应用荧光法筛查葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺乏

目的建立适于葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺乏筛查的检测方法。方法用荧光法对新生儿筛查滤纸干血片标本进行检测,对阳性者召回抽静脉血以G6PD/6PGD比值法进行确诊。结果用荧光法测定7780份新生儿筛查滤纸血片标本的G6PD活性,阳性358例,阳性率为4.6%(358/7780),对召回的358例阳性以比值法进行确诊试验,阳性315例,阳性率为4.0%,两者符合率为87.9%(315/358)。结论荧光法是一种半定量的方法,具有较高的特异性和准确性,且操作简便、检测快速、成本低廉,适合用滤纸干血片标本进行大规模的新生儿筛查。     

定量检测G6PD酶活性的可靠性分析

目的探讨G6PD酶活性的定量检测的可靠性。方法选取177例标本为检测标本，采用G6PD／6PGD比值法测定抗凝血G6PD／6PGD比值，同时采用全自动化生化仪定量检测标本G6PD酶活性，比较两种方法测定结果。结果G6PD／6PGD比值法测定抗凝血G6PD／6PGD比值检出45例缺乏（〈1．0）；全自动化生化仪定量检测标本G6PD酶活性，也同样检出对应的45例缺乏（成人〈1300．OU／L，儿童〈1700．OU／L。新生儿脐血〈2500．OU／L）；两种方法符合率为100％。结论全自动化生化仪定量检测标本G6PD酶活性准确性高、简单、快捷、自动化程度高，可对高发地区进行G6PD缺乏症的大规模筛查。     

应用荧光法筛查葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症

目的探讨荧光法筛查新生儿葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症中的实用性。方法新生儿出生72h后采足跟血,滴在规定的滤纸上,采用荧光法测定OSPD活性水平,同时与荧光斑点法、G6PD／6-磷酸葡萄糖酸脱氢酸（6PGD）比值法进行比较。并且检测3706例新生儿G6PD正常水平及筛查临界值（cut off值）。结果该方法最低检测限为0．52U／gHb,批内平均变异系数（CV）为9．8％,批间平均CV为11．1％,高、中、低3个浓度的平均回收率为96.4％。实验结果与目前国内筛查使用的荧光斑点法的符合率为97．5％,和G6PD／6PGD比值法的符合率为100％。筛查cut off值建议定为2．7U／gHb。结论荧光法适用于新生儿OSPD缺乏症的筛查。     

应用荧光法筛查葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症

目的探讨荧光法筛查新生儿葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症中的实用性。方法新生儿出生72 h后采足跟血,滴在规定的滤纸上,采用荧光法测定G6PD活性水平,同时与荧光斑点法、G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酸(6PGD)比值法进行比较。并且检测3 706例新生儿G6PD正常水平及筛查临界值(cut off值)。结果该方法最低检测限为0.52 U/gHb,批内平均变异系数(CV)为9.8%,批间平均CV为11.1%,高、中、低3个浓度的平均回收率为96.4%。实验结果与目前国内筛查使用的荧光斑点法的符合率为97.5%,和G6PD/6PGD比值法的符合率为100%。筛查cut off值建议定为2.7 U/gHb。结论荧光法适用于新生儿G6PD缺乏症的筛查。     

生化仪直接测定G6PD活性的临床应用

目的 探讨在全自动生化仪上直接测定葡萄糖六磷酸盐脱氢酶(G6PD)活性对检测G6PD缺乏的可靠性.方法 同时用生化仪上直接测定G6PD活性、G6PD/6PGD比值法及高铁血红蛋白还原率法(MHB-RT)对246例成人标本进行检测分析.结果 MHB-RT阳性检出率最高为8.13%,直接酶活性法与G6PD/6PGD比值法有较好的符合率,二者对G6PD缺乏的检出率同为6.1%,但2例用比值法测定结果为可疑的女性样本(高度怀疑为杂合子),直接酶活性法测定结果分别为1 613、1 669 μ/L,在正常参考范围的低值.结论 在全自动生化仪上直接测定G6PD活性,可用于临床G6PD缺乏的筛查,对于女性样本酶活性在1 300～2 000 μ/L者,建议同时用G6PD/6PGD比值法检测,以提高杂合子的检出率.     

