大孔吸附树脂分离纯化红花黄色素的工艺研究

［摘要］目的研究大孔吸附树脂分离纯化红花黄色素的工艺，确定最佳工艺条件和参数。方法红花水提取液浓缩后上大孔吸附树脂柱,以红花黄色素的含量为考察指标，对影响黄色素分离纯化的工艺参数进行考察。结果AB 8型树脂为红花黄色素最佳分离纯化树脂，其分离纯化红花黄色素的工艺条件：上样浓度25 mg·mL 1,上样液pH值为4，吸附流速1 mL·min 1，每毫升树脂最大吸附量为0.65 g红花饮片，洗脱剂为70%乙醇，洗脱流速为2 mL· min 1，洗脱剂用量为6倍量树脂柱床体积，树脂反复使用次数为4次。结论AB 8型树脂在所确定的工艺条件下能较好地分离纯化红花黄色素，其固形物中红花黄色素的含量＞65%,黄色素的回收率＞85%。该法适用于工业上大规模制备红花黄色素。     

正交试验优选黄芪甲苷的分离纯化工艺

目的:优化大孔吸附树脂分离纯化黄芪甲苷的工艺条件。方法:以浸膏得率和黄芪甲苷含量为指标,采用正交试验设计法优选黄芪皂苷的最佳提取工艺和黄芪甲苷的大孔树脂吸附纯化技术,并考察其影响因素。结果:加6倍量水提取3次,每次1h为最佳提取条件;提取液的相对密度、洗脱剂量和洗脱速度对黄芪甲苷的分离纯化均有影响。结论:本试验确定的提取黄芪甲苷类成分的工艺条件和大孔树脂吸附纯化黄芪甲苷的方法可行。     

罗布麻叶总多酚纯化工艺及抗氧化活性研究

目的建立并优化罗布麻叶总多酚的纯化工艺及其抗氧化活性研究。方法以吸附量和解吸率为指标,通过静态吸附实验,确定罗布麻叶总多酚纯化的最佳树脂;并通过动态吸附和解吸实验,对最佳吸附树脂工艺条件进行考察。结果最佳纯化工艺条件:上样浓度6.0 mg·m L-1,吸附速率2 BV·h-1,最大上样量8 BV,除杂用水量5 BV,洗脱液为50%乙醇,洗脱流速2 BV·h-1,洗脱体积为3 BV。结论经HPD-300大孔树脂分离纯化后,罗布麻叶总多酚纯度提高,纯化后抗氧化活性明显增加。     

大孔吸附树脂纯化延灯滴丸中有效成分的工艺研究

目的筛选分离纯化延灯滴丸有效成分的最佳树脂,并确定其工艺条件。方法以有效成分中灯盏乙素的吸附量和解析率为考察指标,采用静态吸附分离法确定适合的大孔吸附树脂;采用动态吸附法确定分离条件。结果 AB-8树脂对延灯滴丸有效成分具有良好的吸附分离性能。其动态分离纯化工艺条件为：延灯滴丸提取物混悬液浓度为8 mg·mL-1,吸附流速为5 mL·min-1,水洗量为13倍柱体积,洗脱剂为60%乙醇,洗脱量为2倍柱体积,洗脱速度为1 mL·min-1。结论 AB-8树脂分离延灯滴丸有效成分最佳工艺稳定高效,可推广应用于生产。     

淫羊藿的提取纯化工艺优选

目的 优选淫羊藿的提取纯化工艺。方法 以淫羊藿总黄酮的含量为指标，采用四因素三水平的正交实验进行提取工艺条件的优选，用大孔吸附树脂进行纯化。结果 影响淫羊藿总黄酮提取效率的因素依次为溶剂用量、溶剂浓度和回流时间，淫羊藿的最佳提取工艺条件为14倍量60％乙醇溶液回流提取2次，每次2h，大孔吸附树脂对淫羊藿苷有明显的分离纯化作用。结论 该实验确定的最佳提取纯化工艺稳定性好。简便易行，适合于工业化大生产。     

