能鉴别正常人和甲状腺癌及Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型.方法:应用SELDI-TOF-MS技术检测72例血清标本的蛋白质质谱,其中甲状腺癌 40 例(Ⅰ-Ⅱ期 26 例,Ⅲ-Ⅳ期14 例),正常人32例.应用支持向量机和判别分析的方法分析质谱数据,建立甲状腺癌诊断模型并留一法交叉验证.结果:区分甲状腺癌和正常人的诊断模型交叉检验敏感性为100%,特异性为86%,总的符合率为93%;区分Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型对Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌检出的敏感性为77%,特异性为86%,对Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌检出的敏感性为86%,特异性为77%,总的符合率为80%.结论:应用SELDI-TOF-MS技术平台和生物信息技术建立的诊断模型为甲状腺癌的早期诊断及临床分期提供了新的手段.     

MB-WCX联合SELDI-TOF-MS在胃癌诊断中的应用

目的 研究WCX纳米磁珠联合表面增强激光解析电离化飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)对胃癌及其癌前病变诊断的意义。方法 应用纳米磁珠联合SELDI-TOF-MS对26例胃癌、35例癌前病变患者(萎缩性胃炎15例,胃溃疡20例)及30例正常人血清标本进行分析,Swiss蛋白数据库搜索鉴定差异蛋白,建立诊断模型。结果 与健康对照相比较,质荷比为2741.2、7963.6和15904.3的蛋白质分子随病变程度表达上调,质荷比为13732.6的蛋白质在癌前病变组无统计学差异,但在胃癌患者中下调。质荷比2741.2、7963.6、15904.3及13732.6的蛋白质组成的诊断模型可以准确鉴别胃癌与正常对照,敏感性为92.3%,特异性为96.7%。结论 WCX纳米磁珠联合SELDI-TOF-MS是筛选胃癌早期诊断标志物的有效手段,2741.2、7963.6、15904.3及13732.6的蛋白质组成的诊断模型有可能成为潜在的胃癌早期诊断标志物。     

WCX纳米磁珠在子宫内膜癌血清蛋白质组中的应用

目的利用弱阳离子交换型(WCX)纳米磁珠联合表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析子宫内膜癌患者血清蛋白质谱,筛选潜在的特异性肿瘤标志物,探讨其临床意义。方法应用WCX纳米磁珠联合SELDI-TOF-MS对24例子宫内膜癌患者及28例正常人血清标本进行蛋白质质谱分析,用BiomarkWizard软件分析差异蛋白峰,并在Swiss蛋白数据库中搜索鉴定差异蛋白,受试者工作特征(ROC)曲线评价该技术的应用价值。结果在质荷比(m/z)2 000~20 000范围内,子宫内膜癌患者血清中筛选出与正常人血清有统计学意义的差异蛋白11个(P<0.05),其中6个高表达:m/z分别为4 175、5 315、7 970、8 047、15 930、16 074;5个低表达:m/z分别为4 592、4 675、7 019、9 188、9 358。m/z为7 970的差异蛋白与子宫珠蛋白(UG)相符。应用ROC曲线分析,确定11个差异蛋白对子宫内膜癌有中等诊断价值,灵敏度为70.5%~96.4%,特异度为89.3%~100%。结论 WCX纳米磁珠联合SELDI-TOF-MS能在子宫内膜癌患者血清中筛选出灵敏度和特异度较好的差异表达蛋白,其有助于子宫内膜癌的筛查、早期诊断及预后监测。     

胃癌血清标志物筛选的初步研究

目的：筛选可用于胃癌的诊断及手术质疗效评估的特征性蛋白质分子标志物。方法：采用表面增强激光解吸离子化-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）技术,对胃癌、胃癌术后、慢性胃炎患者和健康对照组蛋白质指纹图谱的分析,同时采用多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统测定各组血清CA19-9、CEA、CA125的表达情况。结果：胃癌与正常人血清蛋白指纹图谱,其有6种蛋白质表达量有明显差异,利用SELDI-TOF-MS技术组建的筛选模型检测胃癌敏感度为89．9％,特异性为93．1％,阳性和阴性结果预测值均为100％,对胃癌的诊断率为92％。结论：利用SELDI-TOF—MS技术在血清中可以筛选到诊断胃癌的特异性蛋白质标志物,并可对胃癌术后、预后情况以及肿瘤的再次复发提供实验室诊断依据,该技术的诊断性能优于常规肿瘤标志物,并为胃癌的早期治疗提供了可能。     

