早产儿支气管肺发育不良不同时期基质金属蛋白酶表达及其调控的研究

目的　探讨新生儿呼吸窘迫综合征 (NRDS)向支气管肺发育不良 (BPD)发展过程中c Jun蛋白、c Fos蛋白、基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )及其特异性组织抑制物 (TIMP 2 )的动态表达情况及其相关关系。方法　应用免疫组化方法检测 2 5例经临床和病理确诊为NRDS向BPD转变的尸检肺组织标本中c Jun蛋白、c Fos蛋白、TIMP 2以及MMP 2的表达强度 ,并结合计算机图像处理系统进行分析。结果　急性期c Jun、c Fos表达即达峰值 ,以后两者表达开始下降 ,但c Jun仍保持较高水平 ,至慢性期时 ,其表达水平与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 1) ;而c Fos的表达至再生期后与对照组相比差异无显著性 (P >0 0 5 )。MMP 2表达与c Jun表达基本一致 ,且与c Jun、c Fos的表达呈显著性正相关 (P <0 0 1)。MMP 2 /TIMP 2的比值则呈下降趋势 ,但仍显著高于对照组水平 (P <0 0 1或 0 0 5 )。结论　MMP 2 /TIMP 2表达失衡参与了NRDS向BPD进展的过程 ;MMP 2表达与c Jun蛋白、c Fos蛋白表达密切相关。     

基质金属蛋白酶与支气管肺发育不良

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）是一组锌离子（Zn^2＋）依赖的内肽酶家族,能特异性降解细胞外基质（extracellular matrix,ECM）,并为基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs）及细胞因子所调控。     

基质金属蛋白酶与支气管肺发育不良

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一组锌离子(Zn2+)依赖的内肽酶家族,能特异性降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM),并为基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitors ofmetalloproteinases,TIMPs)及细胞因子所调控。ECM过度沉积、肺间质纤维化是婴儿支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的主要病理改变,因此MMPs在肺发育和肺部疾病过程中发挥重要作用,本文就MMPs的生物学特性及其在BPD中的作用作一综述。一、MMPs的结构特点和分类M     

维甲酸治疗新生大鼠高氧肺发育受抑对肺组织基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达的影响

目的 观察维甲酸(RA)对高氧抑制肺发育的影响,初步探讨其作用机制。方法 新生SD大鼠生后d2随机分为I空气+生理盐水组,Ⅱ高氧+生理盐水组,Ⅲ空气+RA组,Ⅳ高氧+RA组。Ⅱ、Ⅳ组持续暴露于85％氧气中,Ⅲ、Ⅳ组每日腹腔注射RA500μg/kg。生后14d行肺组织病理学检查,辐射状肺泡计数(RAC)和免疫组化法检测基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)及其组织抑制剂(TIMP-1、TIMP-2)的表达。结果Ⅱ、Ⅳ组肺组织显示肺泡生成受抑,RAC分别较I、Ⅲ组显著减少(P<0.01),但Ⅳ组RAC(8.3±0.8)较Ⅱ组(7.2±0.9)明显增加(P<0.01)。Ⅱ、Ⅳ组MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的表达较I、Ⅲ组明显增强(P<0.01),但Ⅳ组MMP-2、MMP-9的表达(2.70±0.65,2.64±0.48)较Ⅱ组(3.36±0.59,3.04±0.72)减弱(P<0.05),而TIMP-1的表达(3.68±0.51)较Ⅱ组(3.32±0.63)增强(P<0.05),TIMP-2的表达无统计学差异。结论 RA可部分阻止高氧引起的肺发育进程阻滞,可能是通过纠正MMPs/TIMPs的失衡而发挥作用的。     

