丁硫氨酸亚砜胺逆转人乳腺癌多药耐药细胞株耐药性的体外研究

 目的 探讨丁硫氨酸亚砜胺(BSO)对体外培养的人乳腺癌细胞株多药耐药性的影响。方法 以谷胱甘肽（GSH）还原酶循环法检测丁硫氨酸亚砜胺处理前后细胞内谷胱甘肽含量的变化;四甲基偶氮唑蓝比色法检测丁硫氨酸亚砜胺预处理对多柔比星( ADM) 50%抑制浓度（IC50）的影响并进一步计算耐药倍数和逆转倍数;流式细胞仪检测丁硫氨酸亚砜胺对乳腺癌多耐药细胞株MCF-7/ADM凋亡及细胞周期的影响。结果 耐药细胞MCF-7/ADM内谷胱甘肽含量较人乳腺癌MCF-7细胞内谷胱甘肽含量明显增高;丁硫氨酸亚砜胺显著抑制MCF-7/ADM细胞内谷胱甘肽的合成,而对MCF-7细胞内谷胱甘肽合成影响较小;丁硫氨酸亚砜胺在一定浓度范围内能降低多柔比星对MCF-7/ADM细胞的IC₅₀,在50,100,200,400,800 μmol·L^-1浓度时的耐药的逆转倍数分别为1.25、2.02、 8.42、12.65和9.71倍,而对MCF-7细胞的IC₅₀无明显影响;与单纯应用多柔比星组相比,丁硫氨酸亚砜胺及多柔比星联合用药组凋亡细胞比例明显增加,G0/G1期细胞比例增加。结论 丁硫氨酸亚砜胺可通过抑制细胞谷胱甘肽的合成,部分逆转乳腺癌耐药细胞的耐药性,这种作用可能是通过诱导细胞凋亡实现的。     

补骨脂素对HL60/HT耐药细胞逆转及对细胞内Ca2+浓度影响研究

 目的研究补骨脂素对HL60/HT耐药细胞逆转作用及对耐药细胞内Ca²⁺浓度影响,探讨其可能作用机制。方法采用MTT法测定补骨脂素对细胞增殖抑制作用,高效液相色谱法检测细胞内HT的浓度,激光共聚焦显微镜测定细胞内不同时段和不同时间点的Ca²⁺浓度。结果补骨脂素在1～20μmol·L^-1能不同程度降低HT对HL60/HT细胞的IC50,并不同程度提高细胞内HT浓度;1～20μmol·L^-1补骨脂素在不同作用时段(24,48,96 h)对HL60/HT细胞内Ca2+浓度与作用时间成负相关,10～20μmol·L^-1补骨脂素在作用HL60/HT不同时间点(5,10,15,20,25 min)细胞内Ca2+浓度与作用时间成负相关性。结论补骨脂素能逆转HL60/HT细胞的MDR,其作用机制与影响耐药细胞内Ca²⁺浓度,故而增加细胞内HT浓度有关。     