应用SELDI-TOF-MS技术筛选肝癌血清蛋白标记物

目的 运用表面增强激光解吸附/离子化时间飞行质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测肝癌患者血清蛋白质的特异性生物标志,建立筛选血清蛋白质图谱模型并初步验证.方法 选择肝癌患者30例,HBV阳性携带者20例及正常人20例,应用SELDI-TOF-MS技术及相应的计算机软件进行比较分析,检测肝癌血清蛋白质的特异性生物标志,建立肝癌的筛选模型,并对其进行了双盲法验证.结果 肝癌组与对照组共有25个蛋白质差异有显著性,以其中5个蛋白标志物(6 888、13 764、6 487、3 450和6 814 Da)建立的筛选模型检测灵敏度为96.7％( 29/30),特异性为90.0％(36/40),盲法验证,灵敏度为95.5％(21/22),特异性为90％(27/30).结论 SELDI-TOF-MS技术具有高灵敏度和特异性,在肝癌的诊断及肿瘤特异性生物标志的筛选等方面具有一定价值.     

血清蛋白质质谱与支持向量机模型在胰腺癌检测上的应用

目的:为提高胰腺癌的早期检测率筛选新的标志物,应用蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术建立胰腺癌的血清蛋白质质谱模型。方法:用弱阳离子交换芯片(CM10)结合SELDI-TOF-MS技术检测了73例血清样本,其中31例胰腺癌,22例胰腺炎,20例健康人。用支持向量机方法建立胰腺癌和健康人以及胰腺癌和胰腺炎的辨别模型。结果:胰腺癌和健康人辨别模型用了3个蛋白质峰,辨别的敏感性和特异性均为100%,而胰腺癌和胰腺炎辨别模型用了5个蛋白质峰,辨别的特异性和敏感性分别为95.5%和93.5%。结论:SELDI-TOF-MS技术结合生物信息学方法检测胰腺癌具有较高的敏感性和特异性。     

血清多肿瘤标志物胃癌诊断判别方程的建立及其临床意义

目的建立多肿瘤标志物C12检测系统诊断胃癌的判别方程以提高多肿瘤标志物C12检测系统诊断胃癌的准确率。方法对135例初治胃癌患者、212例胃部良性疾病患者及6 741名健康体检者的12种常见肿瘤标志物检测结果及临床资料进行回顾性分析,通过SPSS18.0统计软件采用Fisher二分类判别分析建立判别诊断方程,比较12种肿瘤标志物和判别诊断函数对肿瘤诊断的准确率差异。结果成功建立胃癌诊断判别方程,诊断正确率总体为95.0%,在正常组为96.1%,在胃癌组为43.7%,较12种肿瘤标志物单项检测均明显提高(P<0.05)。结论用C12多肿瘤标志物蛋白质芯片检测系统判别方程可提高胃癌诊断的准确率,具有较高灵敏度和特异度,优于单项肿瘤标志物检测,具有一定的临床参考价值。     

血清多肿瘤标志物判别方程建立及其对胃癌诊断与分类的意义

目的 探讨多肿瘤标志物联合检测系统在胃癌诊断中的意义,建立联合诊断胃癌的判别诊断函数,以提高多肿瘤标志物诊断胃癌的准确率.方法 对170例胃癌患者、112例胃部良性疾病患者及1 203名正常体检者的12种常见肿瘤标志物检测结果及临床资料进行回顾性研究,分析比较单项指标及联合指标的阳性率,通过Fisher二分类判别分析建立判别诊断方程.结果 用C-12芯片检测胃癌的灵敏度是50.00%,显著高于胃良性病变患者(34.82%)和健康体检者(10.59%) (P<0.05),有诊断意义的指标是CA19-9、CEA、CA125、CA242和HGH(P<0.05),前面3项指标联合检测的敏感度为44.12%,正确率为59.22%.建立胃癌诊断判别方程及分类诊断方程,胃癌诊断符合率为80.10%.结论 用C-12多肿瘤标志物蛋白质芯片检测胃癌可提高诊断的灵敏度,优于单项肿瘤标志物;诊断判别函数可明显提高胃癌诊断的正确率,具有一定的临床参考价值.     