应用G6PD／6PGD比值法检验育龄夫妇6-磷酸葡萄糖脱氢酶

目的：了解佛山地区育龄夫妇的6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏症的患病率。方法：应用G6PD／6PGD比值法检测1000例育龄夫妇的G6PD。结果：检出G6PD缺乏的男28例，女19例，检出率分别是5，6％和3，8％，总检出率为4．7％。结论：G6PD／6PGD比值法简单、快速、较准确，是基层医院检测G6PD的较理想的方法。对育龄夫妇进行G6PD的检测对优生优育，提高人口素质有重要意义。     

应用G6PD/6PGD比值法检测育龄夫妇6-磷酸葡萄糖脱氢酶

目的了解佛山地区育龄夫妇的6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏症的发生率。方法应用G6PD／6PGD比值法检测8057例育龄夫妇的G6PD缺乏。结果4008例男性受检者中，G6PD缺乏的227例，4049例女性受检者中检出146例，检出率分别是5．66％和3．57％，总检出率为4．63％。结论佛山地区G6PD缺乏症有较高的发生率。在育龄夫妇中进行G6PD缺乏症的筛查，并及早采取措施，是减轻新生儿病理性黄疸发生率和核黄疸发生率的有效途径。比值法简单、快速、较准确，是G6PD缺乏症筛查较理想的方法。     

某地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶筛查结果分析

目的了解广西地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发病情况,为患该病新生儿的防治提供参考依据。方法采用荧光法对本筛查中心的30 556例新生儿进行G6PD筛查检测,对可疑患儿召回并用G6PD/6PGD比值法进行确诊。结果所有被检测的新生儿中G6PD缺乏症的初筛阳性率是7.36%,其中男性为10.89%,女性为2.86%;对民族进行分组,汉族G6PD缺乏症的初筛阳性率是5.29%,壮族为9.54%,其他少数民族为5.42%。对可疑患儿召回确诊发现荧光法与G6PD/6PGD比值法的符合率为97%,重度G6PD缺陷者符合率达100%。结论荧光法准确性高、简便、快捷、费用低廉,广西壮族自治区作为G6PD缺乏症的高发区,应常规开展新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的筛查工作,使G6PD缺乏症患者能够及时采取预防性措施。     

东莞地区 G6PD 缺乏症的分子流行病学研究

目的：了解东莞地区人群 G6PD 缺乏的流行特征,为本地区提供 G6PD 缺乏症基因突变、基因型及表型资料,完善本地区基因突变谱,并为制订本地区 G6PD 缺乏症的预防计划提供有价值的参考。方法收集2010年1月至2012年12月在我院进行体检的男性外周血样本,采用 G6PD/6PGD 比值法进行筛查,记录其 G6PD/6PGD 比值法检测结果,G6PD/6PGD＜l．5确诊为 G6PD 缺乏,阳性样本采用 PCR-RDB 进行基因诊断,同时随机抽取50例阴性样本作为对照组进行基因诊断。计算疾病检出率、基因突变、基因型频率和基因构成比。结果3885例样本中共检出302例表型阳性的 G6PD 缺乏症患者,检出10种基因突变和1种多态性位点,鉴定出12种基因型,另有3例样品未发现 PCR-RDB 检测的17种突变类型。50例阴性样本进行基因诊断均为阴性。东莞市男性人群 G6PD 缺乏表型阳性的群体检出率是7．77％,17种常见突变基因携带率是7．70％,各种突变类型的构成比依次为 G1376T（32．8％）、G1388A（34．1％）、A95G（12．4％）、G871A （3．7％）、G392T（3．7％）、C1024T（3．3％）。结论本研究阐述了东莞地区G6PD 缺乏的人群发生率和详细的基因突变谱和突变频率,研究资料为在该地区制订有效可行的 G6PD 缺乏预防计划提供有价值的参考。     

龙岗区孕前人群G6PD缺乏症的分子流行病学研究

目的通过研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因在龙岗区孕前人群中的主要突变类型、分布特点及表型,为该病在本地区的诊断及预防提供实验依据。方法收集龙岗区孕前优生健康检查10075例血标本,利用G6PD/6PGD比值法进行葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性常规检测。对437例G6PD/6PGD比值法阳性及535例阴性样本,采用PCR+导流杂交法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变类型。结果采用G6PD/6PGD比值法筛查,酶活性异常检出率为4.34%。酶学筛查阳性样本基因突变检出率为97.25%,酶学阴性样本基因突变检出率为44.67%。基因检测共检出21种突变类型,包含多种复合突变,常见突变型为1376GT、1388GA、1311CT及95AG。结论分子水平的检测可以显著提高女性杂合子G6PD缺陷症的检出率。     