龙胆泻肝丸对胆汁淤积大鼠肝脏多药耐药蛋白及中性粒细胞CD18表达影响的研究

目的:从与胆汁分泌有关的转运蛋白及中性粒细胞CD18分子的角度探讨龙胆泻肝丸(LD)清肝胆,利湿热的可能作用机制。方法:将20只大鼠分为4组:对照组,模型组,LD 5.0,2.5 g.kg-1(按生药计算)组。给药组每日ig给药1次,连续8 d,对照组和模型组ig等体积的蒸馏水。其中第5天给药1 h后,除对照组ig花生油外,其他各组大鼠按100 mg.kg-1 1次性igα-萘异硫氰酸酯(ANIT)花生油。第8天摘取大鼠肝脏,提取肝脏总RNA,RT-PCR检测多药耐药蛋白MDR1a,MDR1b,MDR2和多药耐药相关蛋白MRP1 mRNA,MRP2 mRNA的表达;眼眶静脉取抗凝血,流式细胞仪测定中性粒细胞CD18表达,血细胞计数仪测定白细胞及粒细胞总数。结果:模型组大鼠肝组织MDR1a,MDR1b mRNA表达显著增加(P<0.05,P<0.01),MDR2 mRNA,MRP2 mRNA分别有表达增加或降低的趋势,MRP1 mRNA的表达无明显变化。LD 5.0,2.5 g.kg-1对胆汁淤积大鼠的肝组织MDR1a,MDR1b,MDR2,MRP1,MRP2 mRNA表达均无明显影响。LD各给药组白细胞总数以及粒细胞总数有下降趋势,CD18荧光强度明显低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:龙胆泻肝丸对ANIT诱导的胆汁淤积(类肝胆湿热证)具有利胆保肝作用,其作用机制主要与其抑制白细胞黏附,降低胆管炎症反应,减轻胆管损伤,从而有利于胆汁排泄有关,而与胆管上皮的转运体蛋白分子MDR,MRP关系可能不大。     

中药逆转肿瘤细胞多药耐药研究进展

阐述了肿瘤多药耐药（MDR）是临床化疗失败的主要原因之一,己成为恶性肿瘤化疗过程急需解决的问题。中药有毒性小、安全有效、多靶点等优势,在逆转肿瘤MDR的研究中正受到越来越广泛的关注。中药通过作用于介导MDR形成的膜转运系统、药物代谢系统、促进肿瘤细胞凋亡等机制,对多种肿瘤的MDR具有逆转作用。如何有效地从浩淼庞大的中药资源库中快速筛选并定位到具有逆转MDR活性的分子仍是目前中药研发亟待解决的瓶颈问题之一。建立科学合理的抗肿瘤药物筛选模型和高效可靠的方法和系统,能够满足现代医学的科学阐述要求,又能兼顾中医药本身的整体观念和辨证论治的思想,还需要大量艰苦的科学工作。     

升血颗粒含药血清对人白血病K562/ADR细胞多药耐药的逆转作用

目的:观察升血颗粒(PG)含药血清对人白血病K562/ADR细胞多药耐药性的逆转作用,并探讨其逆转机制。方法:采用MTT法测定细胞的药敏性及耐药逆转性,应用流式细胞仪检测非细胞毒性的含药血清处理后K562/ADR细胞内阿霉素(ADM)的浓度。结果:低、中、高剂量含药血清对K562/ADR细胞无明显细胞毒性。低、中、高剂量含药血清作用后,ADM对K562/ADR细胞的半数抑制浓度(I C50)显著下降,逆转倍数分别为1.34、1.71、1.82倍;ADM外渗试验显示,低、中、高剂量含药血清处理后K562/ADR细胞内ADM浓度显著增加,增加倍数分别为1.41、1.67、2.04倍。结论:升血颗粒含药血清对人白血病K562/ADR细胞耐药性有一定的逆转作用。     

粉防己碱逆转人乳腺癌MCF-7多药耐药细胞的抗凋亡作用

目的 :研究粉防己碱与长春新碱合用能否逆转人乳腺癌MCF-7多药耐药细胞的抗凋亡作用。方法 :用荧光染料Hoechst 33342和碘化丙锭联染观察染色质凝集 ,流式细胞术检测G₁亚峰 ,TUNEL法检测凋亡细胞 ,Fluo-3染色法测定细胞内游离钙。结果 :抗肿瘤药物长春新碱处理MCF 7敏感和耐药细胞后 24h ,可观察到2种类型的染色质凝集 ;但在耐药细胞中 ,相同浓度处理下染色质凝集的细胞明显减少。无明显细胞毒性的粉防己碱(20μmol·L^-1)与长春新碱合用 ,荧光显示法和TUNEL法均证实敏感和耐药的凋亡细胞明显增多。粉防己碱与长春新碱合用明显升高细胞内的游离钙含量。结论 :粉防己碱能有效地逆转人乳腺癌MCF-7细胞的抗凋亡作用。     