核转录因子κB在神经母细胞瘤中的表达及临床意义

目的　研究核转录因子κB(NF κB)在神经母细胞瘤 (NB)中的表达及其临床意义。方法　标本取自华中科技大学同济医学院附属协和医院 1997～ 2 0 0 2年手术治疗的 2 9例NB患儿 ,年龄 5个月～ 7岁 ,平均 2岁 9个月。其中男 14例 ,女 15例。按Evans分期标准行临床分期 ,Ⅰ期 4例 ,Ⅱ期 5例 ,Ⅲ期 6例 ,Ⅳ期 8例 ,ⅣS期 6例。采用免疫组织化学SP法检测 2 9例NB组织中NF κBp6 5的表达 ,并分析NF κB表达与NB临床分期、病理类型和患儿术后生存时间的关系。 结果　 2 3例NB组织有NF κBp6 5表达 ,阳性检出率为79.3% ,主要表达于瘤细胞胞浆和部分瘤细胞的胞核。Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期、ⅣS期NF κB阳性检出率分别为 77.8%、92 .9%、5 0 .0 % ,各分期间差异均具有显著性意义 (P <0 .0 5 )。NB组NF κB阳性率 (91.6 7% )显著高于节细胞神经母细胞瘤 (GNB)组(2 0 .0 % ) (P =0 .0 0 6 ) ;预后差组织型 (UFH)NF κB阳性率 (91.6 7% )显著高于预后好组织型 (FH)(70 .5 9% ) (P =0 .0 2 4 )。NF κBp6 5与患儿术后生存时间呈负相关 (n =13,r =- 0 .6 2 9)。结论　NF κB表达程度与NB发生、发展关系密切 ,是评估患儿预后的重要指标。     

吸入糖皮质激素对支气管哮喘患儿血清基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶抑制物1的影响

目的 观察吸入糖皮质激素对支气管哮喘(哮喘)患儿血清基质金属蛋白酶9( MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1( TIMP-1)的影响,探讨糖皮质激素降低呼吸道重塑的机制.方法 哮喘患儿50例.给予糖皮质激素信必可都保(布地奈德/福莫特罗粉吸入剂),每吸含布地奈德80 μg、福莫特罗4.5 μg,每日2次,疗程12周,采用ELISA法测定布地奈德/福莫特罗粉吸入剂吸入前后,血清MMP-9、TIMP-1水平及肺功能指标[第1秒最大呼气量(FEV1)、最大呼气流速峰值(PEF)]的变化,并对二者进行相关性分析.结果 使用吸入糖皮质激素布地奈德/福莫特罗粉剂后,哮喘患儿血清MMP-9水平由吸入前的(43.25±13.26) μg?L-1下降至(29.62±12.47) μ.g? L-1,TIMP-1由吸入前的(119.88±32.56)μg?L-1上升至(143.15±45.36) μg?L-1,差异均有统计学意义(Pa＜0.01).PEF及FEV1变异占预计值百分比分别由吸入前的(76.15±3.26)％,(73.12±4.63)％,上升至(85.42±4.73)％,(86.49±3.72)％,PEF及FEV1变异占预计值百分比与MMP-9/TIMP-1比率均呈负相关(r=-0.402、-0.364,Pa＜0.05).结论 糖皮质激素可通过调节MMP-9/TIMP-1的平衡,降低胶原沉积,从而干预呼吸道重塑的发生.     

核因子-κB与早产儿慢性肺疾病

早产儿慢性肺疾病是早产儿吸入高浓度氧、机械通气治疗和肺部感染后最常见的合并症，严重影响患儿的生活质量，其详细的发病机制尚未完全明了。核因子-κB作为一种多向性的核转录调节因子，参与许多因子转录水平的调控，包括细胞因子(如肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β等)、细胞间黏附分子、诱导型一氧化氮合酶及基质金属蛋白酶。这些分子是促进早产儿慢性肺疾病发生发展的重要因子。同时，核因子-κB通过对凋亡的抑制作用，影响了肺脏的正常发育，也促进了早产儿慢性肺疾病的发生。     