液态芯片检测多种肿瘤标志物在胃癌中的应用

目的①通过液态芯片（liquid Chip）技术检测胃癌（gastric callcer）患者和正常人群血清中多种肿瘤标志物（tumor markers）表达的差异;妫：讨运用液态芯片技术进行血清肿瘤标志物联合检测对胃癌的诊断价值。方法应用多肿瘤标志物液态芯片检测系统,检测82例胃癌患者和82例正常对照者血清中4种常见肿瘤标志物。结果①胃癌组CEA、CA125、CA242、CYFRA211表达水平均显著高于正常对照组,差异有统计学差异意义（P〈0．05）;②胃癌组CEA、CA125、CA242、CYFRA211联合检测的阳性率是73．2％,而胃癌组单项检测CEA、CA125、CA242、CYFRA211的阳性率分别为41．5％、31．7％、37．8％、29．3％,均显著低于联合检测的阳性率（P〈0．01）。结论血清CEA、CAl25、CA242、CYFRA211是胃癌辅助诊断的理想指标;应用液态芯片技术联合检测肿瘤标志物CEA、CAl25、CA242和CYFRA211有利于提高检出阳性率。     

应用液体蛋白芯片-飞行时间质谱系统研究乳腺癌血清差异蛋白表达

目的：分析乳腺癌与健康人血清蛋白质谱差异,筛选特异性蛋白标志物,建立乳腺癌诊断预测模型,评价其诊断价值。方法将58例乳腺癌和57例健康女性的血清,随机分为建模组和验证组,应用弱阳离子纳米磁珠（MB-WCX）结合基质辅助激光解吸离子飞行质谱（MALDI-TOF-MS）技术建立血清蛋白质谱,选择遗传算法建立乳腺癌诊断预测模型,利用诊断模型对验证组进行盲筛验证。结果通过蛋白质谱,筛选出29个显著差异蛋白质峰（P＜0．05）。其中乳腺癌中表达上调2个,表达下调27个,利用其中8个差异峰（质荷比分别为698．3、797.37、1449.56、1466．65、1520．74、1584．55、2379．26、2739．69）建立诊断模型,获得了96．55％（28/29）的敏感性和96.42％（27/28）的特异性,经独立样本双盲验证,得到灵敏度为93．10％（27/29）,特异度为96．55％（28/29）。结论应用弱阳离子纳米磁珠联合MALDI-TOF-MS技术可筛选出血清蛋白质谱中的差异蛋白质,据此建立的诊断模型具有较高的敏感性和特异性,对于乳腺癌的辅助诊断有一定的临床意义。     

胃癌患者血清P_(53)抗体的临床意义

目的 :研究胃癌患者血清P53 抗体与临床病理特征之间的关系 ,以及手术前后血清P53 抗体的动态变化规律。方法 :采用ELISA方法对原发胃癌患者 4 6例 ,良性胃部疾病患者和正常人各 30例 ,以及胃癌患者术前和术后 7d进行血清P53 抗体检测。结果 :4 6例原发胃癌患者中有 12例血清P53 抗体阳性 ,阳性率为 2 6 1%。胃癌患者血清P53 抗体指数和吸收率与肿瘤的病理分期、淋巴结转移有密切的关系 (P <0 0 5 )与患者性别、年龄、原发肿瘤大小、部位无明显的关系 (P >0 0 5 )。术后 7d较术前血清P53 抗体指数、吸收率和阳性率明显下降 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 :血清P53抗体用于胃良恶性疾病的诊断和鉴别诊断 ,具有良好的特异性。术后血清P53 抗体水平明显下降 ,动态检测血清P53 抗体水平 ,对于判断预后可能有一定的帮助     

血清CA72-4、CA19-9及CEA免疫放射量度分析在胃癌诊治中的意义

目的　研究血清肿瘤标志物诊治胃癌的敏感度、特异度及其意义。方法　采用免疫放射量度分析 (IR MA)法测定 136例胃癌患者及 73例消化道良性疾病患者中血清CA72 4、CA19 9及CEA的水平。结果　血清CA72 4、CA19 9及CEA在胃癌诊断中的敏感度分别为 39.7%、30 .9%、及 14.7% ,特异度分别为 98.6 %、82 .2 %和 98.6 %。CA72 4联合CA19 9检测的敏感度为 5 4.4% ,特异度为 80 .8%。血清CA72 4的阳性率在早期胃癌与消化道良性疾病组间存在显著差异。三者阳性率均随肿瘤期别的增高而显著上升 ,随胃癌淋巴结转移、远处转移而显著升高。血清CA72 4与CA19 9水平在胃癌根治术后显著降低。结论　血清CA72 4水平能较好地反映胃癌的临床病程和病理特征 ,与CA19 9联合检测有助于胃癌的术前期别预测以及术后的随访与监测。     

