核酸检测方法在献血员肝炎筛查中的初步应用

目的 将核酸检测方法应用于献血员肝炎筛查，了解某地区血液安全水平和常规血液筛检中两次酶免检测方式的可靠性。方法44份Murex-abbott抗-HCV阳性标本经科华酶免试剂复检后，使用罗氏COBAS Ampliscreen单独检测HCV RNA；486份来自某地区的合格献血标本采用24份标本混合检测的方法，用罗氏COBAS AmpliScreen检测HBV DNA和HCV RNA。结果44份标本用科华酶免试剂复检，结果只有13份标本呈抗-HCV阳性；3份HCVRNA阳性标本中1份为科华试剂检测抗-HCV阴性。486份合格献血标本进行罗氏COBAS AmpliScreen 24份混合形式筛检后，发现3例HBV DNA阳性标本，阳性率为0．62％，未发现其他核酸标记物阳性的标本。结论我国血液筛查的HBsAg检测存在漏检的现象，在常规血液筛检中，NAT检测只能作为酶免抗体检测的一种补充手段，如果NAT能取代我国血液二次酶免筛检中的一次，则能在最大程度上保障血液安全。     

ELISA法检测抗HCV影响因素分析

目的 探讨ELISA法检测抗HCV的影响因素及相应对策.方法 利用ELISA法,分别对无偿献血者血液标本进行抗HCV初检、复检两次检测;两次检测结果不符时,取相应标本,分别使用两家试剂进行双孔复试.结果 11293份血液标本检测过程中,共有85份初复检结果不符,经双孔复试79份为阴性,6份为阳性.结论 加强对血液标本、仪器设备、检测试剂的质量管理,建立标准操作规程以规范实验操作,可显著提高检测结果的准确性.     

化学发光免疫分析法检测献血者HCV抗体的应用评价

目的应用化学发光免疫法（CLIA）检测无偿献血者丙型肝炎病毒（HCV）抗体。并与常规抗-HCV ELISA法和HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测法进行比较。方法对2009年1月-2010年8月的5 985例献血者血清标本,先应用HCV-CLIA法和试剂①、试剂②两种抗-HCV ELISA试剂进行常规初检、复检检测。对HCV-CLIA法和试剂①、试剂②检出的阳性标本,再进行HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测。结果在被检测的5 985份标本中,HCV-CLIA法HCV阳性14份;抗-HCV ELISA法初检阳性15份和复检阳性为16份（其中初检、复检均阳性的14份）;HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测阳性的13份。结论本组HCV-CLIA法与HCV ELISA法初检、复检结果比较符合率分别为93.33%和87.50%;与HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测比较符合率为92.86%。HCV-CLIA法具有操作简便、快速、重复性好等优点,适合献血者抗-HCV的筛查。     

复检血液标本中HBsAg阳性结果分析

为了进一步提高血液质量 ,保证输血安全 ,从 1999年起我们采用了灵敏度和特异性均较高的进口试剂对血液的ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＣＶ、抗 -ＨＩＶ检测进行复检。在 1999年 7月～ 11月期间 ,我们共复检了 2 0 5 6 7份标本 ,对初次复检阳性并再次双孔复试阳性的血液进行淘汰。在这其中因ＨＢｓＡｇ阳性而被淘汰的血液有 76份 (0 4% )。在复检中使用进口试剂后与原来相比明显地提高了阳性检出率。为了了解初检 ,复检的差异是否确实因试剂的灵敏度而产生的 ,我们对其中收集到的 45份因ＨＢｓＡｇ阳性而被淘汰的血液标本用三种试剂做了ＨＢｓＡｇ检…     

出入境人员HCV基因型与血清HCV载量及ALT相关性研究

目的 探讨出入境人群HCV的基因分型，并分析HCV不同基因型与病毒载量、ALT活性水平的相互关系。方法 对72542名出入境人员进行HCV抗体检测，对抗-HCV阳性标本进行HCV基因分型。以荧光定量PCR测定HCVRNA载量，同时检测ALT活性。结果 共发现197份标本呈抗-HCV阳性，阳性率为0．27％，其中出境人员阳性率为0．24％。入境人员阳性率为0．31％。抗-HCV阳性标本经PCR检测基因分型后发现110份标本含有HCVRNA，共发现5种基因型，其中1b占40．0％、6a占30．0％、2a占14．5％、1a占8．2％、2b占7．3％。中国大陆人群与中国香港及其他国家人群的各基因型分布无明显差异。各基因型群间与HCVRNA载量差异具有统计学意义（P〈0．05），2a型人群HCVRNA载量明显高于其他各型人群（P〈0．05）。不同基因型人群间ALT水平差异无统计学意义。HCV RNA拷贝量与ALT活性无相关性。结论 HCV-1b为优势基因型。对HCV基因分型以厦PCR病毒载量和LAT活性检测。实行HCV实时监测具有重要的意义。     