Cariporide降低K562/DOX细胞株表达P-糖蛋白而逆转耐药的影响

 目的 探讨cariporide对耐药细胞株K562/DOX中P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）的影响,为抗白血病多药耐药（multidrug resistance, MDR）提供新方法。方法 应用cariporide对细胞进行酸化,应用激光共聚焦显微镜测定野生型细胞系K562及耐药细胞株K562/DOX细胞内pH值及细胞酸化对K562和K562/DOX细胞内阿霉素累积的影响。采用MTT法观察细胞酸化对细胞活力的影响。应用流式细胞术检测细胞酸化对K562/DOX细胞中P-gp功能的影响。采用实时定量RT-PCR技术检测MDR1基因在mRNA表达水平的变化。结果 Cariporide处理3 h对K562及K562/DOX细胞的活力影响较小。在K562/DOX细胞中,P-gp的外排药物能力随细胞内pH值的降低而减弱,cariporide明显增加了细胞对罗丹明123（rhodaminel 123,Rh123）和阿霉素的累积。细胞酸化还在mRNA水平抑制了K562/DOX细胞中P-gp的表达。结论 Cariporide能够抑制K562/DOX耐药细胞株中MDR1基因表达和P-gp的功能。     

硒化壳聚糖逆转K562/ADM细胞多药耐药的实验研究

目的:研究硒化壳聚糖对人慢性粒细胞白血病耐阿霉素细胞株( K562/ADM) mdr-1基因/P-糖蛋白(P-gp)表达及功能的影响,为逆转肿瘤多药耐药提供新的途径.方法:硒化壳聚糖100,200 mg·L-1作用K562/ADM细胞24 h,应用RTPCR法和免疫印迹法检测mdr-1/P-gp表达的改变;应用高效液相色谱法检测细胞内阿霉素积聚浓度;应用MTT法检测阿霉素对K562/ADM细胞增殖的影响.结果:硒化壳聚糖可增强K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性,增加细胞内阿霉素集聚浓度,200 mg·L-1硒化壳聚糖作用效果显著强于100 mg·L-1硒化壳聚糖(P＜0.01);硒化壳聚糖能明显抑制K562/ADM细胞mdr-1/P-gp的表达(P＜0.01),100 mg·L-1硒化壳聚糖可使mdr-1/P-gp表达分别下降(40.87 -3.19)％和(35.08±0.09)％,200 mg·L-1硒化壳聚糖可使mdr-1/P-gp表达分别下降(78.24±3.42)％和(79.61±0.23)％.结论:硒化壳聚糖可明显抑制K562/ADM细胞mdr-1/P-gp表达,增加细胞内阿霉素含量,恢复细胞对化疗药物敏感性,逆转mdr-1编码蛋白P-gp介导的多药耐药.     

大黄酸对Caco-2细胞多药耐药蛋白转运体表达的影响

目的:探讨大黄酸对人结肠腺癌上皮细胞(Caco-2)多药耐药蛋白mRNA表达的影响。方法:用大黄酸作用于Caco-2细胞,采用荧光定量PCR(real time PCR)法检测转运体MRP1-5 mRNA的表达量,数据分析采用2-ΔΔCT法。结果:高(5.00 mg.L-1)低(2.50 mg.L-1)质量浓度大黄酸均可以显著上调Caco-2细胞MRP3 mRNA表达(P<0.05或P<0.01);低浓度大黄酸可以显著下调Caco-2细胞MRP5 mRNA表达(P<0.05);大黄酸对MRP1,MRP2和MRP4 mRNA的表达没有显著影响。结论:大黄酸可能通过上调Caco-2细胞MRP3 mRNA的表达和下调MRP5 mRNA的表达而影响其口服药物的生物利用度。     