Rapid detection of twenty-nine common Chinese glucose-6-phosphate dehydrogenase variants using a matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry assay on dried blood spots

BackgroundGlucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) deficiency is the most common inherited disease. Current neonatal screening methods for G6PD deficiency primarily rely on the use of biochemical tests. However, only 15%–20% of female carriers were estimated to have been detected using these tests. As a better alternative, DNA-based tests could be used for G6PD deficiency screening. We aimed to develop a matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) assay for G6PD variant detection.MethodsA MALDI-TOF MS assay with multiprimer extension (multi-PEX) was developed to rapidly and accurately detect the 29 common G6PD variants in the Chinese population using a dried blood spot as a template. A parallel study screening 571 unrelated neonatal samples using the MALDI-TOF MS and fluorescence quantitative enzymatic assays was performed. All results were confirmed by Sanger sequencing in a blind study.ResultsIn 571 unrelated neonatal samples, 34 positive samples, including 26 samples from hemizygous males and eight samples from heterozygous females, were correctly identified, yielding a clinical sensitivity of 100%. The results were validated using Sanger sequencing with 100% concordance. In contrast, the fluorescence quantitative enzymatic assay had a 75% false negative and 88.8% false positive rate for the detection of heterozygous G6PD deficient females.ConclusionsWe established a reliable MALDI-TOF MS assay for G6PD deficiency screening in the Chinese population maximizing the chance of detection of heterozygous G6PD deficient females and reducing the false negative and false positive rates associated with routinely used newborn screening procedures.     

β-地中海贫血复合α-地中海贫血同时合并葡萄糖6磷酸脱氢酶缺陷症242例血液学分析

目的 分析广东地区β-地中海贫血复合α-地中海贫血同时合并葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD）缺陷症的检出率及其血液学特点。方法 对2006年11月至2009年5月经金域医学检验中心基因诊断室通过地中海贫血基因确诊的242例β-地中海贫血复合α-地中海贫血[GAP-PCR法检测α-Thal基因;反向点杂交（RDB）法检测β-Thal基因]通过G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGD）两个酶的活性直接比值（定量比值法）来正确判断G6PD是否缺乏,并进行血液学分析。结果 242例β-地中海贫血复合α-地中海贫血当中检测出21例G6PD缺陷症,占8.7%（21/242）,β-地中海贫血复合α-地中海贫血同时又合并G6PD缺陷症患者与单纯β-地中海贫血复合α-地中海贫血的各项红细胞参数比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 广东是地中海贫血和G6PD缺陷症的高发区,β-地中海贫血复合α-地中海贫血同时又合并G6PD缺陷症与单纯β-地中海贫血复合α-地中海贫血的血液学表现相似。育龄妇女做地中海贫血检查同时应进行G6PD/6PGD比值法测定,可使部分地中海贫血合并G6PD缺陷女性杂合子避免漏诊。     

3140例新生儿脐带血葡萄糖-6-磷酸脱氢酶检测结果分析

目的 总结和分析本院新生儿脐带血葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性检测结果,为新生儿G6PD缺乏症筛查提供依据和参考.探讨脐带血G6PD检测在新生儿黄疸鉴别诊断及早期防治中的临床意义.方法 新生儿出生后立即取脐带血置于乙二胺四乙酸抗凝真空管,采用全自动生化分析仪进行定量检测,低于参考值为缺乏.结果 G6PD缺乏率为10.10%,其中男婴为12.00%,女婴为7.77%,男性缺乏率高于女性缺乏率.结论 采用新生儿脐带血检测G6PD活性,取材方便、简单,能有效、早期筛查出G6PD缺乏患儿,脐带血G6PD活性检测在新生儿黄疸鉴别诊断及早期治疗中有重要临床价值.     

地中海贫血和G6PD缺乏症联合检测在婚前检查中的应用

目的 探讨地中海贫血和葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症联合检测在婚前检查中的应用价值。方法 选取2009年1月至2012年1月行婚前检查的夫妇4258对,采用地中海贫血一管筛查法检测地中海贫血,采用改良G6PD 定量比值法检测G6PD 缺乏症。结果 4258对夫妇中,2012年地中海贫血检出率明显高于2009、2010年（P＜0.05）,2012年G6PD缺乏症检出率与2009、2010和2011年比较差异无统计学意义（P＞0.05）。8516例受检者中,男性地中海贫血患者433例,G6PD缺乏症患者314例,检出率分别为5.1%、3.7%;女性地中海贫血患者423例, G6PD缺乏症患者298例,检出率分别为5.0%、3.5%。结论 地中海贫血和G6PD缺乏症在婚前检查中有较高的发病率。在婚前进行地中海贫血和G6PD缺乏症的筛查,是避免重型地中海贫血患儿的出生和新生儿溶血的有效途径。     