无偿献血抗-HCV阳性标本及灰带区样本的处理

1　材料与方法我站抗-HCV检测初、复检一方出现阳性结果或OD/cutoff值超过0 8者视为可疑,如连续待检2次仍为阳性,均应予以报废。如何确认初、复检不一致的阳性标本及如何处理灰带区的血样标本,是保证安全输血的重要组成部分,因此,笔者于2 0 0 3年1月至5月,在本站无偿献血的标本中随机抽查了部分初、复检不一致的阳性标本,用分片段酶联免疫测定对ELISA进行对比进一步确定,同时对370 6份血样标本进行了连续4 2次的测试质控OD值,对低值质控样本做了再分析。试剂:初检试剂(为厦门新创抗-HCV酶联免疫诊断试剂盒) ,复检试剂(北京医科大学抗…     

献血者血清抗-HCV阳性与ALT活性的关系

目的 分析献血者血清抗-HCV抗体及丙型肝炎病毒核酸（HCVRNA）含量与ALT的关系。方法 采用ELISA法检测抗-HCV抗体。阳性标本用荧光PCR试剂盒测定HCVRNA，分析ALT活性与HCVRNA水平的关系。结果 83份抗-HCV抗体阳性标本经PCR检测后有37份标本含HCVRNA，HCVRNA拷贝量与ALT活性呈正相关，且标本的HCVRNA含量越多，ALT活性也越高（P〈0．01）。结论 献血者中筛查ALT并结合PCR技术，能减少HCV经血传播的危险。     

西宁地区17 321人次献血初复检结果分析

为了确保血液质量 ,防止输血相关疾病的发生 ,本血液中心自 2 0 0 0年 9月运行之日起 ,便严格按照卫生部规定对献血者进行初检筛选 ,对采后成品血进行复检 ,初、复检使用不同厂家试剂 ,现将 2 0 0 0年 9月至 2 0 0 1年 1 2月进行的 1 73 2 1人次献血初、复检结果分析报告如下。材料与方法1　材料来源　西宁地区 2 0 0 0年 9月至 2 0 0 1年 1 2月有偿献血者标本 ,其中初检标本 1 73 2 1份 ,复检标本 1 4691份。2　检测项目及方法　初检 :①ＨＢｓＡｇ检测 ,ＥＬＩＳＡ法 (北京万泰、洛阳华美公司生产 ) ;②抗-ＨＣＶ、抗 -ＨＩＶ检测 ,ＥＬＩ…     

献血员抗-HCV阳性血标本的复检及试剂适用性评价

目的对献血员抗-HCV阳性血标本进行复检,并对常规检测试剂的适用性作出评价。方法53例初检抗-HCV阳性的献血员血清用抗-HCV分片段酶联免疫试验法进行复检,同时观察国内4种抗-HCV试剂的检测结果。结果53份样本中30份最后确认为抗．HCV阳性或可疑阳性;4种国产试剂中,a试剂与b、d试剂的互补性较好,与C试剂的互补性较差。结论定期对献血员抗-HCV阳性血标本进行复检和结果确认,以及对使用试剂进行阶段性适用性评价,是保证实验室质量的重要措施。     

荧光定量PCR测定HCV RNA对分片段ELISA法检测抗HCV可疑样本的分析

目的利用荧光定量PCR法对分片段检测抗HCV的可疑样品进行检测，确认可疑样本的结果。方法采用分片段检测法对ELISA法检测抗HCV总抗体阳性或可疑阳性的275份样本进行检测，并对其中26份可疑阳性（只有一项阳性）的样本．采用荧光定量PCR法来进行HCVRNA确认分析。结果荧光定量PCR阳性率为26．9％（7／26），7例阳性样本的分片段结果均为NS3及C片段阳性，其含量与HCVRNA含量一致。结论对于NS3及C片段阳性的结果，在条件允许下，应利用PCR法或进口试剂进行确认。而对于单片段阳性而HCVRNA阴性的结果，也不能否定HCV感染，应结合流行病学及临床表现给予确认．     

