定量PCR测定数据处理数学模型研究进展

定量PCR的临床应用越来越广,采用不同的数学模型来处理所得到的数据,对于结果的准确性有着不同的影响。现主要概括采用外标法及内标法进行定量PCR时的数据处理模式,并简要描述最新动力学方法。     

荧光实时逆转录PCR定量研究进展

荧光实时逆转录PCR广泛应用于稳态mRNA水平的定量，并且它已经成为基础研究、分子医学和生物技术的一种必不可少的实验工具。用此技术定量具有范围宽、敏感性高、精确度高，无PCR后处理步骤，避免了交叉污染，且产出率高，可以进行多重检测等特点。然而要成功地应用该技术并不是一件容易的事。现对方法学建立、扩增效率以及标准化等方面作一综述。     

定量PCR技术研究进展

定量 PCR技术为研究痕量致病因素准确数值提供了可能 ,借助 PCR的高灵敏度及高特异性 ,建立定量 PCR技术将为我们的研究工作以及判断疾病的发生、发展及预后提供有力的帮助 ,具有广阔的应用前景     

定量PCR的研究进展

定量PCR技术是在PCR定性技术基础上发展起来的基因定量技术 ,克服了原有的PCR技术存在的不足 ,能准确敏感地测定模板浓度及检测基因变异等。本文就定量PCR技术中的竟争性PCR和荧光定量PCR技术作一综述 ,以便更好地理解及应用这项技术     

定量PCR技术研究进展

定量ＰＣＲ技术为研究痕量致病因素准确数值提供了可能,借助ＰＣＲ的高灵敏度及高特异性,建立定量ＰＣＲ技术将为我们的研究工作以及判断疾病的发生、发展及预后提供有力的帮助,具有广阔的应用前景。     

荧光实时逆转录PCR定量研究进展

荧光实时逆转录PCR广泛应用于稳态mRNA水平的定量 ,并且它已经成为基础研究、分子医学和生物技术的一种必不可少的实验工具。用此技术定量具有范围宽、敏感性高、精确度高 ,无PCR后处理步骤 ,避免了交叉污染 ,且产出率高 ,可以进行多重检测等特点。然而要成功地应用该技术并不是一件容易的事。现对方法学建立、扩增效率以及标准化等方面作一综述。     

定量PCR的研究进展

定量PCR技术是在PCR定性技术基础上发展起来的基因定量技术，克服了原有的PCR技术存在的不足，能准确敏感地测定模板浓度及检测基因变异等。本文就定量PCR技术中的竞争性PCR和荧光定量PCR技术作一综述，以便更好地理解及应用这项技术。     

定量聚合酶链反应测定技术

聚合酶链反应 (ＰＣＲ)现已广泛用于涉及到核酸的科学研究以及临床疾病的诊断和治疗监测。由于ＰＣＲ是对原始待测模板核酸的一个扩增过程 ,任何干扰ＰＣＲ指数扩增的因素都会影响扩增产物的量 ,使得ＰＣＲ扩增终产物的数量与原始模板数量之间没有一个固定的比例关系 ,通过检测扩增终产物很难对原始模板进行准确定量。近年来 ,研究人员为克服上述影响因素 ,研究了各种相对准确的定量ＰＣＲ方法[1 3] 。一、ＰＣＲ扩增的理论模式在ＰＣＲ中 ,随着扩增周期的增加 ,模板以指数方式进行扩增。每一扩增周期后产物的量可用下式表达 :Ｙｎ=Ｙｎ - …     

定量PCR技术的研究进展

定量ＰＣＲ技术的研究进展陈建魁综述牟兆钦审校（军事医学科学院附属医院，北京１０００３９）关键词定量ＰＣＲ核酸检测技术聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术建立以来，定性技术不断改进和完善，可以达到检测单个靶序列的水平。但实际工作中常需要定量检测标本中核酸，而不是...     