基质金属蛋白酶及其抑制物与支气管哮喘

基质金属蛋白酶 (MMPs)是主要的蛋白水解酶之一 ,其活性可以受到内源性抑制物组织金属蛋白酶抑制剂 (TIMPs)特异性调节。MMPs与TIMPs的平衡是维持细胞外基质内环境稳定的决定因素。气道炎症和重构是支气管哮喘的重要特征。MMPs及其抑制物TIMPs可以通过对炎性细胞浸润和功能的影响 ,基质沉积和降解等作用参与支气管哮喘的发病机制 ;并且MMPs与TIMPs比例的失衡与气道高反应性及激素治疗的效果均有密切关系。     

基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制因子与糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)的主要并发症之一,基质金属蛋白酶(MMPs)及其特异性抑制物基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)在DN发病机制中起重要作用,本文综述MMPs/TIMPs在DN中的变化机制及其临床意义。     

基质金属蛋白酶及其抑制物与支气管哮喘

基质金属蛋白酶(MMPs)是主要的蛋白水解酶之一，其活性可以受到内源性抑制物组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)特异性调节。MMPs与TIMPs的平衡是维持细胞外基质内环境稳定的决定因素。气道炎症和重构是支气管哮喘的重要特征。MMPs及其抑制物TIMPs可以通过对炎性细胞浸润和功能的影响，基质沉积和降解等作用参与支气管哮喘的发病机制；并且MMPs与TIMPs比例的失衡与气道高反应性及激素治疗的效果均有密切关系。     

环孢素对哮喘大鼠C-反应蛋白、转化生长因子-β1、基质金属蛋白酶类及其抑制剂表达的影响

目的探讨环孢素对哮喘大鼠C-反应蛋白(CRP)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶类(MMPs)及其抑制剂(TI MPs)表达的影响。方法随机将80只SD大鼠分为对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组、小剂量环孢素组和大剂量环孢素组共5组,制备哮喘模型,应用环孢素及地塞米松进行干预。血样及肺组织标本经免疫组织化学染色后计算机图像分析测定CRP、TGF-β1、MMPs、TI MPs水平。结果模型组标本CRP、TGF-β1、TI MPs及MMPs水平均高于正常对照组,差异均具有显著意义(P均<0.05);不同剂量环孢素组差异亦具有显著性(P<0.05)。大剂量环孢素组与地塞米松组差异无显著意义(P>0.05)。结论CRP、TGF-β1、MMPs及TI MPs与哮喘发病机制有一定联系,一定剂量的环孢素作用与激素相似。     

核因子-κB介导危重新生儿免疫功能研究

目的观察危重新生儿危重状态下免疫功能改变及核因子-κB(NF-κB)在其中的作用。方法选择50例危重新生儿作为观察对象,25例健康新生儿作为健康对照组。抽取二组静脉血,分别检测其血IL-4、IFN-γ、TNF-α及NF-κB等免疫指标。结果与健康对照组比较,危重新生儿存在NF-κB活性增高及Th1及Th2平衡紊乱,IL-4及TNF-α显著升高,IFN-γ降低。结论危重新生儿存在免疫功能紊乱;NF-κB信号转导通路参与危重新生儿发病。     

核因子-κB/抑制蛋白-κB售号通路介导的激素敏感型单纯性肾病患儿病毒基因友式激活

目的研究核因子-κB（NF-κB）／抑制蛋白-κB（IκB）信号通路在激素敏感型单纯性肾病（SRSNS）患儿病毒基因反式激活中的作用。方法采用电泳迁移率改变实验、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和酶标记免疫吸附分析法（ELISA）分别测定SRSNS．肾炎性肾病、继发性肾小球疾病、毛细支气管炎和正常儿童外周血单个核细胞（PBMCs）NF-κB活性、呼吸道病毒基因和血浆病毒抗体；同时采用Western blot和ELISA分别检测SRSNS和正常儿童IxB0蛋白质表达和血浆IL-8水平。结果与SRSNS缓解期和其他组比较，SRSNS活动期组NF-κB活性明显增加。NF—κB活性与呼吸道病毒检出阳性率呈正相关趋势。SRSNS活动期血浆IL-8水平增高，且与NF-κB活性呈正相关（r=0．88，P〈0．001）。SRSNS活动期患儿IκBα蛋白质明湿低于SRSNS缓解期和正常儿章，IκBα蛋白质水平与NF-κB活性呈负相关（r=-0884，P〈0．05）。结论NF—κH／IκB信号通路介导的病毒基因反式激活过程，可能足呼吸道病毒触发SRSNS的主要机制之一。     