早期感染丙型肝炎病毒样本抗原和核酸检测的数据分析

目的评价对丙型肝炎病毒（HCV）早期感染血液样本游离核心抗原（HCVcAg）和核酸（RNA）检测的意义。方法用国外HCVcAg试剂对8649份自然供血员及566份HCV可疑感染者血清进行检测,利用一种核酸试剂（TMARNA）也对这566份血清进行检测,并对检测数据进行分析。结果HCVcAg试剂在8649份自然供血员血清中筛出一份HCVcAg单独阳性血清,在566份HCV可疑感染者血清中,筛出1份HCVcAg和抗体同时阳性血清,确证产生的是核心区抗体。TMARNA试剂筛出6份HCVRNA阳性而抗体阴性的血清,利用傲拓HCV总抗原试剂检测,发现其中5份HCV总抗原阳性,同时这些血清在澳大利亚国家血液中心进行复核,RNA结果与我们一致。结论由于检出了HCVcAg单独阳性的窗口期样品和HCVRNA单独阳性的窗口期样品,认为利用HCV抗体试剂对血液进行筛查的同时,使用HCVcAg和RNA试剂做必要的补充实验,可以减少因窗口期造成的漏检。     

不同ELISA HCV抗体试剂在献血者筛检中的应用评价

目的探讨不同丙型肝炎病毒(HCV)抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂在献血者血液筛检中存在漏检现象。方法采用ELISA法二种不同的HCV抗体筛检试剂对37717人份血清同时进行检测,对于筛检抗—HCV阳性的结果,再用重组免疫印迹(RIBA)法进行确认。结果A试剂ELISA法检出阳性36份而RIBA确认0份阳性,可疑8份,阴性28份;B试剂ELISA法检出阳性67份而RIBA确认4份阳性,可疑32份,阴性31份;A与B两种试剂ELISA法同时检出阳性68份,RIBA确认阳性55份,可疑5份,阴性8份。结论试剂A与试剂B抗—HCV阳性检出的一致性比较,经x2配对计算(x2=12190,P<0.01)得出两种试剂检出抗—HCV阳性标本的一致性有非常显著性的差异。为尽可能减少输血后HCV感染发生,有责任首选灵敏度高、特异性强的ELISA试剂来检测献血者血液。     

丙型肝炎病毒在供、受血者间传播的调查

采用市售第二代抗HCVELISA试剂对一组供、受血者血清抗HCV进行了抽查。结果表明，未经地方血站抗HCV筛选的献血员血清抗HCV阳性率为18．57％，经筛选后为1．03％～5．24％，正常人群为1．98％，同期受血者为7．59％，抗HCV阳性与阴性献血者HCVRNA检测阳性率分别为56．8％与20．0％。在9例接受抗HCV阳性血液的受血者中，1例患者受血前后抗HCV均为阳性，5例抗HCV及6例HCVRNA阳转，6例血清HCV感染标志阳转者中4例ALT明显较正常为高，其中3例因临床症状较重而再次住院治疗。研究还发现3例输血感染者所接受的血液中抗HCV呈低表达状态（采用ELISA检测，OD值0．22～0．39），并对此进行了讨论。     

广东省东莞地区无偿献血者HIV感染情况调查

目的：调查东莞地区无偿献血者HIV感染情况。方法：根据国家有关规定,用两种抗-HIV(1 2)ELISA试剂对每一份献血者标本进行初复检,两种试剂结果均阴性判合格,任何一种试剂为阳性判为可疑。可疑标本送省艾滋病检测中心实验室进行免疫印迹法(WB)确认。结果：1999—2003年共检测无偿献血者标本225091份,确认阳性42份,阳性率0．0186％。结论：在无偿献血者中也存在HIV感染,近年来呈递增趋势,为提高血液质量,需进一步采取措施。     

丙型肝炎病毒的检测方法相关性分析及临床应用

目的　研究丙型肝炎病毒核酸HCVRNA载量与抗-HCV以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的相关性与符合性。方法　用FQ -PCR法检测82份抗-HCV阳性的血清,同时用不同生产厂家的试剂检测抗-HCV及ALT含量。结果　82份抗-HCV阳性的血清中HCVRNA的阳性率为62 .19% ;5 1份HCVRNA阳性的血清中ALT异常率为5 4.90 % ,且ALT异常率随HCVRNA载量升高而升高,两者呈正相关性(r =0 .916,P <0 .0 0 1)。结论　HCVRNA、抗-HCV和ALT三者联合检测,对HCV感染者的筛选、药物治疗的评价有较高的临床应用价值。     