复方藤梨根制剂对K562/ADM多药耐药作用的体内实验研究

目的：研究复方藤梨根制剂逆转人红白血病耐药细胞株K562/ADM裸鼠移植瘤的多药耐药效应及机制。方法：建立K562/ADM裸鼠移植瘤多药耐药模型;以流式细胞仪（FCM）检测各组肿瘤细胞膜上P-gp的表达和肿瘤细胞内ADM蓄积浓度。结果：（1）ADM组P-gp的表达与NS组相比明显升高（P（0.05）;不同剂量的FFTLG制剂与ADM合用时,P-gp的表达与ADM组相比显著下降（P（0.01）。单独应用FFTLG制剂,当浓度为0.8mg/mL时P-gp的表达与ADM组相比下降（P（0.05）。（2）与ADM组相比,ADM和不同剂量的FFTLG合用组肿瘤细胞内的ADM浓度均有上升（P（0.05）。结论：FFTLG制剂可以部分逆转荷瘤裸鼠的多药耐药性,其逆转效果似呈剂量依赖性。FFTLG制剂逆转荷瘤裸鼠多药耐药性的机理之一是通过下调肿瘤细胞膜上P-gp的表达或抑制P-gp的活性,增加肿瘤细胞内ADM的蓄积浓度而实现的。     

欧白芷素对K562/A02细胞阿霉素耐药的逆转作用(英文)

目的:探讨欧白芷素对耐药细胞株K562/A02中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影响,为抗白血病多药耐药(multi-drug resistance,MDR)提供新方法。方法:采用MTT法观察阿霉素对细胞活力的影响。应用流式细胞术检测欧白芷素对K562和K562/A02细胞内阿霉素累积和细胞中P-gp功能的影响。采用实时定量RT-PCR技术检测MDR1基因在mRNA表达水平的变化。结果:欧白芷素对耐药细胞株K562/A02有显著的逆转耐药活性,最大逆转倍数为7.36。在K562/A02细胞中,欧白芷素明显增加阿霉素的累积,增加了罗丹明123(rhodaminel123,Rh123)蓄积,抑制了Rh123的外排,同时欧白芷素还在mRNA水平抑制了K562/A02细胞中P-gp的表达。结论:欧白芷素能够抑制K562/A02耐药细胞株中MDR1基因表达和P-gp的功能。     

Trametenolic Acid B Reverses Multidrug Resistance in Breast Cancer Cells Through Regulating the Expression Level of P‐Glycoprotein

Trametenolic acid B (TAB) is the main active composition of Trametes lactinea (Berk.) Pat which possesses anti‐tumor activities. There was no report its antitumor effect through regulating P‐glycoprotein (P‐gp) so far, due to P‐gp over expression is one of the most important mechanisms contributing to the multiple drug resistance phenotype. The present aim was to investigate the effects of TAB on P‐gp in multidrug‐resistant cells; Paclitaxel‐resistant cell line MDA‐MB‐231/Taxol was established by stepwise exposure for 10 months. MDA‐MB‐231 cells and MDA‐MB‐231/Taxol cells were treated with TAB, and their growth was evaluated using MTT assays. Paclitaxel accumulation in the cells was analyzed by high performance liquid chromatogram (HPLC). The activity of P‐gp was detected by intracellular accumulation of rhodamine123 (Rho123), and the protein expression of P‐gp was evaluated using western blot. Results indicated that the IC₅₀ of MDA‐MB‐231/Taxol to paclitaxel (Taxol) was 33 times higher than that of nature MDA‐MB‐231. TAB increased the intracellular concentration of Taxol and inhibited the activity of P‐gp and suppressed the expression of P‐gp in MDA‐MB‐231/Taxol cells. Our present results showed that TAB could reverse Taxol resistance in MDA‐MB‐231/Taxol cells, mainly inhibiting the activity of P‐gp and down‐regulating the expression level of P‐gp, and then enhancing the accumulation of chemotherapy agents. © 2013 The Authors Phytotherapy Research Published by John Wiley & Sons Ltd.     