小剂量氢化可的松对脓毒症大鼠海马组织核因子kB表达的影响

目的 研究小剂量氢化可的松（HC）对内毒素诱导的脓毒症大鼠海马组织核因子-kB（NF-kB）、抑制因子kB（IkB）表达的影响。方法雄性Wistar大鼠54只随机分为：对照组（A组）6只，模型组（B组）24只、小剂量HC干预组（C组）24只。腹腔注射脂多糖（LPS）1mg／kg建立脓毒症大鼠模型，尾静脉注射小剂量HC（6mg／kg）作为干预，分别在注射后2、8、16、24h分时段麻醉并灌注固定取脑。B组和C组每个时段点各6只。采用免疫组织化学方法及医学图像分析系统检测大鼠海马NF-kB、IkB的表达。结果模型组NF-kB表达较正常对照组显著上调（P〈0．05），IkB表达先降低后逐步上升，较对照组亦明显增加（P〈0．05），以8h为最高；干预组海马NF-kB表达较模型组显著下调（P〈0．05）；IkB表达较模型组明显增加（P〈0．05）。结论小剂量HC可通过诱生IkB来抑制NF-kB的表达，进而调控LPS诱导的脓毒症脑功能障碍，NF-kB信号转导途径在其发病机制中起重要作用。     

小剂量氢化可的松对脓毒症大鼠海马组织核因子κB表达的影响

目的研究小剂量氢化可的松(HC)对内毒素诱导的脓毒症大鼠海马组织核因子-κB(NF-κB)、抑制因子κB(IκB)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠54只随机分为:对照组(A组)6只,模型组(B组)24只、小剂量HC干预组(C组)24只。腹腔注射脂多糖(LPS)1 mg/kg建立脓毒症大鼠模型,尾静脉注射小剂量HC(6 mg/kg)作为干预,分别在注射后2、8、16、24 h分时段麻醉并灌注固定取脑。B组和C组每个时段点各6只。采用免疫组织化学方法及医学图像分析系统检测大鼠海马NF-κBI、κB的表达。结果模型组NF-κB表达较正常对照组显著上调(P<0.05),IκB表达先降低后逐步上升,较对照组亦明显增加(P<0.05),以8 h为最高;干预组海马NF-κB表达较模型组显著下调(P<0.05);IκB表达较模型组明显增加(P<0.05)。结论小剂量HC可通过诱生IκB来抑制NF-κB的表达,进而调控LPS诱导的脓毒症脑功能障碍,NF-κB信号转导途径在其发病机制中起重要作用。     

