DMD患者脐带血干细胞移植中的HLA配型

【目的】了解假肥大型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy，DMD)患者接受脐血干细胞移植中HLA-A B DR不相合几率。【方法】用PCR反向序列特异性寡核苷酸(polymerase chain reaction-reverse sequence specific oligonucleotide，PCR-RSSO)杂交技术，在埘30例DMD患者进行HLA-A B DR基因分型的基础上，将其与广东脐血库中的668份脐血干细胞HLA配型分析比较。【结果】13％(4／30)例患者找到HLA抗原全相合并满足移植细胞数要求的脐血干细胞；50％(15／30)例患者找到HLA抗原1个不相合并满足细胞数要求的脐血干细胞；20％(6／30)例患者找到HLA抗原0～1个不相合且细胞数达要求的2倍以上脐血干细胞。【结论】DMD患者寻找到合适的脐带血干细胞的几率较高，有利于对此病进行临床脐血干细胞移植。     

HLA不相合异基因干细胞移植19例

1临床资料 我科2004-03／2007-03诊治患者19例，均为男性，年龄5-45岁。其中，AML5例，CML6例，ALL1例，混合细胞型白血病1例，SAA3例，MDS3例。1例MDS转化AML及1例混合细胞白血病疾病处NR，1例CML发生急变，余患者处CR期或疾病慢性期。共进行移植20次，1例MDS患者先后行2次移植，1例为无关供者，余供者均为患者亲属，     

HLA多态性对造血干细胞移植患者成功配型的影响

目的 通过对造血干细胞移植患者HLA多态性的分析,包括基因型和单倍型的特征,确定影响患者成功筛选出HLA相合无关供者的关键因素.方法 回顾性分析2013年1月至2016年4月北京市红十字血液中心HLA室完成的768名造血干细胞移植患者以及与其进行HLA配型的1 172名中华骨髓库无关供者的基因型和单倍型数据,确定HLA等位基因和单倍型的分布及特征,比较含有常见基因型(CWD表中的Common基因)或非常见基因型(CWD表中的Well-documented基因及Rare基因)以及至少含有一种常见单倍型或不包含常见单倍型的患者找到相合供者(定义为HLA等位基因9/10相合或10/10相合)的几率、找到的相合供者平均数以及找到相合供者的等待天数.结果 在768名患者中共有481名找到了相合供者,占62.6％.在研究群体中,HLA-A、-B、-C、-DRB1和-DQB1的等位基因数量分别是38、67、34、43和26个,常见的五位点单倍型为25种.通过比较发现,只包含常见基因型的患者找到相合供者的可能性显著高于包含非常见基因型的患者(63.91％ vs.40.48％,P＜ 0.01),其找到的相合供者数目也比后者高(1.25±0.55 vs.1.06±0.24,P＜ 0.01).至少含有一种常见单倍型的患者与不包含常见单倍型的患者相比,其找到相合供者的几率也更高(77.99％ vs.44.29％,P＜0.001),找到的相合供者也更多(1.32±0.62 vs.1.10±0.30,P＜0.001).结论 HLA基因型和单倍型是否常见对患者能否成功找到相合供者至关重要,包含至少一种常见单倍型以及基因型中全部为常见基因是患者成功配型的有利因素.     

脐带血造血干细胞移植研究现状

70年代初 ,人们就发现脐带血中含有大量的造血干 祖细胞 ,80年代末脐带血代替骨髓移植取得成功 ,因此有人预言 ,脐带血有可能成为未来骨髓外移植和基因治疗的造血干细胞来源[1 ] ,从此以后 ,人们对脐带血进行了更加深入细致的实验研究 ,脐带血造血干细胞移植在临床上的应用也越来越多 ,取得了可喜的成果。现将近年来在这方面的研究 ,综述如下。1　开展脐带血造血干细胞移植的意义骨髓移植是目前治疗骨髓衰竭、白血病、恶性肿瘤和某些遗传性疾病的最有效办法 ,这已经是不可争辩的事实。但是骨髓移植要求供受体间ＨＬＡ必须相合 ,而实际上这…     

脐带血干细胞移植治疗肝硬化的研究进展

肝硬化是一种常见病、疑难病,由多种原因引起,最常见的是由慢性乙型肝炎、丙型肝炎、脂肪肝和酒精中毒发展而来。失代偿期肝硬化是各种肝纤维化疾病的终末期,平均存活时间仅为5~7年。干细胞移植已成为肝病治疗研究的热点,脐带血干细胞移植为肝硬化治疗开辟了一条新途径。该文就脐带血干细胞的特点、治疗肝硬化的理论基础、在肝硬化方面的应用、植入途径以及问题、展望等方面进行综述。     