大孔吸附树脂纯化藤梨根中总黄酮工艺优选

目的 筛选大孔吸附树脂纯化藤梨根中总黄酮的工艺条件. 方法 通过动态吸附和解吸的方法,以总黄酮的吸附率、解吸率为评价指标确定树脂型号; 通过最佳上样量、上样速度、水洗用量、乙醇洗脱流速、乙醇解析浓度选择、乙醇解析用量等的筛选实验,确定纯化工艺条件. 结果 AB-8型大孔吸附树脂分离纯化藤梨根中总黄酮效果最好,其吸附率为84.76%,解析率为95.51%. 其最佳工艺条件为:30 mL藤梨根提取液以3 BV.h^-1的流速通过树脂柱,先用水8 BV洗涤,洗脱流速为4 BV.h^-1,再用70%乙醇4 BV解析,洗脱流速为3 BV.h^-1. 结论 AB-8型大孔树脂在所确定的优化工艺条件下,可较好地吸附分离藤梨根中总黄酮.     

牛蒡苷元新制备工艺

目的:优化筛选牛蒡苷元的酶水解条件、提取工艺和大孔树脂型号,得到适合工业生产的工艺流程。方法:以时间、温度、溶媒量为考查因素,用单因素和正交试验设计法,对牛蒡苷元水解条件进行优化;以乙醇浓度、用量、提取次数、提取时间为因素,对提取方法优化;以吸附率和解吸附率对不同型号的大孔树脂优选。结果:牛蒡苷元最佳水解条件为42℃,12倍量水,水解12 h;最佳提取工艺为10倍量40%乙醇提取3次,每次0.5 h;AB-8大孔树脂纯化效果理想。结论:通过对牛蒡苷元的水解提取纯化工艺研究,确定了适合的工业生产的最佳工艺,该工艺方法简单方便,通过该工艺和进一步的硅胶柱层析分离,可得到纯度大于98%的牛蒡苷元。     

Isolation of total flavonoids from seeds of Astragalus complanatus R.Br.with macroporous resin

目的 从AB-8、HPD-100、D101、X-5、NKA-9、LSA-20、LSA-30、D201、SP70、ZTC-1十种大孔树脂中筛选提取中药沙苑子总黄酮的最佳树脂并优化其提取工艺条件.方法 利用静态吸附法确定最佳吸附树脂,利用动态吸附法优化其工艺条件.结果 X-5树脂对沙苑子总黄酮有较好的吸附和解吸附性能,其优化工艺条件为:0.2g生药/mL水溶液上20cm×1.6cm层析柱,吸附速率为1.0mL· min-1,用6BV水洗脱杂质,6BV 70％乙醇洗脱得总黄酮.结论 本提取工艺所得总黄酮纯度高,可为大规模提取提供重要参考.     

离子交换树脂混用技术分离纯化妥布霉素

目的 开发利用离子交换树脂混用技术分离纯化妥布霉素的工艺。方法 建立2,4-二硝基氟苯(DNFB)HPLC柱前衍生化检测妥布霉素及相关物质,以树脂吸附量和解吸量以及妥布霉素纯度为指标,通过静态吸附和动态吸附实验,对妥布霉素在树脂上吸附和解吸条件进行优化。结果 从10种不同类型的树脂筛选出HZ-3C和JK110分离纯化妥布霉素,确定最优工艺条件如下：确定两种树脂最佳比例为3:1,上样pH值为9,上样流速为3BV/h,使用浓度0.20%和0.35%氨水溶液进行梯度洗脱。采用优化后的条件,妥布霉素纯度从32.85%提高到94.82%,回收率为88.26%。结论 建立了一种新的妥布霉素分离纯化方法,优化后的工艺妥布霉素得率高、工艺简单易行,适合工业化生产。     

