丙型病毒性肝炎患者外周血单核细胞中HCV—RNA的存在及其意义

作者用套式ＰＣＲ检测２５例丙型病毒性肝炎（丙肝）患者血清和外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶ－ＲＮＡ，结果显示血清阳性２１例，ＰＢＭＣ阳性１８例，表现在大部分丙肝患者ＰＢＭＣ中有ＨＣＶ－ＲＮＡ的存在。且急性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率明显低于慢性丙肝患者，提示ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ的存在可能与感染ＨＣＶ后的慢性化有关。     

周围血白细胞的复制型丙型肝炎病毒RNA的检测及临床意义

用简并引物作套式反转录。聚合酶链反应检测正、负链丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ。显示３０例急、慢性丙型肝炎患者的血清及血浆中，７例无症状抗－ＨＣＶ阳性者的血清、血浆及周围血白细胞（ＰＢＬ／Ｃ）中，均未检出负链ＨＣＶＲＮＡ。慢性丙型肝炎者ＰＢＩ（中正、负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率高于急性丙型肝炎及无症状抗－ＨＣＶ阳性者（Ｐ＜０．０５～０．００１）。１７例经肝组织学检查的患者中，急性肝炎（ＡＨ）者ＰＢＬ／Ｃ的正、负链ＨＣＶＲＮＡ检出率低于慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）者（Ｐ＜０．０５）。１例ＡＨ及６例ＣＡＨ患者肝组织内正、负链ＨＣＶＲＮＡ全部阳性。证实丙型肝炎患者的ＰＢＬ／Ｃ确可被ＨＣＶ感染，病程越长，被ＨＣＶ感染的可能性越大；病情活动者，ＰＢＬ／Ｃ中负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率越高。提示ＨＣＶ不仅可以感染ＰＢＬＣ，而且可在其中复制；负链ＨＣＶＲＮＡ的出现与病情活动有关。     

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞丙型肝炎病毒检测及其意义

目的 探讨外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）在丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染中的作用。方法 对２２例慢性丙型肝炎患者２１例抗－ＨＣＶ（＋）血液管析患者及１２例健康献血员的ＰＢＭＣｓ分别进行ＨＣＶＲＮＡ,ＨＣＶ抗原检测及电镜观察。结果 （１）２２生丙型肝炎肝炎患者ＰＢＭＣｓ中有７７．３％（１７／２２）ＨＣＶＲＮＡ阳性,（２）感染ＨＣＶ的ＰＢＭＣｓ中电镜下发现复制的ＨＣＶ颗粒;（３）ＨＣＶ颗粒阳笥者的血清和     

原位反转录PCR检测慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中HCV

目的研究慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌ，ＰＢＭＣ）中丙型肝炎病毒的定位分布及复制。方法直接原位反转录－ＰＣＲ（标记引物）对２０例慢性丙型肝炎患者的ＰＢＭＣ内丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的分布、定位及存在形式进行研究。结果１６例患者外周血单个核细胞的胞浆内发现ＨＣＶＲＮＡ阳性信号，并有一例患者的胞浆内发现ＨＣＶＲＮＡ负链信号。结论ＨＣＶ可感染ＰＢＭＣ并在其中复制。原位ＲＴ－ＰＣＲ为进一步研究ＨＣＶ进入人体内的分布、潜伏、复制状况以及丙型肝炎治疗、药物研究奠定了基础。     

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中HCV RNA和NS5抗原的检测

目的 研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染外周血个核细胞（ＰＢＭＣ）的情况及其意义。方法 运用非核素原位杂交法（ＮＩＳＨ）和抗生蛋白链菌素－生物素法（ＳＡＢＣ）分别检测２０例慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中的ＨＣＶ ＲＮＡ和ＮＳ５抗原。结果 ２０例患者中有８例（４０％）,ＰＢＭＣ中ＨＣＶ ＲＮＡ呈阳性,其中６例（３０％）ＰＢＭＣ中ＮＳ５抗原同时呈阳性。ＨＣＶＲＮＡ主要分布于胞浆中,而ＮＳ５抗原还可以出现在胞膜     