定量PCR技术

用PCR技术对基因从定性到定量测定是分子生物学方法学研究的一大飞跃，实现对核酸信息量的分析比较，为疾病的诊断和治疗提供更多、有效的基因水平信息。本文介绍了近年来研究和应用较多的4个重要定量PCR方法，即对PCR产物的直接定量、极限稀释法、靶基因与参照基因的同步扩增和竞争性PCR。并对定量PCR的特性和扩增动力学的影响因素等作了讨论。     

定量PCR技术

聚合酶键反应（PCR）是模拟DNA体内复制过程,在体外将DNA片段加以人工扩增的技术。有许多因素都可以影响PCR的扩增效率,导致常规PCR的特异性不强,准确性不高,为此,大量学者设计了定量PCR技术,以克服各种因素对PCR扩增的干扰,从而提高PCR的特异性及准确性。本文对定量PCR技术进行了简要的综述。     

应用生物发光技术定量检测PCR扩增产物

目的　建立一种基于生物发光技术的定量检测PCR产物的方法 ,并用于HBV定量PCR检测。方法　首先利用ATP硫酰化酶 (ATPsulfurylase)将焦磷酸 (PPi)定量转化成ATP ,然后利用虫荧光素酶 (luciferase)系统发光检测ATP ,从而确定样品中PPi含量。利用 2次PCR法扩增HBVDNA目的片段 ,并进行回收纯化定量 ,以之作为阳性标准模板制作标准曲线。选择适当的循环次数扩增样品中HBVDNA ,利用化学发光法检测扩增产物中PPi的量 ,进而确定样品中HBVDNA模板的量。结果　当起始模板量为 (10～ 5 )× 10 5拷贝 ,循环次数为 2 5 ,发光值与起始模板浓度呈现良好的相关。检测 32份样品血清 ,其中 2 3例HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)标本中HBVDNA平均含量为 1 6× 10 5拷贝 / μl,9例HBsAg(+)、HBeAg(- )、HBcAb(+)标本中HBVDNA平均含量为 5 6× 10 3 拷贝 / μl。结论　本方法是一种操作简便、灵敏度高的定量PCR方法     

定量PCR

随着分子生物学在医学领域的广泛应用。对检测标本的核酸定量已显得十分必要,PCR技术是一种较为理想的方法。本文介绍了近几年国外在这方面的研究进展。     

荧光定量PCR技术及其在临床上的应用

荧光定量PCR（Fluorescence Quantitive Polymerase Chain Reaction FQ-PCR)技术是在90年代末期发展起来的一项全新技术。经过几年的实践及临床应用，已获得了较为稳定的检测效果。作为一种体外基因扩增技术，它能敏感地检测初始模板浓度及基因变异等情况。它的出现，克服了传统PCR技术普遍存在的假阳性及不能定量等问题，使得PCR技术更广泛地应用于临床，在监测患者病情、预后、指导用药等方面有着广阔的应用前景。本文概述了FQ－PCR技术及其在临床上的应用，即常见病原体的检测及其在分子遗传学和法医学中的应用。     

实时荧光定量PCR检测胸水端粒酶活性

端粒酶检测方法从端粒酶重复序列扩增方法（TRAP）、TRAP-ELISA法逐渐发展为实时荧光定量PCR（FQ—PCR）方法。本文采用的FQ—PCR方法对胸水内的端粒酶活性进行检测，现报道如下。     

荧光定量PCR室内质控体系的概念及方法

近年来，随着《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》和《临床基因扩增检验实验室工作规范》的贯彻实施，以及卫生部临床检验中心对全国各地部分临床基因扩增检验实验室技术验收工作的陆续展开，临床基因扩增检验实验室的质量管理已日益受到广大同行的关注。本文就临床基因扩增检验实验室荧光定量PCR室内质控体系的概念与方法介绍如下。     

定量PCR在弓形虫病诊断中的研究进展

弓形虫病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病。应用定量PCR对弓形虫进行定量检测，为弓形虫病的诊断提供了一条快速、准确、灵敏的途径。现就定量PCR技术诊断弓形虫病所用目的基因、定量PCR的类型以及在弓形虫病诊断中的应用作一综述。     

扩增曲线异常对荧光定量PCR检测乙肝病毒核酸的影响

乙型肝炎病毒（HBV）DNA准确定量对乙型肝炎病人的治疗监测和预后判断有重要的临床指导意义。实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）是目前测定HBVDNA较为简便、敏感和特异的方法。影响实时荧光PCR准确定量的因素很多．我们在对血清HBVDNA定量检测中发现个别标本的PCR扩增曲线荧光强度增加特别不明显且不规则（以下称“异常扩增曲线”），致检测结果明显偏低，对此我们进行了分析。