HLA配型不合情况下造血干细胞移植的新方法

目的:采用新方法进行非体外去除T细胞的人类白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)配型不合造血干细胞移植.方法:58例血液恶性肿瘤患者,33例为高危或难治复发白血病,接受了至少一个HLA位点不合的家庭供者造血干细胞移植.移植物为经粒细胞集落刺激因子(granulocyte clony-stimulating factor, G-CSF)动员的骨髓以及外周血造血干细胞,而无需体外去除T细胞.移植物抗宿主病(graft-versus-host-disease, GVHD)预防采用环孢菌素A 霉酚酸酯 短程甲氨喋呤方案.结果:所有患者均获得持久、完全供者植入.58例患者中发生Ⅱ度及以上急性GVHD 22例(37.9%),其中Ⅲ度和Ⅳ度急性GVHD分别为2例和1例,其严重程度与HLA不合程度无相关;42例可评估患者中,慢性GVHD为26例(61.9%),广泛型和局限型分别为11例和15例.复发9例,除1例外均为复发、难治白血病患者.死亡14例,其中7例死于疾病复发,另7例死于移植相关合并症,其中严重感染和间质性肺炎各2例,巨细胞病毒性脑炎、病毒型肝炎和急性GVHD死亡各1例.中位随访10月(2～37.5月),58例患者中42例无病存活(disease-free survival, DFS),高危患者2年DFS明显低于标危患者,分别为63.2%和77.6%(P= 0.04).DFS与供受者间HLA配型不合程度、急性GVHD严重程度及回输干细胞数量无关.结论:(1)无需体外去除T细胞的新方法可克服HLA屏障、安全有效地用于HLA不合的移植;(2)G-CSF动员的外周血干细胞可安全用于HLA不合的造血干细胞移植.     

脐带血干细胞移植的应用与研究进展

造血干细胞(HSC)在治疗白血病、恶性肿瘤、重症非恶性血液系统疾病以及某些遗传性疾病中有肯定的疗效,是某些白血病和恶性淋巴瘤的唯一根治手段[1].HSC移植包括异基因骨髓移植(Allo-BMT)、自体骨髓移植(Auto-BMT)、外周血干细胞移植(PBSCT)及脐带血(UCB)移植.但不论是异基因或自体骨髓移植,还是外周血干细胞移植,都存在一些不足,而UCB移植则可以弥补这些不足.1972年,Ende等首次报道1例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者进行小量血型相合的UCB输注后获得短期植入.尽管未广泛应用于临床,但为UCB移植奠定了一定的临床基础.1988年,法国医生Gluckman等[2]首先应用HLA相同的同胞UCB干细胞移植治疗范科尼(Fanconi)贫血患儿获得成功.近年来,很多学者对UCB干细胞移植进行了广泛的研究.UCB干细胞不仅可以替代骨髓HSC,甚至在一些方面更优于骨髓HSC而被临床所认可.本文就此作一综述.     

脐带血造血干细胞移植的伦理问题

脐带血造血干细胞移植 (脐血移植 )是治疗遗传性疾病和恶性肿瘤的重要治疗方法之一。我国首例脐血移植始于 1991年 ,经过一段时间的沉寂之后 ,近年来又成为临床应用的热点。为了更广泛地应用这一新技术 ,各地相继建立脐带血库 ,如广东省就有 4家脐带血库采集和贮存新生儿的脐带血。然而我们也要看到脐带血移植存在一些伦理上的问题。大部分医务人员及脐带血库代表在热心推广与应用这一新技术过程中 ,往往忽视医学伦理学问题。1　脐带血移植仍是试验阶段的治疗方法1989年以来 ,全世界进行了 10 0 0余例脐血移植 ,为肿瘤患者、遗传性疾病患者…     

探讨临床脐带血干细胞移植治疗2型糖尿病疗效

目的观察脐带血干细胞移植治疗2型糖尿病的临床疗效。方法选择8例2型糖尿病患者进行脐带血干细胞治疗。结果随访3、9个月,空腹血糖、餐后2 h血糖及胰岛素、C肽释放试验都有明显的改善。结论脐带血干细胞移植治疗2型糖尿病疗效显著,有借鉴推广价值。     