外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正负链检测的临床意义

目的通过对外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ正负链的检测,来探讨其与丙型肝炎慢性化及干扰素治疗的关系．方法慢性丙型肝炎患者４０例,其中干扰素治疗者１０例,分离血清及ＰＢＭＣ．异硫氰酸胍－酚－氯仿抽提法提取ＨＣＶＲＮＡ,应用逆转录－巢式ＰＣＲ技术检测ＨＣＶＲＮＡ正负链．结果血清正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６７５％,但负链均为阴性,ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为５７５％,负链的阳性率为３５０％．其中３例患者血清中正链ＨＣＶＲＮＡ为阴性,而ＰＢＭＣ中为阳性．１０例干扰素治疗者在治疗结束时血清正链ＨＣＶＲＮＡ６０％转阴,ＰＢＭＣ中负链ＨＣＶＲＮＡ８０％转阴,而正链仅３７５％转阴．结论ＨＣＶ能在ＰＢＭＣ中存在和复制,这可能是导致丙型肝炎易发生慢性化的原因之一．ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ正负链的检测对于临床判断干扰素的疗效及预后有重要意义     

急性丙型肝炎患者抗－HCV－IgM检测的临床意义

采用重组ＨＣＶ抗原片段Ｃ２２和３３ｃ包被酶标板孔，以间接ＥＬＩＳＡ方法，检测４０例输血后急性丙型肝炎患者血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ。４０例患者均在起病后４０天内出现抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性，抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性与ＨＣＶＲＮＡ阳性密切相关，抗体阳性持续时间因病程是否转为慢性而不同。２３例自限性急性丙型肝炎（丙肝）患者，在起病后６个月内抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ全部阴转并伴有ＨＣＶＲＮＡ阴转，而１７例转慢的急性丙肝患者中１５例抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ持续阳性，其ＨＣＶＲＮＡ亦持续阳性或间断阳性。提示急性丙肝检测抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ，可作为抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ和ＨＣＶＲＮＡ检测的一个补充，在反映病情和判断预后方面有一定作用     

干扰素联合病毒唑对肝炎患者正,负链丙型肝炎病毒RNA的影响

为评价干扰素联合病毒唑的抗病毒效果，用套式反转录－聚合酶链反应技术观察其对慢性丙型肝炎患者正、负链丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＲＮＡ）的作用。结果显示，在对联合抗病毒治疗有反应的患者中，多数患者ＡＬＴ降至正常，血清正链阳性率由９２．３１％降至３８．４６％（Ｐ＜０．００５），周围血单核细胞（ＰＢＭＣ）中负链阳性率由７６．９２％降至３８．４６％（Ｐ＜０．０５），但对ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ影响不大。治疗停止后，半数以上患者病情复发，病情复发者均为ＰＢＭＣ中正链及负链ＨＣＶＲＮＡ持续阳性者。提示单纯检测血清正链ＨＣＶＲＮＡ作为疗效考核及病情转归的判断指标有一定的局限性。同时检测血清及ＰＢＭＣ中正、负链ＨＣＶＲＮＡ，具有重要的临床意义。本研究干扰素联合病毒唑的抗病毒效果与单用干扰素接近，似说明病毒唑并未增加干扰素的疗效     

急慢性丙型肝炎患者进行乙型肝炎病毒标志物检测的临床意义

采用ＥＩＡ、ＰＣＲ技术对急、慢性丙肝患者血清标本进行乙型肝炎病毒标志物、丙型肝炎不同功能区抗体和ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ检测。结果：排除甲、戊型肝炎的急、慢性丙肝的乙肝感染率的７４．６７％和５９．０９％均以ＨＢｃＡｂ和ＨＢｓＡｂ为主,其他出现,有乙肝三内肝ＡＬＴ值较高。ＨＢＶＤＮＡ检出率较低,且与ＨＣＶＲＮＡ极少同时检出;急、慢性丙肝ＨＣＶＲＮＡ检出率有乙肝旮明显偏低。有乙肝感染时急性丙肝中Ｅ     

不同外周血标本中HCV RNA检出比较

对５４例抗－ＨＣＶ阳性患者，用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测其外周血不同检材（血清、血浆、外周血单核细胞）中ＨＣＶ ＲＮＡ，结果检出率分别为５９．３％、５０％、５５．６％，以血清标本检出率最高。外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中亦有较高的检出率，且在部分（６％）血清测不到ＨＣＮ ＲＮＡ时，ＰＢＭＣ中可测及，提示ＰＢＭＣ可贮存ＨＣＶ ＲＮＡ。     

Hepatitis C virus RNA detection in serum and peripheral blood mononuclear cells of patients with hepatitis C

ＨｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓＲＮＡｄｅｔｅｃｔｉｏｎｉｎｓｅｒｕｍａｎｄｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｈｅｐａｔｉｔｉｓＣＺＨＯＵＰｉｎｇ，ＣＡＩＱｉｎｇ，ＣＨＥＮＹｏｕＣｈｕｎ，ＺＨＡ...     