糖皮质激素抑制实验性肾炎大鼠肾组织中核因子-κB活化及单核细胞趋化蛋白-1表达

目的：探讨核因子-κB(NF-κB)活化在肾小球肾炎发病机制中的作用及糖皮质激素对NF-κB活化的调节作用。方法：肾毒血清肾炎应用兔抗鼠肾小球基底膜肾毒血清制备。模型组：注射肾毒血清后不加任何治疗,第14 d处死;糖皮质激素干预组(治疗组)：于肾毒血清注射后第1～14 d给予地塞米松每日0.125 mg/kg腹腔注射。采用免疫组化及医学图像分析系统观察肾小球及肾小管中NF-κB活化和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达,并分析其与蛋白尿和肾小球细胞数之间的关系。结果：模型组肾小球及肾小管中NF-κB活化较正常对照组显著上调,分别为(38.27±8.83)% vs (1.82±0.68)%和(68.46±12.94)% vs (16.89±4.47)%,P均<0.01;模型组肾小球及肾小管中MCP-1表达分别为(24.37±7.06)个/gcs和(54.78±11.49)%,较正常对照组显著升高(P<0.01),肾小球中NF-κB活化和MCP-1表达与单核细胞浸润和蛋白尿密切相关;糖皮质激素干预组肾小球及肾小管中NF-κB活化和MCP-1表达均显著下调。结论：NF-κB活化在肾小球肾炎发病机制中发挥重要作用,抑制NF-κB活化可能是糖皮质激素抗肾炎作用的机制之一。     

Dysregulated Hepatic Expression of Glucose Transporter Type-1,Toll-Like Receptor 4,and Nuclear Factor Kappa B in Estrogen-Induced Cholestasis Pregnant Rats with Placental Ischemia-Reperfusion Stress

Objective:This study aimed at investigating the expression of nuclear factor kappa B(NF-κB)and mammalian target of rapamycin(mTOR)related signal pathways in liver tissues of intrahepatic cholestasis of pregnancy animal models.Methods:Estrogen(EE)-induced cholestasis and a placental ischemia-reperfusion(IR)model were established in pregnant rats.All pregnant rats were divided into four groups by random number table:EE-IR group(n=6),EE-sham group(n=6),control-IR group(n=6)and control-sham group(n=6).Liver expression of mTOR,its upstream regulator DNA damage response-1(REDD1),and downstream factor glucose transporter type-1(GLUT1),accompanied by NF-κB(p65 is the most important component),its activator toll-like receptor 4(TLR4),and inhibitor IκBα,were detected by western blot analysis and real-time polymerase chain reaction.The intergroup comparisons were performed with a one-way analysis of variance,the comparisons among groups were analyzed with the nonparametric Kruskal-Wallis test.Results:Giving pregnant rats EE alone reduced the hepatic expression of IκBα(0.72±0.20vs.1.01±0.07,P=0.008).Meanwhile,giving pregnant rats placental IR alone increased liver levels of REDD1(3.24±0.98vs.1.06±0.24,P=0.025),GLUT1(2.37±0.82vs.1.09±0.10,P=0.039),TLR4(2.12±0.29vs.1.20±0.28,P=0.010),and p65(2.09±0.85vs.1.04±0.06,P=0.023),and decreased hepatic mTOR(0.50±0.07vs.1.01±0.03,P=0.001)and IκBα(0.61±0.08vs.1.01±0.07,P=0.014)expression.Subjecting EE-treated rats to placental IR did not further alter liver levels of GLUT1(2.02±0.45vs.1.79±0.39,P=0.240),TLR4(2.10±0.74vs.1.60±0.36,P=0.129),or p65(2.41±0.83vs.1.65±0.46,P=0.145),whereas it did decrease hepatic mTOR(0.42±0.09vs.0.90±0.14,P=0.008)and IκBα(0.43±0.09vs.0.72±0.20,P=0.004)expression and enhance REDD1 expression(4.46±0.65vs.2.05±0.47,P=0.009).Placental IR stress did impact the hepatic expression of REDD1-mTOR-GLUT1 and TLR4/NF-κB/IκBαin pregnant rats.Conclusion:Placental IR-induced hepatic GLUT1,TLR4,and p65 alternation,which responded efficiently in control rats,were impaired in EE-induced ICP rats.     