成都市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查分析

目的 了解成都地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的发病分布情况.方法 采用NADP＋氧化还原酶法,对11 085例（男6 440例,女4 645例）就诊患儿进行红细胞中G6PD活性的定量检测.结果 在11 085例受检者中,检出G6PD缺乏者677例,总检出率6.1%.其中男婴545例,占男婴检查人数的8.46%（545/6 440）;女婴132例,占女婴检查人数的2.84%（132/4 645）.结论 成都地区G6PD缺乏症检出率较高,应在新生儿期常规开展G6PD检测,及早诊断,采取有效防范措施,预防由G6PD缺乏引起的新生儿高胆红素血症及核黄疸的发生.     

An update on the prevalence of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency and neonatal jaundice in Tehran neonates

OBJECTIVES: The aim of this study was to screen newborns in Tehran for glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) deficiency in relation to hyperbilirubinemia and jaundice. DESIGN AND METHODS: We performed quantitative and qualitative red blood cell (RBC) G6PD assays in cord blood of 2000 male and female at-term neonates. Observations for jaundice and bilirubin determination were made in G6PD-deficient and normal groups. Those with severe jaundice were treated with phototherapy or exchange transfusion. RESULTS: Our results showed that 2.1% (3.6% of males and 0.6% of females) was G6PD-deficient. Those with severe jaundice and hyperbilirubinemia (160 normal and 17 G6PD-deficient) were hospitalized and treated with phototherapy or exchange transfusion. Bilirubin levels in G6PD-deficient neonates were somewhat higher compared to G6PD-normal babies (18.8 +/- 2.4 mg/dl [321.5 +/- 41 micromol/l] vs. 15.7 +/- 3.2 mg/dl [268.5 +/- 54.7 micromol/l]; P < 0.05). G6PD activity was significantly lower in G6PD-deficient group than in the normal group (2.1 +/- 0.7 vs. 12.5 +/- 5.0 U/g Hb; P < 0.001). CONCLUSION: This study shows that the incidence of G6PD deficiency in newborns of Tehran is 2.1%, which is relatively high, and also hyperbilirubinemia and jaundice are approximately 3-fold higher in G6PD-deficient group than in the G6PD-normal group (51% vs. 16%). This emphasizes the necessity of neonatal screening on cord blood samples of both sexes for G6PD deficiency and the need to watch closely for development of hyperbilirubinemia.     

梧州市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查结果分析

目的 了解梧州市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的筛查情况,为患该病新生儿的防治提供参考依据.方法 采用G6PD定量(连续监测速率法)对3 235例新生儿G6PD活性进行检测,并对筛查结果进行分析.结果 所有被检测的新生儿中G6PD缺乏症的发病率是10.88%,其中男性的发病率为12.21%,女性的发病率为9.33%.结论 梧州市作为G6PD缺乏症的高发区,应常规开展新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的筛查工作,对G6PD缺乏症患者及时采取预防性措施,避免因出现核黄疸而造成的智力低下或死亡等后果,确保新生儿的生命质量,从而提高优生优育的水平.     

东莞地区469例 G6PD 缺乏症基因突变类型分析

目的：了解东莞地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的基因突变类型,为 G6PD 缺乏症的临床诊断及预防提供依据。方法收集进行 G6PD 酶活性筛查的患者资料,记录其 G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGD）比值结果,随机抽取469例表型阳性样本,通过反向斑点杂交（RDB）技术检测其基因突变类型。结果采用 G6PD/6PGD 比值法共检测16464例标本,检出阳性标本672例（G6PD/6PGD＜1．0）,检出率为4．08％。随机抽取样本中,检出基因突变460例,检出率为98．1％,其中G1376T 突变173例、G1388A 突变141例、A95G 突变82例、G871A 突变60例、G392T 突变23例、C1024T 突变14例;还检出中国地区 G6PD 少见突变基因型 C1004T 突变6例、T517C 突变2例、C1360T 突变1例;同时检出 C1311T 多态性65例和双重杂合突变96例。结论东莞地区 G6PD 缺乏症发生率较高,G6PD 基因突变类型具有中国人群普遍代表性,又有该地区的异质性。