检测慢性丙型肝炎患者抗－HCVIgM的临床意义

对８２例输血后慢性丙型肝炎病人丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）ＩｇＭ动态变化进行观察，８２例患者均检测到抗－ＨＣＶ抗体，其中５１例抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性。抗－ＨＣＶＩｇＭ出现规律表现为４种类型：（１）持续检出型２４例（２９．２７％）；（２）间断检出型８例（９．７６％）；（３）短暂检出型１９例（２３．１７％）；（４）阴性型３１例（３７．８０％）。将８２例输血后慢性丙型肝炎抗－ＨＣＶＩｇＭ出现类型与丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、ＨＣＶＲＮＡ消长情况比较，发现阴性型具有较低的ＡＬＴ峰值，而其它３型ＡＬＴ峰值较高（Ｐ＜０．０１）。８例经干扰素治疗的慢性活动性丙型肝炎患者，治疗前均有ＡＬＴ明显异常及ＨＣＶＲＮＡ、抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性，治疗后１～３个月ＡＬＴ均转为正常，ＨＣＶＲＮＡ转为阴性，但其中只有３例伴抗－ＨＣＶＩｇＭ的阴转，随访１年发现，只有抗，ＨＣＶＩｇＭ阴转的３例病人得以痊愈，其余５例均在治疗后半年内病情复发。提示治疗中伴有抗－ＨＣＶＩｇＭ阴转的患者预后良好。     

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中负链HCV RNA的检测及意义

19例临床诊断慢性丙型肝炎患者,检测其外周血单个核细胞中丙型肝炎病毒(HCV)RNA的存在及复制状态。所选检测对象血清标本抗-HCV及HCV RNA均为阳性。采用逆转录-套式PCR法检测其外周血单个核细胞中HCV正、负链RNA,结果19例患者外周血单个核细胞中14例HCV正链RNA阳性;6例HCV负链RNA阳性。实验结果证实部分慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中存在HCV复制,表明肝细胞并非为HCV感染与复制的唯一场所。HCV感染慢性化与其外周血单个核细胞中存在HCV复制可能有一定关系。     

FAS抗原与慢性丙型肝炎关系的研究

目的　通过观察慢性丙型肝炎 (CHC)患者肝组织及外周血单核细胞 (PBMC)FAS抗原表达对CHC病情的影响 ,进而探讨FAS系统及HCVRNA水平与CHC的关系及临床意义。方法　采用肝活检组织病理、免疫组织化学、PCR及血液生化等方法检测 41例CHC患者的肝组织和PBMC中FAS抗原、血清HCVRNA及肝功能 ,观察肝组织和PBMC中FAS抗原表达情况与血清HCVRNA水平及肝损伤的关系。结果　 ( 1)CHC患者PBMC的FAS阳性率为41.5 % ( 17/ 41) ,肝组织FAS阳性率为 65 .6% ( 2 1/ 3 2 )。 ( 2 )CHC患者PBMCFAS阳性组血清HCVRNA和ALT水平均显著高于FAS阴性组 (P <0 .0 5 )。结论　 ( 1)CHC患者肝组织和PBMC中FAS表达与肝组织炎症及血清病毒载量有关 ;( 2 )FAS系统可作为观察CHC病情的新指标 ,协助诊断与治疗。     

丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒复制的研究

９例临床诊断为丙型肝炎患者，研究其外周血单核细胞中ＨＣＶＲＮＡ的存在及复制。９例患者血清标本抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ均为阳性，采用高敏感的逆转录一套式ＰＣＲ法测定其外周血单核细胞中ＨＣＶ正、负链ＲＮＡ，结果９例患者外周血单核细胞中７例ＨＣＶ正链ＲＮＡ阳性，３例ＨＣＶ负链ＲＮＡ阳性，证实部分丙肝患者外周血单核细胞中存在ＨＣＶ的复制，表明肝细胞并非为ＨＣＶ感染与复制的唯一场所。     