健脾解毒方对人结肠癌裸鼠原位移植瘤铂类耐药相关铜转运蛋白ATP7A ATP7B表达的影响

目的:探讨健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用及其对移植瘤铂类耐药相关铜转运蛋白ATP7A、ATP7B表达的影响,揭示健脾解毒方对奥沙利铂增效作用的部分机制。方法:建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,随机分为4组:对照组、奥沙利铂组、健脾解毒方组、健脾解毒方联合奥沙利铂组(联合用药组),治疗后观察各组移植瘤生长情况,采用实时荧光定量-PCR及免疫组化S-P法、Western-blot检测移植瘤中ATP7A、ATP7B mRNA和蛋白的表达。结果:(1)联合用药组的抑瘤率为53.6%,是单用奥沙利铂组的4.25倍;(2)奥沙利铂组裸鼠反复腹腔注射L-OHP后,移植瘤组织ATP7A和ATP7B的mRNA及蛋白表达均高于对照组(P<0.05);联合用药组移植瘤组织ATP7A和ATP7B的mRNA及蛋白表达均低于奥沙利铂组(P<0.05)。结论:健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长有增效作用,其增效作用可能与下调移植瘤组织ATP7A和ATP7B的mRNA及蛋白表达,增加细胞内奥沙利铂药物的浓度有关。     

槲皮素和山柰酚逆转白血病细胞系K562/A02多药耐药性的机制及相关基因表达谱的研究

目的研究槲皮素(quercetin,Que)及山柰酚(kaempferol,Kae)单用及联合应用时对K562/A02细胞系多药耐药的影响及机制。方法体外培养K562和K562/A02细胞经Que及Kae处理,采用噻唑蓝(MTT)法计算药物单独及联合作用后细胞的生长抑制率及对多柔比星(adriamycin,ADM)的增敏倍数;流式细胞术检测药物作用后细胞内ADM浓度的变化;Annexin V/PI法观察细胞凋亡情况;Real-time PCR基因芯片检测药物转运蛋白及凋亡相关基因表达的变化。结果药物作用48 h后,Que及Kae在5～160μmol.L-1时对K562和K562/A02细胞均有剂量依赖性的生长抑制作用,K562/A02对ADM的敏感性显著增强,二者联用效果有协同性;在ADM为5μmol.L-1时,药物与细胞共培养2 h即可检出Que能增加细胞内ADM的浓度,而Kae则对ADM浓度无明显影响,两药联合作用的效果不及Que单独作用。Que和Kae均可剂量依赖性地诱导K562和K562/A02细胞的凋亡。二者可影响ABC、SLC家族等药物转运蛋白相关基因的表达,并可调节Bcl-2、TNF等凋亡相关基...     