核酸检测与酶免检测平行筛查血液的效果评价

目的：初步了解本站采取核酸检测与酶免检测平行筛查血液的效果。方法：对2011年6月15日～2014年6月底共计39236份献血者标本的 ELISA 检测结果（HBsAg、抗－HCV、抗－HIV）和 NAT 检测结果进行比较分析。结果：39236份标本中 NAT 阳性220份,阳性率为0．56％;ELISA阳性（HBsAg、抗－HCV、抗－HIV 3项）199份,阳性率为0．51％;NAT、ELISA 阳性157份,占0．40％;ELISA 阴性 NAT 阳性63份,占0．16％,鉴别出27例 HBV －DNA 和1例 HCV －RNA;NAT 阴性 ELISA 阳性42份,占0．11％,ELISA 双试剂检测阳性与 NAT 阳性符合率为78．9％,HBsAg、抗－HCV、抗－HIV 双试剂阳性与 NAT 阳性符合率分别为80．3％、66％、100％。结论：NAT 与 ELISA 平行检测血液筛查模式既能够防漏互补,同时也可以缩短血液检测周期,保障血液的及时安全供应。     

HCV RNA和抗-HCV联合检测的诊断意义

目的通过丙型肝炎病毒(HCV)与抗-HCV检测结果的比较,探讨两项检测对丙型肝炎诊断的价值。方法采用真空抽滤柱提取法提取HCVRNA,用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测HCVRNA的含量,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测丙型肝炎抗体(抗-HCV)。结果 92份临床血清标本中87份抗-HCV阳性,阳性率为95%,有66份HCVRNA阳性,阳性率为72%,结果显示HCVRNA检出率显著低于抗-HCV(P<0.01)。抗-HCV光密度值(D值)高低与HCVRNA检出率有一定关系,高D值的标本HCVRNA检出率相对较高。结论抗-HCV阳性患者并不是都有病毒复制,HCVRNA才是病毒复制的直接指标。抗-HCVD值与HCVRNA检测结果有一定的关系。     

血液复检的意义

目的：规范临床用血的检测方法,保证用血者安全;方法：对深圳市血液中心1995年1－8月1939人次个体献血者HBsAg及抗－HCV的初、复 检结果进行回顾性分析;结果：献血后复检的1181份初检合格的献血者的血液,有34份为HBsAg阳性,占复检总份数的2.88％、有3份为抗－HCV阳性,占复检总份额的0.25％;结论：初检合格的血液,须经复检确定后才可发给病人使用。     

无偿献血者抗-HIV检测模式的分析

目的评价无偿献血者血液抗-HIV检测模式应用的效果. 方法根据国家有关规定,用两种抗-HIV（1＋2）ELISA试剂对每一份献血者标本进行初、复检,对阳性者送HIV确认实验室进行确认,并进一步评价单一试剂检测与双重试剂筛查检测的效果. 结果在54 591份无偿献血者标本中,国产试剂初筛163份阳性,经确认其中9份为真阳性,国产试剂的灵敏度、特异性分别为100.0%、99.72%;进口试剂初筛149份阳性,经确认其中9份为真阳性,进口试剂的灵敏度、特异性分别为100.0%、99.74%.单一试剂检测与两种试剂同时检测在灵敏度差异无显著性,在特异性单一试剂检测与两种试剂同时检测差异极显著性（P＜0.01）,单一试剂检测优于两种试剂同时检测. 结论增加检测次数或选用进口试剂排除HIV感染意义有限,改进血液筛查手段实为提高血液安全性的首要途径.     

104份抗-HIV初筛阳性结果分析

目的　对艾滋病病毒 (HIV)抗体检测方法的研讨。方法　采用归纳法对酶联免疫吸附试验 (ELISA)和快速检测法检出的抗 -HIV阳性结果进行分析。结果　共检测 5 0 78份血标本 ,第一次初筛试验抗 -HIV阳性 10 4份 ;第二次双孔复检 ,同种试剂再次阳性的 81份 ,另一种试剂检出阳性 5 0份 ;确证实验室确证 2 8份阳性 (其中三份为可疑 )。结论　通过初筛、复检阳性后的抗 -HIV阳性总数与确证试验结果较接近