脐带血造血干细胞移植临床应用研究进展

198 8年Ｇｌｕｃｋｍａｎ等进行了世界首例Ｆａｎｃｏｎｉ’ｓ贫血脐带血移植 ,临床应用获得成功 ,进一步从临床上验证了脐血可以作为一种造血干细胞的来源。由此 ,世界各地兴起了对脐血及其临床应用的研究热潮。随着对脐血生物学特性的深入研究 ,脐血采集、检测、分离和保存技术的改进以及一系列脐血库的建立与合作 ,近十年脐血移植 (ＵＣＢＴ)在临床上得到了迅速的推广。迄今为止全世界已进行了约15 0 0多例脐血移植。从目前的临床结果来看 ,脐血移植具有广阔的临床应用前景。1　脐血移植临床应用适应症脐血移植已经成功地用于治疗许多良…     

脐血移植治疗急性白血病的临床研究

目的　探讨同胞和非血缘关系脐血造血干细胞移植治疗急性白血病的疗效和相关并发症。方法　 4例急性白血病患者分别行同胞和非血缘关系脐血移植各 2例。预处理方案 :以BUCY为基础化疗方案。移植物抗宿主病(GVHD)的预防 :采用环孢素A和短程甲氨喋呤方案。脐血细胞回输 :输注脐血有核细胞中位数为 3 5 5× 10 7/kg(2 2 0× 10 7～ 4 86× 10 7/kg) ,CD34 细胞中位数为 2 80× 10 5/kg (0 93× 10 5～ 3 85× 10 5/kg)。结果　 4例患者脐血造血干细胞经DNA多态性分析证实植活。出现急性Ⅱ度和Ⅳ度GVHD各 1例 ,加强免疫抑制治疗后好转。 3例患者仍无病存活 ,生存时间分别为 36个月、 2 4个月、 2 0个月 ,1例患者移植后 7个月白血病复发。结论　脐血是造血干细胞的良好来源 ,脐血移植是治疗急性白血病的一种有效方法。     

人脐带血干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的实验研究

目的利用人脐带血干细胞(HUCBSC)移植治疗大鼠心肌梗死,探索治疗心肌梗死的新方法。方法采用Ficoll-Hypague法分离培养HUCBSC;将20只Wister大鼠随机分为实验组10只和对照组10只,两组建立心肌梗死模型60min后,实验组于缺血区心肌组织注射HUCBSC200μl,对照组注射脐带血200μl。3周后行心功能和病理学检测并进行比较。结果实验组与对照组大鼠的左室前壁厚度、左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、左室舒张末期容积、左室收缩末期容积、左室短轴缩短率及左室射血分数间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HUCBSC移植治疗可改善心肌梗死大鼠的心功能。     

脐血干细胞移植治疗1型糖尿病的研究进展

1型糖尿病是由于胰岛β细胞破坏所致的胰岛素绝对缺乏。脐血干细胞具备的增殖和分化能力使其成为胰岛素分泌细胞的潜在来源。脐血干细胞可定向诱导分化为胰岛β细胞,进而发挥治疗糖尿病作用。脐血干细胞治疗糖尿病研究已取得了一定进展,部分实验已纠正糖尿病动物的高血糖状态。     

人脐血间质干细胞一般特性及其多向分化潜能

【目的】观察人脐血间质干细胞增殖能力、细胞表面分子标志及多向分化潜能。【方法】从人脐血中分离出单个核贴壁细胞并进行体外培养。将细胞以单克隆抗体标记后用流式细胞仪进行检测。向培养细胞中加入成骨、成软骨和成脂肪诱导剂，检测其多向分化能力。【结果】脐血间质干细胞原代培养时间为7周。流式细胞分析显示这些细胞CD29、CD13、CD44等表达为阳性，但是它们不表达造血干细胞表面标志物。加入成骨诱导剂会导致细胞碱性磷酸酶的表达。采用微球培养法并加入软骨诱导剂对细胞进行诱导，用阿尔新蓝染色显示有蛋白多糖表达。在加入成脂诱导剂后，会导致细胞形态学改变，且油红O染色为阳性。【结论】通过体外传代培养的方法可以从人脐血单个核贴壁细胞中得到纯化的间质干细胞。脐血有望成为间质干细胞的替代来源。     

人脐血间质干细胞一般特性及其多向分化潜能

 【目的】观察人脐血间质干细胞增殖能力、细胞表面分子标志及多向分化潜能。【方法】从人脐血中分离出单个核贴壁细胞并进行体外培养。将细胞以单克隆抗体标记后用流式细胞仪进行检测。向培养细胞中加入成骨、成软骨和成脂肪诱导剂，检测其多向分化能力。【结果】脐血间质干细胞原代培养时间为7周。流式细胞分析显示这些细胞CD29、CD13、CD44等表达为阳性，但是它们不表达造血干细胞表面标志物。加入成骨诱导剂会导致细胞碱性磷酸酶的表达。采用微球培养法并加入软骨诱导剂对细胞进行诱导，用阿尔新蓝染色显示有蛋白多糖表达。在加入成脂诱导剂后，会导致细胞形态学改变，且油红O染色为阳性。【结论】通过体外传代培养的方法可以从人脐血单个核贴壁细胞中得到纯化的间质干细胞。脐血有望成为间质干细胞的替代来源。     