大孔树脂提取沙苑子总黄酮工艺研究

目的从AB-8、HPD-100、D101、X-5、NKA-9、LSA-20、LSA-30、D201、SP70、ZTC-1十种大孔树脂中筛选提取中药沙苑子总黄酮的最佳树脂并优化其提取工艺条件。方法利用静态吸附法确定最佳吸附树脂,利用动态吸附法优化其工艺条件。结果 X-5树脂对沙苑子总黄酮有较好的吸附和解吸附性能,其优化工艺条件为:0.2g生药/mL水溶液上20cm×1.6cm层析柱,吸附速率为1.0mL.min-1,用6BV水洗脱杂质,6BV 70%乙醇洗脱得总黄酮。结论本提取工艺所得总黄酮纯度高,可为大规模提取提供重要参考。     

大孔树脂D113吸附分离苹果原花青素的研究

目的：优选大孔树脂吸附分离苹果原花青素的工艺条件.方法：选用3种不同极性大孔吸附树脂D113、DM130和ADS-17对苹果提取液中原花青素的吸附性能进行研究,以pH、样品流速、乙醇浓度、乙醇流速为考察因素,以吸附率和解吸率为评价标准.结果：D113树脂分离效果较好,吸附率达到68.1％,吸附量为5.91 mg·g-1树脂.最佳工艺是pH为7的原花青素粗提液以0.8 ml·main-的流速上柱吸附,再用体积分数40％的乙醇、以0.8 ml·main-1的流速进行解吸.结论：D113大孔极性树脂适用于吸附分离苹果原花青素.     

光果葶苈中硫代葡萄糖苷的提取工艺研究

目的：通过试验来优化光果葶苈中硫代葡萄糖苷的提取工艺。方法：在单因素试验基础上设计正交试验,对光果葶苈中硫代葡萄糖苷提取条件进行优化。结果：试验得出光果葶苈硫代葡萄糖苷提取最佳工艺条件为：提取温度80℃、提取时间20min、提取次数为1次,料液比1：7。结论：该工艺合理可行,可用于光果葶苈中硫代葡萄糖苷的大量提取。     

马勃多糖提取及体外抗肿瘤研究

目的研究马勃子实体多糖的最佳提取条件及其体外抗肿瘤作用。方法通过单因素及正交试验确定热水浸提法提取马勃多糖(CGP)的最佳提取工艺条件。利用MTT法研究马勃多糖对宫颈癌细胞(Siha)和乳腺癌细胞(MDA)体外增殖的抑制作用。结果通过正交试验确定CGP的最佳提取条件为提取时间:1.5 h、提取次数:2次、提取温度:100℃、料液比:1∶15;体外肿瘤细胞增殖抑制实验结果显示:马勃醇沉多糖在250μg.mL1时对Siha细胞具有最高抑制率达到52.6%;醇溶多糖在250μg.mL1时对MDA的抑制率达到80.4%。结论在最佳提取条件下马勃多糖热水浸提的得率为:1.792%;马勃多糖对Siha及MDA肿瘤细胞具较好的抑制作用。     

微波辅助萃取海芦笋中总黄酮工艺的研究

目的以海芦笋为原料、乙醇为浸提剂,在传统浸提技术基础上,辅以微波提取总黄酮。方法分别考察时间、温度、微波功率、料液比、乙醇浓度对总黄酮得率的影响,并在单因素试验基础上,运用正交试验,确定总黄酮提取最佳工艺条件。结果最佳提取工艺为:提取时间15 min,提取温度60℃,微波功率700 W,料液比1∶40,乙醇浓度55%,在此条件下提取海芦笋干粉中的总黄酮,得率为1.37%。结论微波辅助萃取海芦笋总黄酮的效率高于传统浸提工艺,乙醇浓度、提取时间和温度对总黄酮得率都有显著影响。     

红花黄色素酶法提取工艺的正交试验研究

目的研究纤维素酶提取红花黄色素的工艺条件.方法以羟基红花黄色素A为指标,采用正交试验法和单因素试验法考察纤维素酶浓度、提取时间、提取温度、pH等因素对红花黄色素提取量的影响.结果最佳提取工艺为:溶媒pH为5.0、提取温度为60℃、纤维素酶浓度为0.15 mg爛mL-1,提取次数为2次,提取时间为60 min.结论此法稳定,可用于红花黄色素的提取.     