核因子-κB/抑制蛋白-κB信号通路介导的激素敏感型单纯性肾病患儿病毒基因反式激活

目的研究核因子-κB(NF-κB)/抑制蛋白-κB(IκB)信号通路在激素敏感型单纯性肾病(SRSNS)患儿病毒基因反式激活中的作用。方法采用电泳迁移率改变实验、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶标记免疫吸附分析法(ELISA)分别测定SRSNS、肾炎性肾病、继发性肾小球疾病、毛细支气管炎和正常儿童外周血单个核细胞(PBMCs)NF-κB活性、呼吸道病毒基因和血浆病毒抗体;同时采用Western blot和ELISA分别检测SRSNS和正常儿童IκBα蛋白质表达和血浆IL-8水平。结果与SRSNS缓解期和其他组比较,SRSNS活动期组NF-κB活性明显增加。NF-κB活性与呼吸道病毒检出阳性率呈正相关趋势。SRSNS活动期血浆IL-8水平增高,且与NF-κB活性呈正相关(r=0.88 P<0.001)。SRSNS活动期患儿IκBα蛋白质明显低于SRSNS缓解期和正常儿童,IκBα蛋白质水平与NF-κB活性呈负相关(r=-0.884 P<0.05)。结论NF-κB/IκB信号通路介导的病毒基因反式激活过程,可能是呼吸道病毒触发SRSNS的主要机制之一。     

基质金属蛋白酶及金属蛋白酶组织抑制因子-1在肾小球硬化大鼠中的表达和意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）在多柔比星诱导肾小球硬化大鼠中的表达和意义。方法40只雄性8周龄Wistar大鼠随机分为假手术和模型组。将模型组大鼠麻醉，在无菌条件下背侧切口行左肾切除术，1周后尾静脉注射多柔比星（5mg／kg）；假手术组大鼠麻醉后予以假手术，1周后尾静脉注射等容积9g／L盐水。造模12周末处死大鼠，取肾脏组织作病理检查，采用免疫组织化学方法检测肾组织Ⅳ型胶原（Col—Ⅳ）、纤维连接蛋白（FN）、MMP-2、-9和TIMP-1的蛋白表达。结果与假手术组比较，模型组大鼠肾组织MMP-2、-9蛋白表达显著减少（Pa〈0．01），Col—Ⅳ、FN、TIMP-1蛋白表达显著增高（Pa〈0．01），TIMP-1／MMP-9和TIMP-1／MMP-2比值显著增高（Pa〈0．01）。肾组织TIMP-1、TIMP-1／MMP-9和TIMP-1／MMP-2比值与肾小球硬化指数（GSI）呈显著正相关（Pa〈0．01）。而MMP-2、-9与GSI呈显著负相关（Pa〈0．01）。结论TIMP-1／MMP-2、TIMP-1／MMP-9比值失调，使肾小球细胞外基质（ECM）降解减少，导致ECM过度积聚，参与肾小球硬化的发生发展。     

基质金属蛋白酶9及组织型基质金属蛋白酶抑制因子1在感染性脑水肿大鼠中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶9(MMP9)及组织型基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)在大鼠感染性脑水肿中的表达及意义.方法 采用颈内动脉注射内毒素脂多糖(LPS)制作大鼠感染性脑水肿模型,在不同时间点采用干湿质量法测定大鼠脑组织含水量(BWC);甲酰胺法测定大鼠脑组织伊文思蓝(EB)水平;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)对大鼠急性感染性脑水肿模型中MMP9及TIMP1 mRNA表达进行检测,并对二者比值变化进行统计学分析.结果 各时间点LPS组脑BWC、EB水平、MMP9 mRNA、TIMP1 mRNA表达水平及MMP9 mRNA/TIMP1 mRNA比值均明显高于对照组,二组比较有统计学差异(Pа<0.05).同时LPS组BWC与EB水平、MMP9 mRNA与TIMP1 mRNA表达量,MMP9 mRNA/TIMP1 mRNA比值与EB水平、MMP9 mRNA/TIMP1 mRNA比值与BWC均呈正相关(r=0.455,0.675,0.352,0.396 Pа<0.05).结论 MMP9及TIMP参与了感染性脑水肿的发生和发展,MMP9/TIMP1的比例失衡可能在感染性脑水肿得发生发展过程中起重要作用.