坤泰胶囊对卵巢储备功能下降大鼠卵巢凋亡调控蛋白Bcl-2,Bax表达的影响

目的:探讨坤泰胶囊对去氧乙烯基环己烯(4-vinylcyclohexene diepoxide,VCD)所致卵巢储备功能下降(decreasing ovarian reserve,DOR)大鼠凋亡调控蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响,研究该药的作用机制。方法:SD雌性大鼠连续腹腔注射VCD(80 mg·kg~(-1))15 d,建立与人类相似的生理性卵巢储备功能下降模型。将动物分为正常组,模型组,坤泰胶囊高、中、低剂量组(1.89,0.63,0.21 g·kg-1),补佳乐(戊酸雌二醇,0.13 mg·kg~(-1))组,于造模第1天开始灌胃给药,每天1次,连续45 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清激素卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢、子宫的病理组织变化,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测卵巢组织Bcl-2,Bax蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组FSH与LH明显升高,E_2明显降低(P0.05);模型组卵巢、子宫体积明显缩小,原始卵泡与初级卵泡数目明显减少,子宫内膜变薄,腺体数目减少;模型组大鼠卵巢Bcl-2蛋白表达明显减少,Bax蛋白表达明显增加(P0.05),Bcl-2/Bax显著下降(P0.01)。与模型组比较,坤泰胶囊高、中、低剂量组FSH明显降低,E_2明显升高(P0.05);补佳乐组FSH,LH明显降低,E2明显升高(P0.05)。各给药组卵巢、子宫体积增大,原始卵泡与初级卵泡数目增多,子宫内膜变厚,腺体数目增加,改善程度顺序依次为坤泰胶囊低、中、高剂量组、补佳乐组。坤泰胶囊高、中、低剂剂量组及补佳乐组大鼠卵巢Bcl-2蛋白表达明显增加(P0.05,P0.01);坤泰胶囊高、中、低剂量组及补佳乐药组大鼠卵巢Bax蛋白表达减少(P0.05);坤泰胶囊高、中、低剂量组及补佳乐组大鼠卵巢Bcl-2/Bax升高(P0.05,P0.01)。结论:坤泰胶囊可能通过上调卵巢Bcl-2蛋白表达及下调Bax蛋白表达,抑制卵泡的凋亡,从而改善卵巢功能。     

补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠A549/DDP细胞顺铂耐药的影响

目的:探讨补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠肿瘤细胞A549/DDP顺铂耐药的影响,并确定最佳用药浓度。方法:36只BALB/C裸鼠随机分为空载组,模型组,顺铂组,补中益气汤低、中、高剂量(1.46,2.92,5.84 g·kg~(-1))组。空载组接种转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)空载慢病毒转染的A549/DDP细胞,余接种TGF-β_1稳定过表达的A549/DDP细胞。药物干预后处死裸鼠。称量小鼠瘤重,计算抑瘤率;镜下计数肿瘤肝、脾、肺转移情况;病理观察肺组织形态学改变;免疫组化、蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测移植瘤中肺耐药相关蛋白(lung resistance-related protein,LRP),多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-related protein,MRP),P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达情况。结果:与模型组比较,补中益气汤组瘤重降低,肺转移结节数量减少,随着补中益气汤剂量增加,瘤重逐渐减小,抑瘤率上升,高剂量组效果最为明显(P0.05)。肝、脾未见明显转移结节。病理切片显示,模型组肺部结构紊乱,出现明显肺损伤,补中益气汤组肺泡、肺泡囊、肺间隔形态逐渐恢复,高剂量组效果最好。与空载组比较,模型组LRP,MRP,P-gp蛋白和mRNA表达均明显上调(P0.05);与模型组和顺铂组比较,补中益气汤中、高剂量组LRP,MRP,P-gp蛋白和mRNA表达明显下调(P0.05);高剂量组下调效果最为明显。结论:补中益气汤能抑制肺腺癌移植瘤生长及转移,减轻肺损伤,改善A549/DDP顺铂耐药,该作用有一定的量效关系,高剂量(5.84 g·kg~(-1))为最佳裸鼠体内用药浓度。     

Baicalein Triggers Autophagy and Inhibits the Protein Kinase B/Mammalian Target of Rapamycin Pathway in Hepatocellular Carcinoma HepG2 Cells