人脐血间充质干细胞的分离与纯化

目的:探讨人脐血间充质干细胞(MSC)的培养纯化条件。方法:比较不同的梯度离心速度及时间、接种密度、首次换液时间、不同培养基对脐血中的MSC分离及原代培养过程的影响,以流式细胞仪对优化条件下培养的MSC进行细胞周期分析,并对细胞表面标志进行检测。结果:在其他条件不变的情况下,以1 000g×15 min的梯度离心速度及时间分离脐血为最宜,5×106/mL是脐血MSC培养的适宜接种密度,首次换液时间7 d。优化条件下培养的MSC传至3代时,几乎全部强表达CD29、CD44。结论:建立了一种优化的人脐血MSC分离纯化方法。     

脐血干细胞移植治疗血管性痴呆

血管性痴呆（vascular dementia,VD）是由缺血或出血性脑血管病以及全脑缺血、缺氧引起的认知障碍。传统药物治疗效果欠佳,脐血干细胞具备很强的增殖和分化能力,在一定条件下可分化为神经元,进而起到治疗VD的作用。脐血干细胞治疗VD研究已取得了一定进展,部分实验可明显改善模型动物的认知障碍。     

脐带血临床输注

将符合采集要求的脐带血（脐血）１５４份，分别给５３例需要常规输血的患者输注。结果显示：脐血有较好的输血效果，与对照组比较，有效少的输血反应倾向（Ｐ＞０．０５）。     

脐血间充质干细胞肌源性诱导分化的研究

目的研究脐血间充质干细胞 (MSC)体外的采集、培养和扩增 ,探讨MSC肌源性分化的条件和能力。方法选择杂种妊娠犬 11只 ,采集适量脐带血 ,常规分离后获得单核细胞 ,分别接种于不同的培养液中进行培养和体外传代扩增。免疫组织化学检测脐血MSC表面抗原的表达 ;5 -氮杂胞嘧啶核苷 (5 aza)诱导处理脐血MSC ,观察细胞形态结构的变化及肌源性标记物的表达。结果犬脐血MSC在IMDM中生长良好 ,增殖迅速 ,每传一代细胞扩增 2 ～3倍 ,传至 7代后细胞可扩增 1.5× 10 2～2 .0× 10 3 倍 ;脐血中包含破骨细胞样和纤维母细胞样贴壁细胞 ,后者CD2 9和CD71表达阳性 ,CD11a、CD11b和CD34表达阴性 ;脐血MSC在 10μmol/L的 5 aza诱导 3周后体积延长 ,与邻近细胞形成连接 ,并表达肌节性肌动蛋白和结蛋白 ,与阳性对照结果相似。 结论脐血MSC是存在于脐血中的一类不同于造血干细胞的原始细胞 ,在体外可大量扩增 ,在诱导剂的作用下向肌源性定向分化     

脐血干细胞移植结合常规药物治疗终末期肝硬化的临床研究

目的观察脐血干细胞移植结合常规药物治疗终末期肝硬化的临床疗效。方法选取湖北医药学院附属太和医院于2012年1～7月收治的50例自愿接受脐血干细胞移植患者为肝硬化失代偿期(Child C级),全部患者均给予静脉输注及股动脉介入脐血干细胞,同时进行常规药物治疗。定期观察术后3、6、9、12周肝功能、血清白蛋白(ALB)及凝血酶原时间(PT)的变化。结果治疗第3周开始多数患者的临床症状、体征得到明显改善,其中腹水减少30例(60%),双下肢水肿减轻40例(80%),乏力好转35例(70%),食欲改善30例(60%)。经脐带干细胞治疗后3周,各指标较治疗前未见明显改善;治疗后6周,谷氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、ALB、PT改善不明显,治疗9周时,所有指标均有明显改善(P<0.05),12周时,各指标改善更为明显(P<0.05)。结论脐血干细胞移植结合常规药物治疗终末期肝硬化是一种简便、安全、有效的治疗方法,其治疗疗效显著,可避免肝移植供体紧缺及免疫排异反应,明显改善患者的生活质量。