消化道肿瘤患者血清和组织中的酸溶性糖蛋白水平

测定４６例食管癌，２９例结肠直肠癌，１００例胃癌患者及１００例正常人血清中酸溶性糖蛋白（ＡＳＰ），以正常组的　＋２ｓ为正常值上限。结果正常组阳性率为２％，病例组阳性率为６５．２％～７８．０％，提示血清ＡＳＰ检测在消化道肿瘤普查及诊断上具有一定的实用价值。各种消化道癌组织与对照组织的ＡＳＰ含量比较，前者均显著高于相应的对照组织（Ｐ＜０．０５～０．０１），提示癌组织伴有ＡＳＰ合成增加。     

血清CA－50、CA19－9、CEA和SA联合检测诊断胃癌初探

目的探讨血清肿瘤标志物ＣＡ－５０、ＣＡ１９－９、ＣＥＡ和ＳＡ联合检测对胃癌诊断的实用价值。方法应用免疫放射法（ＩＲＭＡ）、酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和分光光度法分别对３０例胃癌患者（胃癌组）、３０例胃部良性疾病患者（胃良性疾病组）及３０例正常人（对照组）进行血清ＣＡ－５０、ＣＡ１９－９、ＣＥＡ和ＳＡ测定。结果胃癌患者上述各项肿瘤标志物水平均显著高于胃良性疾病组和对照组（Ｐ＜０．０１），胃癌患者血清中ＣＡ－５０、ＣＡ１９－９、ＣＥＡ和ＳＡ的阳性率分别为６３．３％，４６．７％，５３．３％和７６．７％。将四项肿瘤标志物进行联合检测，以任二项阳性作为诊断标准，则联合检测对胃癌诊断的敏感性为８３．３％，特异性为９６．７％，准确性为９２．２％。阳性预测值为９２．６％，阴性预测值为９２．１％。结论血清ＣＡ－５０、ＣＡ１９－９、ＣＥＡ和ＳＡ联合检测对胃癌诊断具有实用价值。     

应用蛋白质芯片技术在人血清中发现肾癌差异蛋白

目的研究肾癌患者手术前血清与对照人群血清的蛋白质差异及其临床意义。方法采用蛋白质芯片CM10技术鉴定40例肾癌患者(肾癌组)手术前血清与40例正常人(对照组)血清的蛋白质质谱的差异。结果两组质谱显示初步筛出质荷比在1 038、1 568、1 723、7 976、8 058、1 5 940、1 545、16 107、1 433、1 701、1 500共11个蛋白峰有明显差异,其敏感性为88.95%,特异性为83.68%。结论肾癌特异性蛋白质的发现,对进一步研究其发生机理及临床特异性标记物的发现有重要的意义。     

多种肿瘤标志物与胃癌进展及预后的关系

目的:研究血清肿瘤标志物与胃癌临床转归的关系。方法:检测166例胃癌患者术前血清标志物水平,术后随访,获得76例患者完整预后信息。分析肿瘤标志物与肿瘤浸润深度、临床分期、淋巴结转移及预后的关系。结果:CEA阳性率与肿瘤浸润深度和临床分期显著相关,CA19-9与临床分期相关(P<0.05)。CA19-9、CEA、CA125预测胃癌患者不良预后的敏感性和特异度都高于术前诊断。3项标志物同时升高患者中位生存时间3.0个月,两项同时升高者11.0个月,只有一项标志物升高的患者19.0个月(P<0.01)。多因素生存分析提示CA19-9和临床分期为独立预后因素(P<0.05)。CA19-9升高倍数与生存时间呈中度负相关(r=-0.466,P<0.01)。结论:胃癌患者术前血清CA19-9、CEA、CA125升高可预测不良预后,CA19-9为预测预后的独立因素。