Baicalein (BA), isolated from the Chinese medicinal herb Scutellariae radix (Huangqin in Chinese), is a flavonoid with various pharmacological effects. Herein, we found that BA only slightly reduced the cell viability on HepG2 cells after 24‐h treatment as determined by 3‐(4, 5‐dimethylthiazol‐2‐yl)‐2, 5‐diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay. However, BA (50 μM) effectively blocked the colony formation. Meanwhile, BA remarkably induced the formation of autophagosomes after 24‐h treatment as determined by immunofluorescence with monodansylcadaverine staining as well as transmission electron microscopy, respectively. Moreover, BA obviously up‐regulated the expression of microtubule‐associated protein 1A/1B‐light chain 3‐II in concentration‐dependent and time‐dependent manners in HepG2 cells. When combined with the autophagy inhibitor chloroquine and BA, the cell viability and colony formation were significantly decreased, indicating that BA triggered protective autophagy, which prevented cell death. Further study showed that BA concentration‐dependently and time‐dependently decreased the expression of p‐AKT (S473), p‐ULK1 (S757) and p‐4EBP1 (T37 and S65), suggesting the involvement of protein kinase B (AKT)/mammalian target of rapamycin (mTOR) in BA‐triggered autophagy. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.     

桂枝茯苓胶囊提取物的体外抗肿瘤活性及机制

 目的 比较桂枝茯苓胶囊不同溶剂提取物的体外抗肿瘤活性,并探讨其可能的机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝法观察桂枝茯苓胶囊不同溶剂提取物对HeLa和C33A 2种人宫颈癌细胞株增殖的影响,以酶联免疫吸附法测定蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinases, PTKs)活性,用二苯代苦味肼基 (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) 清除率方法测定体外抗氧化活性。结果 桂枝茯苓胶囊的多种溶剂提取物具有良好的人宫颈癌细胞生长抑制活性。对HeLa细胞的抑制强度最大者为正丁醇部分-30%乙醇洗脱物 (提取物9),IC₅₀为（7.09±1.25）μg·mL^-1,对C33A细胞的抑制强度最大者为乙酸乙酯部分-丙酮洗脱物 (提取物5),IC₅₀为（5.14±0.70）μg·mL^-1。结论 桂枝茯苓胶囊提取物在体外显示不同的抗肿瘤活性,抑制蛋白酪氨酸激酶活性以及抗氧化作用可能是其提取物抗肿瘤作用的机制之一。     

二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达的影响

目的:观察二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达的影响,从细胞凋亡的角度探讨二仙汤含药血清对卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制。方法:22~24 d的SD雌性大鼠30只,随机分为3组,分别为生理盐水组,补佳乐组,二仙汤组。每组大鼠10只。给药4 d后处死大鼠,心脏取血,制备药物血清。22~24 d的SD大鼠卵巢颗粒细胞,经培养贴壁后,用顺铂损伤大鼠原代卵巢颗粒细胞。经各组药理血清作用后,应用放免法,进行雌激素和孕激素水平测定及分析。应用免疫组化法,测定各分组bcl-2、bax蛋白的表达情况,并进行图像分析。结果:放免结果显示,与正常组相比,模型组和补佳乐组E2表达明显改变,有统计学意义(P0.05)。与模型组相比,补佳乐组、二仙汤组E2表达均有增加;与正常组相比,模型组P表达水平有所变化,有统计学意义(P0.05)。与模型组相比,二仙汤组P表达略高于补佳乐组,但低于正常组。免疫组化结果显示,在卵巢颗粒细胞细胞质上可见bcl-2和bax蛋白表达的棕黄色颗粒。和正常组相比较,顺铂干预后各组bcl-2表达均减弱,而以模型组最明显,有统计学意义(P0.05);和模型组比较,各药物组均可见bcl-2阳性表达增加,但弱于正常组,有统计学意义(P0.05)。bax与bcl-2表达强度结果相反,和正常组比较,顺铂干预后的各组bax均表达增强,模型组呈现极强表达现象,有统计学意义(P0.05);和模型组比较,各药物组均可见阳性表达减弱,但表达高于正常组,有统计学意义(P0.05)。结论:二仙汤能降低经顺铂干预后大鼠bax蛋白在卵泡颗粒细胞表达,增强bcl-2蛋白的表达,二仙汤能够通过调节凋亡蛋白bcl-2、bax蛋白的表达,抑制卵巢颗粒细胞发生凋亡,从而保护卵巢功能。