New perspectives in occult hepatitis C virus infection

Occult hepatitis C virus (HCV) infection, defined as the presence of HCV RNA in liver and in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) in the absence of detectable viral RNA in serum by standard assays, can be found in anti-HCV positive patients with normal serum levels of liver enzymes and in anti-HCV negative patients with persistently elevated liver enzymes of unknown etiology. Occult HCV infection is distributed worldwide and all HCV genotypes seem to be involved in this infection. Occult hepatitis C has been found not only in anti-HCV positive subjects with normal values of liver enzymes or in chronic hepatitis of unknown origin but also in several groups at risk for HCV infection such as hemodialysis patients or family members of patients with occult HCV. This occult infection has been reported also in healthy populations without evidence of liver disease. Occult HCV infection seems to be less aggressive than chronic hepatitis C although patients affected by occult HCV may develop liver cirrhosis and even hepatocellular carcinoma. Thus, anti-HCV negative patients with occult HCV may benefit from antiviral therapy with pegylated-interferon plus ribavirin. The persistence of very low levels of HCV RNA in serum and in PBMCs, along with the maintenance of specific T-cell responses against HCV-antigens observed during a long-term follow-up of patients with occult hepatitis C, indicate that occult HCV is a persistent infection that is not spontaneously eradicated. This is an updated report on diagnosis, epidemiology and clinical implications of occult HCV with special emphasis on anti-HCV negative cases.     

HCV不同编码区抗体在慢性丙型肝炎干扰素治疗中的变化

采用含ＨＣＶ不同编码区三种重组抗原（Ｃ２２，Ｃ３３ｃ，Ｃ１００－３）的重组免疫印迹试验，对２０例接受干扰素（ＩＦＮ）治疗的慢性丙型肝炎患者血清相应的三种抗体进行动态监测，同时观察ＨＣＶＲＮＡ及ＡＬＴ的变化，并进行对比分析。结果表明：ＨＣＶＲＮＡ持续清除与Ｃ３３ｃ及Ｃ１００－３抗体滴度的持续下降及转阴有关（Ｐ值分别＜０．０１及＜０．００５），与Ｃ２２抗体变化无关（Ｐ＞０．０５）；ＩＦＮ治疗后ＡＬＩ稳定正常与ＨＣＶ病毒血症清除之间无相关性（Ｐ＞０．０５）。提示动态观察抗－Ｃ１００－３及抗－Ｃ３３ｃ可预测ＣＨＣ病人ＩＦＮ治疗后病毒血症的变化，而ＩＦＮ治疗后ＡＬＴ转为稳定正常不一定预示病毒血症消失。     

Testing for hepatitis C virus sequences in peripheral blood mononuclear cells of patients with chronic hepatitis C in the absence of serum hepatitis C virus RNA

Hepatitis C virus (HCV) is able to replicate in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of HCV-infected patients. Few data are available on PBMC testing for HCV RNA in serum HCV RNA negative patients, positive for anti-HCV and with histological evidence of chronic hepatitis. Twenty such patients were studied; of these, 11 were tested during interferon α (IFN) treatment, at the time of serum HCV RNA clearance and ALT normalisation: only one was found to be positive for HCV sequences in PBMC. Within 3 months of IFN withdrawal all 11 patients relapsed with high ALT and recurrence of serum HCV RNA. Of nine serum HCV RNA negative patients with chronic hepatitis C who were not receiving IFN when tested (four untreated patients and five patients who had already completed IFN schedule), PBMC HCV RNA was detected in four. Evidence of active HCV replication (presence of the minus strand genome) in PBMC was also observed in two cases. Thus, five of the 20 patients without detectable serum HCV RNA turned out to be carriers of HCV sequences in PBMC. These data indicate that: 1. PBMC are an extrahepatic replication site of HCV; this is true also in the absence of serum HCV RNA; 2. the role of PBMC as a “viral reservoir” after IFN-induced serum HCV RNA clearance is questioned; 3. the absence of both serum and PBMC HCV RNA in patients under IFN is not predictive of sustained viral loss; 4. testing for PBMC viral sequences might enhance the chances of detecting HCV infection.     

Occult hepatitis C virus infection： A new form of hepatitis C

INTRODUCTION The etiology of liver disease is unknown in approximately 10% of patients with abnormal results on liver function tests. Some authors have reported that occult hepatitis B virus could be the cause of a proportion of these cryptogenic chronic …     

42例丙型肝炎病毒感染的临床血清学分析

本文分析了42例丙型肝炎患者的临床资料和病毒感染的血清学标志物。在42例患者中,抗-HCV-lgM、抗-HCV-IgG和HCV RNA检出率分别为66.7％、71.4％和59.5％。其中抗-HCV-IgM和HCVRNA检出率,在急性肝炎患者(88.9％,66.7％)明显高于慢性肝炎患者(50.0％,54.2％);肝损害严重者(79.3％,72.4％)显著高于肝损害轻微者(38.5％,30.8％)。结果显示,抗-HCV-IgM、抗-HCV-IgG和HCV RNA同时检测不仅可提高丙肝病原诊断阳性率并对病情和预后的判断有一定作用。