酶解-溶剂联合提取洋葱中槲皮素的研究

目的:研究酶解与溶剂联合提取洋葱中槲皮素的最佳工艺条件。方法:以槲皮素得率为考察指标,通过单因素试验及正交实验确定最佳提取工艺。结果:酶解-溶剂联合提取槲皮素的最佳工艺条件是:酶解pH为5.5,酶解浓度为0.5mg.ml-1,酶解温度为45℃,酶解时间为2 h,液固比为20∶1,提取温度为65℃,提取时间为1.5 h,乙醇浓度为60%,槲皮素平均得率为0.046%。结论:采用酶解-溶剂联合提取槲皮素,工艺方法简单,可大大提高原料利用率。     

微波萃取法提取复方硫酸软骨素片中硫酸软骨素C的研究

目的从复方硫酸软骨素片中提取硫酸软骨素C(Chs-C)。方法采用微波萃取法提取复方硫酸软骨素片中的Chs-C,以Chs-C的提取率为考察指标,在单因素试验基础上进行正交试验,确定微波萃取最佳条件。结果微波萃取最佳条件为:萃取功率为595W,浸提时间90s,固液比为1∶75。在此条件下,提取率可达4.1%。结论对照传统乙醇沉淀法,微波法具有省时,操作简单,提高效率等优势。     

超声提取蒙药漏芦花中总皂苷工艺研究

目的优化蒙药漏芦花中总皂苷超声提取工艺。方法超声提取漏芦花总皂苷,以漏芦花总皂苷的提取率为评价指标,先后通过单因素试验和正交试验优化皂苷提取工艺。结果最佳提取工艺条件为：超声时间15 min,温度60℃,料液比为1：40,超声功率140 W。经工艺验证试验及工艺放大试验证实,该方法稳定可行。结论超声提取法用时短,提取率高,且经济合理、重现性良好,值得进一步推广。     

超声-微波辅助提取无花果果实总黄酮工艺的优化

目的 验证在超声-微波法下,无花果果实黄酮的最佳提取条件。方法 采用超声-微波提取法从不同种类的无花果中提取黄酮类化合物。结果 通过单因素试验,考察液料比、乙醇体积分数、微波时间、微波功率、超声时间、超声功率对黄酮类化合物提取率的影响。在单因素的基础上,采用六因素三水平正交试验确定为：青皮的最佳提取条件为液料比70∶1、乙醇体积分数55%、微波功率340 W、微波时间60 s、超声功率350 W、超声时间35 min;波姬红的最佳提取条件为液料比45∶1、乙醇体积分数90%、微波功率420 W、微波时间45 s、超声功率350 W、超声时间40 min。布兰瑞克的最佳提取条件为液料比45∶1、乙醇体积分数60%、微波功率320 W、微波时间135 s、超声功率350 W、超声时间40 min。在此条件下,无花果果实（青皮、波姬红、布兰瑞克）总黄酮的平均提取率,分别为0.42%,0.51%,0.37%。结论 采用单因素试验和正交试验的方法研究了超声波辅助提取无花果中总黄酮的工艺条件,确定了最佳提取条件。     

在大肠杆菌中表达重组CotA蛋白的培养条件优化

为了提高大肠杆菌对重组CotA蛋白的表达量,对本实验室构建的含CotA基因表达载体的工程菌株的培养条件进行优化。通过单因素试验及正交试验L18（3 7）优化了产酶的最佳培养条件为：摇床转速为180r／min、装液量为100mL／500mL锥形瓶、接种量为5％、诱导温度25℃、诱导剂IPTG浓度为1．0mmol／L、诱导时间为12h,以及加诱导剂时菌体OD600值为1．0,其中诱导剂IPTG浓度和菌体OD600值对CotA蛋白表达影响显著。